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Los tripanosomas de murciélagos: riqueza,
evolución e implicaciones para la salud
pública y la conservación
Miguel Pinto
miguel.pinto@epn.edu.ec
INABIO, 3-mayo-2018
¡No es un tripanosoma!
¿Qué son los tripanosomas?
Vectores
T. grayi clade
T. terrestris clade
T. avium clade
T. theileri clade
T. lewisi clade
T. copermani clade
T. cruzi clade
T. brucei clade
Lizard clade
Aquatic clade
T. grayi clade
T. terrestris clade
T. avium clade
T. theileri clade
T. lewisi clade
T. copermani clade
T. cruzi clade
T. brucei clade
Lizard clade
Aquatic clade
Trypanosoma brucei
(Enfermedad del sueño)
Trypanosoma cruzi
(Enfermedad de Chagas)
Los tripanosomas de murciélagos
T. cruzi
La especie
• Causa la
enfermedad de
Chagas
El clado
• El grupo que contiene
a T. cruzi y sus
parientes más
cercanos
T. cruzi, la especie:
T. cruzi sensu lato
T. cruzi cruzi
T. cruzi marinkellei
TcI
Clasificación
TcII
TcIII
TcIV
TcV
TcVI
TcmI
TcmII
Tcbat
Trypanosoma cruzi y Chagas
Tcbat en murciélagos de Panamá
Tcbat en murciélagos de Panamá
Las Bati-Chicas de Elisabeth Kalko
Veronika Cottontail en acción
Tcbat en murciélagos de Panamá
Árbol bayesiano
Modelo TN93+G
18S rRNA
Tcbat y T. c. marinkellei en Ecuador
Tcbat y T. c. marinkellei en Ecuador
El CISeAL en acción: Mario Grijalva, Sofía Ocaña et al.
Tcbat y T. c. marinkellei en Ecuador
Tcbat y T. c. marinkellei en Ecuador
Árbol ML
gen cytb
Tcbat y T. c. marinkellei en Ecuador
π (pi)
diversidad
nucleotídica
Revisión de T. cruzi en murciélagos
Revisión de T. cruzi en murciélagos
La conexión con Brasil: Marta Teixeira y Luciana Lima.
Revisión de T. cruzi en murciélagos
Revisión de T. cruzi en murciélagos
Delimitación de especies en T. cruzi
Delimitación de especies en T. cruzi
Published Data
454 sequencing of PCR amplicons
T. dionisii + T. cruzi marinkellei + TcBat + TcIV
+
19 loci with all lineages and
outgroup represented
43 loci in total
Delimitación de especies en T. cruzi
Bayesian Gene Trees
Species Tree
Time Divergences
*BEAST
19 loci
ML gene trees
RAxML
Species Tree
MP-EST
Delimitación de especies en T. cruzi
0.009
Tcr-TCC1994^70
Tcm-M1909^6
Tcr-MCQ1495_B^42
Tcm-M1909_B^7
Tcr-TCC1994_B^71
Tcm-MBC1539^3
Tcr-EP_255^29
Tcr-SC13^64
Tcr-STC10R^68
Tcr-CBB_cl3^20
Tdi-JMJ^10
Tcm-N6^8
Tcm-B3^1
Tcr-M6241_cl6^39
Tcr-SO34_cl4^66
Tcr-MCQ1495^41
Tcr-STC10R_B^69
Tcr-M6241_cl6_B^40
T. c. marinkellei
T. c. cruzi
ML trees
e.g., TR gene
(19 loci in total)
Tcr-MCQ1495^41
Tcm-B3^1
Tdi-JMJ_B^11
Tdi-JMJ^10
Tcr-SC13^64
Tcr-MCQ1495_B^42
Tcr-SO34_cl4^66
Tcr-CANIII_cl1^18
Tcr-CBB_cl3^20
Tcm-N6^8
Tcr-M6241_cl6^39
Tcm-MBC1539^3
Tcr-STC10R^68
Tcm-M1909^6
Tcr-TCC1994^70
0.03
Tcr-M6241_cl6^39
Tcm-N6^8
Tcr-CBB_cl3^20
Tcr-SO34_cl4^66
Tcr-SC13^64
Tcm-MBC1539^3
Tcr-M6241_cl6_B^40
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Tcr-MCQ1495^41
Tdi-JMJ^10
Tcm-B3^1
Tcr-STC10R^68
Tcm-M1909^6
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Tcr-EP_255^29
Tcm-B3_B^2
Tdi-JMJ_B^11
0.04
Tcr-TCC1994^70
Tcr-STC10R^68
Tcm-M1909^6
Tcr-SC13^64
Tcm-B3_B^2
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Tcm-B3^1
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Tcr-EP_255^29
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Tcm-MBC1539^3
Tdi-JMJ^10
Tcr-TCC1994_B^71
Tcr-MCQ1495^41
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0.02
Tcm-N6^8
Tcm-MBC1539^3
Tcm-B3^1
Tdi-JMJ^10
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0.02
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0.009
Tcr-TCC1994^70
Tcm-M1909^6
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Tdi-JMJ^10
Tcm-N6^8
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0.02
Tcm-B3^1
Tcr-TCC1994^70
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Tcr-M6241_cl6_B^40
Tcr-CBB_cl3^20
Tdi-JMJ^10
Tcr-EP_255_B^30
Tcr-SO34_cl4^66
Tcr-MCQ1495^41
Tcm-B3_B^2
Tcr-CBB_cl3_B^21
Tcm-N6^8
Tcr-STC10R^68
Tcm-M1909^6
Tcr-SC13^64
Tcr-M6241_cl6^39
0.02
Tcr-CANIII_cl1^18
Tcr-SO34_cl4_B^67
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Tcm-M1909_B^7
Tcr-ESMERALDO_cl3_B^32
Tcr-TCC1994_B^71
Tcm-M1909^6
Tcr-SC13^64
Tcr-EP_255^29
Tcr-M6241_cl6^39
Tcm-B3^1
Tcr-MCQ1495^41
Tcm-N6^8
Tcr-TU18_cl2_B^75
Tcr-STC10R^68
Tcr-M5631_cl5^37
Tcr-ESMERALDO_cl3^31
Tcm-B3_B^2
Tcr-CBB_cl3_B^21
Tdi-JMJ^10
Tcm-MBC1539^3
Tcr-CUICA_cl1_B^26
Tcr-TU18_cl2^74
Tcr-CBB_cl3^20
Tcr-TCC1994^70
Tcr-MCQ1495_B^42
0.03
Tcm-B3_B^2
Tcr-EP_255^29
Tcr-STC10R_B^69
Tdi-JMJ_B^11
Tcm-N6_B^9
Tcr-M6241_cl6^39
Tcr-CBB_cl3^20
Tcr-SC13^64
Tcm-MBC1539^3
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Tcr-SO34_cl4^66
Tcm-M1909^6
Tcm-B3^1
Tcr-SO34_cl4_B^67
Tcr-STC10R^68
Tcr-EP_255_B^30
Tdi-JMJ^10
Tcr-CBB_cl3_B^21
Tcm-N6^8
Tcm-M1909_B^7
Tcr-TCC1994^70
0.01
Tcr-VINC6^79
Tcm-B3_B^2
Tcr-ESQUILO^33
Tcr-CUTIA^27
Tcr-CANIII_cl1^18
Tcr-CBB_cl3_B^21
Tdi-JMJ^10
Tcm-B3^1
Tcr-MSC2H1^43
Tcr-TU18_cl2^74
Tcr-P209^47
Tcr-MSC2H2^44
Tcr-ESMERALDO_cl3^31
Tcr-STC10R^68
Tcr-A80^17
Tcr-Florida^34
Tcr-STC10R_B^69
Tcr-OPS21^45
Tcm-N6^8
Tcr-M5631_cl5^37
Tcr-MCQ1495^41
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Tcr-X10^80
Tcr-CM17^24
Tcr-SABP3^63
Tcr-X110_8^22
Tcm-TcmB7^5
Tcr-CBB_cl3^20
Tcr-SC13^64
Tcr-133_79_cl7^14
Tcr-S2679^62
Tcr-TCC1994^70
Tcr-nd27^23
Tcm-M1909^6
Tcr-CUICA_cl1^25
Tcr-85_818^16
Tcr-SO34_cl4^66
Tcm-MBC1539^3
Tcr-TEH^73
Tcr-ESMERALDO_cl3_B^32
Tcr-TU18_cl2_B^75
0.02
Tcr-133_79_cl7^14
Tcr-SO34_cl4^66
Tcr-SO34_cl4_B^67
Tcm-M1909^6
Tcr-CUICA_cl1^25
Tcr-CANIII_cl1^18
Tcm-N6^8
Tcr-CM17^24
Tcr-EP_255^29
Tcr-M6241_cl6^39
Tcr-TCC1994^70
Tcm-B3^1
Tcr-TU18_cl2^74
Tcr-CUICA_cl1_B^26
Tcm-MBC1539^3
Tcr-SC13^64
Tdi-JMJ_B^11
Tcr-M5631_cl5^37
Tcr-CBB_cl3^20
Tcr-ESMERALDO_cl3^31
Tcr-STC10R^68
Tdi-JMJ^10
Tcr-MCQ1495^41
0.02
Tcr-SC13^64
Tcm-B3^1
Tcm-MBC1539^3
Tcr-EP_255^29
Tdi-JMJ^10
Tcr-CBB_cl3_B^21
Tcr-STC10R^68
Tcr-SC13_B^65
Tcm-M1909^6
Tcr-CBB_cl3^20
Tcr-TCC1994^70
Tcm-N6^8
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Tcr-M6241_cl6^39
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0.02
Tcr-CBB_cl3_B^21
Tcr-SC13^64
Tcm-M1909^6
Tcr-MCQ1495_B^42
Tcm-N6^8
Tcr-MCQ1495^41
Tcm-B3_B^2
Tcm-B3^1
Tcr-CBB_cl3^20
Tcr-TCC1994^70
Tcr-SC13_B^65
Tcm-MBC1539^3
Tcr-M6241_cl6_B^40
Tcr-SO34_cl4^66
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Tcr-STC10R^68
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0.008
Tcm-MBC1539^3
Tcr-PalDa3cl4-1^56
Tcr-PalV1cl1-1^59
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Tcr-TCC1994^70
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0.02
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Tcm-B3^1
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0.02
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Tcm-B3^1
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Tcr-DogTheis_1^28
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Tcr-TCC1994^70
Tcm-MBC1539^3
Tcr-TEDa2cl4-1^78
Tdi-JMJ^10
Tcr-PalDa1cl9-2^51
Tcr-PalDa3cl4-1^56
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Tcr-PalDa20cl3-2^53
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Tcr-M5631_cl5^37
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0.02
Tcr-PAV00cl7-1^48
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Tcr-STC10R^68
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Tcm-M1909_B^7
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Tcm-B3^1
Tcr-PalV1cl1-2^60
Tcr-PalV1cl1-1^59
Tcr-MCQ1495^41
Tcr-M6241_cl6^39
Tcr-PalDa3cl4-1^56
Tcr-IVVcl4_1^35
Tcr-PalDa1cl9-1^50
Tcr-PalDa20cl3-1^52
Tcr-TU18cl93-2^77
Tcr-OPS21^45
Tcr-PalDa3cl4-2^57
Tcr-PalDa20cl3-2^53
Tcr-PAV00cl7-2^49
0.03
Tcr-PalV2-2cl5-1^58
Tcr-IVVcl4_1^35
Tdi-JMJ^10
Tcr-TCC1994^70
Tcr-TU18cl93-1^76
Tcr-PalV1cl1-1^59
Tcr-PalV2-2cl5-2^61
Tcr-PalDa3cl4-1^56
Tcr-PalDa20cl3-1^52
Tcr-PalDa1cl9-2^51
Tcr-PalDa1cl9-1^50
Tcr-M5631_cl5^37
Tcr-DogTheis_1^28
Tcr-STC10R^68
Tcr-PalDa22cl7-1^54
Tcr-PalV1cl1-2^60
Tcr-X10^80
Tcr-CANIII_cl1^18
Tcr-TEDa2cl4-1^78
Tcr-M6241_cl6^39
Tcm-B3^1
Tcr-PalDa20cl3-2^53
Tcr-PalDa3cl4-2^57
Tcr-OPS21^45
Tcr-MCQ1495^41
Tcr-PAV00cl7-1^48
Tcm-M1909^6
Tcr-PAV00cl7-2^49
0.02
Tcm-B3^1
Tcr-M5631_cl5_B^38
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Tcr-OPS21^45
Tcr-PalDa1cl9-1^50
Tcm-MBC1539_B^4
Tcr-DogTheis_1^28
Tcr-TCC1994^70
Tcr-TCC1994_B^71
Tcr-M5631_cl5^37
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Tdi-JMJ^10
Tcr-X10^80
Tcr-PalDa22cl7-1^54
Tcr-M6241_cl6^39
Tcr-PalV1cl1-2^60
Tcr-M6241_cl6_B^40
Delimitación de especies en T. cruzi
Species Tree
MP-EST
2.0
TcIV
TcmII
TcI
TcmI
TcII
TcIII
Tdio
Tcbat
90
100
95
100
100
100
Delimitación de especies en T. cruzi
Species Tree
Time Divergences
*BEAST
Delimitación de especies en T. cruzi
0
2
4
6
8
10
12
14
16
18
20
1 3 5 7 9 11 13 15 17 19 21 23 25 27 29 31 33 35 37 39 41
Delimitations PTPh + PTPml + GMYC single
+ GMYC multiple
delimitations
genes
Delimitación de especies en T. cruzi
TcmI
TcmII
T. cruzi
T. dionisii
Validation
BPP 1
1
1
T. cruzi
La especie
• Causa la
enfermedad de
Chagas
El clado
• El grupo que contiene
a T. cruzi y sus
parientes más
cercanos
T. cruzi, el clado
T. cruzi, el clado
Busqueda de los
parientes más
cercanos de
Trypanosoma
cruzi (usando
colecciones de
museos y
muestreos
focalizados)
Muestreos focalizados
Muestreos focalizados
Muestreos focalizados
Muestreos focalizados
Muestreos focalizados y colecciones
Marta Teixeira Luciana Lima Burton Lim (ROM)
Muestreos focalizados y colecciones
Muestreos focalizados y colecciones
Pinto et al. (2010) Emerg. Infec. Dis.
Uso de colecciones (el inicio)
Tissues of Woodrats
N=159; infected= 26.4%
Trypanosoma cruzi
Riqueza de especies en el clado T. cruzi
Riqueza de especies en el clado T. cruzi
PCR screening of >1,300
mammalian tissues
Sanger sequencing (18S rRNA) of PCR positives
ML phylogeny, RAxML
Combining with reference sequences (18S rRNA + gGAPDH)
Species delimitation, PTP
Bayesian phylogeny with one representative per species, BEAST
ML ancestral host reconstructions, Mesquite
Biogeographic reconstructions, Lagrange
Riqueza de especies en el clado T. cruzi
Trypanosoma cruzi clade
ML tree, RAxML
PTP – Species delimitation
Riqueza de especies en el clado T. cruzi
Riqueza de especies en el clado T. cruzi
Riqueza de especies en el clado T. cruzi
Salud pública y conservación
Salud pública y conservación
Una sola salud
Salud pública y conservación
Salud pública y conservación
Agradecimientos
Agradecimientos
•Grad. Student Fellowship
•Kade Fellowship
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Agradecimientos
Marta Teixeira Luciana Lima Burton Lim
Veronika Cottontail Mario Grijalva Sofía Ocaña
miguel.pinto@epn.edu.ec

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