Caldo lactosado

1. FUNDACIÓN UNIVERSITARIA DE POPAYÁN
Facultad de Ciencias Naturales
Sistemática y Ecología de Microorganismos
Periodo de 2014
Caldo Lactosado
Sandra Milena Chavaco Trochez
Ecología, Facultad de Ciencias Naturales, Fundación Universitaria de Popayán, Sede los
Robles, Popayán Colombia
CALDO LACTOSADO
DESCRIPCIÓN:
Es un medio rico en nutrientes, y no contiene inhibidores del crecimiento
bacteriano.
El extracto de carne y la peptona, son la fuente de carbono y nitrógeno, mientras
que la lactosa es el hidrato de carbono. Por la fermentación de la lactosa, se
produce ácido y gas, y éste último se demuestra al usar las campanas Durham.
Fórmula (en gramos por litro) Instrucciones
Extracto de carne 3.0 Suspender 13 g por litro de agua destilada.
Mezclar bien y distribuir en tubos con
campanitas de Durham. Esterilizar en
autoclave durante 15 minutos a 121°C.
Peptona 5.0
Lactosa 5.0
pH final: 6.9 ± 0.2
Siembra

Para investigar la presencia de bacterias coliformes, si se trata de
volúmenes pequeños de muestra (1ml), sembrar en caldo simple
concentración, si se trata de volúmenes grandes (10ml) sembrar en caldo
doble concentración.
 Cuando se emplea como preenriquecimiento no selectivo en la búsqueda
de Salmonella spp a partir de alimentos, se siembra 25 g ó ml de alimento
en 225 ml de caldo.
Incubación

Para bacterias coliformes a 35-37 °C durante 24-48 horas, en aerobiosis.

2.  Para preenriquecimiento de Salmonella a 35-37 ºC durante 24 horas, en
aerobiosis.
Características del medio
Medio preparado: ámbar claro, transparente sin precipitado.
Almacenamiento:
Medio deshidratado: a 10-35 ºC.
Medio preparado: a 2-8 ºC.
USO:
 El Caldo Lactosado es utilizado para el cultivo de Salmonella y organismos
coliformes en agua, productos Lácteos, alimentos y
productos farmacéuticos.
 En alimentos deshidratados o procesados pueden encontrarse salmonellas
dañadas y en bajo número; adicionalmente, la presencia de otras bacterias
o componentes de los alimentos puede enmascarar el crecimiento y
recuperación de las mismas.
EJEMPLO:
Lactosa por E.coli

3. PROCEDIMIENTO DE TINCION DE GRAM
1. Cubrir la extensión con papel de
filtro (dificulta la precipitación del
colorante sobre las bacterias).
2. Depositar la preparación sobre una
platina de Koch. Añadir verde de
malaquita. Esperar un minuto.
3. Seguir la tinción con calor: en
emisión de vapores durante 5-10
minutos.
Dejar enfriar.
4. Lavar con agua abundante. Secar.
5. Teñir con safranina (dos minutos).
Lavar con agua. Secar. Observar con
objetivo de inmersión.
Resultados:
Esporas teñidas de verde y células vegetativas teñidas de rosa.
Observar la forma, tamaño relativo y posición de la espora en la
célula vegetativa.

4. FUNCIONES BIOLOGICAS Y QUIMICAS DE LA TINCION DE GRAM
Una tinción o coloración es una técnica auxiliar utilizada en microscopía para
mejorar el contraste en la imagen vista al microscopio. Los colorantes y tinturas
son sustancias que usualmente se utilizan en biología y medicina para resaltar
estructuras en tejidos biológicos que van a ser observados con la ayuda de
diferentes tipos de microscopios. Los diferentes colorantes pueden ser utilizados
para aumentar la definición y examinar grandes cortes de tejido (resaltando por
ejemplo fibras musculares o tejido conectivo), poblaciones celulares (por ejemplo
clasificando diferentes células sanguíneas) o incluso para
resaltar organelas dentro de células individuales.
En bioquímica, esto implica agregar un colorante específico (esto significa que se
una de manera selectiva ya sea a ADN, proteínas, lípidos, carbohidratos, etc.) a
un sustrato para cualificar o cuantificar la presencia de un determinado
compuesto. Tanto la tinción como el marcado fluorescente pueden servir para los
mismos propósitos.
Diferentes tipos de tinciones biológicas son utilizadas también para marcar células
en citometría de flujo y para marcar proteínas o ácidos nucleicos en electroforesis
en gel.
Las tinciones no están limitadas a su uso en materiales biológicos, también
pueden ser utilizadas para estudiar la morfología de otros materiales (por ejemplo,
las estructuras lamelares de polímeros semicristalinos de las estructuras de
dominio de bloques de copolímeros.
BIBLIOGRAFIAS
Véase en la página:
http://www.electronic-systems.com.mx/pdf/caldo_lactosado.pdf
AGOSTO 24 DEL 2014
http://britanialab.com.ar/esp/productos/b02/lactosadocaldo.htm
AGOSTO 21 DEL 2014
http://www.ugr.es/~eianez/Microbiologia/05pared.htm
AGOSTO 22 DEL 2014