Description des expériences de base en RMN 2D hétéro-nucleaire

1. La RMN 2D
hétéronucléaire
Séminaires "la RMN en pratique"
Centre Commun de RMN de l'université Lyon1,
bâtiment Lederer, 1 rue Victor Grignard, 69616 Villeurbanne

2. La RMN 2D hétéronucléaire
c
H
c O
H H
cc
HSQC, HMQC (détection 1H)
HetCor (détection X)
HMBC
c
H
c O
H H
cc
H
c
H
"through bond"
"through space"
HOESY
H
c c
X
c
H
c
c

3. La RMN 2D hétéronucléaire
Tube test cyclosporine, 500MHz, 4 scans, sonde BBFO
t1=0
t1=in0
t1=2in0
t1=3in0
t1=TD(F1)*in0
in0=1/SW(F1)
AQ
13C
1H
1/2J 1/2Jd0 d01/2J 1/2J

4. La RMN 2D hétéronucléaire

5. La RMN 2D hétéronucléaire

6. La RMN 2D hétéronucléaire
Menthol 20mg/CDCl3, 500MHz, HSQC éditée 2 scans, sonde BBI

7. La RMN 2D hétéronucléaire
Menthol 20mg/CDCl3, 500MHz, HSQC éditée 2 scans, sonde BBI

8. ppm
4.14.24.34.44.54.64.74.8 ppm
73.0
73.5
ppm
4.14.24.34.44.54.64.74.8 ppm
73.0
73.5
ppm
4.14.24.34.44.54.64.74.8 ppm
72.5
73.0
73.5
Expérience HSQC standart
15mn
Expérience HSQC standart
avec zero filling
15mn
Expérience HSQC
Nombre d'incréments doublé
30mn
La RMN 2D hétéronucléaire

9. Attention au repliement / folding dans la dimension indirecte
15N
HMBC 15N
?
SW=400ppm
1H
La RMN 2D hétéronucléaire

10. Attention au repliement /folding dans la dimension indirecte
15N
HMBC 15N
?
SW=600ppm
La RMN 2D hétéronucléaire

11. Rappels
Détection directe (X) : HetCor
Détection inverse (1H) HSQC, HMQC, HMBC
AQ
13C
1H
1/2J d0 1/2Jd0
AQ
13C
1H
d0 1/2Jd0 1/3J

12. 1J 1H/13C : HMQC ou HSQC ?
AQ
13C
1H
1/2J d0
HMQC
1/2Jd0
HSQC
c
H
c O
H H
cc
H
AQ
13C
1H
1/2J 1/2Jd0 d01/2J 1/2J

13. 1J 1H/13C : HMQC ou HSQC ou HetCosy ?
Tube organo magnésien 500MHz, 4 scans, 512 incréments, sonde BBFO, expt=1h
HSQC HMQC

14. 1D HSQC
From University of Ottawa NMR facility blog, with Glenn Facey' kind authorization
mesure des couplages 1H-13C

15. 1J 1H/13C : HSQC : le découplage 1H large bande
Tube organo magnésien 500MHz, 4 scans, 512 incréments, sonde BBFO, expt=1h
HSQC HMQC
Tube test cyclosporine, 500MHz, 4 scans, 512 incréments, sonde BBFO, expt=1h

16. 1J 1H/13C : les HSQC sélectives
Tube test cylosporine, 500MHz, 4 scans, sonde BBFO
HSQC fenêtre "normale" , zoom HSQC fenêtre réduite HSQC sélective
Si / No = 90
expt = 2h30
pas de signaux repliés, meilleur
SiNo, expérience longue
Si / No = 38
expt = 20mn
nombreux signaux repliés, SiNo
faible, expérience courte
Si / No = 30
expt = 17mn
peu de signaux repliés, SiNo
faible, expérience courte

17. 1J 1H/13C : les HSQC sélectives
Tube test cyclosporine, 500MHz, 4 scans, sonde BBFO
t1=0
t1=in0
t1=2in0
t1=3in0
t1=TD(F1)*in0
in0=1/SW(F1)

18. 1J 1H/13C : HSQC : les expériences combinées
Tube test cyclosporine, 500MHz, 4 scans, 512 incréments, sonde BBFO, expt=1h
la HSQC - TOCSY

19. 1J 1H/13C : HSQC : les expériences combinées
Tube test cyclosporine, 500MHz, 4 scans, 512 incréments, sonde BBFO, expt=1h
la HSQC - TOCSY
HSQC-TOCSY
HSQC editée

20. 1J 1H/13C : HSQC -TOCSY
la HSQC - TOCSY : 2 types d'édition possibles
CH, CH3 CH2
1JC-H
3JH-H
Tube test cyclosporine, 500MHz, 4 scans, 512 incréments, sonde BBFO, expt=1h

21. nJ 1H/13C : les HMBC
Tube test cyclosporine 500MHz, 4 scans, 512 incréments, sonde BBFO, expt=1h
la HMBC
classique
avec filtre 1J
AQ
13C
1H
1/2JLR d0 1/2Jd0
AQ
13C
1H
1/2Jmin d0 d0 2*d0
1/2Jmax
1/2JLR

22. nJ 1H/13C : les HMBC
Tube test ciclosporine 500MHz, 4 scans, 512 incréments, sonde BBFO, expt=1h
classique
Si/No = 1480
avec filtre 1J
Si/No = 580

23. 1J 1H/13C : les HMBC sélectives
la HMBC
Tube test ciclosporine 500MHz, 4 scans, 512 incréments, sonde BBFO, expt=1h
HMBC fenêtre "normale" , zoom HMBC fenêtre réduite HMBC sélective
Si / No = 220/98
expt =
pas de signaux repliés, meilleur
Si/No, expérience longue
Si / No = 175 / 95
expt = 21 mn
nombreux signaux repliés,
expérience courte
Si / No = 65/18
expt = 20 mn
peu de signaux repliés, Si/No
faible, expérience courte

24. HoeSy
AQ
13C
1H
d0
mixing time
d0