2. §Es uno de los puntos mas esenciales en la
biologia molecular, se hace rutinariamente en
muchas áreas de las ciencias biológicas y
médicas. Es el punto de inicio de cualquier kit de
diagnóstico molecular.
3. § El ADN y el ARN son moléculas con
características acídicas, se encuentran en
el núcleo celular y también en la
mitocondria.
§ El ARN se utiliza para estudios de
expresión génica y el ADN se utiliza para
buscar modificaciones o alteraciones
genéticas.
4. § El tipo de ácido nucleico que se va a extraer.
§ El tipo organismo del que se va a extraer el
ácido nucleico.
§ La fuente del acido nucleico.
§ La técnica en que se utilizará el ácido nucleico
extraído (según el uso se tendrán
requerimientos de rendimiento pureza y tiempo
de extracción específicos).
Para elegir el método de
extracción suelen tenerse en
cuenta los siguientes criterios:
5. La extracción es una técnica minuciosa que se puede
dividir en 4 pasos:
§ LISIS CELULAR.
§ REMOCION (SEPARACION) DE LIPIDOS DE MEMBRANA,
PROTEINAS Y OTROS ACIDOS NUCLEICOS.
§ PURIFICACION/UNION DE ACIDOS NUCLEICOS.
§ CONCENTRACION DE ACIDOS NUCLEICOS.
6. RUPTURA
CELULAR.
La desintegración celular se puede
lograr por metodos físicos y/o
químicos -> romper la pared celular
y/o membranas celulares.
Los métodos se basan principalmente
en las propiedades de la muestra.
Muchas proterinas recombinantes y
otros constituyentes importante de la
célula se pueden recuperar en este
proceso.
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11. CUANTIFICACIÓN.
ESPECTROFOTOMETRIA.
§ Cualquier solución que contenga moléculas
suspendidas permite el paso de un haz de luz a través
de ella en proporción inversa a la cantidad de
moléculas que contiene.
FLUOROMETRIA.
§ Unión específica de colorantes fluorescentes al ácido
nucleico que absorben luz de una determinada
longitud de onda y emite luz de una longitud de onda
superior.
12. BIBLIOGRAFIA.
§ Ali, N., Rampazzo, R. D. C. P., Costa, A. Di. T., & Krieger, M. A.
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Implications to Point-of-Care Diagnostics. BioMed Research
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Técnicas y métodos para la iniciación en el estudio de la
evolución molecular con aplicaciones especiales para el análisis
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§ Emaus, M. N., Varona, M., Eitzmann, D. R., Hsieh, S. A., Zeger, V. R.,
& Anderson, J. L. (2020). Nucleic acid extraction: Fundamentals of
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Extracción de ácidos nucleicos. En Biologia molecutar.
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McGraw Hill.
