this document is the same one but i translated it in turkish for my non english speaking fellow i used whole document translation so please excuse any errors in translation

1. ESCMID ULUSLARARASI OBSERVERSHIP
2019
MARMARA ÜNİVERSİTESİ HASTANESİ
PENDİK , İSTANBUL, TÜRKİYE
βlaktamazlar Enzimler
Yapısı, Sınıflandırılması, bulma
Dr Toufik DJERBOUA
Eczacı yardımcısı usta klinik mikrobiyolog
tıp Koleji Mouloud Maammeri
Belloua Hastanesi, nedir Mohammed UH
Klinik biyoloji laboratuvarı
Tizi-Ouzou-CEZAYİR

2. ÖZET1. Giriş
2. β-lactamin antibiyotikler : bir genel bakış
3. β - laktamaz:
3.1) Tanım
3.2) Tarihçe arasında çıkma
3.3) Adlandırma
4. Yapı ve biyokimyasal özellikleri
4.1) Enzim yapısı
4.2) Fonksiyonel caracteristics
4.3) β-lactamin / βlaktamaz etkileşim: Alt tabaka ve inhibisyon profilleri
5. Sınıflandırılması βlaktamazlar
6. Algılama ve keşfi βlaktamazlar
6.1) fenotipik yöntemleri
6.2) Genotipik yöntemleri

3. β-laktam antibiyotikler, doğal olarak ipliksi bakterilerin ve mantarların pek çoğu
türleri tarafından sentezlendiği, bu hayvan kullanılan yaygın en çok kullanılan insan
sağlığı antibiyotikler ve da
1. Giriş :
halk sağlığı yaşadığını kötü tehditlerden biri tanıtım ve β-laktam antibiyotikler, ortaya
çıkışı ve kommensal ve patojenik bakteriler arasında bu enzimlerin yayılmasının geniş
kullanımı bu enzimleri yapar yana nowdays.
çok envionnemental Bakteri β-laktamaz aktivitesi, özel olarak gram negatif basiller
hayatta kalma önemli bir rol oynayan, antibiyotik ailesine olan direnç mekanizmasını
barındırır.

4. 2. β-Laktam antibiyotikler : bir genel
bakış
 Kimyasal çeşitlilik ve insan
kullanımı açısından
antibiyotik büyük aile (toplam
antibiyotik% 60)
 kombinasyon halinde 80'den
fazla kimyasal bileşikler ve
daha

5. 2. β-Laktam antibiyotikler : bir genel
bakış
 genel kimyasal yapısı 2-
azetidinon (β-laktam) aktiviteden
sorumlu çekirdeğidir.
 β-laktam çekirdeği bitişik yapı bir
çok alt grup tanımlar, her bir
grubun farklı kimyasal göre alt
bölünür subsitutions

7. 2. antibiyotikler-laktam p: genel bir
bakış
 β-laktam antibiyotik moleküler hedef
bağlayıcı proteinler, Penisilin vardır.
 nedeniyle D, D-alanil-L-alanin bağlı ve
yüksek ölçüde reaktif β-laktam halkası
arasındaki yapısal analojiye, bunlar molekül
tarafından “intihar substratlar” gibi hareket
mimetism Bir sürekli aktif asil-β-laktam
enzimi ile sonuçlanır.
 PBP amino asit dizisine ve katalitik alanının
da β-laktamaz enzimlerinin birçok benzerlik
gösterir ve bunların ataları olduğuna
inanılmaktadır

8. 2. antibiyotikler-laktam p: genel bir
bakış
 Nedeniyle Transpeptidase aktivitesinin inhibe
edilmesi için, sonuçtaki Hücre duvarı eksikliği
bakteriler (CWDB / L-formları) ozmotik
değişikliklere çok hassastırlar ve hızlı bir
şekilde parçalanır
β-laktam antibiyotikler bakterisidal
olan
 Her bir β-laktam molekül PBP karşı bir afinite
modeli vardır ve her bir bakteri bu ailenin her
bir üyesi karşı bakteri davranışların sayıda
açıklayan PBP farklı ayarlar ifade

9. β - laktamaz

10. 2. β-laktamaz Tanımı
 β-laktamaz β-laktam
halkasının açılması ile
inaktive β-laktam
antibiyotikler edebilen
enzimlerdir
 Elde edilen penisilloik ve
cephalosporoic asitler
herhangi bir antibiyotik
aktiviteye sahiptir.
 Asil-β-laktam kompleksi
Asil PBP kompleksi daha
hızlı bir şekilde ayrıştığını
dışında herhangi bir
reaksiyon PBP ile aynıdır

11. 2. β-laktamaz Tanımı
 β-laktamaz geniş yayılır environnemental En yaygın ve Gram verimli ama bakteri,
negativebacteriaBazı türler bazen doğal kromozomal var indüklene p-laktamaz:
- Escherichia coli, Yersinia sppEnterobacter sppSerratia spp
- İndol + Proteus spp, Morganella spp , Providencia spp
- Pseudomonas spp
- Acinetobacter spp
- Stenotrophomonas spp
- Kluyvera spp
- Schwanella spp ...

12. 2. β-laktamaz Tanımı
 Ancak, Azam Bu enzimlerin
yüzdesi plazmid kodlanmış ve
geniş tıbbi açıdan önemli
bakteriler arasında yayılacak
şekilde bilinmektedir:
(Neisseria negatif koklar -gram
spp , Branhamella...)
-hemofili spp
-Staphylococcus aureus
-Enterobacterales ...
 Çoğu zaman, bir bakteri direnci
β-laktam antibiyotikler ve diğer
antibiyotik güçlendirir
seviyesini modüle etmek
suretiyleifadesi onun kendi β-laktamaz genler, ifade eden çok farklı β-laktamaz, ancak Ayrıca
ilişkilendirerek o için diğer özel (hedef Mutasyon, PBP modülasyonu) ya da geniş spektrum
direnç aksam (geçirmeme, detoksifikasyon...), yapma o zor yerini belirlemek özel
mecanism ile doğruluk

13. 2. β-laktamaz: çıkması Tarihi
 1940'larda: Penisilin Gram negatif bakteri enzimatik direnç Bulma (AmpC ), E. coli içerisinde
 1950'ler: Penisilinaz ortaya çıkışı 1950'lerde Staphylococci üretilmesi
β-laktam antibiyotikler bakterisidal olan
 1960: tanımlama ardından TEM-1 olarak adlandırılan, Escherichia coli içinde ilk geniş spektrumlu
transfer β-laktamaz, ortaya çıkması, Klebsiella pneumoniae SHV enzimler (SHV-1)
 1980'ler: Klebsiella pneumoniae ilk geniş spektrumlu β-laktamaz tanımlanması (CID-2)
 Geç 1980s: CTX-M salgını
 1990'lar: ortaya çıkması Classe bir karbapenemazlar
 2000'ler: devredilebilir ortaya çıkması AmpC OKSA tip enzimler ve Genişletilmiş spektrumu
sefalosporinaz ve yayılması gibi enzimler
 NDM-1: 2012'den beri metalli-beta laktamaz pandemik
 Gelecek için neler ...

14. 2. β-laktamaz antibiyotikler: çıkması Tarihi

15. 2. β-laktamaz: Adlandırma
 gerçek bir konsensüs n bu enzimlerin, adları ve kaynaklanabilir türetilen kısaltmaların
sınıflandırmayı:
 üreten organizma: PSE (Pseudomonas spesifik enzim)
 En hidrolize alt-tabaka: OKSA (Oxacillinase)
 Özellikle yapı, özelliği: SHV (sülfidril varyantı)
 keşif yeri: CTX-M (Cefotaximase Münih)
 suşu izole alındığı hasta: TEM (Temoneira), BİL (Bilal)
 Hatta bazıları iki ismi vardır: MEN enzimleri şimdi CTX-M değiştirildi
Bununla birlikte, aşırı çeşitliliği bu enzimler özeti sınıflandırma ile sonuçlanmıştır ve yapısal
benzerlik ve keşif kronolojik göre regrooming için artık biliyoruz (TEM CIDj CTX-M, OKSA
...)
Diğer ayrıntılar: β-laktamaz Nomenklatürü George A. Jacoby 10,1128 / AAC.50.4.1123-1129.2006

16. 2. β-laktamaz: BİYOKİMYA
karakterızasyonu β-laktamaz sonra onun tanımlama / saflaştırma şu klasik Protein/Enzim yazarak teknikleri dahil
olmak üzere :
1) Belirleme localisation: sınırlı kullanım
2) Belirleme yapısal özellikleri : moleküler kitle, izoelektrik puan, elektroforetik göç profili, amino asit içerik,
amino asit sıra3D yapı ...
3) Belirleme arasında kinetik özellikleri : substrat profil, İnhibisyon profil, Km kcatKi / Vmax ...
4) Sonra üzerinde belirleme arasında genetik özellikleri : gen sıra, genetik destek, gen yapı ...

17. 2. β-laktamaz: BİYOKİMYA
2.1) Yapısı: β-laktamaz 25
arasında değişen, düşük
molekül ağırlıklı proteinler
KDa'da 31 KDa'da 298 bir
ortalama amino asit içeriğine
sahip.
protein dizilerinin yapısal
karşılaştırması konsensüs
dizileri ve korunmuş artıkları,
aynı zamanda mutasyon sıcak
noktaları gösterilmektedir.
TEM AİLESİ: TEM-1 dizisi ve mutasyon noktaları

18. 2. β-laktamaz: BİYOKİMYA
2.2) Substrat profili: işaret bahaviour
Mevcut farklı türde karşı enzim β-laktam
antibiyotikler. Oolduğu tabloyla seyreden
MH tarafından kinetik parametreler (Km
kcat, Vmax, katalitik verim...)
karbamat : Karbenisilin
Meti : Metisiline
Cer : Cephaloridin
Cet : Cefalotin
Benzılpenıcılın 100% kıyasla β-laktamaz: Farklı türde
Vmaks

19. 2. β-laktamaz: BİYOKİMYA
2.3) inhibisyonu profili: işaret bahaviour
Mevcut farklı türde karşı enzim β-laktam
antibiyotikler huzurunda diffrent türleri
inhibitörler
pCMB : para-klorocivabenzoat.
Bazı β-laktamaz inhibisyonu profili

20. 2. β-laktamaz: BİYOKİMYA
2.4) Genetik desteği: çok β-laktamaz (kromozomal, uyarılabilir olabilir Enterobacter olan spp Serratia
spp...) ya da olmayan indüklene (Escherichia coli, Acinetobacter spp)
-The Edinilen β-laktamaz kodlanmış plazmid transpozonlara ve benzerleri gibi mobil / Hareketli hale
elemanlar takılabilen integronlar. Genellikle de doğuştan üretilmektediren Yüksek konsantrasyonlarda
ve diğer antibiyotik türleri ortak birçok dirençleri (aminoglikositler, florokinolonlar ...)

21. 2. β-laktamaz: Sınıflandırma
02 şebeke sınıflandırma sistemler
Hangi çoğu Kullanılmış :
2.1) Yapısal Sınıflandırılması : Ayrıca
bilinen gibi eşkinli at classifcation o
olduğu merkezli üzerinde amino asit
sıra ve doğası katalitik yer o
distinguiches 04 sınıfları β-
laktamaz (A, B, C, D)

24. 2. β-laktamaz: Sınıflandırma
02 şebeke sınıflandırma sistemler
Hangi çoğu Kullanılmış :
2.2) Fonksiyonel sınıflandırma :
Ayrıca bilinen gibi Çalı-Jackoby-
Medeiros classifcation o olduğu Daha
karmaşık ve merkezli üzerinde Alt
tabaka ilgi ve inhibisyon profilleri

26. 2. β-laktamaz: Sınıflandırma
2.3) dolayı karmaşa o dünyası
βlaktamaz olduğu yaşandığı bazı diğer
othors sevmek Giske et Al önerilen
yeni sınıflandırma yanaştığınızda için
GSBL'ler

27. 3. β-laktamaz: saptama yöntemleri
3.1) fenotipik yöntemleri : her ikisi de CLSI ve EUCAST noktası gerçek o βlaktamaz bulma
ve kimlik olduğu değil her zaman gerekli için klinik tepki ( merkezli MIC ile ilgili), bulma ara
sıra olduğu çoğu önemli ilişkin epidemioloji ve kamu sağlık hususlar
fenotipik meethodes Kullanılmış farklılık göstermek bağlı üzerinde düşünülen mikrop ve
şüpheli enzymAma en azından Fikir olduğu aynı ve olduğu merkezli üzerinde vahiy arasında
Alt tabaka yıkım ve veya enzim inhibisyonu ile çeşitli yöntemleri o kutu olmak Kullanılmış
rutininde
bulma arasında interation enzim-Alt tabaka +/- önleyici kutu olmak bakteriyolojik,
coloromitric...
belirli desenleri Alt tabaka yıkımı ve / ya da önlenmesi izin vermek a ve yönlendirme özel
enzimler en grubu (zor / karmaşık)
kitle spektrometresi ve yanal akış tahlilleri Hangi olmak gittikçe sık sık Kullanılmış
tanımlanmasında ve yazarak arasında bunlar enzimler.

28. 3. β-laktamaz: saptama yöntemleri
3.1) fenotipik yöntemleri : fenotipik testler genellikle Dahil etmek tarama testleri ( indirgeme
içinde çap arasında bazı antibiyotikler, Görüntü sinerji veya düşmanlık arasında belli diskler…)
ve doğrulayıcı / yazarak Çift testleri ( disk Ölçek , karbapenem inaktivasyonu köylünün
simgesi Ölçek, Yonca Yaprak Ölçek , Rosco Ölçek , et suyu mikrodilüsyonE-testi ...)

29. nitrosefin Ölçek
karbamat NP
testi
OXA-23 bulma
tarafından
immunakromatogrfi

30. • Penisilinaz- bulma tarafından yoncayaprağı Ölçek

31. İmipenem-ceftazidim
antagonizma
(indüklene AmpC

32. GSBL onay
Sinerji TESTİ çift disk TESTİ

33. SİNERJİ TESTİ

34. SİNERJİ testi arasında Klavulanik
asit ve oxyiminocephalosporines
(CTX-M GSBL)

35. GSBL + AmpC hiper-

36. Bla VEB-1 inhibe tarafından klavulanik asit, sefoksitin ve
imipenem

37. Masuda biyo-deney (AmpC)
Değiştirilmiş köylünün simgesi-Ö

38. Metallo-enzim bulma
mipenem / mipenem + EDTA

39. karbapenem direnç yazarak
tarafından Rosco Ölçek
Classe A karbapenemazın : sinerji clav + karbapenemler
Classe B: sinerji EDTA +/- Dipikolinik asit ve karbapenem
D Sınıfı: köylünün simgesi +, Yok sinerji
Classe C + porine kayıp : sinerji Kloksasilin + karbapenem
köylünün simgesi Ölçek -

40. Değiştirilmiş
karbapenem
inaktivasyonu
yöntem (mCIM)
Ve EDTA CIM

41. OKSA-48 bulma Temosilin disk
ile

42. 3.1) Genotipik yöntemleri : fenotipik kimlik olduğu alma daha kompleksleri, ara sıra sadece
yol için belirlemek bir enzim olduğu için belirlemek gen
çok genotipik yöntemleri kutu olmak Kullanılmış :
-Hedeflenen basit veya çoklu PCR
-PCR - dizileme
a-DNA probları
-Bütün genom dizileme...

44. SON SÖZLER
 βlaktamaz aracılı direnç olduğu yaygın arasında klinik olarak uygun
izolatlar özel olarak Gram negatif bakteriler içinde topluluk ve hastane
ayarlar
 Bugünün sınıflandırılması βlaktamaz olduğu çok complexe ve
ihtiyaçlar için olmak basitleştirilmiş özel olarak için klinik kullanmak
ve Araştırma puropse
 Süre o olduğu değil her zaman gereklidir için klinik raporlar, Araştırma
için bunlar enzimler olduğu kamu için importante sağlık hususlar
 dolayı artan karmaşa arasında antimikrobiyal direnç mekanizmalar ,
klasik fenotipik yöntemleri irade muhtemelen olmak az Kullanılmış
kütle profil için spektrometresi ve diğer moleküler tahlilleri