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Les hemocultures en pratique
- 1. UNIVERSITE MOULOU-MAAMERI DE TIZI-OUZOU FACULTE DE MEDECINE DEPARTEMENT DE MEDECINE COURS DE 4èME ANNEE MEDECINE MODULE D'INFECTIOLOGIE Dr T.DJERBOUA Pharmacien maitre assistant en microbiologie Chef de service du labratoire central de biologie clinique UNITE BELLOUA-CHU TIZI-OUZOU. Année universitaire : 2017-2018 Email : drtaoufik123@hotmail.fr LES HEMOCULTURES
- 2. PLAN I. INTRODUCTION II. GENERALITES DU LE SEPSIS III.DEFINITION ET MECANISMES DES BACTERIEMIES IV.INDICATIONS DES HEMOCULTURES V. PHASE PRE-ANALYTIQUE VI.PHASE ANALYTIQUE VII.INTERPRETATION ET RENDU DES RESULTATS VIII.CONCLUSION
- 3. OBJECTIFS PEDAGOGIQUES OBJECTIFS : A l'issus du cours , le futur médecin devra savoir : I. Poser l'indication d'une hémoculture II. Connaitre les règles de bonne pratiques de prélèvement et d'acheminement au laboratoire III. Avoir une idée sur les étapes de l'analyse bactériologique d'une hémoculture IV. Connaitre les bases bactériologiques d'incrimination d'un germe isolé d'une hémoculture dans le syndrome septicémique
- 4. INTRODUCTION enrichir le sang! =)hémoculture A l'état normal, Le sang est un milieu stérile Dans certains situations bénignes et transitoires continues et accompagnés d'un syndrome infectieux décharges septiques Quantité de bactérie faible
- 5. GENERALITES SUR LE SYNDROME SEPTIQUE SRIS SRISREPONSE INFLAMMATOIRE SYSTEMIQUE AGRESSIONS GRAVES DE L’ORGANISME TUMEURS TRAUMA METABOLISME ET TOXIQUES 2
- 9. SEPSIS ET TYPE D’AGENT INECTIEUX AGENT INFECTIEUX DANS LE SANG BACTERIEME VIREMIE PARASITEMIE FONGEMIE PRIONEMIE
- 10. DEFINITION DES ETATS BACTERIEMIQUES LA BACTERIEMIE TRANSITOIRE Limitée dans le temps par irritation d’une muqueuse colonisée , infection bactérienne aigue Ou geste invasif Généralement sans conséquence sur l’état de santé Sauf chez l’immunodéprimé
- 11. DEFINITION DES ETATS BACTERIEMIQUES LA BACTERIEMIE INTERMITTENTE Décharges intermittentes ou le meme germe est généralement retrouvé Associées le plus souvent a un foyer infectieux focalisé cloisonné ou non LA BACTERIEMIE CONTINUE Décharges continue , les germes sont Trouvés en permanence dans le sang, Ex : endocardite , brucellose, FT…
- 13. TOXICOMANIE TRANSLOCATION DIGESTIVE ET NEUTROPENIE BACTERIEMIES NOSOCOMIALES BACTERIEMIE A BARTONELLA qintana LA SEPTICEMIE NEONATALE
- 14. ELIOLOGIE DES SEPTICEMIES • Grande variété des micro-organismes impliques =) difficulté d’incriminer tel ou tel germe REPARTITION EN DEUX CATEGORIES SELON LE DEGRE D’IMPLICATION PATHOGENES SPECIFIQUES LEURS ISOLEMENT POSE LE DIAGNOSTIC =) ASSOCI2S A UNE PATHOLOGGIE CLINIQUEMENT DEFINIE PATHOGENES OPPORTUNISTES LEURS IMPLICATION NECESSITE UN ISOLEMENT REPETE ET UNE CONFRONTATION CLINICO- BIOLOGIQUE PNEUMOCOQUE,,, ENTEROBACTERIE
- 15. INDICATIONS DES HEMOCULTURES La prescription Fièvre inexpliquée surtout si elle est accompagnée de signes infectieux et/ou associée a un terrain favorisant (femme enceinte , immunodépression , cardiopathie, matériel étranger …) Infection localisée sévère : méningite , pneumonie , arthrite septique... Rechercher et préciser l'étiologie d'une endocardite infectieuse Rechercher et préciser l’implication d’une voie centrale ou périphérique Dans le syndrome infectieux
- 16. LES HEMOCULTURES EN PRATIQUE ETAPES PRE-ANALYTIQUES REALISER UNE HEMOCULTURE TIENS COMPTE DE NOMBREUX PARAMETRES ESSTIELLEMENT QUANTITE FAIBLE, ADULTE++ FORMES LESEES OU DEFICIENTES INHIBITION BACTERIENNE
- 17. LES HEMOCULTURES EN PRATIQUE ETAPES PRE-ANALYTIQUES REALISER UNE HEMOCULTURE TIENS COMPTE DE NOMBREUX PARAMETRES ESSTIELLEMENT Il en découle CHOIX DES MILIEUX ( richesse , inhibition , atmosphère , pression, phases…) QUALITE DU TRAITEMENT AU LABORATOIRE VOLUME DE SANG PRELEVE/60-80 cc adulte sur 2 a 3 séries (enfant en fonction du poids) Moment des prelevement (fievre continue/discontinue)
- 18. LE PRELEVEMENT
- 19. LE PRELEVEMENT ASEPTIE RIGOUREUSE A DISTANCE DE TOUT OYER INFECTIEUX A DISTANCE DE TOUT DISPOSITIF INTRAVASCULAIRE AU MOMENT DU PIC FEBRILE AVANT TOUT TRAITEMENT RESPECTER ! LES VOLUMES ! LES TYPES DE FLACONS ! LE NOMBRE DE SERIES ! PROTECTION DU MANIPULTEUR !
- 21. ACHEMINEMENT AU LABORATOIRE ACCOMPAGNE D’UNE ICHE DE RENSEIGNEMENTS CORRECTEMENT REMPLIE RESPECTER ! TEMPS ! TEMPERATURE ! PROTECTION DES FLACONS! SIGNALER TOUTE RECHERCHE PARTICULIERE SOUHAITEE !!!
- 22. QUELQUES SYSTEMES DE PRELEVEMENT HEMOCULTURES CLASSIQUES
- 23. QUELQUES SYSTEMES DE PRELEVEMENT HEMOCULTURES CLASSIQUES + SYSTEM DE LECTURE
- 24. QUELQUES SYSTEMES DE PRELEVEMENT HEMOCULTURES AUTOMATISEES
- 25. ETAPES ANALYTIQUES Incubation directe a la reception puis lecture a 18-24h Critères macroscopiques de positivité : Des leurs arrivé au laboratoire, les hémocultures sont incubés a 37° puis sont observés quotidiennement a la recherche de signes macroscopiques de positivité * Production de gaz *Hémolyse du sang *Trouble , voile ou dépôt * Présence de colonies sur la phase solide des flacons diphasiques. La durée de positivité pour les germes couramment incriminés dans les états septicémiques est de 2 a 3 jours , la durée maximale d'observation est de 10 a 15 jours sauf en cas de recherches particulières ou cette durée peut être prolongée (6 semaines pour la brucellose)
- 26. ETAPES ANALYTIQUES Examen microscopique : : état frais et colorations a la recherche de germes et de leurs mobilité Repiquage des hémocultures : sur divers milieux enrichis et sélectifs , orienté par l'examen microscopique identification biochimique et tests de sensibilité aux antibiotiques
- 27. ETAPES POST-ANALYTIQUES CONFRONTATION CLINICO-BIOLOGIQUE GERMES SPECIFIQUES VS GERMES OPPORTUNISTES NB: les hémocultures faussement négatives peuvent être dues a : *Traitement antibiotique *Quantité de sang inoculé insuffisante *Repiquage des flacons sur des milieux inadéquats *Temps d'observation insuffisant DIALOGUE CLINICIEN-BIOLOGISTE !!!!!
- 28. CONCLUSION les hémocultures constituent un outils précieux pour le clinicien (infectiologie , réanimation , cardiologie...) .C’est la clé de voûte du diagnostic étiologique de tout syndrome infectieux fébrile inexpliqué. Sa fiabilité est étroitement dépendante de la procédure de prélèvement sanguin et de la qualité des flacons d’hémoculture. Actuellement, de plus en plus de microorganismes saprophytes ou commensaux sont isolés par hémoculture en raison de la recrudescence des malades immunodéprimés et de la fréquence croissante d’utilisation des cathéters vasculaires. Il n’y a pas de milieu universel en matière de flacon pour hémoculture. grâce à l’avènement des automates qui, en plus de réduire significativement le délai de positivité des hémocultures, mettent à la disposition du médecin une large gamme de milieux pour hémoculture spécifiques à différentes espèces microbiennes.
Notes de l'éditeur
- SRIS, est un syndrome clinique correspondant à la réponse inflammatoire systémique à certaines agressions cliniques graves comme un état infectieux, un état de choc ou un traumatisme. Il remonte à la classification des états septiques adoptée en 1992 basée sur l'intensité de la réponse de l'organisme à l'infection. Cette classification est basée sur 4 éléments cliniques très simples et caractérisant le syndrome de réponse inflammatoire systémique : fièvre, tachycardie, tachypnée et hyperleucocytose. La simplicité = reconnaissance précoce des états septiques, Ce syndrome est caractérisé par la présence d'au moins deux des signes suivants : une température corporelle > 38 ° C ou < 36 ° C, une fréquence cardiaque FC > 90 BPM une fréquence respiratoire FR > 20/min -PaCO2 < 32 mmHg (< 4,3 kPa) en air ambiant, une leucocytose > 12.000/mm3 ou leucopenie < 4.000/mm3 ou > 10 % de cellules immatures. Pathologies non infectieuses potentiellement associées à un SRIS Agression tissulaire : Pancréatite, Infarctus tissulaire (myocarde, pulmonaire), Maladie thrombo-embolique, Erythrodermie, Hémorragie méningée, Rejet de greffe, Chirurgie majeure – traumatisme – hématomes Métabolique : Crise hyperthyroidienne, Insuffisance surrénale aigüe Pathologie inflammatoire : Maladie de Still de l’adulte, LED en poussée, Syndrome catastrophique des APL, PTT, DRESS syndrome Effet indésirable d’un traitement : Réaction à un produit dérivé du sang, Administration de cytokines (G-CSF, IL2,..), Syndrome malin des neuroleptiques et syndromes de sevrage, Hyperthermie maligne associée à l’anesthésie (produits halogénés, succinylcholine, ..) Pathologie tumorale : Cancers solides (du rein, ..), lymphomes, Syndrome de lyse tumorale Limites / L'utilisation des critères du SRIS pour dépister un état septique sévère de façon précoce a toutefois des limites, surtout chez les malades en réanimation : les critères sont tellement larges qu’ils n’ont aucune spécificité, ainsi en réanimation, 80 % des malades ont ces critères. même avec des critères aussi larges, il persiste un nombre important de faux négatifs, c’est-à-dire de malades ne remplissant pas les critères de SRIS alors qu’ils sont dans un état septique sévère. Depuis d'autres critères et d'autres scores ont été créés pour améliorer la spécificité du SRIS. Il reste cependant un moyen simple mais peu spécifique, de dépister des états septiques, notamment en pré-hospitalier et aux urgences.