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Récolte, Examen et Conditionnement du sperme ovin pour
l'insémination artificielle
Présenté par : TABACHE Mahdi
mardi 16 janvier 2024
1
Plan du cours :
 Particularités sexuelles du male ;
 Critères de bases du bélier reproducteur;
 Examens de l’aptitude à la reproduction
du bélier ;
 Préparation du bélier et réalisation de la
collecte de sperme ;
 Contrôle qualitative et quantitative du
sperme;
 Conditionnement du sperme ;
 Bibliographie .
mardi 16 janvier 2024
https://o-maroc.com/mouton-sardi-ou-beldi
2
Carte des différentes races de moutons au Maroc
particularités sexuelles du male:
 La puberté apparait en général entre 6 et 9
mois
 La puberté est relative au mois de
naissances , régime alimentaire , à
l’environnement
 Pour introduire le male a la reproduction il
doit peser ¾ du poids vif adulte au moins
mardi 16 janvier 2024 3
particularités sexuelles du male:
 La production du sperme est continue et relative au poids des
testicules
 Aussi la production est relative à :
l’âge : le jeune produit moins que l’adulte
la saison : maximum automne , la chaleur inhibe la
spermatogenèse
l’état de sante : les maladies cachexiques , les maladies des
pieds
mardi 16 janvier 2024
Examen de l’aptitude à la reproduction chez le bélier et le bouc
A. TIBARY1, R. BOUKHLIQ2, K. EL ALLALI3
4
Mesure de la circonférence scrotale chez un bouc
Critères de bases du bélier reproducteur :
 S’assurer que le bélier a bien deux testicules , ne présente pas d’infections génitales
 Présente le comportement sexuel :
flehmen
flairage du périnée
bêlement
léchage du flanc de la brebis
petits coups de la patte antérieure contre la brebis
mardi 16 janvier 2024
Examen de l’aptitude à la reproduction chez le bélier et le bouc 5
Examens de l’aptitude à la reproduction du
bélier :
 L’examen de l’aptitude à la reproduction (EAR) est réalisée 2 mois avant la
saison de reproduction
 Il est basé sur l’examen clinique (pénis et prépuce , scrotum ,testicules et
épididyme ) et physique ( conformation général , pieds et état corporelle
)ainsi que sur la détection des anomalies des spermatozoïdes. En
considérant les résultats de cet examen, les béliers sont classés en 4
catégories:
Insatisfaisant,
Douteux
Satisfaisant
Excellent :1 bélier pour 100 brebis
mardi 16 janvier 2024
Examen de l’aptitude à la reproduction chez le bélier et le bouc 6
Préparation du bélier et réalisation de la
collecte de sperme :
 La collecte du sperme se fait par :
 vagin artificiel
Electro éjaculateur ( douloureuse , n’est pas utilisée )
mardi 16 janvier 2024 7
Équipement pour la récolte et l’examen du sperme des béliers et des
boucs. [A] : a) vagin artificiel pour petits
ruminants, b) ruban de mesure de la circonférence scrotale, c)
électroéjaculateur portable avec électrode linéaire, d) électro-
éjaculateur portable avec électrode circulaire, [B] : e-f) Technique d’électro-
éjaculation chez un bélier debout
Préparation du bélier et réalisation de la
collecte de sperme par vagin artificiel:
mardi 16 janvier 2024 8
Lors de la récolte du sperme deux cas se présentent :
 Males non entretenus à la récolte :
 nécessite beaucoup de travail et de patience
 Le faire entretenir pendant la saison de reproduction ( automne )
 Dés la puberté
 La présence de deux brebis une immobilisée et l’autre libre
 Brebis avec comportement d’oestrus
 Apprécier le comportement sexuel du male
 Le male est suffisamment motivé on peut présenter le vagin artificielle
des la position est adéquate
 Si le male crain le manipulateur il ne faut pas changer la position et
laisser le bélier faire la saillie
Préparation du bélier et réalisation de la
collecte de sperme par vagin artificiel:
mardi 16 janvier 2024 9
 Males entretenus à la récolte :
 Pas de problèmes se posent sauf dans le cas de collecte en contre
saison : il faut les stimuler par des femelles en œstrus et les entrainer à
une collecte à des jours et heures fixes
 La récolte se fait dans la salle de collecte prés du laboratoire avec
respect des règles d’hygiènes
 Une brebis est placée bout en train
 Le bélier habitué assure deux montes par jour
 Le manipulateur doit être accroupi , dévie le pénis dans le vagin artificiel
 Le vagin artificiel contient de l’eau à 38°c comme le vagin
 Cône en latex muni à son extrémité d’un tube en verre stérile de
prélèvement
Contrôle qualitative et quantitative du
sperme:
 Volume : se fait directement sur le tube de collecte , sans tenir compte de la mousse , il est
d’environ 1 à 1,5 ml chez les ovins et les caprins
 Concentration : déterminer le nombre de spermatozoïdes par millilitre de semence pure ,
varie entre 2 à 10^9 spr/ml de semence
mesure : visuelle , comptage avec hématimètre (plus précise) ou mesure par
spectrophotométrie ( précise et rapide= plus efficace )
mardi 16 janvier 2024 10
Contrôle qualitative et quantitative du
sperme:
 Motilité massale : rapide et facile , Une goutte de sperme pur est
déposée sur une lame et placée sur la platine chauffante du
microscope (37-38°C) sous un grossissement de 80.
 il faut faire la lecture rapidement à cause de la diminution de la
température
 Il faut s’entrainer sur la lecture (voir beaucoup de lames) pour aboutir à
une mesure fiable
mardi 16 janvier 2024 11
score de motilité massale de la semence
mardi 16 janvier 2024 12
score Motilité
0 Immobile
1 Mouvements individualisés
2 Mouvements très lents
3 Mouvements à faibles amplitudes
4 Rapide sans tourbillons
5 Rapide avec tourbillons
 Pourcentage de spermatozoïdes mobiles
Examen d’une goutte de sperme dilué au microscope (x200) en utilisant une platine
chauffante (38°c) cette observation nécessite de l’entrainement pour estimer un
pourcentage des spermatozoïdes mobiles
NB : il faut mettre en considération la vitalités des spermatozoïdes
 Motilité individuelle des spermatozoïdes
Elle est réalisée en même temps avec le test précèdent et dans les mêmes
conditions et elle nécessite aussi un entrainement
En utilise un score allant de 0 (immobile) à 5 ( mouvement important rectiligne)
En prend en compte la nature et la vitesse du mouvement ( rectiligne , latéral )
mardi 16 janvier 2024 13
mardi 16 janvier 2024 14
• Mesure du pourcentage de spermatozoïdes
vivants et des anomalies spermatiques :
En utilise ce test que chez les béliers et les boucs
dans les saisons chaudes ou à cause de la
photopériode
Le sperme des géniteurs ne doit pas contenir plus de
20 à
30 % de spermatozoïdes morts (colorés) et pas plus
de 15 à 20 % de spermatozoïdes anormaux.
• Test de thermo résistance :
Ce test est destiné aux paillettes pour savoir
l’aptitude de survie des spermatozoïdes dans le
tractus génital femelle
La paillette est incubée à 37-38°C pendant 3h et on
calcule la vitalité et la motilité de la semence au
début et à la fin du test
Conditionnement du sperme :en forme
liquide
mardi 16 janvier 2024 15
Conditionnement du sperme:
 Dilution avec super écrémé en bain-marie 29°c (lait :
protecteur+ nutritif ) on effectue la dilution selon la
concentration et le volume de la semence (1.4
milliards de sprmts/ml dans la paillette )
 On utilise un flacon d’acide acétique gelé pour
baisser la T° de la semence diluée jusqu’à 15°c (
ralentissement du mécanisme cellulaire )
mardi 16 janvier 2024 16
Conditionnement du sperme:
 Chaque couleur est attribuée à une race , la
mise en paillette est faite dans une chambre
froide 15°C
 Cette machine remplit les paillettes par
aspiration , sertit d’un coté par un bouchon et
l’autre coté par soudure à ultrasons froid
 Les paillettes sont stockées dans des thermos
hermétiques
mardi 16 janvier 2024 17
Bibliographie
 La production du mouton ( Christian Dudouet )
 Examen de l’aptitude à la reproduction chez le bélier et le bouc (A. TIBARY, R. BOUKHLIQ, K.
EL ALLALI )
 Manuel de formation pour l’insémination artificielle chez les ovins et les caprins (Étude FAO:
Production et Santé Animales (FAO))
 Insémination animale : du bélier à la paillette
mardi 16 janvier 2024 18
mardi 16 janvier 2024
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  • 1. Récolte, Examen et Conditionnement du sperme ovin pour l'insémination artificielle Présenté par : TABACHE Mahdi mardi 16 janvier 2024 1
  • 2. Plan du cours :  Particularités sexuelles du male ;  Critères de bases du bélier reproducteur;  Examens de l’aptitude à la reproduction du bélier ;  Préparation du bélier et réalisation de la collecte de sperme ;  Contrôle qualitative et quantitative du sperme;  Conditionnement du sperme ;  Bibliographie . mardi 16 janvier 2024 https://o-maroc.com/mouton-sardi-ou-beldi 2 Carte des différentes races de moutons au Maroc
  • 3. particularités sexuelles du male:  La puberté apparait en général entre 6 et 9 mois  La puberté est relative au mois de naissances , régime alimentaire , à l’environnement  Pour introduire le male a la reproduction il doit peser ¾ du poids vif adulte au moins mardi 16 janvier 2024 3
  • 4. particularités sexuelles du male:  La production du sperme est continue et relative au poids des testicules  Aussi la production est relative à : l’âge : le jeune produit moins que l’adulte la saison : maximum automne , la chaleur inhibe la spermatogenèse l’état de sante : les maladies cachexiques , les maladies des pieds mardi 16 janvier 2024 Examen de l’aptitude à la reproduction chez le bélier et le bouc A. TIBARY1, R. BOUKHLIQ2, K. EL ALLALI3 4 Mesure de la circonférence scrotale chez un bouc
  • 5. Critères de bases du bélier reproducteur :  S’assurer que le bélier a bien deux testicules , ne présente pas d’infections génitales  Présente le comportement sexuel : flehmen flairage du périnée bêlement léchage du flanc de la brebis petits coups de la patte antérieure contre la brebis mardi 16 janvier 2024 Examen de l’aptitude à la reproduction chez le bélier et le bouc 5
  • 6. Examens de l’aptitude à la reproduction du bélier :  L’examen de l’aptitude à la reproduction (EAR) est réalisée 2 mois avant la saison de reproduction  Il est basé sur l’examen clinique (pénis et prépuce , scrotum ,testicules et épididyme ) et physique ( conformation général , pieds et état corporelle )ainsi que sur la détection des anomalies des spermatozoïdes. En considérant les résultats de cet examen, les béliers sont classés en 4 catégories: Insatisfaisant, Douteux Satisfaisant Excellent :1 bélier pour 100 brebis mardi 16 janvier 2024 Examen de l’aptitude à la reproduction chez le bélier et le bouc 6
  • 7. Préparation du bélier et réalisation de la collecte de sperme :  La collecte du sperme se fait par :  vagin artificiel Electro éjaculateur ( douloureuse , n’est pas utilisée ) mardi 16 janvier 2024 7 Équipement pour la récolte et l’examen du sperme des béliers et des boucs. [A] : a) vagin artificiel pour petits ruminants, b) ruban de mesure de la circonférence scrotale, c) électroéjaculateur portable avec électrode linéaire, d) électro- éjaculateur portable avec électrode circulaire, [B] : e-f) Technique d’électro- éjaculation chez un bélier debout
  • 8. Préparation du bélier et réalisation de la collecte de sperme par vagin artificiel: mardi 16 janvier 2024 8 Lors de la récolte du sperme deux cas se présentent :  Males non entretenus à la récolte :  nécessite beaucoup de travail et de patience  Le faire entretenir pendant la saison de reproduction ( automne )  Dés la puberté  La présence de deux brebis une immobilisée et l’autre libre  Brebis avec comportement d’oestrus  Apprécier le comportement sexuel du male  Le male est suffisamment motivé on peut présenter le vagin artificielle des la position est adéquate  Si le male crain le manipulateur il ne faut pas changer la position et laisser le bélier faire la saillie
  • 9. Préparation du bélier et réalisation de la collecte de sperme par vagin artificiel: mardi 16 janvier 2024 9  Males entretenus à la récolte :  Pas de problèmes se posent sauf dans le cas de collecte en contre saison : il faut les stimuler par des femelles en œstrus et les entrainer à une collecte à des jours et heures fixes  La récolte se fait dans la salle de collecte prés du laboratoire avec respect des règles d’hygiènes  Une brebis est placée bout en train  Le bélier habitué assure deux montes par jour  Le manipulateur doit être accroupi , dévie le pénis dans le vagin artificiel  Le vagin artificiel contient de l’eau à 38°c comme le vagin  Cône en latex muni à son extrémité d’un tube en verre stérile de prélèvement
  • 10. Contrôle qualitative et quantitative du sperme:  Volume : se fait directement sur le tube de collecte , sans tenir compte de la mousse , il est d’environ 1 à 1,5 ml chez les ovins et les caprins  Concentration : déterminer le nombre de spermatozoïdes par millilitre de semence pure , varie entre 2 à 10^9 spr/ml de semence mesure : visuelle , comptage avec hématimètre (plus précise) ou mesure par spectrophotométrie ( précise et rapide= plus efficace ) mardi 16 janvier 2024 10
  • 11. Contrôle qualitative et quantitative du sperme:  Motilité massale : rapide et facile , Une goutte de sperme pur est déposée sur une lame et placée sur la platine chauffante du microscope (37-38°C) sous un grossissement de 80.  il faut faire la lecture rapidement à cause de la diminution de la température  Il faut s’entrainer sur la lecture (voir beaucoup de lames) pour aboutir à une mesure fiable mardi 16 janvier 2024 11
  • 12. score de motilité massale de la semence mardi 16 janvier 2024 12 score Motilité 0 Immobile 1 Mouvements individualisés 2 Mouvements très lents 3 Mouvements à faibles amplitudes 4 Rapide sans tourbillons 5 Rapide avec tourbillons
  • 13.  Pourcentage de spermatozoïdes mobiles Examen d’une goutte de sperme dilué au microscope (x200) en utilisant une platine chauffante (38°c) cette observation nécessite de l’entrainement pour estimer un pourcentage des spermatozoïdes mobiles NB : il faut mettre en considération la vitalités des spermatozoïdes  Motilité individuelle des spermatozoïdes Elle est réalisée en même temps avec le test précèdent et dans les mêmes conditions et elle nécessite aussi un entrainement En utilise un score allant de 0 (immobile) à 5 ( mouvement important rectiligne) En prend en compte la nature et la vitesse du mouvement ( rectiligne , latéral ) mardi 16 janvier 2024 13
  • 14. mardi 16 janvier 2024 14 • Mesure du pourcentage de spermatozoïdes vivants et des anomalies spermatiques : En utilise ce test que chez les béliers et les boucs dans les saisons chaudes ou à cause de la photopériode Le sperme des géniteurs ne doit pas contenir plus de 20 à 30 % de spermatozoïdes morts (colorés) et pas plus de 15 à 20 % de spermatozoïdes anormaux. • Test de thermo résistance : Ce test est destiné aux paillettes pour savoir l’aptitude de survie des spermatozoïdes dans le tractus génital femelle La paillette est incubée à 37-38°C pendant 3h et on calcule la vitalité et la motilité de la semence au début et à la fin du test
  • 15. Conditionnement du sperme :en forme liquide mardi 16 janvier 2024 15
  • 16. Conditionnement du sperme:  Dilution avec super écrémé en bain-marie 29°c (lait : protecteur+ nutritif ) on effectue la dilution selon la concentration et le volume de la semence (1.4 milliards de sprmts/ml dans la paillette )  On utilise un flacon d’acide acétique gelé pour baisser la T° de la semence diluée jusqu’à 15°c ( ralentissement du mécanisme cellulaire ) mardi 16 janvier 2024 16
  • 17. Conditionnement du sperme:  Chaque couleur est attribuée à une race , la mise en paillette est faite dans une chambre froide 15°C  Cette machine remplit les paillettes par aspiration , sertit d’un coté par un bouchon et l’autre coté par soudure à ultrasons froid  Les paillettes sont stockées dans des thermos hermétiques mardi 16 janvier 2024 17
  • 18. Bibliographie  La production du mouton ( Christian Dudouet )  Examen de l’aptitude à la reproduction chez le bélier et le bouc (A. TIBARY, R. BOUKHLIQ, K. EL ALLALI )  Manuel de formation pour l’insémination artificielle chez les ovins et les caprins (Étude FAO: Production et Santé Animales (FAO))  Insémination animale : du bélier à la paillette mardi 16 janvier 2024 18
  • 19. mardi 16 janvier 2024 MERCI 19