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Thème :
République Algérienne Démocratique et Populaire
Ministère de l’Enseignement Supérieur et de la Recherche Scientifique
Département des sciences de la nature et de la vie
Faculté des Sciences Exactes
et Sciences de la Nature
et de la vie
Université de Tébessa
Effets du cadmium Cd sur l’activité enzymatique
chez un poisson téléostéen Gambusia affinis.
Sous la direction: Mme. Rouachdia .R
Par :
DJELLAB Imed
2012-2013
Matériel et méthodes
Résultats
Conclusion
introduction
Les activités humaines
anthropisé tous les milieux
environnementauxet
notamment
l’évaluation de la qualité des milieux
aquatiques
La présence des xénobiotique dans le milieu pourrait avoir
des retombées sur des organismes non visé.
Objectif
l’évaluation de l’effet d’un métal lourd (cadmium) sur les
biomarqeurs biochimiques (protéines et lipides) et sur l’activité
enzymatique hépatique (Malondialdéhyde) chez un poecilidae
vivipare : Gambusia affinis
vivipare de petite taille variant de 2 à 6 cm. Utilisé
Figure 1: Morphologie générale de Gambusia affinis, male et femelle
Tache de
gravidité
(Ovaire)
Nageoire anale
Gonopode
1- Matériel biologiqueSelon Grassé (1985), sa position systématique est la suivante :
Embranchement
Classe
Sous classe
Super ordre
Ordre
Famille
Genre
Espèce
Vertébrés
Poisson
Téléostome
Téléostéen
Cyprinodontiformes
Poecillidae
Gambusia
affinis (baird et Girard., 1954)
Gambusia affinis (Baird et Girard, 1984), est un poisson d'eau douce de couleur
gris argentée.
 poids atomique
est de 112.41
g/mol
48 éléments
métal trace non
essentiel. À l’état pur
il est malléable
 inodore
 de couleur métal blanc-
argent, légèrement bleuté.
2- Le Cadmium
fréquemment
retrouvé à de fortes
concentrations dans
l’environnement
aquatique associe
agricole
industrielle
Traitement durant 21 jours
Lot non traité
témoin
Lots traités par le Cd
5 µg/L
Lots traités par le cd
2,5µg/L
Prélèvement contenu de l’hépatopancréas
3j, 7j, 15j, 21jours
Biométrie: RHS
Dosage des protéines et les lipides
Dosage des biomarqueurs: MDA.
3-Protocole expérimental
Acclimatation: 1 semaines
évaluer
Représente un moyen simple et rapide de mesure des interactions des
individus avec leur environnement .
4- Le rapport Hépatosomatique (RHS)
RHS = poids du foie X 100/ poids du corps
5 -Extraction et dosage des métabolites
(Proteines & lipides)
L’épatopancréas
1ml de TCA
Broyage
5000 trs/min pdt 10mnSurnageant I
Culot I
Surnageant II
Culot II
Lipides
Goldchworthy et al, 1972
Proteines
bradford, 1976
6-Dosage du Malondialdéhyde (MDA)
H.
pancréas
males
adultes
Broyage a
basse T°
Tris HCL
Centrifugation
10000tr/ 10mn
500 µl
Surnageant I
2,5 ml TCA
Chauffer
100°c (15min)
Refroidissement
(Glace)
Centrifugation
10000tr/ 10mn
2 ml
Surnageant II
1 ml TBA
Chauffer
100°c (15min)
Refroidissement
(Glace)
Ajouté 1,5 ml
butanol
Centrifugation
10000tr/ 10mn
532nm
(Draper & Hadley, 1990)
Minitab (Weisberg., 1985),
test ‘’t’’ de Student l’analyse de la variance à 2critères
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RapportHepatosomatique
Temps (jours)
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5µg/l
2,5µg/l
Figure 2 : Variation du rapport Hépatosomatique chez les males du G.affinis traité par le
cadmium (5µg/L et 2,5 µg/L). (NS : Différence non significative, * : Différence significative
p<0,05 entre les séries témoins et traité).
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contenuenproteinesµg/hépatopancréas
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Figure 3 : Effet du cadmium (5µg/L et 2,5 µg/L) sur le taux de protéines totales (µg/hépatopancréas)
.chez les males du G.affinis. (NS : Différence non significative, * : Différence significative p<0,05
entre les séries témoins et traité, ** : Différence hautement significative p<0,01 entre les séries
témoins et traité, *** : Différence très hautement significative p<0,001 entre les séries témoins et
traité).
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contenuenlipidesµg/hépatopancréas
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Figure 4 : Effet du cadmium (5µg/L et 2,5 µg/L) sur le contenu en lipides totaux (µg/hépatopancréas)
.chez les males du G.affinis traité. (NS : Différence non significative, * : Différence significative
p<0,05 entre les séries témoins et traité).
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5µg/l
2,5µg/l
Figure 5 : Effet du cadmium (5µg/L et 2,5 µg/L) sur le taux du Malonedialdéhyde (mM/mg de protéine) .chez les
males du G.affinis. (NS : Différence non significative, * : Différence significative p<0,05 entre les séries témoins et
traité).
Le travail réalisé à évalué l’étude de l’impact d’une agression chimique induite par le
cadmium chez un poisson d’eau douce « Gambusia affinis ».
Les résultats obtenus après exposition des Gambusies à ce métal aux différents temps
testés (3,7, 15 et 21 jours) montrent que
Les deux doses du cd
n’entrainent aucun effet
significatif sur le rapport
hépatosomatique, à
l’exception de la
diminution observée après
3jours de traitement à la
faible dose.
une augmentation
progressive de la
concentration des
protéines de 3 à 7
jours.
De plus, l'étude de la
composition biochimique
(protéines et lipides)
révèle une baisse de la
teneur en lipides
hépatopancréatiques à 3et
à 7 jours avec une
augmentation
significative après
15jours.
Les deux doses du cd n’entrainent aucune modification significative sur le taux du
MDA, à l’exception de la diminution significative observée après 15joursde traitement à
la faible dose.
Ce travail mériterait d'être approfondi par des
nouvelles voies d'approche (enzymologie, embryologie,
génétique…) qui pourrait peut être élucidé d’autres
problèmes.
Présentation 2013

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Présentation 2013

  • 1.
  • 2. Thème : République Algérienne Démocratique et Populaire Ministère de l’Enseignement Supérieur et de la Recherche Scientifique Département des sciences de la nature et de la vie Faculté des Sciences Exactes et Sciences de la Nature et de la vie Université de Tébessa Effets du cadmium Cd sur l’activité enzymatique chez un poisson téléostéen Gambusia affinis. Sous la direction: Mme. Rouachdia .R Par : DJELLAB Imed 2012-2013
  • 4. Les activités humaines anthropisé tous les milieux environnementauxet notamment l’évaluation de la qualité des milieux aquatiques La présence des xénobiotique dans le milieu pourrait avoir des retombées sur des organismes non visé.
  • 5. Objectif l’évaluation de l’effet d’un métal lourd (cadmium) sur les biomarqeurs biochimiques (protéines et lipides) et sur l’activité enzymatique hépatique (Malondialdéhyde) chez un poecilidae vivipare : Gambusia affinis
  • 6.
  • 7. vivipare de petite taille variant de 2 à 6 cm. Utilisé Figure 1: Morphologie générale de Gambusia affinis, male et femelle Tache de gravidité (Ovaire) Nageoire anale Gonopode 1- Matériel biologiqueSelon Grassé (1985), sa position systématique est la suivante : Embranchement Classe Sous classe Super ordre Ordre Famille Genre Espèce Vertébrés Poisson Téléostome Téléostéen Cyprinodontiformes Poecillidae Gambusia affinis (baird et Girard., 1954) Gambusia affinis (Baird et Girard, 1984), est un poisson d'eau douce de couleur gris argentée.
  • 8.  poids atomique est de 112.41 g/mol 48 éléments métal trace non essentiel. À l’état pur il est malléable  inodore  de couleur métal blanc- argent, légèrement bleuté. 2- Le Cadmium fréquemment retrouvé à de fortes concentrations dans l’environnement aquatique associe agricole industrielle
  • 9. Traitement durant 21 jours Lot non traité témoin Lots traités par le Cd 5 µg/L Lots traités par le cd 2,5µg/L Prélèvement contenu de l’hépatopancréas 3j, 7j, 15j, 21jours Biométrie: RHS Dosage des protéines et les lipides Dosage des biomarqueurs: MDA. 3-Protocole expérimental Acclimatation: 1 semaines évaluer
  • 10. Représente un moyen simple et rapide de mesure des interactions des individus avec leur environnement . 4- Le rapport Hépatosomatique (RHS) RHS = poids du foie X 100/ poids du corps
  • 11. 5 -Extraction et dosage des métabolites (Proteines & lipides) L’épatopancréas 1ml de TCA Broyage 5000 trs/min pdt 10mnSurnageant I Culot I Surnageant II Culot II Lipides Goldchworthy et al, 1972 Proteines bradford, 1976
  • 12. 6-Dosage du Malondialdéhyde (MDA) H. pancréas males adultes Broyage a basse T° Tris HCL Centrifugation 10000tr/ 10mn 500 µl Surnageant I 2,5 ml TCA Chauffer 100°c (15min) Refroidissement (Glace) Centrifugation 10000tr/ 10mn 2 ml Surnageant II 1 ml TBA Chauffer 100°c (15min) Refroidissement (Glace) Ajouté 1,5 ml butanol Centrifugation 10000tr/ 10mn 532nm (Draper & Hadley, 1990)
  • 13. Minitab (Weisberg., 1985), test ‘’t’’ de Student l’analyse de la variance à 2critères
  • 14. * 0.00 0.50 1.00 1.50 2.00 2.50 3.00 3.50 4.00 3 jours 7 jours 15 jours 21 jours RapportHepatosomatique
  • 15. * 0.00 0.50 1.00 1.50 2.00 2.50 3.00 3.50 4.00 3 jours 7 jours 15 jours 21 jours RapportHepatosomatique Temps (jours) Temoin 5µg/l 2,5µg/l Figure 2 : Variation du rapport Hépatosomatique chez les males du G.affinis traité par le cadmium (5µg/L et 2,5 µg/L). (NS : Différence non significative, * : Différence significative p<0,05 entre les séries témoins et traité).
  • 16. ** *** * ** *** ** * 0.00 20.00 40.00 60.00 80.00 100.00 120.00 140.00 160.00 180.00 3 jours 7 jours 15 jours 21 jours contenuenproteinesµg/hépatopancréas Temps (jours) Temoin 5µg/L 2,5µg/L Figure 3 : Effet du cadmium (5µg/L et 2,5 µg/L) sur le taux de protéines totales (µg/hépatopancréas) .chez les males du G.affinis. (NS : Différence non significative, * : Différence significative p<0,05 entre les séries témoins et traité, ** : Différence hautement significative p<0,01 entre les séries témoins et traité, *** : Différence très hautement significative p<0,001 entre les séries témoins et traité).
  • 17. * * * * * 0 50 100 150 200 250 300 350 400 450 500 3 jours 7 jours 15 jours 21 jours contenuenlipidesµg/hépatopancréas Temps (jours) Temoin 5µg/L 2,5µg/L Figure 4 : Effet du cadmium (5µg/L et 2,5 µg/L) sur le contenu en lipides totaux (µg/hépatopancréas) .chez les males du G.affinis traité. (NS : Différence non significative, * : Différence significative p<0,05 entre les séries témoins et traité).
  • 18. * 0 0.5 1 1.5 2 2.5 3 3.5 3 jours 7 jours 15 jours 21 jours TauxduMDA(mM/mgdeproteine Temps (jours) Temoin 5µg/l 2,5µg/l Figure 5 : Effet du cadmium (5µg/L et 2,5 µg/L) sur le taux du Malonedialdéhyde (mM/mg de protéine) .chez les males du G.affinis. (NS : Différence non significative, * : Différence significative p<0,05 entre les séries témoins et traité).
  • 19.
  • 20. Le travail réalisé à évalué l’étude de l’impact d’une agression chimique induite par le cadmium chez un poisson d’eau douce « Gambusia affinis ». Les résultats obtenus après exposition des Gambusies à ce métal aux différents temps testés (3,7, 15 et 21 jours) montrent que Les deux doses du cd n’entrainent aucun effet significatif sur le rapport hépatosomatique, à l’exception de la diminution observée après 3jours de traitement à la faible dose. une augmentation progressive de la concentration des protéines de 3 à 7 jours. De plus, l'étude de la composition biochimique (protéines et lipides) révèle une baisse de la teneur en lipides hépatopancréatiques à 3et à 7 jours avec une augmentation significative après 15jours. Les deux doses du cd n’entrainent aucune modification significative sur le taux du MDA, à l’exception de la diminution significative observée après 15joursde traitement à la faible dose. Ce travail mériterait d'être approfondi par des nouvelles voies d'approche (enzymologie, embryologie, génétique…) qui pourrait peut être élucidé d’autres problèmes.

Notes de l'éditeur

  1. Bbdhbfkjgbbf