•  Varia0on	
  de	
  la	
  quan0té	
  d’ADN	
  au	
  cours	
  du	
  temps	
  	
  
Avec	
  A	
  =	
  Phase	
  G1	
  B	
  =	
  Phase	
  S,	
  C	
  =	
  phase	
  G2	
  
Durant la phase S la quantité d’ADN est doublée ; elle est ensuite divisée par 2
lors de la mitose.
Pb : comment se réalise la duplication du matériel génétique lors de la phase S ?
TP1	
  –	
  La	
  duplica1on	
  de	
  l’ADN	
  
Objec0fs	
  de	
  la	
  séance	
  :	
  raisonner	
  pour	
  comprendre	
  les	
  mécanismes	
  qui	
  permeVent	
  la	
  
réplica1on	
  de	
  l’ADN	
  précédent	
  la	
  division	
  cellulaire	
  et	
  communiquer	
  ses	
  résultats	
  par	
  un	
  
schéma.	
  
	
  
Consigne	
  :	
  À	
  par1r	
  des	
  documents	
  proposés,	
  retrouver	
  la	
  démarche	
  historique	
  et	
  les	
  
résultats	
  obtenus	
  par	
  Meselson	
  et	
  Stahl.	
  
Schéma0ser	
  les	
  résultats	
  de	
  la	
  réplica1on	
  de	
  l’ADN	
  durant	
  deux	
  généra1ons	
  chez	
  les	
  
levures.	
  
	
  
Documents	
  :	
  	
  
	
  -­‐	
  livre	
  p	
  22	
  document	
  1	
  et	
  2	
  	
  
	
  -­‐	
  site	
  interac1f	
  :	
  hVp://pedagogie.ac-­‐toulouse.fr/svt/serveur/lycee/gueraut/stahl/	
  
	
  	
  
	
  
Démarche	
  historique	
  
Meselson	
  et	
  Stahl	
  partent	
  d’un	
  constat	
  :	
  Durant	
  la	
  phase	
  S	
  (B	
  sur	
  le	
  doc	
  ci-­‐dessus),	
  	
  
	
  la	
  molécule	
  d’ADN	
  est	
  recopié,	
  les	
  2	
  brins	
  formés	
  doivent	
  porter	
  la	
  	
  
même	
  informa1on	
  géné1que.	
  	
  
Hypothèses	
  émises	
  
Protocole	
  expérimental	
  
L’azote est un constituant des nucléotides, il a pour formule chimique N, il
existe 2 isotopes (nombre de neutrons différents) 14N et 15N. Ces 2 isotopes
se distinguent par leurs poids moléculaires 15N>14N.
Si on cultive des bactéries en présence d’azote 14, l’ADN synthétise sera un
ADN de densité légère ; les bactéries cultivées en présence 15N
synthétiseront un ADN lourd. Les différences de densités sont mises en
évidence par centrifugation.
Témoins
Expériences
Les	
  résultats	
  
Témoins	
   Résultats	
  sur	
  3	
  généra1ons	
  
Comment à partir de ces résultats valider une des 3 hypothèse émise ?
Hypothèse	
  1	
  :	
  hypothèse	
  
conserva1ve	
  
Dans cette hypothèse on devrait obtenir dans les tubes une bande d’ADN lourd et une
bande d’ADN léger.
Ce n’est pas ce qui est obtenu expérimentalement => l’hypothèse est réfutée
Hypothèse	
  2	
  :	
  hypothèse	
  semi	
  -­‐	
  
conserva1ve	
  
Pour les 3 générations ce modèle de duplication est concordant avec les résultats
expérimentaux.
C’est hypothèse est validée
Hypothèse	
  3	
  :	
  hypothèse	
  
dispersive	
  
Dans ce cas :
1er génération les résultats sont concordants et ne permettent
pas de réfuter cette hypothèse.
2ième et 3ième génération : modèle de réplication non conforme aux résultats
expérimentaux (une seule bande de densité comprise entre 1,710 et 1,717)
Donc sur les 3 hypothèses émises seule la
duplication semi-conservative de l’ADN permet
d’expliquer les résultats expérimentaux obtenus
par Meselson et Stahl.

P t1 tp1correction1

  • 1.
    •  Varia0on  de  la  quan0té  d’ADN  au  cours  du  temps     Avec  A  =  Phase  G1  B  =  Phase  S,  C  =  phase  G2   Durant la phase S la quantité d’ADN est doublée ; elle est ensuite divisée par 2 lors de la mitose. Pb : comment se réalise la duplication du matériel génétique lors de la phase S ?
  • 2.
    TP1  –  La  duplica1on  de  l’ADN   Objec0fs  de  la  séance  :  raisonner  pour  comprendre  les  mécanismes  qui  permeVent  la   réplica1on  de  l’ADN  précédent  la  division  cellulaire  et  communiquer  ses  résultats  par  un   schéma.     Consigne  :  À  par1r  des  documents  proposés,  retrouver  la  démarche  historique  et  les   résultats  obtenus  par  Meselson  et  Stahl.   Schéma0ser  les  résultats  de  la  réplica1on  de  l’ADN  durant  deux  généra1ons  chez  les   levures.     Documents  :      -­‐  livre  p  22  document  1  et  2      -­‐  site  interac1f  :  hVp://pedagogie.ac-­‐toulouse.fr/svt/serveur/lycee/gueraut/stahl/        
  • 3.
    Démarche  historique   Meselson  et  Stahl  partent  d’un  constat  :  Durant  la  phase  S  (B  sur  le  doc  ci-­‐dessus),      la  molécule  d’ADN  est  recopié,  les  2  brins  formés  doivent  porter  la     même  informa1on  géné1que.    
  • 4.
  • 5.
    Protocole  expérimental   L’azoteest un constituant des nucléotides, il a pour formule chimique N, il existe 2 isotopes (nombre de neutrons différents) 14N et 15N. Ces 2 isotopes se distinguent par leurs poids moléculaires 15N>14N. Si on cultive des bactéries en présence d’azote 14, l’ADN synthétise sera un ADN de densité légère ; les bactéries cultivées en présence 15N synthétiseront un ADN lourd. Les différences de densités sont mises en évidence par centrifugation. Témoins Expériences
  • 6.
    Les  résultats   Témoins   Résultats  sur  3  généra1ons   Comment à partir de ces résultats valider une des 3 hypothèse émise ?
  • 7.
    Hypothèse  1  :  hypothèse   conserva1ve  
  • 8.
    Dans cette hypothèseon devrait obtenir dans les tubes une bande d’ADN lourd et une bande d’ADN léger. Ce n’est pas ce qui est obtenu expérimentalement => l’hypothèse est réfutée
  • 9.
    Hypothèse  2  :  hypothèse  semi  -­‐   conserva1ve  
  • 10.
    Pour les 3générations ce modèle de duplication est concordant avec les résultats expérimentaux. C’est hypothèse est validée
  • 11.
    Hypothèse  3  :  hypothèse   dispersive  
  • 12.
    Dans ce cas: 1er génération les résultats sont concordants et ne permettent pas de réfuter cette hypothèse. 2ième et 3ième génération : modèle de réplication non conforme aux résultats expérimentaux (une seule bande de densité comprise entre 1,710 et 1,717)
  • 13.
    Donc sur les3 hypothèses émises seule la duplication semi-conservative de l’ADN permet d’expliquer les résultats expérimentaux obtenus par Meselson et Stahl.