1. República Bolivariana de VenezuelaMinisterio del Poder Popular para la Educación SuperiorUniversidad Arturo MichelenaFacultad de Ciencias de La SaludEscuela de Patología MedicaCitoctenologíaCromatografía San Diego; Mayo 2009
2. Historia El botánico ruso Mijaíl Tswett empleó por primera vez en 1906 el término "cromatografía" (que proviene del griego chroma"color" y graphos "escribir"). A comienzos del año 1903, MijailTsvet usó columnas de adsorción de líquidos para separar pigmentos vegetales (por ejemplo, clorofilas). Las disoluciones se hacían pasar a través de una columna de vidrio rellena de carbonato de calcio, que finamente dividido de un material poroso que interacciona de forma diferente con los componentes de la mezcla, de forma que éstos se separaban en distintas bandas coloreadas a lo largo de la columna. Los primeros equipos de cromatografía de gases aparecieron en el mercado a mediados del siglo XX. A su vez, la cromatografía líquida de alta resolución (HPLC) comenzó a desarrollarse en los años 1960
3. Definición de Cromatografía La cromatografía es un método de separación para la caracterización de mezclas complejas, la cual tiene aplicación, en todas las ramas de la ciencia. Es un conjunto de técnicas basadas en el principio de retención selectiva, cuyo objetivo es separar los distintos componentes de una mezcla, permitiendo identificar y determinar las cantidades de dichos componentes. Las técnicas cromatográficas son muy variadas, pero en todas ellas hay una fase móvil que consiste en un fluido (gas, líquido o fluido supercrítico) que arrastra a la muestra a través de una fase estacionaria que se trata de un sólido o un líquido fijado en un sólido.
4. Fases Las distintas técnicas cromatográficas se pueden dividir según cómo esté dispuesta la fase estacionaria:
5. Cromatografía plana: La fase estacionaria se sitúa sobre una placa plana o sobre un papel. Las principales técnicas son:
6. Cartografia de Papel La cromatografía en papel es un proceso muy utilizado en los laboratorios para realizar análisis cualitativos ya que pese a no ser una técnica muy potente no requiere de ningún tipo de equipamiento. Hay varios factores de los cuales depende una cromatografía eficaz: la elección del solvente y la del papel de filtro.
7. Cromatografía en capa fina La cromatografía en capa fina o película fina, o más comúnmente TLC es una técnica cromatográfica utilizada, para separar los componentes puros que forman parte de una mezcla. La elección del eluyente dependerá lógicamente del componente que se va a separar y del material en que la separación se lleva a cabo. Principales eluyentes en orden creciente de polaridad: 1) Éter de petróleo. 2) Éter dietílico. 3) Ciclohexano. 4) Acetato de etilo. 5) Tetracloruro de carbono.
8. Cromatografia en Columna La fase estacionaria se sitúa dentro de una columna. Según el fluido empleado como fase móvil se distinguen:
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11. Cromatografía de gases La cromatografía de gases es útil para gases o para compuestos relativamente volátiles, lo que incluye a numerosos compuestos orgánicos. En el caso de compuestos no volátiles se recurre a procesos denominados de "derivatización", a fin de convertirlos en otros compuestos que se volatilizen en las condiciones de análisis.