4. AC1
++++
Ravary et al., 2003
Existe t_il de nombreuses façons possibles de production AMPc en
réponse à un signal cellulaire tels que les fluctuations de Ca ++ ?
AC
8
Ca2
+
5. Cette présente étude a comme objectif principal la
détermination du rôle potentiel d'autres isoformes
AC.
Nous avons donc localisé les gènes AC dans les
centres visuels
5Eloualidi , H ; Lguensat ,A et Mnaouer N et Achbani ,A
6. Les deux techniques utilisées dans l’étude :
l’hybridation in situ
Traçage antérograde de la rétine
Eloualidi , H ; Lguensat ,A et Mnaouer N et
Achbani ,A 6
7. l’hybridation in situ :
7Eloualidi , H ; Lguensat ,A et Mnaouer N et Achbani ,A
8. Traçage antérograde de la rétine :
► Effectué sur 5 souries de chaque génotypes
(AC1– ⁄ –, AC1 brl ⁄ brl, AC5– ⁄ – , AC8– ⁄ – )
Et de différents âges : E15, P4, P10, et adults
Sélectionner les sections au niveau du CGLd
Réaliser les images
Alexa 488
conjuguée à la
sous unité b de la
toxine de cholera
Alexa 594 CTB
8
Eloualidi , H ; Lguensat ,A et Mnaouer N et Achbani ,A
9. 1. Résultats ( développement de la rétine)
Localisation des gènes de AC 1,2 et 3 au niveau de la rétine au cours de
développement 9
10. Localisation des gènes de AC 5,8 et 9 au niveau de la rétine au cours de
développement
10
Eloualidi , H ; Lguensat ,A et Mnaouer N et Achbani ,A
11. Localisation des gènes AC 1,2 et 8 au niveau du corps genouillé latéral au
cours de développement
12. Localisation des gènes AC 1,2 et 8 au niveau du colliculus supérieure au
cours de développement
13. Quantification de l'expression des gènes AC dans les CGR, LGN, et CS au cours du
développement.
CGR couche
(pixels/unité de surface)
CS
(pixels/unité de surface)
•AC1 :expression forte au dLGN pendant ls 2 premières semaines après la naissance ( B et C) ,
plus faible chez les adultes ( D )- SC expression +++sauf pour âge adulte.
•AC8 expression dans le dLGN ++++ à E15, ↑↑ à P4 , P10, adulte. SC expression
+++significative à tous les ages
•Expression non signifiante de AC2
13
(pixels/unité
desurface)
(pixels/unité
desurface)
14. 14
Eloualidi , H ; Lguensat ,A et Mnaouer N et Achbani ,A
Figure: Conséquences de l’invalidation AC gène sur la ségrégation des projections de la
rétine IPSI et controlatérale dans le corps genouillé latéral
15. Figure:surface occupée par les projections ipsilatèrales et controlatérales dans dLGN
•Souris WT , ↓↓% de
chevauchement des fibres de la
rétine de chaque œil dans la
dLGN (0.77%)
•AC1 brl/ brl swiss , AC1– ⁄ –, et
AC1– ⁄ – ⁄ AC8 – ⁄ – ↑↑ %.
15
Eloualidi , H ; Lguensat ,A et Mnaouer N et Achbani ,A
Surfaceoccupéeparlesprojectionsipsi
etcontrolaterales(%)
16. 2. Avantages et limites
Avantages:
Détermination la localisation de 6 isoformes membranaires de
Acs (1,2,3,5,8 et 9).
Confirmation du rôle de AC1 dans l’établissement des
territoires rétiniens dans les centres visuels(RGCs et SC).
Limites:
manque de model génétique pour l’AC2 a empêché de tester
son rôle sélective.
Les sondes utilisées pendant l’expérimentation pourrait être
une cause de ne pas détecter les AC 4,6 et 7.
16Eloualidi , H ; Lguensat ,A et Mnaouer N et Achbani ,A
17. Les isoformes membranaires de AC sont tout impliqués
dans le développement du système visuel rétinien par la
production de l’AMPc.
AMPc est important dans le phénomène de guidage
axonal rétinien :
seulement AC1et AC5 sont exprimés précocement pour
effectuer cette tâche.
l’altération de la fonction d’AC1 et AC5 ne perturbe pas la
croissance et le développement des trajets de la rétine.
17
18. Deux hypothèses sont proposées:
la perte d’un de ces isoformes est compensée
par l’autre.
l’isoforme soluble AC10
L’AC1 est impliqué dans la ségrégation des
projections rétiniennes dans les centres visuels
AC2 peut être un acteur dans ce phénomène.
C’est pertinent d’ examiner tout les isoformes
de Acs (membranaires et solubles)
Eloualidi , H ; Lguensat ,A et Mnaouer N et Achbani ,A 18
E0 is the day following mating night and P0 is the day of
birth.
The area occupied
by the ipsilateral (red filter) or the contralateral retinal axons (green
filter)
