Este documento describe un método para determinar simultáneamente dos fármacos, sulfanilamida y sulfatiazol, en una mezcla mediante espectrofotometría UV-Visible y regresión lineal múltiple. Se obtuvieron los espectros de absorción individuales de cada fármaco y se realizó un calibrado para cada uno. Luego, se midieron los espectros de una mezcla conocida y otra desconocida y mediante un modelo quimiométrico se determinaron las concentraciones de cada fármaco en la muestra des
Análisis espectrofotométrico de mezclas de fármacos mediante regresión lineal múltiple
1. Análisis espectrofotométrico de mezclas de fármacos
mediante regresión lineal múltiple
Introducción
En esta práctica se determinó dos tipos de sulfamidas simultáneamente en una mezcla preparada
en el laboratorio. Las dos sulfamidas determinadas son la sulfanilamida y el sulfatiazol.
Sulfatiazol Sulfanilamida
En este caso se utilizó un método espectrofométrico UV-Visible, ya que estas sustancias absorben
en este rango del espectro de radiación electromagnética.
La determinación simultánea se realizó utilizando la diferencia en las absortividades molares de
cada uno de los compuestos mediante un método quimiométrico para el tratamiento de resultados.
Procedimiento
● Obtención del espectro de absorción de la sulfanilamida y el sulfatiazol.
Se obtuvieron los espectros de absorción de los analitos por separado. Se utilizó un
espectrofotómetro Perkin-Elmer LAMBDA EZ201 y una disolución patrón de cada uno de los
analitos de 10 ppm en etanol, realizada a partir de una disolución patrón madre de 1000 ppm.
● Realización de un calibrado para cada analito.
Se realizó un calibrado para la sulfanilamida y el sulfatiazol, utilizando disoluciones patrón
de las siguientes concentraciones aproximadas: 2, 4, 6, 8, 10 ppm.
Se anotó los máximos de absorción para realizar el calibrado.
● Determinación de una muestra desconocida de cada compuesto.
Se comprobó la exactitud del calibrado utilizándolo para determinar una cantidad
desconocida de cada analito en sendas disoluciones preparadas en el laboratorio.
● Obtención de los espectros de absorción de los analitos de interés para cada una de las
concentraciones de las disoluciones patrón, para una mezcla conocida y para una mezcla
desconocida.
Daniel Martín Yerga
2. En esta parte se midió la absorbancia de cada espectro cada 5nm en la región
comprendida entre 220nm y 320nm. Los cálculos quimiométricos se hicieron con los datos de la
región entre 250 y 300 nm.
La mezcla conocida poseía una concentración para cada analito de 5ppm.
Resultados y Discusión
Espectro de absorción de la sulfanilamida:
Espectro Sulfanilamida
1.000
0.900
0.800
0.700
0.600
0.500
Abs.
0.400
0.300
0.200
0.100
0.000
210 230 250 270 290 310 330
longitud onda (nm)
Se puede observar
como el máximo de absorción para la sulfanilamida está entorno a 262nm.
Espectro de absorción del sulfatiazol: Espectro Sulfatiazol
0.800
0.700
0.600
0.500
0.400
A
0.300
0.200
En el caso del sulfatiazol el máximo de
absorbancia está entorno a 290nm. 0.100
0.000
210 230 250 270 290 310 330
longitud onda(nm)
Según estos espectros, se seleccionó
las longitudes de onda siguientes para hacer el calibrado: para la sulfanilamida 262.4nm, y para el
sulfatiazol 289.8nm.
La sulfanilamida tiene su máximo en esa longitud de onda mientras que el sulfatiazol teniendo dos
máximos se eligió el de mayor intensidad por esa razón y también porque el otro pico de
absorción que tiene estaría solapándose con el pico de la sulfanilamida y podría haber algún tipo
de interferencia.
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3. Calibrado para la sulfanilamida:
Concentración Absorbancia Calibrado Sulfanilamida
(ppm) (262.4nm) 1.200
0.00 0.000
1.000
2.03 0.238
0.800
4.06 0.455
6.09 0.636
Abs.
0.600
8.12 0.896
0.400
10.15 1.015
0.200
Recta de regresión lineal:
0.000
Abs = 0.0236 + 0.1018·[sulfanilamida] 0.000 2.000 4.000 6.000 8.000 10.000 12.000
r = 0.997 Concentración (ppm)
Calibrado para el sulfatiazol:
Concentración Absorbancia Calibrado Sulfatiazol
(ppm) (289.8nm) 0.900
0,000 0.000 0.800
1.998 0.147 0.700
0.600
3.996 0.306
0.500
5.994 0.482
Abs.
0.400
7.992 0.599 0.300
9.990 0.789 0.200
0.100
Recta de regresión lineal: 0.000
0.000 2.000 4.000 6.000 8.000 10.000 12.000
Abs = -0.0040 + 0.0783·[sulfatiazol]
Concentración (ppm)
r = 0.998
Este calibrado se “validó” con sendas muestras preparadas en el laboratorio, de las que se obtuvo
sus concentraciones y fueron para el sulfatiazol de 6.91ppm, donde la muestra preparada tenía
7ppm; para la sulfanilamida, se obtuvo 2.93ppm, mientras que la muestra tenía 3ppm.
Los datos completos de los espectros de absorción a cada concentración y de las mezclas
conocida y desconocida se encuentran en el apéndice I.
Espectro de la mezcla conocida:
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4. Espectro mezcla conocida
0.900
0.800
0.700
0.600
0.500
Abs.
0.400
0.300
0.200
0.100
0.000
210 230 250 270 290 310 330
longitud onda (nm)
Espectro de la mezcla desconocida:
Espectro mezcla desconocida
0.900
0.800
0.700
0.600
0.500
Abs.
0.400
0.300
0.200
0.100
0.000
210 230 250 270 290 310 330
longitud onda (nm)
Después de realizar el tratamiento quimiométrico (apéndice 2), se obtuvieron los resultados para
la determinación de sulfatiazol y sulfanilamida de la muestra desconocida. Los resultados son los
siguientes:
Concentración de sulfatiazol en muestra: 3.75 ± 0.05 mg/l
Concentración de sulfanilamida en muestra: 6.53 ± 0.06 mg/l
Apéndice I
Datos de los espectros de absorción:
Daniel Martín Yerga
7. 220 0.307 0.319
225 0.187 0.195
230 0.166 0.171
235 0.191 0.193
240 0.258 0.258
245 0.369 0.368
250 0.531 0.527
255 0.714 0.706
260 0.824 0.817
265 0.792 0.789
270 0.669 0.663
275 0.554 0.530
280 0.501 0.460
285 0.484 0.431
290 0.464 0.406
295 0.419 0.363
300 0.343 0.295
305 0.244 0.209
310 0.137 0.121
315 0.058 0.055
320 0.023 0.025
Apéndice II
Para hacer el cálculo quimiométrico de los resultados y obtener la concentración de la mezcla
desconocida para las dos sustancias, se utilizó un método con matrices, donde la matriz de
concentraciones e obtenía de la siguiente manera:
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8. C ='∗−1∗ '∗A
Y las matrices obtenidas fueron:
0.527 0.054 0.041
0.706 0.077 0.054
0.817 0.092 0.059
0.789 0.091 0.053
0.663 0.073 0.050
A= 0.530 = 0.048 0.057
0.460 0.032 0.068
0.431 0.023 0.076
0.406 0.018 0.078
0.363 0.013 0.074
0.295 0.009 0.062
Por este método también se pudo determinar el error en la determinación mediante la matriz
varianza-covarianza:
V = ' ∙ˉ ¹∙ S² e
donde aparecen la matriz de los coeficientes de extinción molar, y la varianza de la regresión.
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