2. plan
Présentation du laboratoire
Étapes pré-laboratoires :
1. Echantillonnage
2. acheminement
3. Réception et enregistrement
Etapes du laboratoire:
1. Les analyses physiques
2. Les Analyses chimiques
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3. Fais partie du département des
productions animales au sein de l’ENMV. Agrée par l’état
ayant 3 missions;
deux certificats donnés par le
laboratoire:
Certificat d’analyse officiel*
Certificat d’analyse non officiel
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4. Les étapes pré-laboratoire
1. Echantillonnage:
Homogène et représentatif (quantité).
Plusieurs prises de différents endroits d’une
façon aléatoire (500g ou 1kg).
2. Acheminement:
Lieu de prise laboratoire d’analyse.
L’aliment doit conserver ses caractéristiques
physico-chimiques.
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5. 3. Réception et enregistrement:
Dans un cahier de réception on va enregistrer :
Numéro de l’échantillon.
Date de réception.
Nature de l’échantillon.
Origine de l’échantillon.
Analyse demandée.
Modalité de payement.
Date de remise de résultat et signature
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7. Les étapes du laboratoire
Objectifs:
Déterminer la valeur nutritive des aliments
analysés.
Proposer des rations équilibrées aux animaux.
Déceler les fraudes dans la composition des
aliments industriels
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11. 1. Les analyses physiques
Analyses Macroscopiques:
appréciation primaire sur la qualité de l’aliment où on
utilise nos 5 sens:
Vision: couleur, composition, forme, nature…
Odeur: absence ou présence de farine animal,
moisi ou non, rance…
Toucher: consistance.
Ouïe: boite de conserve: présence ou non de l’eau.
Goût: salé, sucré, amer, acide…
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12. Analyses Microscopiques ou
micrographiques:
Etude des différentes structures
morphologiques végétales et animales par
microscopie.
Détermination de la composition de l’aliment,
Dépistage de la présence de farine de viande
pour éviter toute tentative de fraude.
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13. Prendre 1g de l’échantillon broyé + 4 Pastilles de KOH+50 ml d’eau distillée
Ébullition pendant quelques minutes + Ajouter l’eau distillée jusqu’à 150 ml
Décantation pendant quelques minutes
Etalement entre lame et lamelle du culot de filtration ( une goutte de
glycérine
+ une goutte de l’échantillon )
Observation au microscope optique
(deux lames préparées pour chaque échantillon)
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14. 2. Les analyses chimiques:
Détermination de la matière sèche et de l’humidité
Détermination de la teneur en matière
minérale (MM)
Détermination des protéines brutes (PB)
Détermination MG ou EE
Dosage de la cellulose brute (CB)
Recherche du Phosphore (P)
Recherche du calcium (Ca)
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15. Détermination de la matière sèche et de l’humidité
PRINCIPE: Perte de la masse d’échantillon par séchage
MODE OPERATOIRE:
-Concentré: Pe= 5g
-Grossier (fourrage) Pe = 10g
*on va mettre l’échantillon dans un récipient pesé vide au
préalable(P0). P1=P0+Pe
*Séchage à 103°C pendant 4heures et puis refroidissement dans un
dessiccateur.
*on va faire une deuxième pesée P2 et on répète cette pesée
jusqu’à avoir un poids constant.
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16. Détermination de la matière sèche et de
l’humidité
%H= P1 – P2 x 100 %MS= 100-%H
Pe
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17. Dans le but de conserver l’échantillon on doit faire recours
à un conditionnement:
Si l’échantillon a une humidité < 14% il est considéré sec
et on va travailler directement sur le produit brut sinon on
va faire un pré séchage à 63°C dans une étuve pendant
24h.
Ensuite on va faire un broyage à un millimètre qui va être
utile pour les analyses ultérieures et assurer une
homogénéité adéquate, une fois l’échantillon conditionné
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18. Détermination de la teneur en matière
minérale (MM):
PRINCIPE: Destruction de la matière organique par
incinération
MODE OPERATOIRE:
-P0:Peser un creuset d’incinération (en porcelaine)
vide.
-Pe: 5g de l’échantillon dans le creuset à ajouter.
-Mettre l’échantillon dans un four à moufle pendant
4h à 550°C.
-Refroidissement après incinération dans
dessiccateur.
-P1:poids de creuset après incinération.
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19. Détermination de la teneur en matière minérale
(MM):
% MM = (P1-P0)/ Pe * 100
% MO= 100 – H -MM
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20. Détermination des protéines brutes (PB)
PRINCIPE:
Cette méthode mesure le taux d’azote total
dans l’échantillon en transformant l’azote
organique en azote minéral à l’aide de l’acide
sulfurique
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21. Détermination des protéines brutes (PB)
MODE OPERATOIRE: 3 étapes
1. Minéralisation: Transformation de l’azote
organique en azote minéral. (NH4+)
2. Distillation: Déplacement quantitatif de
toute la masse d’azote dans un milieu de
réception ( acide borique (40g/L) +
indicateur coloré ).
3. Titration: Dosage acido-basique: Titration du
milieu de réception par un acide faible:
acide sulfurique H2SO4 0.1 N
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22. 1. Minéralisation:
1g échantillon dans un tube digesteur + 12.5
ml H2SO4 pur + catalyseur ( 5 comprimés
KJELDAHL)
Mettre dans le digesteur (3h à 370°C)
2. Distillation:
Solution de réception:
50 ml de solution d’acide borique (40g/L) + 10
gouttes d’indicateur coloré (bleu de méthylène +
rouge de méthyle)
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23. i. Prélavage et réglage de l’appareil jusqu’au atteindre
un volume ≥ 200mL.
ii. On met le tube dans le distillateur en ajoutant 75 ml
de NAOH (soude) à 33% .
iii. Bombardement à chaud avec la vapeur d’eau
Dégagement de vapeur contenant l’azote
qui sera récupérée et condensée avec un système de
refroidissement dans le milieu de réception .
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24. 3. Titration:
- On ajoute de petite quantité d’acide sulfurique (0,1N)
jusqu’au virage de couleur vers la coloration rose
violette.
- Lecture du volume titré.
%Protéines= volume titré * 0,875
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25. Azote = 16% Protéine végétale
PB= 6,25 x N
Prise d’essai (Pe)=1g
Or on a :
1 ml d’acide sulfurique H2SO4 (1N) = 14 mg azote
ac.sulfurique à 0,1 N : = 1,4 mg azote
(6,25 x 1,4.10-3/ Pe) x 100
= 0,875
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26. Détermination de la MG
L’extraction de la matière grasse ou extrait éthéré se fait par un
solvant organique tel que l’éther de pétrole.
Le solvant est séparé et le résidus est séché puis pesé.
MODE OPÉRATOIRE:
Il existe deux procédés d’extraction selon la nature de
l’échantillon:
Procédé A : appliqué pour l’échantillon non indiqué
pour le procédé B.
Procédé B: étape d’hydrolyse acide + procédé A.
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27. -PROCEDE A
-Mettre 5g de l’échantillon (Pe) + 100ml d’acide
chlorhydrique (HCl) 3N dans un bécher.
-Une ébullition pendant une heure.
- Après refroidissement , Une filtration par un double
papier filtre dans un entonnoir.
- Récupérer le filtrat et le mettre à l’étuve pour éliminer
l’eau à 103°C pendant 4 heures.
-Continuer selon le procédé A .
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28. L’ensemble est placé sur une plaque chauffante à 110°c
pendant 3h (pour s’assurer que la matière grasse est
totalement éliminée) .
L’éther évaporé se condense Rinçage de la cartouche
et élimination de la matière grasse Matière grasse
sera récupérée dans le flacon.
Pour éliminer le reste d’éther on met l’extrait dans
l’étuve pendant 4 heures à 103 °C.
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29. Dosage de la cellulose brute (CB): WEENDE
PRINCIPE: Destruction de la parois cellulaire
et l’évacuation du contenu cytoplasmique
2 attaques: acide et basique
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30. 1g d’échantillon (Pe) : dans un creuset en verre,
ensuite on fixe les creusets dans la machine de
dosage de CB
30
Attaque acide
150 ml H2SO4 (0,25N)
légère ébullition pendant
30 min + évacuation du
liquide et rinçage avec
l’eau distillée
Attaque basique
150 ml d’hydroxyde de
potassium KOH (0,26N)
une légère ébullition
pendant 30 minutes
+évacuation du liquide +
rinçage
31. Culot constitué de :
H2O+ Minéraux insolubles + des parois cellulaires.
Il faut se débarrasser de l’eau (mettre à l’étuve à 103°C
pendant 4h)
après refroidissement dans un dessiccateur on va faire une
première pesée P1.
Se débarrasser de la MO (les creusets dans le four à moufle
pendant 4h) puis refroidissement et effectuer une 2éme
pesée: P2
% CB =P1 – P2 x 100
Pe
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32. Recherche du Phosphore (P)
PRINCIPE: Dosage colorimétrique par
spectrophotomètre UV à longueur d’onde de 430 nm.
P est sensible à la chaleur au cours de
l’incinération, d’où l’ajout du carbonate de
calcium ( CaCO3) pour favoriser sa fixation.
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33. Mettre une prise d’essai de 2,5 g + 1g de CaCO3
dans un creuset.
Placer le mélange dans un four à moufles à 550°C
pendant 4 H.
Laisser refroidir et ajouter 10 ml de HCl (6N)
(solubilisation du phosphore).
Filtration (fiole, entonnoir, papier filtre).
Rinçage et ajout d’eau distillée jusqu’à obtenir
250 ml de solution.
Prendre 10ml de cette solution + 10ml de
colorant.
Mettre dans une cuve, puis lecture.
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34. Recherche du calcium (Ca)
PRINCIPE: Mesure par un spectrophotomètre d’absorption
atomique.
MODE OPÉRATOIRE:
1- Obtention de la matière minérale.
2- matière minérale + 10 ml d’acide chlorhydrique (6N)
avec chauffage jusqu’au début d’ébullition.
3- Filtration dans un fiole + eau distillée jusqu’au trait de
jauge. (250 ml)
4- Dilution dans des fioles de 100 ml: 10 ml de la solution
mère + 5 ml de chlorure de lanthane (catalyseur).
5- Lecture au spectrophotomètre d’absorption atomique à
une longueur d’onde de 422,7 nm pour le Ca.
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35. CONCLUSION
Les analyses des aliments sont indisponsables,
Le travail d’équipe au laboratoire aide a fournir un
meilleur résultat.
Il faut maitriser l’alimentation pour postuler mieux la
croissance et la production et donc l’economie de
tout un pays .
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Notes de l'éditeur
1. Analyse des différents aliments destinés aux animaux (simple, composé, sous produits).
2. Détermination des valeurs nutritionnelles des différents aliments.
Formation des étudiants et l’élaboration des travaux de recherches.
officiel au profit des organismes étatiques (MC, MA, CRDA…) où l’échantillon doit être plombé et cacheté avec un dossier contenant une fiche de prélèvement, une demande d’analyse et un bordereaux d’envoi.
non officiel au profit des éleveurs des industries et des chercheurs.dans le cadre de la recherche, de l’autocontrôle ou à la demande de particuliers.
Homogène(sur le plan qualitatif)
représentatif (sur le plan quantitatif).
Du lieu de prise jusqu’au labo
L’aliment doit conserver ses caractéristiques physico-chimiques jusqu'au laboratoire.
La conservation varient selon la nature de l’aliment:
sac anaérobique, Glacière, Thermos…