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Rôle du laboratoire de
microbiologie
environnementale dans
la prévention et le
contrôle des infections
Objectifs
1. Décrire les caractéristiques des
microorganismes impliqués (habitat, mode de
transmission…)
2. Lister les principaux microorganismes
impliqués dans les infections associées aux
soins (IAS)
3. Expliquer le rôle du laboratoire dans le
contrôles des infections
4. Préciser les 4 missions du laboratoires dans la
maîtrise des infections
August
23,
2013
2
Temps imparti
• 60 minutes
August
23,
2013
3
Base de la microbiologie
• Ce sont des agents infections
• Ils sont ubiquitaires (environnement, commensal
de l’Homme)
• La plupart sont non pathogène pour l’Homme
• Certains sont responsables de maladie
• Les microorganismes sont divisés en plusieurs
catégories
• Bactéries
• Champignons ou fungi
• Virus
• Prions
• Parasites
August
23,
2013
4
Pathogénèse de l’infection
• Colonisation d’un nouvel hôte puis
multiplication
• Création d’un équilibre entre l’hôte et les
microorganismes : flore commensale
• Infection : conflit hôte/microorganismes
aboutissant à la maladie
• Infection endogène : maladie liée à la flore de
l’hôte
• Infection exogène : maladie liée à la flore
environnementale
August
23,
2013
5
Mode de transmission
• Dissémination via l’Homme, les animaux ou
l’environnement
• Transmission directe ou indirecte
• Voie de transmission
• Par contact
• Mains
• Instruments chirurgicaux
• Par contact avec une surface souillée
• Eau
• Alimentation
• Vecteurs comme les moustiques
August
23,
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6
Bactéries
• Microorganismes possédant toute la machinerie
cellulaire pour se développer
• Multiplication par division
• Forme visible = colonie sur les géloses
• Le matériel génétique peux se transférer d’une
bactérie à une autre soit verticalement soit
horizontalement
• Certaines forment des spores
• Forme de résistance
August
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7
Bactéries Acinetobacter
baumannii
Bordetella
pertussis
Campylobac
ter jejuni,
C. coli
Clostridium difficile
Habitat Peau humide,
tractus GI
Muqueuse
NP
Tractus GI Tractus GI
Survie 3 jours à 5 mois 3-5 jours Plus de 6
jours
5 mois sous forme
de spores
Diffusion lors
des soins
Contact Goutellette Fécal-oral,
eau, aliment
Fécal-oral, contact
IAS UTI, sepsis,
méningite,
pneumonie
Pertussis Diarrhée CDI
Echantillon Urine, sang,
LCR, sécrétions
respiratoires
Ecouvillon NP Selles Selles
Prévention Bionettoyage,
des instruments
et lavage des
mains
Isolement Contrôle des
aliments et
de l’eau,
lavage des
mains
Lavage des mains et
bionettoyage, usage
des antibiotiques
August
23,
2013
8
Bacteries Salmonella
typhimurium
Serratia
marcescens
Shigella
species
S. aureus
Habitat Tractus GI Tractus GI
, aire humide
Tractus GI Peau,
muqueuse
Survie 10 mois à 4,2
ans
3 jours à 2 mois 2 jours à 5
mois
7 jours à 7
mois
Diffusion
lors des
soins
Fécal-oral Contact, voie
veineuse
Fécal-oral Contact,
goutelettes,
equipement,
endogène
IAS Diarrhée, sepsis Sepsis, plaie Diarrhée Variable
Echantillon Selles, sang Sang, exudat Selles Variable
Prévention Contrôle
alimentaire,
eau, lavage des
mains
Bionettoyage,
lavage
équipement, des
mains
Bionettoyage,
lavage
équipement,
des mains
Bionettoyage,
lavage des
mains, usage
des
antibiotiques
August
23,
2013
9
Bacteries S. agalactiae
(Group B
streptococcus)
S. pyogenes
(Group A
streptococcus)
Vibrio
cholerae
Yersinia
enterocolitica
Habitat Voie génital Muqueuse
oropharyngée
Tractus GI Tractus GI
Survie 3 jours à 6,5 mois 1 – 7 jours
Diffusion
lors des
soins
Contact,
materno-fœtale
Goutelette,
contact,
endogène
Fécal-oral Transfusion
IAS Sepsis,
meningite du
nouveau né
Pharyngite, plai
chirugicale
Cholera Bacteremie
Echantillon Sang, LCR Exudat,
écouvillon
oropharyngé
Selles Selles, sang
Prévention Antibioprophyla
xie lors de
l’accouchement
, lavage des
mains
Lavage des main,
port de masque
Contrôle de
l’eau et
aliment
Production
des poches de
sang sécurisé
August
23,
2013
10
Fungi
• Unicellulaire (levures) or pluricellulaire
(moisissures)
• Reproduction asexuée (conidies) et sexuée
(spores*)
• Ubiquitaire
• Certains sont commensaux
• Agent opportunistes
• À l’origine d’infection sévère chez le patient
immunodéprimé
August
23,
2013
11
* Les spores ne sont pas aussi résistantes que celles des bactéries dans la nature
Fungi Candida
albicans
Candida
glabrata
Candida
parapsilosis
Habitat Environement,
muqueuse
Environement,
muqueuse
Environement,
muqueuse
Survie 1-120 jours 120-150 jours 14 jours
Diffusion
lors des
soins
Contact,
endogène
Contact,
endogène
Contact,
endogène
IAS Variable Variable Variable
Echantillon Variable Variable Variable
Prévention Lavage des
mains,
équipements
Lavage des
mains,
équipements
Lavage des mains,
équipements
August
23,
2013
12
Fungi Aspergillus species Mucor Rhizopus
Habitat Environement, air Environement Environement
Survie Résistance des
conidies
Résistance des
conidies
Résistance des
conidies
Diffusion
lors des
soins
Inhalation,
(contact)
Inhalation Inhalation
IAS Variable Variable Variable
Echantillon Variable Variable Variable
Prévention Maîtrise de l’air et
de l’eau, isolement
Maîtrise de l’air et
de l’eau, isolement
Maîtrise de l’air et
de l’eau, isolement
August
23,
2013
13
Virus -1
• Agents infectieux microscopiques
• Nécessite des cellules vivantes pour se reproduire
• Bactérie, plante au animal
• Composé d’AND ou d’ARN et d’un manteau
protéique
• Certains possèdent une enveloppe lipidique externe
August
23,
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14
Virus -2
• Après pénétration dans la
cellule, les virus utilisent la
machinerie cellulaire pour
synthétiser ses acides
nucléiques et ses protéines
• La cellule est sévèrement
endommagée ou détruite et
l’infection se développe
August
23,
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15
Virus Adenovirus Coronavirus,
including
SARS
Coxackie B
virus
Cytomegalovirus
Habitat Eau, vecteur,
environement
Humains Humains Humains
Survie 7 jours à 3
mois
3 heures
SRAS virus: 72
à 96 heures
>2 semaines 8 heures
Diffusion
lors des
soins
Contact Gouttelette Fécal-oral;
contact
Sang, greffe de
tissus ou d’organe
IAS conjonctivité,
pneumopathie
Pneumopathie Maladie
généralisée
du nouveau
né
Variable
Echantillon Sérum Sérum Sérum Sérum
Prévention Collyre
individuel
Isolement,
lavage des
mains,
bionettoyage
Lavage des
mains,
bionettoyage
Sécurisation des
transfusion et
greffes
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16
Virus Human
immunodeficiency
virus
Influenza
virus
Norovirus Respiratory
syncytial virus
Habitat Humains Humains Humains Humains
Survie >7 jours 1-2 jours 8 heures– 7
jours
> 6 heures
Diffusion
lors des
soins
Sang, fluide
corporel, tissu,
greffe d’organes
Gouttelette,
contact
Fécal-oral,
contact
Gouttelette,
contact
IAS SIDA Influenza Diarrhée Infection
respiratoire
aigue
Echantillon Sérum Sérum Sérum Exudat
Prévention Sécurisation des
transfusions et des
transplantations/
greffes
Isolement,
vaccination
Lavage des
mains,
bionettoyage
Isolement,lavage
des mains et
équipement
August
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2013
17
Virus Rotavirus Rubula virus
(mumps)
Rubivirus
(rubella)
Habitat Humain Humain Humain
Survie 6-60 jours
Diffusion lors
des soins
Fécal-oral,
contact
Gouttelettes Gouttelletes
IAS Diarrhée Oreillons
(parotite)
Rubéole
Echantillon Stool Serum sample Serum sample
Prévention Lavage des
mains,
bionettoyage
Isolement,
vaccination
Isolement ,
vaccination
August
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18
Virus Morbillivirus Varicella-zoster virus
Habitat Humain Humain
Survie
Diffusion lors
des soins
Goutelletes Gouttelettes , contact
proche
IAS Rougeole Varicelle
Echantillon Sérum Sérum
Prévention Isolement, vaccination Isolement, vaccination
August
23,
2013
19
Prions
• Prions est une particule protéique
• Ne contient pas d’acide nucléique
• Liés à des maladies neurologiques sévères et
multiples
• Hautement résistant aux désinfectants et aux
méthodes de stérilisation habituels
• Transmission iatrogène possible
• Lors de transplantation
• Via les instruments contaminés par du tissu cérébral,
liquide céphalorachidien, autres fluides contaminés
August
23,
2013
20
Parasites
• Inclus les protozoaires
• Microorganisme unicellulaire
• Habitat : environnement, homme, animaux
• Certains sont responsables d’infections
• Parasites pluricellulaires
• Vers pouvant causer des infections nommées infestation
• Cause fréquente de maladie dans les climats
chauds (paludisme, bilharziose)
• Rarement impliqués dans IAS
August
23,
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21
Parasite Cryptosporidium
(protozoa)
Plasmodium
species
(protozoa)
Trichomonas
vaginalis
(protozoa)
Enterobius
vermicularis
(helminthe)
Habitat Foie,
érythrocyte
Muqueuse
vaginale
Tractus
intestinal
Survie 2 heures Plusieurs heures
dans les
environnements
humides
Oeuf : au moins
1 an
Diffusion
lors des
soins
Moustique,
sang
contaminé
Voie sexuelle,
équipement
gynécologique
contaminé
Fécal-oral
IAS Malaria Trichomonose Oxyurose
Echantillon Sang Sécrétion
vaginale
Scotch périanal
Prévention Sécurisation
des
transfusions
Désinfection des
équipements
Bionettoyage,
lavage des
mains
August
23,
2013
22
Rôle du laboratoire de
microbiologie : Introduction
• Le diagnostic de laboratoire a 2 fonctions :
• Clinique
• Diagnostic de l’infection pour la prise en charge du
patient
• Epidémiologique
• Aide pour la mise en place de la prévention et le contrôle
de l’infection en recherchant la source et le mode de
transmission
August
23,
2013
23
Conditions minimales pour le
laboratoire de microbiologie -1
1. Accessibilité du laboratoire
• Si ce n’est pas possible, établir un contrat avec le
laboratoire le plus proche
2. Disponibilité quotidienne, samedi et dimanche
inclus
• Idéalement 24h/24h
3. Capacité à examiner un échantillon de sang,
LCR, selles, exsudat, sécrétions respiratoires et
la possibilité de réaliser des sérologies virales
(HIV, HBV, HCV)
August
23,
2013
24
4. Capacité à identifier les bactéries et les
champignons à l’espèce
5. Possibilité de réaliser les études de sensibilité
aux antibiobiotiques (méthode de diffusion en
disque)
6. Réaliser les phénotypages
• sérotypage
• Salmonella, Shigella, P. aeruginosa, N. meningitidis
• biotypage
• S. typhi
August
23,
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25
Conditions minimales pour le
laboratoire de microbiologie -2
Rôle clinique : diagnostic de
l’infection
• Le diagnostic doit être rapide et précis
• Méthodes classiques de bactériologie
• Examen direct
• Culture
• Recherche d’antigène
• Antibiogramme
• Recherche d’antigène
• Pas toujours utile dans les stades précoces de l’infection
• Méthodes moléculaires
• Rarement utilisées en routine pour le diagnostic d’IAS
August
23,
2013
26
Rôle dans la prévention et le
contrôle des infections associées
aux soins
• Investigation
• Surveillance
• Alerter
• Stratégie antibiotique
August
23,
2013
27
Investigation
• Rechercher la source de l’infection
• Déterminer si la souche est la même (génotype)
August
23,
2013
28
Tests complémentaires lors
d’une investigation
• Parfois, pour clarifier la situation (épidémie ou
endémie), d’autres données sont requises
• Tests microbiologiques
• Produits sanguins
• Contrôle environnemental des surfaces
• Désinfectants, antiseptiques
• Air
• Eau
• Mains du personnel
• Fosses nasales du personnel
August
23,
2013
29
Surveillance des IAS
• Le laboratoire doit fournir les comptes rendu
dès que possible
• Permettant de réaliser des courbes, des isolements
ou des regroupements de patient
• Etablir une incidence de base
• Tout nouvel isolat pourra être comparé à cette
incidence
• L’informatisation du laboratoire permet un
accès plus rapide aux données
August
23,
2013
30
Microorganismes concernés
• Microorganismes
• Methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA)
• Vancomycin-intermediate S.aureus (VISA)
• Vancomycin-resistant enterococci (VRE)
• MDR Pseudomonas aeruginosa
• MDR Acinetobacter baumannii
• MDR Mycobacterium tuberculosis
• ESBL enterobacterie
• Clostridium difficile
August
23,
2013
31
Stratégie antibiotique
• Etat des lieux régulier des changements des
phénotypes de résistance :
• Newsletters
• Données spécifiques du laboratoire
• Limiter les comptes rendus aux :
• Antibiotiques de première ligne
• Antibiotiques de réserve
August
23,
2013
32
Bon usage des antibiotiques
• Rôle clinique du microbiologiste
• Participer au groupe de travail
• Interprétation des données pour optimiser le
traitement
• Culture, susceptibilité
• Surveillance active
• Recherche des bactéries résistantes
• Génotypage
August
23,
2013
33
Interprétation des données
microbiologiques
• Les données sont interprétées lors de réunion de
service
• Résultats des bactéries isolées, de leur profil de
résistance et des typage
• Idéalement, un spécialiste est requis
• Dans le cas contraire, une formation est demandée
August
23,
2013
34
Rôle dans l’éducation
• Réunion sur la prévention des infections
• Comment interpréter les résultats
• Le personnel hospitalier
• Transport des échantillons, interprétation des comptes
rendus, des tests de sensibilités
• Etudiants (médical and infirmier)
• Base de la microbiologie
August
23,
2013
35
Point clé -1
• Les microbes sont des microorganismes non
visible à l’oeil nu
• Largement répandu dans le nature et pouvant causer
des infections
• Le diagnostic de l’infection par le laboratoire a 2
fonctions importantes
• Clinique
• Epidémiologique
• Le laboratoire devrait déterminer les principaux
agents pathogènes et ceux impliqués dans les
IAS
August
23,
2013
36
Point clé -2
• Le laboratoire devrait réaliser les typages des
souches isolées
• Le laboratoire devrait fournir régulièrement des
rapports sur les principales souches isolées
• Réaliser des courbes d’incidence pour les pathogènes
spécifiques,
• Le microbiologiste interprète les données et
décide collectivement avec le service des
mesures préventives à prendre
August
23,
2013
37
Références
• Diekema DJ, et al. Infection Control Epidemiology and
Microbiology Laboratory. In Manual of Clinical
Microbiology, 8th Ed., Murray PR, Editor in Chief, ASM
Press, Washington, DC, 2003:129-138
• Peterson LR, et al. Role of clinical microbiology laboratory
in the management and control of infectious diseases
and the delivery of health care. Clin Infect Dis 2001;
32:605-611
• Gill VJ, et al. The clinician and the Microbiology
Laboratory. In: Mandell, Douglas and Bennett’s
Principles and Practice of Infectious Diseases, 6th ed.,
Mandell GL, Bennett JE, Dolin R, Editors, Elsevier,
Philadelphia, 2005:203-241
August
23,
2013
38
Références
• Stratton CW IV, Greene JN. Role of the Microbiology
Laboratory in Hospital Epidemiology and Infection
Control. In: Hospital Epidemiology and Infection Control,
3rd Ed., Mayhall CG, Editor, Lippincott, Williams &
Wilkins, Philadelphia, 2004:1809-1825
• Poutanen SM, Tompkins LS. Molecular Methods in
Nosocomial Epidemiology. In: Prevention and Control of
Nosocomial Infections, 4th Ed., Wenzel RP, Editor,
Lippincott, Williams & Wilkins, Philadelphia, 2003: 481-
499
August
23,
2013
39
Quiz
1. Les microorganismes à l’origine d’infection ne peuvent
pas vivre sur des surfaces inertes. V/F
2. Le matériel génétique des bactéries peut être transmis
pas seulement verticalement mais aussi
horizontalement. V/F
3. Pour le rôle du laboratoire dans la surveillance des IAS,
quelle(s) est (sont) les condition(s) non nécessaire(s) du
laboratoire :
a. Fournir régulièrement des rapports sur les souches isolées
b. Faire une base de données sur l’incidence des isolements
c. Avoir un médecin microbiologiste
d. Avoir un système qualité
August
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2013
40
Fédération Internationale de la
Prévention des Infections (IFIC)
• La mission de l’IFIC est de faciliter la coopération
internationale afin d’améliorer la prévention et le contrôle des
infections liées aux soins à l’échelle mondiale. C’est une
organisation rassemblant des sociétés et associations de
professionnels de santé spécialisées dans la prévention des
infections et les domaines liés à travers le monde.
• Le but de l’IFIC est de diminuer le risque d’infection au sein
des établissements de soins à travers le développement d’un
réseau d’organisations de lutte contre les infections, pour
faciliter la communication, la recherche de consensus,
l’éducation et le partage d’expertise.
• Pour plus d’informations, aller sur http://theific.org/
December
1,
2013
41
Fédération Internationale de la
Prévention des Infections (IFIC)
• Traduction réalisée pour le compte de l’IFIC par la Société
Française d’hygiène hospitalière SF2H
• Ont collaboré à ce projet :
• Ludwig Serge Aho, Gabriel Birgand, Tristan Delory, Arnaud
Florentin, Annick Lefebvre, Clément Legeay, Olivia Keita-Perse,
Chantal Léger, Julie Lizon, Margaux Lepainteur, Véronique Merle,
Pierre Parneix, Alexandre Rivier, Carole Roy, Anne Savey, Anne-
Gaëlle Venier.
December
1,
2013
42

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  • 1. Rôle du laboratoire de microbiologie environnementale dans la prévention et le contrôle des infections
  • 2. Objectifs 1. Décrire les caractéristiques des microorganismes impliqués (habitat, mode de transmission…) 2. Lister les principaux microorganismes impliqués dans les infections associées aux soins (IAS) 3. Expliquer le rôle du laboratoire dans le contrôles des infections 4. Préciser les 4 missions du laboratoires dans la maîtrise des infections August 23, 2013 2
  • 3. Temps imparti • 60 minutes August 23, 2013 3
  • 4. Base de la microbiologie • Ce sont des agents infections • Ils sont ubiquitaires (environnement, commensal de l’Homme) • La plupart sont non pathogène pour l’Homme • Certains sont responsables de maladie • Les microorganismes sont divisés en plusieurs catégories • Bactéries • Champignons ou fungi • Virus • Prions • Parasites August 23, 2013 4
  • 5. Pathogénèse de l’infection • Colonisation d’un nouvel hôte puis multiplication • Création d’un équilibre entre l’hôte et les microorganismes : flore commensale • Infection : conflit hôte/microorganismes aboutissant à la maladie • Infection endogène : maladie liée à la flore de l’hôte • Infection exogène : maladie liée à la flore environnementale August 23, 2013 5
  • 6. Mode de transmission • Dissémination via l’Homme, les animaux ou l’environnement • Transmission directe ou indirecte • Voie de transmission • Par contact • Mains • Instruments chirurgicaux • Par contact avec une surface souillée • Eau • Alimentation • Vecteurs comme les moustiques August 23, 2013 6
  • 7. Bactéries • Microorganismes possédant toute la machinerie cellulaire pour se développer • Multiplication par division • Forme visible = colonie sur les géloses • Le matériel génétique peux se transférer d’une bactérie à une autre soit verticalement soit horizontalement • Certaines forment des spores • Forme de résistance August 23, 2013 7
  • 8. Bactéries Acinetobacter baumannii Bordetella pertussis Campylobac ter jejuni, C. coli Clostridium difficile Habitat Peau humide, tractus GI Muqueuse NP Tractus GI Tractus GI Survie 3 jours à 5 mois 3-5 jours Plus de 6 jours 5 mois sous forme de spores Diffusion lors des soins Contact Goutellette Fécal-oral, eau, aliment Fécal-oral, contact IAS UTI, sepsis, méningite, pneumonie Pertussis Diarrhée CDI Echantillon Urine, sang, LCR, sécrétions respiratoires Ecouvillon NP Selles Selles Prévention Bionettoyage, des instruments et lavage des mains Isolement Contrôle des aliments et de l’eau, lavage des mains Lavage des mains et bionettoyage, usage des antibiotiques August 23, 2013 8
  • 9. Bacteries Salmonella typhimurium Serratia marcescens Shigella species S. aureus Habitat Tractus GI Tractus GI , aire humide Tractus GI Peau, muqueuse Survie 10 mois à 4,2 ans 3 jours à 2 mois 2 jours à 5 mois 7 jours à 7 mois Diffusion lors des soins Fécal-oral Contact, voie veineuse Fécal-oral Contact, goutelettes, equipement, endogène IAS Diarrhée, sepsis Sepsis, plaie Diarrhée Variable Echantillon Selles, sang Sang, exudat Selles Variable Prévention Contrôle alimentaire, eau, lavage des mains Bionettoyage, lavage équipement, des mains Bionettoyage, lavage équipement, des mains Bionettoyage, lavage des mains, usage des antibiotiques August 23, 2013 9
  • 10. Bacteries S. agalactiae (Group B streptococcus) S. pyogenes (Group A streptococcus) Vibrio cholerae Yersinia enterocolitica Habitat Voie génital Muqueuse oropharyngée Tractus GI Tractus GI Survie 3 jours à 6,5 mois 1 – 7 jours Diffusion lors des soins Contact, materno-fœtale Goutelette, contact, endogène Fécal-oral Transfusion IAS Sepsis, meningite du nouveau né Pharyngite, plai chirugicale Cholera Bacteremie Echantillon Sang, LCR Exudat, écouvillon oropharyngé Selles Selles, sang Prévention Antibioprophyla xie lors de l’accouchement , lavage des mains Lavage des main, port de masque Contrôle de l’eau et aliment Production des poches de sang sécurisé August 23, 2013 10
  • 11. Fungi • Unicellulaire (levures) or pluricellulaire (moisissures) • Reproduction asexuée (conidies) et sexuée (spores*) • Ubiquitaire • Certains sont commensaux • Agent opportunistes • À l’origine d’infection sévère chez le patient immunodéprimé August 23, 2013 11 * Les spores ne sont pas aussi résistantes que celles des bactéries dans la nature
  • 12. Fungi Candida albicans Candida glabrata Candida parapsilosis Habitat Environement, muqueuse Environement, muqueuse Environement, muqueuse Survie 1-120 jours 120-150 jours 14 jours Diffusion lors des soins Contact, endogène Contact, endogène Contact, endogène IAS Variable Variable Variable Echantillon Variable Variable Variable Prévention Lavage des mains, équipements Lavage des mains, équipements Lavage des mains, équipements August 23, 2013 12
  • 13. Fungi Aspergillus species Mucor Rhizopus Habitat Environement, air Environement Environement Survie Résistance des conidies Résistance des conidies Résistance des conidies Diffusion lors des soins Inhalation, (contact) Inhalation Inhalation IAS Variable Variable Variable Echantillon Variable Variable Variable Prévention Maîtrise de l’air et de l’eau, isolement Maîtrise de l’air et de l’eau, isolement Maîtrise de l’air et de l’eau, isolement August 23, 2013 13
  • 14. Virus -1 • Agents infectieux microscopiques • Nécessite des cellules vivantes pour se reproduire • Bactérie, plante au animal • Composé d’AND ou d’ARN et d’un manteau protéique • Certains possèdent une enveloppe lipidique externe August 23, 2013 14
  • 15. Virus -2 • Après pénétration dans la cellule, les virus utilisent la machinerie cellulaire pour synthétiser ses acides nucléiques et ses protéines • La cellule est sévèrement endommagée ou détruite et l’infection se développe August 23, 2013 15
  • 16. Virus Adenovirus Coronavirus, including SARS Coxackie B virus Cytomegalovirus Habitat Eau, vecteur, environement Humains Humains Humains Survie 7 jours à 3 mois 3 heures SRAS virus: 72 à 96 heures >2 semaines 8 heures Diffusion lors des soins Contact Gouttelette Fécal-oral; contact Sang, greffe de tissus ou d’organe IAS conjonctivité, pneumopathie Pneumopathie Maladie généralisée du nouveau né Variable Echantillon Sérum Sérum Sérum Sérum Prévention Collyre individuel Isolement, lavage des mains, bionettoyage Lavage des mains, bionettoyage Sécurisation des transfusion et greffes August 23, 2013 16
  • 17. Virus Human immunodeficiency virus Influenza virus Norovirus Respiratory syncytial virus Habitat Humains Humains Humains Humains Survie >7 jours 1-2 jours 8 heures– 7 jours > 6 heures Diffusion lors des soins Sang, fluide corporel, tissu, greffe d’organes Gouttelette, contact Fécal-oral, contact Gouttelette, contact IAS SIDA Influenza Diarrhée Infection respiratoire aigue Echantillon Sérum Sérum Sérum Exudat Prévention Sécurisation des transfusions et des transplantations/ greffes Isolement, vaccination Lavage des mains, bionettoyage Isolement,lavage des mains et équipement August 23, 2013 17
  • 18. Virus Rotavirus Rubula virus (mumps) Rubivirus (rubella) Habitat Humain Humain Humain Survie 6-60 jours Diffusion lors des soins Fécal-oral, contact Gouttelettes Gouttelletes IAS Diarrhée Oreillons (parotite) Rubéole Echantillon Stool Serum sample Serum sample Prévention Lavage des mains, bionettoyage Isolement, vaccination Isolement , vaccination August 23, 2013 18
  • 19. Virus Morbillivirus Varicella-zoster virus Habitat Humain Humain Survie Diffusion lors des soins Goutelletes Gouttelettes , contact proche IAS Rougeole Varicelle Echantillon Sérum Sérum Prévention Isolement, vaccination Isolement, vaccination August 23, 2013 19
  • 20. Prions • Prions est une particule protéique • Ne contient pas d’acide nucléique • Liés à des maladies neurologiques sévères et multiples • Hautement résistant aux désinfectants et aux méthodes de stérilisation habituels • Transmission iatrogène possible • Lors de transplantation • Via les instruments contaminés par du tissu cérébral, liquide céphalorachidien, autres fluides contaminés August 23, 2013 20
  • 21. Parasites • Inclus les protozoaires • Microorganisme unicellulaire • Habitat : environnement, homme, animaux • Certains sont responsables d’infections • Parasites pluricellulaires • Vers pouvant causer des infections nommées infestation • Cause fréquente de maladie dans les climats chauds (paludisme, bilharziose) • Rarement impliqués dans IAS August 23, 2013 21
  • 22. Parasite Cryptosporidium (protozoa) Plasmodium species (protozoa) Trichomonas vaginalis (protozoa) Enterobius vermicularis (helminthe) Habitat Foie, érythrocyte Muqueuse vaginale Tractus intestinal Survie 2 heures Plusieurs heures dans les environnements humides Oeuf : au moins 1 an Diffusion lors des soins Moustique, sang contaminé Voie sexuelle, équipement gynécologique contaminé Fécal-oral IAS Malaria Trichomonose Oxyurose Echantillon Sang Sécrétion vaginale Scotch périanal Prévention Sécurisation des transfusions Désinfection des équipements Bionettoyage, lavage des mains August 23, 2013 22
  • 23. Rôle du laboratoire de microbiologie : Introduction • Le diagnostic de laboratoire a 2 fonctions : • Clinique • Diagnostic de l’infection pour la prise en charge du patient • Epidémiologique • Aide pour la mise en place de la prévention et le contrôle de l’infection en recherchant la source et le mode de transmission August 23, 2013 23
  • 24. Conditions minimales pour le laboratoire de microbiologie -1 1. Accessibilité du laboratoire • Si ce n’est pas possible, établir un contrat avec le laboratoire le plus proche 2. Disponibilité quotidienne, samedi et dimanche inclus • Idéalement 24h/24h 3. Capacité à examiner un échantillon de sang, LCR, selles, exsudat, sécrétions respiratoires et la possibilité de réaliser des sérologies virales (HIV, HBV, HCV) August 23, 2013 24
  • 25. 4. Capacité à identifier les bactéries et les champignons à l’espèce 5. Possibilité de réaliser les études de sensibilité aux antibiobiotiques (méthode de diffusion en disque) 6. Réaliser les phénotypages • sérotypage • Salmonella, Shigella, P. aeruginosa, N. meningitidis • biotypage • S. typhi August 23, 2013 25 Conditions minimales pour le laboratoire de microbiologie -2
  • 26. Rôle clinique : diagnostic de l’infection • Le diagnostic doit être rapide et précis • Méthodes classiques de bactériologie • Examen direct • Culture • Recherche d’antigène • Antibiogramme • Recherche d’antigène • Pas toujours utile dans les stades précoces de l’infection • Méthodes moléculaires • Rarement utilisées en routine pour le diagnostic d’IAS August 23, 2013 26
  • 27. Rôle dans la prévention et le contrôle des infections associées aux soins • Investigation • Surveillance • Alerter • Stratégie antibiotique August 23, 2013 27
  • 28. Investigation • Rechercher la source de l’infection • Déterminer si la souche est la même (génotype) August 23, 2013 28
  • 29. Tests complémentaires lors d’une investigation • Parfois, pour clarifier la situation (épidémie ou endémie), d’autres données sont requises • Tests microbiologiques • Produits sanguins • Contrôle environnemental des surfaces • Désinfectants, antiseptiques • Air • Eau • Mains du personnel • Fosses nasales du personnel August 23, 2013 29
  • 30. Surveillance des IAS • Le laboratoire doit fournir les comptes rendu dès que possible • Permettant de réaliser des courbes, des isolements ou des regroupements de patient • Etablir une incidence de base • Tout nouvel isolat pourra être comparé à cette incidence • L’informatisation du laboratoire permet un accès plus rapide aux données August 23, 2013 30
  • 31. Microorganismes concernés • Microorganismes • Methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) • Vancomycin-intermediate S.aureus (VISA) • Vancomycin-resistant enterococci (VRE) • MDR Pseudomonas aeruginosa • MDR Acinetobacter baumannii • MDR Mycobacterium tuberculosis • ESBL enterobacterie • Clostridium difficile August 23, 2013 31
  • 32. Stratégie antibiotique • Etat des lieux régulier des changements des phénotypes de résistance : • Newsletters • Données spécifiques du laboratoire • Limiter les comptes rendus aux : • Antibiotiques de première ligne • Antibiotiques de réserve August 23, 2013 32
  • 33. Bon usage des antibiotiques • Rôle clinique du microbiologiste • Participer au groupe de travail • Interprétation des données pour optimiser le traitement • Culture, susceptibilité • Surveillance active • Recherche des bactéries résistantes • Génotypage August 23, 2013 33
  • 34. Interprétation des données microbiologiques • Les données sont interprétées lors de réunion de service • Résultats des bactéries isolées, de leur profil de résistance et des typage • Idéalement, un spécialiste est requis • Dans le cas contraire, une formation est demandée August 23, 2013 34
  • 35. Rôle dans l’éducation • Réunion sur la prévention des infections • Comment interpréter les résultats • Le personnel hospitalier • Transport des échantillons, interprétation des comptes rendus, des tests de sensibilités • Etudiants (médical and infirmier) • Base de la microbiologie August 23, 2013 35
  • 36. Point clé -1 • Les microbes sont des microorganismes non visible à l’oeil nu • Largement répandu dans le nature et pouvant causer des infections • Le diagnostic de l’infection par le laboratoire a 2 fonctions importantes • Clinique • Epidémiologique • Le laboratoire devrait déterminer les principaux agents pathogènes et ceux impliqués dans les IAS August 23, 2013 36
  • 37. Point clé -2 • Le laboratoire devrait réaliser les typages des souches isolées • Le laboratoire devrait fournir régulièrement des rapports sur les principales souches isolées • Réaliser des courbes d’incidence pour les pathogènes spécifiques, • Le microbiologiste interprète les données et décide collectivement avec le service des mesures préventives à prendre August 23, 2013 37
  • 38. Références • Diekema DJ, et al. Infection Control Epidemiology and Microbiology Laboratory. In Manual of Clinical Microbiology, 8th Ed., Murray PR, Editor in Chief, ASM Press, Washington, DC, 2003:129-138 • Peterson LR, et al. Role of clinical microbiology laboratory in the management and control of infectious diseases and the delivery of health care. Clin Infect Dis 2001; 32:605-611 • Gill VJ, et al. The clinician and the Microbiology Laboratory. In: Mandell, Douglas and Bennett’s Principles and Practice of Infectious Diseases, 6th ed., Mandell GL, Bennett JE, Dolin R, Editors, Elsevier, Philadelphia, 2005:203-241 August 23, 2013 38
  • 39. Références • Stratton CW IV, Greene JN. Role of the Microbiology Laboratory in Hospital Epidemiology and Infection Control. In: Hospital Epidemiology and Infection Control, 3rd Ed., Mayhall CG, Editor, Lippincott, Williams & Wilkins, Philadelphia, 2004:1809-1825 • Poutanen SM, Tompkins LS. Molecular Methods in Nosocomial Epidemiology. In: Prevention and Control of Nosocomial Infections, 4th Ed., Wenzel RP, Editor, Lippincott, Williams & Wilkins, Philadelphia, 2003: 481- 499 August 23, 2013 39
  • 40. Quiz 1. Les microorganismes à l’origine d’infection ne peuvent pas vivre sur des surfaces inertes. V/F 2. Le matériel génétique des bactéries peut être transmis pas seulement verticalement mais aussi horizontalement. V/F 3. Pour le rôle du laboratoire dans la surveillance des IAS, quelle(s) est (sont) les condition(s) non nécessaire(s) du laboratoire : a. Fournir régulièrement des rapports sur les souches isolées b. Faire une base de données sur l’incidence des isolements c. Avoir un médecin microbiologiste d. Avoir un système qualité August 23, 2013 40
  • 41. Fédération Internationale de la Prévention des Infections (IFIC) • La mission de l’IFIC est de faciliter la coopération internationale afin d’améliorer la prévention et le contrôle des infections liées aux soins à l’échelle mondiale. C’est une organisation rassemblant des sociétés et associations de professionnels de santé spécialisées dans la prévention des infections et les domaines liés à travers le monde. • Le but de l’IFIC est de diminuer le risque d’infection au sein des établissements de soins à travers le développement d’un réseau d’organisations de lutte contre les infections, pour faciliter la communication, la recherche de consensus, l’éducation et le partage d’expertise. • Pour plus d’informations, aller sur http://theific.org/ December 1, 2013 41
  • 42. Fédération Internationale de la Prévention des Infections (IFIC) • Traduction réalisée pour le compte de l’IFIC par la Société Française d’hygiène hospitalière SF2H • Ont collaboré à ce projet : • Ludwig Serge Aho, Gabriel Birgand, Tristan Delory, Arnaud Florentin, Annick Lefebvre, Clément Legeay, Olivia Keita-Perse, Chantal Léger, Julie Lizon, Margaux Lepainteur, Véronique Merle, Pierre Parneix, Alexandre Rivier, Carole Roy, Anne Savey, Anne- Gaëlle Venier. December 1, 2013 42

Notes de l'éditeur

  1. La microbiologie est l'étude des organismes microscopiques; les sous-disciplines comprennent la virologie, mycologie, parasitologie et la bactériologie. Les micro-organismes sont très diverses; ils incluent toutes les bactéries, les protozoaires, les champignons et les virus. Ils peuvent vivre sur ou dans le corps humain. Les micro-organismes peuvent former une relation avec l'homme, par exemple, les bactéries qui vivent dans le système digestif humain contribuent à l'immunité viscérale, synthétiser les vitamines et fermente les glucides non digestibles complexes. Alors que certains microbes sont confinés à un hôte, la plupart des microbes peuvent vivre sur / dans un large éventail d'hôtes dans la nature. Les microbes végétaux sont inoffensifs pour les humains, mais certains microbes animales peuvent provoquer des maladies chez les humains aussi (zoonose). Les micro-organismes sont la cause de nombreuses maladies infectieuses.
  2. Les microbes qui causent toujours pathogène chez un humain sensible sont appelés pathogènes primaires alors que les microbes qui provoquent des maladies seulement chez les patients immunodéprimés sont appelés pathogènes opportunistes. Les microbes de la flore normale sont un exemple de pathogènes opportunistes. Après l'infection, les microbes peuvent rester dans le corps humain pendant un certain temps, ce que nous appelons "l'état de porteur». État de porteur = La présence continue d'un organisme (bactérie, virus ou parasite) dans le corps qui ne provoque pas de symptômes, mais est capable de se transmettre et d'infecter d'autres personnes. Colonisation = La présence de bactéries sur une surface du corps (comme sur la peau, la bouche, les intestins ou les voies respiratoires) sans causer de maladie chez la personne. Flore normale = La présence de bactéries normalement présentes dans des sites spécifiques du corps. Infection = invasion et la multiplication de micro-organismes dans les tissus du corps, en particulier qui causent un dommage cellulaire local en raison du métabolisme compétitivf, les toxines, la réplication intracellulaire, ou la réponse antigène-anticorps.
  3. Les sources de microbes pour des hôtes humains pourraient être un autre être humain colonisés / infectés ou animale ou l'environnement. L'environnement pourrait être une source de microbes environnementaux (par exemple, d'Aspergillus) ou, plus souvent, de microbes qui contaminent l'environnement à partir d'un hôte humain ou animal (par exemple, les salmonelles dans l'eau ou Staphylococcus aureus résistant à la méthicilline sur les surfaces de l'hôpital). Dans les soins de santé, la transmission par contact direct ou indirect est le type le plus fréquent. Le portail d'entrée pourrait être l'appareil respiratoire, gastro-intestinal ou des voies génito-urinaire ou la peau endommagée (comme en chirurgie).
  4. Les bactéries sont des organismes unicellulaires avec l'ADN haploïde (de sorte que toute variation génétique peut être facilement exprimé phénotypiquement), et plusieurs petites molécules d'ADN appelés plasmides indépendants. Certaines parties de l'ADN chromosomique, ainsi que des plasmides, peuvent être transmis horizontalement entre très différentes bactéries. Particulièrement important est la transmission de gènes de résistance et de virulence entre les bactéries.
  5. Tableau décrit les caractéristiques des principales bactéries impliquées dans les infections associées aux soins, La survie des microorganismes est favorisée par l’humidité (exception Staphylococcus aureus), par la présence de matériel organique (sang, selle, exudat), par les température basse et si les bactérie sont présentes en grande quantité. Lorsqu’il y a un contact, il se fait principalement via les mains du personnel soignant. LCR = liquide céphalo-rachidien CDI = infection à Clostridium difficile GI = gastrointestinal US = unité de soins NP = Nasopharyngée UTI = infection du tractus urinaire Reference: IFIC Basic Concepts of Infection Control - http://www.theific.org/basic_concepts/index.htm. Il serait conseillé de télécharger tous les quatre tableaux (de 7.1 à 7.4) et donner aux participants du cours.
  6. Reference: IFIC Basic Concepts of Infection Control - http://www.theific.org/basic_concepts/index.htm. Il serait conseillé de télécharger tous les quatre tableaux (de 7.1 à 7.4) et donner aux participants du cours.
  7. Les tableaux montrent les caractéristiques de la plupart des bactéries importantes qui peuvent causer des infections nosocomiales (IN). La survie est meilleure si les conditions sont humide pour la plupart des organismes (l’exception étant Staphylococcus aureus), si le micro-organisme est dans un produit biologique (sang, les selles, l'exsudat de la plaie), si la température est plus basse, et si les bactéries sont en plus grand nombre. Chaque fois que les contacts indirects sont impliqués, il l’est le plus souvent via les mains des professionnels de la santé. CSF = céphalorachidien GI fluide = HC gastro = soins de santé IV = intraveineuse Référence: Concepts de base IFIC du contrôle des infections - http://www.theific.org/basic_concepts/index.htm. Il serait conseillé de télécharger tous les quatre tableaux (de 7.1 à 7.4) et donner aux participants du cours.
  8. La transmission n’est pas interhumaine la plupart du temps. Cependant, il a été montré qu’il existe une transmission interhumaine pour les Candida sp via les mains. Les infections à moisissures sont toujours d’origine exogène dont la source est environnementale.
  9. Reference: IFIC Basic Concepts of Infection Control - http://www.theific.org/basic_concepts/index.htm. Il serait conseillé de télécharger tous les quatre tableaux (de 7.1 à 7.4) et donner aux participants du cours.
  10. Reference: IFIC Basic Concepts of Infection Control - http://www.theific.org/basic_concepts/index.htm. Il serait conseillé de télécharger tous les quatre tableaux (de 7.1 à 7.4) et donner aux participants du cours.
  11. Les virus sont des agents infectieux de petite taille qui se répliquent uniquement dans les cellules vivantes des hôtes. Les particules virales sont constituées de 2 ou 3 parties : i) le matériel génétique est constitué d’AND et d’ARN ii) un manteau protéique qui protège le matériel génétique iii) et dans certain cas, une enveloppe lipidique autour du manteau protéique. Les virus sont sous forme de simple hélice à des structures plus complexes. En moyenne, les virus sont environ 1000 fois plus petit que les bactéries. Viruses as causative agents of HAIs are mostly encountered in paediatric wards. Depending on vaccination programmes in particular countries, it could be different viruses. Blood transmitted viruses (HIV, HBV, HCV) are very important in healthcare.
  12. Reference: IFIC Basic Concepts of Infection Control - http://www.theific.org/basic_concepts/index.htm. Il serait conseillé de télécharger tous les quatre tableaux (de 7.1 à 7.4) et donner aux participants du cours.
  13. Reference: IFIC Basic Concepts of Infection Control - http://www.theific.org/basic_concepts/index.htm. Il serait conseillé de télécharger tous les quatre tableaux (de 7.1 à 7.4) et donner aux participants du cours.
  14. Reference: IFIC Basic Concepts of Infection Control - http://www.theific.org/basic_concepts/index.htm. Il serait conseillé de télécharger tous les quatre tableaux (de 7.1 à 7.4) et donner aux participants du cours.
  15. Reference: IFIC Basic Concepts of Infection Control - http://www.theific.org/basic_concepts/index.htm. Il serait conseillé de télécharger tous les quatre tableaux (de 7.1 à 7.4) et donner aux participants du cours.
  16. La plus importante maladie est la maladie de Creutzfeldt-Jakob (encéphalopathie familiale spongiforme hériditaire) et un variant de la maladie de Creutzfeldt-Jakob (encéphalopathie spongiforme bovine transmise du bétail au Homme) et d’autres maladies.
  17. Les protozoa sont des microorganismes unicellulaires, eucaryotes et souvent mobiles. Certains arthropodes sont à l’origine d’infection et d’IAS : Sarcoptes scabies responsible de la gale. Les poux peuvent disséminer également parmi les patients. Les Hommes peuvent être infestés par des vers qui utilisent tous les nutriments nécessaires de leur hôte (parasitisme). La plupart des vers sont intestinaux pendant au moins une partie de leur cycle biologique. Dans plusieurs cas, l’infestation se réalise sur le long terme où la symptomatologie est absente ou discrète au début du cycle de vie.
  18. Reference: IFIC Basic Concepts of Infection Control - http://www.theific.org/basic_concepts/index.htm. Il serait conseillé de télécharger tous les quatre tableaux (de 7.1 à 7.4) et donner aux participants du cours.
  19. Le rôle clinique et épidémiologique du laboratoire de microbiologie est trés important afin de connaître la source, le mode de transmission et les mesures préventives à prendre.
  20. Tous les laboratoire de microbiologie doivent posséder un système d’assurance qualité et des microbiologistes qualifiés.
  21. Il est trés utile que le laboratoire puissent également réaliser le génotypage des souches ou qu’il est la possibilité de le faire dans un autre centre. Common bacteria & fungi = S.aureus, E.coli, Salmonella, Shigella, P.aeruginosa, K.pneumoniae, Group A streptococci, Group B streptococci, enterococci, S.pneumoniae, C.jejuni/coli, other enterobacteria, H.influenzae, N. meningitidis and N.gonorrhoeae, S. maltophilia, C.albicans, aspergilli
  22. Dans les IAS, l’étiologie doit être connue le plus tôt possible afin de cibler la prise en charge du patient – dans ce cas, le microorganisme en cause peut être rapidement éradiquer et le patient ne plus être une source de contamination sauf en cas d’échec thérapeutique. La sérologie n’est utile que pour les virose où des IgM peuvent être détectés. For ensuring good microbiological diagnosis, right specimen should be sent to the laboratory. Laboratory staff could advice ward staff about specimen collection and transport.
  23. Le laboratoire à un rôle important dans la prévention et le contrôle de l’infection. Il a un rôle important dans l’interprétation des données ainsi que dans léducation du personnel dans la prévention et le contrôle des infections. Cela signifie que le microbiologiqte devrait participer au groupe de travail sur la prévention et le contrôle des infections au niveau local (hôpital) et national ou au moins communiquer quotidiennement avec le groupe de travail.
  24. Une espèce microbienne peut se subdiviser en sous espèces et variants,. De plus, chez un même individu, la même bactérie peut différer phénotypiquement et génotypiquement (jusqu’à 30 % du génome). Ceci explique l’importance du laboratoire dans l’identification phénotypique et génotypique des souches.
  25. Si l’agent pathogène est connu, le laboratoire peut utiliser des milieux de culture sélectifs pour la recherche de l’agent dans l’environnement.
  26. Les comptes rendus du laboratoire permet de déterminer rapidement la source plus qu’avec les données cliniques seules. De plus, les rapports peuvent indiquer s’il s’agit d’une bactérie émergentee et être utile dans la mise en place des mesures préventives. Le laboratoire peut génotuper les souches et dire s’il s’agit de la même souche chez différents patients. Les données sont plus facilement interprétables à partir de souches issues du sang, des urines que du tractus respiratoire.
  27. Les microorganismes qui doivent faire l’objet d’une alerte doit être réalisé conjointement entre le laboratoire et l’hygiène hospitalière. L’isolement d’une souche inhabituelle (virulence ou résistance) permet à l’hygiène hospitalière de prende les mesures rapidement et de stopper la dissémination.
  28. Le laboratoire de microbiologie jour un rôle crucial dans la prise en charge du patient en fournissant l’identification et la sensibilité aux antibiotiques mais aussi dans la rédaction des protocoles hospitaliers. Le laboratoire devrait pouvoir réaliser périodiquement des rapports sur le niveau de résistance selon les services cliniques. Restricted antibiotic reporting in individual patient reports is important for saving of reserve antibiotics.
  29. Le laboratoire de microbiologie fournit également les données de surveillance des profils de résistance en faisant un retour régulier aux prescripteurs. Le screening des patients porteurs de bactéries résistantes se réalise selon l’écologie de l’hôpital et peut être trés utile pour la mise en place d’un traitement empirique dans le cas d’une infection.
  30. Pour interpréter les données microbiologiques, il faut prendre en compte la nature du microorganisme isolé (primaire ou opportuniste), l’espèce, l’état clinique du patient et le statut immunitaire. Pour interpréter ces données pour mettre en place des mesures épidémiologuqes, uil faudrait prendre en compte également les propriétés et l’habitat du microorganisme ainsi que sa capacité de diffusion à d’autres patients.
  31. Le personnel du laboratoire de microbiologie a un rôle important dans la formation du personnel de soins en microbiologie. Cette éducation est un travail de tous les jours, la plupart du temps fait individuellement avec les professionnels de santé qui entrent en contact avec le laboratoire. Peut également être effectuée sous forme de séminaires organisés périodiquement sur des sujets spécifiques sur le niveau de l'organisation (par exemple échantillon de collecte).
  32. Faux Vrai C