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La biomasse microbienne représente
plus de la moitié de la biomasse de la planète
Le rôle de l'infiniment petit
dans la nature
est infiniment grand
Louis Pasteur
 Fixation d ’azote atmosphérique
 Nitrification
 Dénitrification
Cycle de l’azote
Oxydation de l’ammoniac
en anaérobiose
Bactéries capables de convertir l’ammoniaque en azote
moléculaire en absence d'oxygène (Strous et al., Nature 1999)
NH4
+ + NO2
- N2 + 2H2O
Processus anammox
 Fixation d ’azote atmosphérique
 Nitrification
 Dénitrification
 Anammox
Cycle de l’azote
Aquifex aeolicus
Thermotoga
maritima
Deinococcus-Thermus
Cyanobacteria
Actinobacteria
Fusobacterium
nucleatum
Mollicutes
Clostridia,
Thermoanaerobacteriales
Bacilli
Chlorobium tepidum
Bacteroidetes
Leptospira interrogans
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Kuenenia stuttgartiensis
Rhodopirellula baltica
Gemmata
obscuriglobus
Chlamydiae
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0.10
Firmicutes
Spirochaetes
Proteobacteria
100,100
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Planctomycetes
NO2
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+
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anammoxosome cytoplasm
Anammox reaction :
NH4
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Anammox bacteria
Ladderanes
Functional redundancy in catabolism and respiration
1 10 20 30 40 50 60
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Valérie Barbe
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David Vallenet
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Genoscope et UMR8030 Génomique Métabolique
Michael Jetten, Marc Strous et al. Dept Microbiologie Nimègue
Michael Wagner et al. Dept Ecologie Microbienne Vienne
Hans Werner Mewes et al. Dept Bioinformatique Munich
La flore procaryote de tous les milieux naturels analysés
est constituée à plus de 99% d’espèces non cultivées
 compréhension des processus globaux auxquels les bactéries
prennent une part essentielle et qu ’il faut mieux connaître alors
que des changements globaux commencent à se produire
 nouveaux éclairages sur l ’évolution et l ’origine de la vie
 applications
Pourquoi explorer le monde procaryote ?
diversité biochimique des procaryotes reste en partie
ignorée
nouveaux constituants cellulaires
métabolites secondaires
pathogènes
production primaire de biomasse et de composés
organiques reste largement méconnue
Pourquoi explorer le monde procaryote ?
Le comportement des communautés d'espèces procaryotes
sera aussi plus facile à modéliser
Les systèmes procaryotes seront plus faciles à modéliser
Pourquoi explorer le monde procaryote ?
La nature transforme en permanence la biomasse y
compris les déchets de ces transformations, sans coût
énergétique (énergie solaire)
Depuis quelques décennies l'homme a commencé à
imiter la nature en développant des procédés de chimie
de synthèse faisant appel aux bioconversions
Nous ne sommes qu'au début de cette mutation
inéluctable
L'industrie chimique commence à être touchée par
deux problèmes majeurs et interdépendants :
Le renchérissement du coût des hydrocarbures
L'ajustement à une logique de "développement
durable"
Les solutions à ces deux problèmes doivent viser à :
diminuer l'utilisation du carbone fossile en tant
que source d"énergie et matière première
diminuer les coûts de production
diminuer la production de déchets et de sous-
produits polluants
Ces trois objectifs peuvent être atteints par une
démarche unique qui substitue aux procédés
chimiques actuels des procédés biotechnologiques qui
peuvent être :
économes en énergie
basés sur des matières premières recyclables
(carbone de la biomasse)
non polluants ou recyclant les déchets
L’inventaire des bioconversions et des enzymes
capables de les catalyser est loin d’être clos
Le monde microbien constitue la principale
source d’activités biocatalytiques
Or ce monde reste à explorer…
Bioconversions
Inventorier les gènes commandant les réactions
chimiques du vivant et les cycles biogéochimiques
des éléments (C,N,P,S)
• séquençage systématique des ADN de flores
bactériennes de milieux naturels
• recherche de gènes d'intérêt potentiel
• test des activités biocatalytiques
At this stage, biotechnology's greatest uses are in
medicine and agriculture, but it's greatest long term
impact may well be industrial
Carl Feldbaum Biotechnology Industry Organisation (BIO) 2004
cartographie
sous-clonage
etc.
séquençage
assemblage
finition
annotation
Inventaires de gènes codant pour des protéines
et de leurs transcrits
Identification de transcrits sans fonction(s) connue(s)
Variabilité et plasticité des génomes
Evolution et phylogénèse
Le séquençage massif de l’ADN est il encore utile ?
Le séquençage reste un préalable incontournable pour
aborder
- l’étude d’un organisme d’intérêt fondamental ou
pratique
- des questions d’ordre biomédical
- explorer la biodiversité
Poursuivre l'analyse et l'annotation de génomes procaryotes et
eucaryotes
Contribuer à l'inventaire des fonctions métaboliques des
bactéries
Aller au-delà du séquençage en testant expérimentalement les
activités d'enzymes du métabolisme bactérien
Tenter de modéliser des processus et des systèmes biologiques
cartographie
sous-clonage
séquençage
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  • 1.
  • 2. La biomasse microbienne représente plus de la moitié de la biomasse de la planète Le rôle de l'infiniment petit dans la nature est infiniment grand Louis Pasteur
  • 3.  Fixation d ’azote atmosphérique  Nitrification  Dénitrification Cycle de l’azote
  • 4.
  • 5.
  • 6. Oxydation de l’ammoniac en anaérobiose Bactéries capables de convertir l’ammoniaque en azote moléculaire en absence d'oxygène (Strous et al., Nature 1999) NH4 + + NO2 - N2 + 2H2O Processus anammox
  • 7.  Fixation d ’azote atmosphérique  Nitrification  Dénitrification  Anammox Cycle de l’azote
  • 8. Aquifex aeolicus Thermotoga maritima Deinococcus-Thermus Cyanobacteria Actinobacteria Fusobacterium nucleatum Mollicutes Clostridia, Thermoanaerobacteriales Bacilli Chlorobium tepidum Bacteroidetes Leptospira interrogans Borrelia burgdorferi Treponema pallidum Treponema denticola Kuenenia stuttgartiensis Rhodopirellula baltica Gemmata obscuriglobus Chlamydiae Epsilon- Delta- Alpha- Beta/Gamma- 0.10 Firmicutes Spirochaetes Proteobacteria 100,100 100, 98 100, 100 98,58 Planctomycetes
  • 9. NO2 - NH2OH NH4 + N2H4 4e- N2 anammoxosome cytoplasm Anammox reaction : NH4 + + NO2 - N2 + 2 H2O Anammox bacteria
  • 10.
  • 12.
  • 13.
  • 14.
  • 15. Functional redundancy in catabolism and respiration
  • 16.
  • 17.
  • 18. 1 10 20 30 40 50 60 SET3_tetraodon SGRGVFTKAKISKGQFVAEYRGDIINDSEYQCRRRVYHPSCAAFMF-------IDASRED SET5_tetraodon SGRGVFTKAKISKGQFVAEYRGDIINDSEYQCRRRVYHPSCAAFMF-------IDASRED SET1_tetraodon SGRGVFTKAKISKGQFVAEYRGDIINDSEYQCRRRVYHPSCAAFMF-------IDASRED SET4_tetraodon SGRGVFTKAKISKGQFVAEYRGDVINDSEYQCRRRVYHPSCAAFMF-------IDASRED SET2_tetraodon SGRGVFTKAKISKGQFVAEYRGDIINDSEYQCRRRVYHPSCAAFMFAL-----IDASRED SET6_tetraodon SGRGVFTKAKISKGQFVAEYRGDIINDSEYQCRRRVYHPSCAAFMF-------VDASRED SET_EZH2_tetraodon AGWGIFIKEPVQKNDFISEYCGEIISQDEADRRGKVYDKYMCSFLFNLNNDFVVDATRKG SET_EZH2_human AGWGIFIKDPVQKNEFISEYCGEIISQDEADRRGKVYDKYMCSFLFNLNNDFVVDATRKG SET_EZH1_mouse AGWGTFIKESVQKNEFISEYCGELISQDEADRRGKVYDKYMSSFLFNLNNDFVVDATRKG SET_EZ_drosophila AGWGIFLKEGAQKNEFISEYCGEIISQDEADRRGKVYDKYMCSFLFNLNNDFVVDATRKG 70 80 90 100 110 120 SET3_tetraodon E--SFG-RLVNPNCKMK*IDVNGKPRLCLFALDDIQEGAEITYDYKG--ARFIKWVGV-- SET5_tetraodon E--SFG-RLVNPNCKMK*IDVNGKPRLCLFALDDIQEGAEITSDYKG--ARFIKWVGV-- SET1_tetraodon E--SFG-RLVNPNCKMK*IDVNGKPHLCLFALDDIQEGAEITYDYKG--AHFIKWVGV-- SET4_tetraodon E--SFG-RLVNPNCKMK*IDVNGKPHLCLFALDDIQEGAEITYDYKG--AHFIKWVGV-- SET2_tetraodon E--SFG-RLVNPNCKMK*IDVNGKPRLCLFALDDIQEGAEITYDYKG--AHFIKWVGV-- SET6_tetraodon E--SFG-RLVNPNCKMK*TDVNGKPRLCLFALDDIQEGAEITYDYKG--AHFIKWVGV-- SET_EZH2_tetraodon NKIRFANHSVNPNCYAKVMMVNGDHRIGIFAKRAIQTGEELFFDYRYSQADARKYVGIER SET_EZH2_human NKIRFANHSVNPNCYAKVMMVNGDHRIGIFAKRAIQTGEELFFDYRYSQADALKYVGIER SET_EZH1_mouse NKIRFANHSVNPNCYAKVVMVNGDHRIGIFAKRAIQAGEELFFDYRYSQADALKYVGIER SET_EZ_drosophila NKIRFANHSINPNCYAKVMMVTGDHRIGIFAKRAIQPGEELFFDYRYGPTEQLKFVGIER 121 SET3_tetraodon ----- SET5_tetraodon ----- SET1_tetraodon ----- SET4_tetraodon ----- SET2_tetraodon ----- SET6_tetraodon ----- SET_EZH2_tetraodon EMEIA SET_EZH2_human EMEIP SET_EZH1_MOUSE ETDVF SET_EZ_drosophila EMEIV Alignements multiples de séquences
  • 19.
  • 20. EVK1-CT-2000-00050 Denis Lepaslier Eric Pelletier Sophie Layac Chantal Schenowitz Valérie Barbe Delphine Mavel Patrick Wincker David Vallenet Claudine Médigue Nuria Fonknechten Béatrice Ségurens Genoscope et UMR8030 Génomique Métabolique Michael Jetten, Marc Strous et al. Dept Microbiologie Nimègue Michael Wagner et al. Dept Ecologie Microbienne Vienne Hans Werner Mewes et al. Dept Bioinformatique Munich
  • 21.
  • 22. La flore procaryote de tous les milieux naturels analysés est constituée à plus de 99% d’espèces non cultivées
  • 23.  compréhension des processus globaux auxquels les bactéries prennent une part essentielle et qu ’il faut mieux connaître alors que des changements globaux commencent à se produire  nouveaux éclairages sur l ’évolution et l ’origine de la vie  applications Pourquoi explorer le monde procaryote ?
  • 24. diversité biochimique des procaryotes reste en partie ignorée nouveaux constituants cellulaires métabolites secondaires pathogènes production primaire de biomasse et de composés organiques reste largement méconnue Pourquoi explorer le monde procaryote ?
  • 25. Le comportement des communautés d'espèces procaryotes sera aussi plus facile à modéliser Les systèmes procaryotes seront plus faciles à modéliser Pourquoi explorer le monde procaryote ?
  • 26. La nature transforme en permanence la biomasse y compris les déchets de ces transformations, sans coût énergétique (énergie solaire)
  • 27. Depuis quelques décennies l'homme a commencé à imiter la nature en développant des procédés de chimie de synthèse faisant appel aux bioconversions Nous ne sommes qu'au début de cette mutation inéluctable
  • 28. L'industrie chimique commence à être touchée par deux problèmes majeurs et interdépendants : Le renchérissement du coût des hydrocarbures L'ajustement à une logique de "développement durable"
  • 29. Les solutions à ces deux problèmes doivent viser à : diminuer l'utilisation du carbone fossile en tant que source d"énergie et matière première diminuer les coûts de production diminuer la production de déchets et de sous- produits polluants
  • 30. Ces trois objectifs peuvent être atteints par une démarche unique qui substitue aux procédés chimiques actuels des procédés biotechnologiques qui peuvent être : économes en énergie basés sur des matières premières recyclables (carbone de la biomasse) non polluants ou recyclant les déchets
  • 31. L’inventaire des bioconversions et des enzymes capables de les catalyser est loin d’être clos
  • 32. Le monde microbien constitue la principale source d’activités biocatalytiques Or ce monde reste à explorer…
  • 33. Bioconversions Inventorier les gènes commandant les réactions chimiques du vivant et les cycles biogéochimiques des éléments (C,N,P,S) • séquençage systématique des ADN de flores bactériennes de milieux naturels • recherche de gènes d'intérêt potentiel • test des activités biocatalytiques
  • 34. At this stage, biotechnology's greatest uses are in medicine and agriculture, but it's greatest long term impact may well be industrial Carl Feldbaum Biotechnology Industry Organisation (BIO) 2004
  • 36. Inventaires de gènes codant pour des protéines et de leurs transcrits Identification de transcrits sans fonction(s) connue(s) Variabilité et plasticité des génomes Evolution et phylogénèse Le séquençage massif de l’ADN est il encore utile ?
  • 37. Le séquençage reste un préalable incontournable pour aborder - l’étude d’un organisme d’intérêt fondamental ou pratique - des questions d’ordre biomédical - explorer la biodiversité
  • 38. Poursuivre l'analyse et l'annotation de génomes procaryotes et eucaryotes Contribuer à l'inventaire des fonctions métaboliques des bactéries Aller au-delà du séquençage en testant expérimentalement les activités d'enzymes du métabolisme bactérien Tenter de modéliser des processus et des systèmes biologiques