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B.P.204 Goma
FACULTE DE MEDECINE
PROMOTION: Deuxiѐme année de graduat
Sous la supervision du prof. Pierre YASSA
ANNEE ACADEMIQUE 2017-2018
UNIVERSITE DE GOMA
UNIGOM
TRAVAIL PRATIQUE D’HISTOLOGIE GENERALE SUR LE
CYTOSQUELETTE
1
Travail réalisé par:
1. RUHUMURIZA YVES
2. NEEMA MUDEKEREZA CARINE
3. SHAMBA GASTON
4. SHUKURU ELOI BYANCHIRA
5. KASEREKA MUSAVULI
6. BAHATI KITAMBALA DEGAULE
7. IRAGI MULINDANGABO PATRICK
8. KAMALIRO KALEMBA ROSETTE
9. KASANGANDJO MULUNGULA
10. MAPENZI MUSANGANYA
11. MBUYI KASONGO
12. MASUDI MUSA SERGE
13. KINDI DIVIN DIVIN
14. METYA MBAYIGHANA
15. CHUBAKA MIRINDI
2
REMERCIEMENTS
En guise de notre reconnaissance infini à tous ceux qui
nous sont si cher,qui’il nous soit permis à traves cette page de
tarir des éloges à quelques uns.
De prime abord au Dieu le Pѐre tout puissant maitre de
temps.
En suite, à notre cher profésseur d’histologie Pierre YASSA qui
nul n’ignore sa résponsabilité, les qualités dont vous avez
inculqué en nous peuvent à travers ce travail temoigner du
bagage scientifique que nous avons acquis et pour cela nous
disons infiniment merci. Et à nos camarades pour leur
collaboration scientifique.
En fin, à nos trѐs cher parents pour leur bravoure, que Dieu
les bénisse infiniment.
3
Sigles et abreviations
• MTOC: centres organisateurs des microtubules
• MAP: microtubules-protéines associées
• GTP: guanosine triphosphate
• ADN: acide désoxyribonucléique
• ATP: adénosine triphosphate
• GFAP: fibres gliales de protéine acide
4
Table des matiѐres
0. INTRODUTION ….……………………………………..8
0.1. Objectifs ……………………………………………….. 8
0.2. Approche et definition ………………………….. 9
0.3. Propriétés, fonctions et localisation des
composantes du cytosquelette ………………….. 11
I: LES MICROTUBULES.…………………………….... 14
I.1. Déscription ………………………………………….. 14
I.2.Application médicale ………………………....... 24
II: LES MICRO FILAMENTS …………………………. 25
II.1. Déscription …………………………………………. 25
II.2. Propriétés …………………………………………… 28
5
Table des matiѐres
III: LES FILAMENTS INTERMEDAIRES …………… 36
III.1. Déscription ………………………………………….. 36
III.2. Propriétés ………………………………………..… 37
III.2.1 Les keratines …………………………………….. 38
III.2.2 La vimentine ……………………………………. 39
III.2.3 Les lamines ……………………………………… 40
III.3. Application médicale …………………………. 45
IV: CONCLUSION ………………………………………. 46
6
LE CYTOSQUELETTE
7
O. INTRODUCTION
0.1. OBJECTIFS
 Connaitre la structure et les fonctions du cytosquelette
 Décrire les composantes du cytosquelette
 Donner les applications medicales en rapport avec le
cytosquelette
8
0.2. APPROCHE ET DEFINITIONS
Le cytosquelette est l’architecture interne des cellules, formé
des divers éléments filamenteux. Ce réseau tridimensionnel des
protéines fournit un support interne dans les cellules eucaryotes,
organise les structures et intervient dans les phénomènes de transport,
de trafic et de division cellulaire. Dans les cellules eucaryotes, le
cytosquelette forme un réseau complexe de filaments protéiques qui
s’étendent dans tout le cytoplasme et permettant le déplacement des
organites, les contractions, les déformations et la mobilité cellulaire.
Dans les cellules procaryotes, il est principalement constitué des
protéines structurales. Selon le dictionnaire médical, le cytosquelette est
une constitution de microfilaments d’actine intracellulaire, assurant
l’armature de la cellule. Le cytosquelette est constitué de:
9
0.2. APPROCHE ET DEFINITIONS
• microtubules,
• micro filaments (filaments d'actine), et
• les filaments intermédiaires.
Ces polymères protéiques déterminent les formes des cellules, jouent
un rôle important dans les mouvements d’organites et de vésicules
cytoplasmiques, ainsi permettent le mouvement de la cellule entière.
0.3. PROPRIÉTÉS, FONCTIONS ET LOCALISATION DES
COMPOSANTES DU CYTOSQUELETTE
Les propriétés importantes, fonctions et les emplacements des
composants du cytosquelette sont résumés dans le tableau 2- 4.
10
0.3. PROPRIÉTÉS, FONCTIONS ET LOCALISATION DES
COMPOSANTES DU CYTOSQUELETTE
11
0.3. PROPRIÉTÉS, FONCTIONS ET LOCALISATION DES
COMPOSANTES DU CYTOSQUELETTE
SOUS-UNITES HETERODIMERES DES
αβ-TUBULINE
G-ACTINE MONOMERES TETRAMERES
ANTIPARALLELES DE
BATONNET DU TYPE
DIMERES
Structure générale Tube creux avec une
paroi de 13
protofilaments parallèles
Deux filaments entrelacés
de F-actine
Câble de 4 protofibrils
entrelacés, chacun
compose de tétramères
associe groupées bout en
bout
Diamètre 25nm 5-7nm 8-10nm
Protéines monomériques α et β tubuline (54 kDa) G-actine globulaire (42
kDa)
Différentes protéines en
forme de bâtonnets
hélicoïdales α
(~ 55 kDa, tableau 2-5)
12
0.3. PROPRIÉTÉS, FONCTIONS ET LOCALISATION DES
COMPOSANTES DU CYTOSQUELETTE
Polarité se termine par + et - se termine par + et - Pas de polarité
apparente
Stabilité relative Dynamique dans le
cytoplasme; stable dans
les axonèmes
Dynamique Stable
Emplacements généraux Rayonnant à travers le
cytoplasme de
concentration aux
centrosomes;
axonèmes
Concentré sous la cellule
membrane; dans les
extensions de cellules
comme les microvillosités
Rangé dans tout le
cytoplasme; à
desmosomes; enveloppe
nucléaire
Fonctions clés Maintenir la forme et la
polarité de la cellule;
pistes pro vide pour
organelle et mouvement
des
chromosomes; bouge un
peu les
cils et flagelles
Contracter et déplacer
les cellules;
changer la forme de la
cellule; transport et
streaming de la
cytokinèse micro
cytoplasique
Renforcer la structure
cellulaire et tissulaire
maintenir la forme de la
cellule; maintenir la
forme nucléaire
(lamines)
13
Chap.I. LES MICROTUBULES
I.1. Déscription
Dans le cytoplasme de toutes les cellules eucaryotes sont fines
tubulaires, les structures connues sous le nom de microtubules (voir
tableau 2-4 et figure 2-22). Les microtubules sont également organisés
en plus grandes collections appelées axonèmes dans les extensions
cytoplasmiques appelées cils et flagelles. Chaque microtubule est
creux, avec un diamètre extérieur de 25 nm et une paroi de 5 nm
d’épaisseur, une structure qui confère une rigidité importante pour
aider à maintenir la forme des cellules. Les microtubules varient en
longueur, mais peuvent devenir plusieurs micromètres de long. Deux
microtubules ou plus sont souvent liés côte à côte par des bras ou des
ponts protéiques, qui sont particulièrement importants dans les cils et
les flagelles. 14
LES MICROTUBULES
I.1. Déscription
Comme indiqué dans le tableau précédent, la sous-unité protéique
d'un microtubule est un hétéro dimère de α et β tubuline .
Dans des conditions appropriées, les hétéros dimères de la
tubuline se polymérisent en formant des microtubules, qui ont une
légère organisation en spirale globale.
Un total de 13 unités est présenté dans un tour complet du spirale.
Les sous-unités alignées forment des protofilaments longitudinaux, et
13 protofilaments parallèles constituent la paroi des microtubules. La
polymérisation des tubulines est dirigée par les centres
organisateurs des microtubules(MTOC), qui contiennent des
assemblages de tubuline agissant comme sites de nucléation pour la
polymérisation.
15
LES MICROTUBULES
I.1. Déscription
Les microtubules sont des structures polarisées et la croissance
(polymérisation) survient plus rapidement à l'extrémité (+) des
microtubules existants (Figure 2-23). Les microtubules montrent une
instabilité dynamique, avec des cycles continus de polymérisation
et de dépolymérisation à l'état d'équilibre, qui dépendent des
concentrations de la tubuline, Ca2 +, Mg2 +, et la présence de divers
microtubules-protéines associées (MAP). L'énergie pour
l'assemblage est dérivée du GTP lié à la tubuline, et des
microtubules individuels raccourcis car la dépolymérisation dépasse
la croissance. La stabilité des microtubules varie grandement avec
l'emplacement et la fonction cellulaire; les microtubules des cils sont
très stables, alors que ceux des bronches mitotiques sont de courte
durée.
16
LES MICROTUBULES
I.1. Déscription
Le MTOC dominant dans la plupart des cellules somatiques est le
centrosome, qui s'organise autour de deux centrioles
cylindriques, chacun d'environ 0,2 μm de diamètre et 0,3-0,5 μm de
longueur. Chaque centriole est composé de neuf microtubules
hautement organisés en triplets (Figure 2-24).
17
LES MICROTUBULES
(a) Les microtubules (MT) et les micros filaments d'actine (MF)
Peuvent être clairement distingués dans ce TEM du cytoplasme de
fibroblaste, qui fournit une bonne comparaison du diamètre relatif
à ces deux composants du cytosquelette. X60,000.
(b) Les réseaux de micro filaments et de microtubules sont
facilement démontrés par immunocytochimie en utilisant des
anticorps contre leurs protéines sous-unitaires, comme dans cette
cellule cultivée. Les filaments d’actine (en rouge) sont les plus
concentrés à la périphérie de la cellule pour former des faisceaux
circonférentiels proéminents à partir desquels les filaments
projettent dans les extensions cellulaires et poussent contre la
membrane cellulaire. Les filaments d'actine forment un réseau
dynamique important pour les changements de forme de cellule
tels que ceux de la cellule pendant la division, la locomotion et la
formation de processus cellulaires, plis, pseudopodes,
lamellipodes, microvillosités, etc. pour changer la surface d'une
cellule ou donner une direction à une cellule de mouvements
rampants. Les microtubules (vert / jaune) sont orientés dans des
réseaux s'étendant généralement à partir de la zone du
centrosome près du noyau dans les extensions les plus
périphériques. En plus de servir à stabiliser la forme des cellules,
les microtubules forment les pistes de kinésie, le transport de
vésicules et d'organites dans la périphérie de la cellule et le
transport à base de dynéine vers le noyau de la cellule.
18
LES MICROTUBULES
À des concentrations stables de tubuline, certains microtubules se
développent, tandis que d'autres rétrécissent, chacun existant dans une
condition appelée instabilité dynamique. Dans les zones cytoplasmiques
où la tubuline est en concentration élevée, la GTP de la tubuline est
ajoutée au microtubule (+) et se termine plus rapidement que le GTP
incorporé pouvant être hydrolysé. Le "plafond GTP" résulte de la
stabilité de cette fin de microtubule et favorise une croissance plus
rapide. Aussi libre, les concentrations de tubuline diminuent, le taux de
croissance diminue et permettant ainsi à l'hydrolyse du GTP de se
rattraper. Le "plafond du PIB" résultant à la fin des microtubules est
instable et favorise une dépolymérisation rapide (appelée
"catastrophe"). Cela augmente la concentration locale de monomère
libre de tubuline qui "sauve" le microtubule avant de disparaître
complètement et produit une autre courte période d’élongation de
microtubules. L'instabilité dynamique permet la croissance des
extrémités des microtubules d’explorer le cytoplasme et se stabiliser
quand ils entrent en contact avec des structures stabilisatrices, telles
que des kinétochores sur les chromosomes au début de la mitose.
19
LES MICROTUBULES
Le centrosome est le centre organisateur du fuseau
mitotique des microtubules et se compose de centrioles
appariés. Le TEM révèle que les deux centrioles d'un
centrosome existent à perpendiculaires l'un à l'autre
dans une matrice dense des sous-unités de tubuline libre
et d'autres protéines. Chaque centriole se compose de
neuf triplets micro tubulaires. Dans un processus mal
compris, le centrosome se duplique et est divisé
également pendant une interphase de la cellule, chaque
moitié ayant une paire de centriole dupliquée. Au début
de la mitose, les deux centrosomes de la fille se
déplacent aux côtés opposés du noyau et deviennent les
deux pôles du fuseau mitotique des microtubules se
fixant aux chromosomes.
20
LES MICROTUBULES
I.1. Déscription
Avec les longs axes à angle droit des microtubules, les
centrioles appariés organisent des complexes de tubuline à
proximité et d'autres protéines comme une matrice périe centriolaire
trouvé près du noyau de cellules ne se divisant pas. Avant la division
cellulaire, plus précisément pendant la période de réplication de
l'ADN, chaque centrosome se duplique de sorte que maintenant
chaque centrosome a deux paires de centrioles. Pendant la mitose,
le centrosome se divise en deux, qui se déplacent aux pôles
opposés de la cellule, et deviennent centres pour les microtubules
du fuseau mitotique.
21
LES MICROTUBULES
I.1. Déscription
Les microtubules font également partie du système
intracellulaire transport de vésicules membraneuses, complexes
macromoléculaires, et les organelles. Des exemples bien étudiés
comprennent le transport axoplasmique dans les neurones,
transport de la mélanine dans les cellules pigmentaires, les
mouvements des chromosomes, et les mouvements des vésicules
par le fuseau mitotique parmi les différents compartiments
cellulaires.
Dans chacun de ces exemples, le mouvement est suspendu si les
microtubules sont perturbés. Le transport le long des microtubules
est sous le contrôle de protéines appelées protéines motrices, qui
utilisent l'ATP pour déplacer les structures plus grandes .
22
LES MICROTUBULES
I.1. Déscription
Les kinésines transportent du matériel loin du MTOC près du
noyau vers l'extrémité plus des microtubules (transport
antérograde);les dyneins cytoplasmiques transportent le matériel le
long des microtubules dans la direction opposée (transport
rétrograde), généralement vers le noyau. Les rôles importants pour
ce système comprennent l'extension du réticulum endoplasmique de
l'enveloppe nucléaire au plasmalemme et le déplacement des
vésicules vers et à travers l'appareil de Golgi.
23
I.2.APPLICATION MÉDICALE
Plusieurs composés inhibiteurs utilisés par les biologistes
cellulaires pour étudier les détails de la dynamique des
microtubules sont également largement utilisés dans la
chimiothérapie du cancer pour bloquer l'activité du fuseau
mitotique dans les cellules néoplasiques à croissance rapide. Tels
médicaments comprennent la vinblastine, la vincristine et le
paclitaxel, tous ont été initialement découverts en tant que dérivés
de plantes.
24
Chapitre II: LES MICROFILAMENTS
(filaments d'actine)
II.1. Déscription
Les micro filaments sont des composés d'actine permettant la
mobilité cellulaire et la plupart des activités contractiles dans les
cellules, par assemblage réversible des filaments d'actine et
interactions entre ces filaments et la protéine associée, la myosine.
Les Filaments d'actine sont minces (diamètre de 5-7 nm), polymères
polarisés, plus courts et plus flexible que les microtubules (Figure 2-
22).Elles sont composés de monomères G-actine globulaires qui
s'assemblent, la présence de K + et Mg2 + dans une hélice double
brin, F-actine filamenteuse (tableau 2-4). G-actine est généralement
ajouté aux filaments préexistants, mais de nouveaux filaments
peuvent être formés à partir d'un pool de G-actine par l'action des
facteurs de nucléation comme le formin.
25
LES MICROFILAMENTS
II.1. Déscription
Les filaments d'actine sont également très dynamiques.
Les monomères sont ajoutées rapidement à l'extrémité (+) ou
barbelée, avec hydrolyse ATP à chaque addition; en même temps, les
monomères se dissocient à l'extrémité (-) ou pointue. Cela conduit à
la migration des sous-unités à travers le polymère, qui se produit
rapidement dans les filaments purifiés dans un processus appelé le
moulin à rouler (Figure 2-25). Dans les cellules à la fois l'assemblage
et le démontage des sous-unités de F-actine sont favorisées par
d’autres protéines, telles que la profiline et la cofiline, respectivement.
26
LES MICROFILAMENTS
II.1. Déscription
L'actine est très abondante dans toutes les cellules, généralement
concentrée comme des réseaux de filaments d'actine et abondant
libre globulaire sous-unités de G-actine concentrées près de la
membrane cellulaire (une région parfois appelée le cortex
cellulaire) et dans les extensions cellulaire.
Les microvillosités sont des extensions qui augmentent la
surface d'une cellule, zone d'absorption cellulaire améliorée, tandis
que d'autres saillies sont utilisées dans la mobilité cellulaire. Dans
les cellules attachées à l'entreprise substrat, les filaments d'actine
peuvent être concentrés en parallèle des faisceaux appelés fibres
de stress (voir la figure 2-13c).
27
LES MICROFILAMENTS
II.2.Propriétés
Les propriétés physiques des filaments d'actine, en particulier
leurs longueurs et interactions avec d'autres protéines, déterminent
les propriétés mécaniques du cytoplasme local, notamment sa
viscosité. Le Cross-linking dans les réseaux de F-actine augmente la
viscosité cytoplasmique, tout en coupant (et coiffant) les filaments
ont tendance à diminuer la viscosité. Les longueurs et autres
propriétés physiques des filaments d'actine sont contrôlées par une
grande variété de protéines liant l'actine, dont quelques-unes sont
indiquées dans la figure 2-26.
28
LES MICROFILAMENTS
Fugure 2-13
(c) L'emplacement de l'appareil de Golgi peut être clairement vu intact
dans les cellules cultivées traitées par immunocytochimie en
utilisant un anticorps contre golgin-97 pour montrer les nombreux
complexes de vésicules de Golgi (vertes), tout près du noyau, sur un
fond de micro filaments organisés en fibres de stress et colorés
avec phalloïdine fluorescente (violet). En raison de l'abondance de
lipides dans ses nombreuses membranes, l'appareil de Golgi est
difficile à être visualisé dans un système inclus en paraffine, les
sections colorées H & E. En développant des globules blancs avec
des complexes de Golgi actifs, l'organite peut parfois être vu
comme une zone juxta nucléaire faible non colorée (parfois appelée
"Golgi fantôme") entouré de cytoplasme basophile
29
LES MICROFILAMENTS
a) Les filaments d'actine ou les micro filaments sont hélicoïdaux à deux brins
polymères assemblés à partir de sous-unités globulaires d'actine.
(b) L'assemblage des filaments d'actine (F-actine) est polarisé, avec les sous-
unités G-actine ajoutées à l'extrémité plus (+) et enlevées au moins (-)
à la fin. Même les filaments d'actine d'une longueur constante sont des
structures hautement dynamiques, équilibrant l'assemblage G-actine
et le démontage aux extrémités opposées, avec un mouvement net ou
s'écouler le long du polymère connu sous le nom de foulage.
30
LES MICROFILAMENTS
II.2.Propriétés
L’activité importante de ces protéines inclue les éléments
suivants:
 Séparation et / ou plafonnement de la fin de l'actine (par
exemple, gelsoline, capZ)
 Réticulation (par exemple, filamine) ou groupage (par exemple,
fimbrin,α-actinine) filaments d'actine
Liaison F-actine aux protéines membranaires et autres filaments
du cytosquelette (par exemple, spectrine)
31
LES MICROFILAMENTS
II.2.Propriétés
Tout comme les moteurs moléculaires kinésines et dynéine se
déplacent le long des microtubules, divers moteurs à myosine
utilisent l'ATP pour le transport de marchandises le long de F-
actine. Le mouvement est habituellement vers l'extrémité
barbelée (+) des filaments d'actine; la myosine VI est la seul
myosine connue qui se déplace dans l'autre sens.
Les interactions entre F-actine et les myosines forment la base
de divers mouvements cellulaires:
Transport de divers organites, vésicules et granules à travers
la cellule (diffusion cytoplasmique)
32
LES MICROFILAMENTS
II.2.Propriétés
 Anneaux contractiles de micro filaments et de myosine II qui se
construisent pour produire deux cellules à la fin de la mitose
(Cytokines)
 Molécules associées à la membrane de la myosine I dont les
mouvements le long des micro filaments sont importants dans les
changements de surface cellulaire qui sous-tendent la phagocytose
et pinocytose
 Contraction du cytoplasme qui raccourcit les cellules ou
rapidement rétracte les extensions cellulaires.
Les réseaux stabilisés de filaments d'actine intégrés à des réseaux
des filaments de myosine plus épais (16 nm) permettent des très
énergiques contractions dans des cellules spécialisées telles que
celles des muscles. 33
LES MICROFILAMENTS
Un grand nombre de protéines régulent l'assemblage des micro
filaments et les interactions de ces filaments avec un autre. En
modifiant la longueur des micro filaments et la réticulation, ces
protéines influent grandement sur les propriétés physiques du
cytoplasme local.
34
Chapitre III: LES FILAMENTS
INTERMEDIAIRES
III.1. Déscription
En plus des microtubules et des filaments d'actine, le
cytosquelette comprend une classe de filaments de taille intermédiaire
entre deux autres et avec un diamètre moyen de 10 nm (tableau 2-4).
Les filaments intermédiaires sont beaucoup plus stables que les
microtubules et les filaments d'actine.
De plus, ces filaments sont composés de différentes sous-unités
protéiques dans différents types des cellules. Plus d'une douzaine de
classes de protéines hétérogènes, allant en taille de 40 à 230 kDa,
formant des sous-unités des filaments ont été identifiés et localisés
immunocytochimiquement.
35
LES FILAMENTS INTERMEDIAIRES
III.1. Déscription
Comme indiqué dans le tableau 2-4, presque toutes ces sous-unités
sont des dimères enroulés en forme de bâtonnets formant des
tétramères antiparallèles, qui s'auto-assemblent en gros faisceaux ou
protofibrilles semblables à des câbles stabilisé par d'autres interactions
latérales.(Tableau 2-5) listes six classes de protéines de filaments
intermédiaires formant des bâtonnets sous-unités, leurs tailles et les
distributions de cellules, et les maladies qui résultent de leur
perturbation.
III.2. Propriétés
Les protéines de filaments intermédiaires avec des propriétés
biologiques particulières comprennent l'importance histologique ou
pathologique suivants:
36
LES FILAMENTS INTERMEDIAIRES
III.2. Propriétés
III.2.1 Les kératines
Les kératines (Gr. Keras, klaxon) ou les cytokératines sont
des diverses familles d'iso formes acides et basiques qui composent
les sous-unités hétéro dimères des filaments intermédiaires dans tous
les cellules épithéliales. Ils sont codés par plus de 30 gènes
apparentés et produisent des filaments avec différentes propriétés
chimiques et immunologiques pour diverses fonctions. Dans les
cellules épidermiques, les cytokératines s'accumulent dans le
processus de différenciation appelé kératinisation, qui se traduit par
une couche externe de cellules de peau non vivantes et cela réduit la
déshydratation. L'évolution des kératines a rendu possible la vie
terrestre.
37
LES FILAMENTS INTERMEDIAIRES
III.2. Propriétés
La kératinisation fournit aussi une certaine protection contre les
abrasions mineures et produit diverses structures protectrices dures
de la peau, telles que les ongles (ainsi que les plumes, les becs, les
cornes et les écailles des reptiles). Les filaments intermédiaires de
kératines forment de grands faisceaux qui s'attachent à certaines
jonctions entre les cellules épithéliales (Figure 2-27).
III.2.2 La vimentine
La vimentine est l'intermédiaire de classe III la plus commune
de protéine filamentaire et se trouve dans la plupart des cellules
provenant de mésenchyme. Les protéines importantes comme la
vimentine comprennent une desmine trouvé dans presque toutes les
cellules musculaires et les fibres gliales de protéine acide (GFAP)
trouvée surtout dans les astrocytes, pour soutenir les cellules du
tissu du système nerveux central.
38
LES FILAMENTS INTERMEDIAIRES
III.2. Propriétés
Les filaments d'une cellule cultivée sont montrés
immunocytochimiquement (figure 1-12a). Les protéines de
neurofilaments de trois tailles distinctes font des hétéros dimères
formant les sous-unités majeures de filaments intermédiaires de
neurones.
III.2.3 Les lamines
Les lamines sont une famille de sept iso formes présentes
dans le noyau de la cellule, où ils forment un cadre structurel appelé
la lame nucléaire juste à l'intérieur de l'enveloppe nucléaire.
39
Tableau 2-5
Les principales classes et les représentants des protéines de filaments
intermédiaires, leurs tailles et emplacements
CLASSE PROTEINES TAILLE (kDa) DISTRIBUTIO
N
CELLULAIRE
IMPLICATION
DE LA
MALADIE (si
connue)
I Acide cytokeratine 40-65 Cellules
épithéliales
Certains troubles
de brûlure dela
peau
II Cytokératine de
Base
51-68 Cellules
épithéliales
Kératodermie;
dystrophie
cornéenne
III Desmine 53 Cellules
musculaires
Myopathies
Synemine 190 Cellules
musculaires
GFAP 50 Astrocytes (moins
dans les autres
cellules gliales)
Maladie Alexander
Peripherine 57 Neurones
40
Vimentine 54 Cellules
mésenchymateus
es
IV NF-L 68 Neurones
NF-M 110 Neurones
NF-H 130 Neurones
α-internexine 55 Neurones
embryonnaires
V Lamine 62-72 Noyaux de toutes
les cellules
Cardiomyopathie;
dystrophies
musculaires;
progeria
VI Nestines 230 Quelques cellules
souches et
embryonnaires
41
LES FILAMENTS INTERMEDIAIRES
Les filaments intermédiaires (FI) affichent un diamètre moyen de
8-10nm, entre celui des filaments d'actine et des
microtubules, et pour fournir la résistance mécanique ou la
stabilité aux cellules. Une grande classe importante de
filaments intermédiaires est composée des sous-unités de
kératine, qui sont proéminentes dans les cellules épithéliales.
Les liasses des filaments de kératine appelés tonofibrilles
sont associés à certaines classes de jonctions intercellulaires
(J) communes dans les cellules épithéliales et sont facilement
visibles avec le TEM, comme indiqué ici dans deux extensions
dans une cellule épidermique liée à une cellule voisine.
60 000X
42
LES FILAMENTS INTERMEDIAIRES
Figure 1–12
Pour localiser des protéines spécifiques, les méthodes
immunocytochimiques peuvent être appliquées à des
préparations microscopiques ou TEM en utilisant une
variété d'étiquettes.
(a) Une seule cellule utérine en culture colorée par
fluorescence peut révéler un réseau de filaments
intermédiaires (vert) dans tout le cytoplasme. Les
anticorps primaires contre la protéine des filaments de
desmine et l'isothiocyanate de fluorescéine. Des
anticorps secondaires marqués au FITC ont été utilisés
dans les techniques de coloration avec le noyau contre-
bleu avec DAPI. X650.
43
III.3. APPLICATION MÉDICALE
La présence d'un type spécifique de filament intermédiaire
dans les tumeurs peut souvent révéler l'origine cellulaire de cette
dernière, informations importantes pour le diagnostic et le traitement
du cancer. L’identification des protéines de filaments intermédiaires au
moyen de méthodes immunocytochimiques est une routine
procédure. Un exemple est l'utilisation des fibres gliales de protéine
acide (GFAP) pour identifier les astrocytomes, le type le plus commun
de tumeur cérébrale.
44
IV. CONCLUSION
Le cytosquelette est composé de des éléments essentiels entre
autre :
Les microtubules qui sont constitués des tubulines et jouent un rôle
dans le transport cellulaire, en arrêtant les systèmes membranaires
internes ; les micro filaments constitués d’actine et jouent un rôle dans
le mouvement cellulaire et la stabilisation de la membrane ; et les
filaments intermédiaires qui sont faits de six protéines qui varient d'un
type cellulaire à l'autre; il joue un rôle dans l’union des cellules
associées à l'intérieur d’unités structurales. Ces six protéines sont : la
cytokératines situées dans les cellules épithéliales, la desmine située
dans les muscles (lisse et strie), la protéine fibrillaire gluante acide
(GFAP) située dans les astrocytes, les neurofilaments situés dans les
neurones, la lamine nucléaire située dans les noyaux de toutes les
cellules et la vimentine qu’on trouve dans les nombreux tissus
mésodermiques.
45
Bibliographie
Stevens,A .et James,L. (2002) Histologie humaine , 2è𝑚𝑒
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Mostby, Département De Boek University. Bruxelles. Page 23
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Jacques Quevauvilliers, (28 juin 2011) Dictionnaire Médical,
6ème ed, Elsevier Masson. Page 250
46
PHOTO DU GROUPE
47

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TRAVAIL PRATIQUE D'HISTOLOGIE GENERALE SUR LE CYTOSQUELETTE

  • 1. B.P.204 Goma FACULTE DE MEDECINE PROMOTION: Deuxiѐme année de graduat Sous la supervision du prof. Pierre YASSA ANNEE ACADEMIQUE 2017-2018 UNIVERSITE DE GOMA UNIGOM TRAVAIL PRATIQUE D’HISTOLOGIE GENERALE SUR LE CYTOSQUELETTE 1
  • 2. Travail réalisé par: 1. RUHUMURIZA YVES 2. NEEMA MUDEKEREZA CARINE 3. SHAMBA GASTON 4. SHUKURU ELOI BYANCHIRA 5. KASEREKA MUSAVULI 6. BAHATI KITAMBALA DEGAULE 7. IRAGI MULINDANGABO PATRICK 8. KAMALIRO KALEMBA ROSETTE 9. KASANGANDJO MULUNGULA 10. MAPENZI MUSANGANYA 11. MBUYI KASONGO 12. MASUDI MUSA SERGE 13. KINDI DIVIN DIVIN 14. METYA MBAYIGHANA 15. CHUBAKA MIRINDI 2
  • 3. REMERCIEMENTS En guise de notre reconnaissance infini à tous ceux qui nous sont si cher,qui’il nous soit permis à traves cette page de tarir des éloges à quelques uns. De prime abord au Dieu le Pѐre tout puissant maitre de temps. En suite, à notre cher profésseur d’histologie Pierre YASSA qui nul n’ignore sa résponsabilité, les qualités dont vous avez inculqué en nous peuvent à travers ce travail temoigner du bagage scientifique que nous avons acquis et pour cela nous disons infiniment merci. Et à nos camarades pour leur collaboration scientifique. En fin, à nos trѐs cher parents pour leur bravoure, que Dieu les bénisse infiniment. 3
  • 4. Sigles et abreviations • MTOC: centres organisateurs des microtubules • MAP: microtubules-protéines associées • GTP: guanosine triphosphate • ADN: acide désoxyribonucléique • ATP: adénosine triphosphate • GFAP: fibres gliales de protéine acide 4
  • 5. Table des matiѐres 0. INTRODUTION ….……………………………………..8 0.1. Objectifs ……………………………………………….. 8 0.2. Approche et definition ………………………….. 9 0.3. Propriétés, fonctions et localisation des composantes du cytosquelette ………………….. 11 I: LES MICROTUBULES.…………………………….... 14 I.1. Déscription ………………………………………….. 14 I.2.Application médicale ………………………....... 24 II: LES MICRO FILAMENTS …………………………. 25 II.1. Déscription …………………………………………. 25 II.2. Propriétés …………………………………………… 28 5
  • 6. Table des matiѐres III: LES FILAMENTS INTERMEDAIRES …………… 36 III.1. Déscription ………………………………………….. 36 III.2. Propriétés ………………………………………..… 37 III.2.1 Les keratines …………………………………….. 38 III.2.2 La vimentine ……………………………………. 39 III.2.3 Les lamines ……………………………………… 40 III.3. Application médicale …………………………. 45 IV: CONCLUSION ………………………………………. 46 6
  • 8. O. INTRODUCTION 0.1. OBJECTIFS  Connaitre la structure et les fonctions du cytosquelette  Décrire les composantes du cytosquelette  Donner les applications medicales en rapport avec le cytosquelette 8
  • 9. 0.2. APPROCHE ET DEFINITIONS Le cytosquelette est l’architecture interne des cellules, formé des divers éléments filamenteux. Ce réseau tridimensionnel des protéines fournit un support interne dans les cellules eucaryotes, organise les structures et intervient dans les phénomènes de transport, de trafic et de division cellulaire. Dans les cellules eucaryotes, le cytosquelette forme un réseau complexe de filaments protéiques qui s’étendent dans tout le cytoplasme et permettant le déplacement des organites, les contractions, les déformations et la mobilité cellulaire. Dans les cellules procaryotes, il est principalement constitué des protéines structurales. Selon le dictionnaire médical, le cytosquelette est une constitution de microfilaments d’actine intracellulaire, assurant l’armature de la cellule. Le cytosquelette est constitué de: 9
  • 10. 0.2. APPROCHE ET DEFINITIONS • microtubules, • micro filaments (filaments d'actine), et • les filaments intermédiaires. Ces polymères protéiques déterminent les formes des cellules, jouent un rôle important dans les mouvements d’organites et de vésicules cytoplasmiques, ainsi permettent le mouvement de la cellule entière. 0.3. PROPRIÉTÉS, FONCTIONS ET LOCALISATION DES COMPOSANTES DU CYTOSQUELETTE Les propriétés importantes, fonctions et les emplacements des composants du cytosquelette sont résumés dans le tableau 2- 4. 10
  • 11. 0.3. PROPRIÉTÉS, FONCTIONS ET LOCALISATION DES COMPOSANTES DU CYTOSQUELETTE 11
  • 12. 0.3. PROPRIÉTÉS, FONCTIONS ET LOCALISATION DES COMPOSANTES DU CYTOSQUELETTE SOUS-UNITES HETERODIMERES DES αβ-TUBULINE G-ACTINE MONOMERES TETRAMERES ANTIPARALLELES DE BATONNET DU TYPE DIMERES Structure générale Tube creux avec une paroi de 13 protofilaments parallèles Deux filaments entrelacés de F-actine Câble de 4 protofibrils entrelacés, chacun compose de tétramères associe groupées bout en bout Diamètre 25nm 5-7nm 8-10nm Protéines monomériques α et β tubuline (54 kDa) G-actine globulaire (42 kDa) Différentes protéines en forme de bâtonnets hélicoïdales α (~ 55 kDa, tableau 2-5) 12
  • 13. 0.3. PROPRIÉTÉS, FONCTIONS ET LOCALISATION DES COMPOSANTES DU CYTOSQUELETTE Polarité se termine par + et - se termine par + et - Pas de polarité apparente Stabilité relative Dynamique dans le cytoplasme; stable dans les axonèmes Dynamique Stable Emplacements généraux Rayonnant à travers le cytoplasme de concentration aux centrosomes; axonèmes Concentré sous la cellule membrane; dans les extensions de cellules comme les microvillosités Rangé dans tout le cytoplasme; à desmosomes; enveloppe nucléaire Fonctions clés Maintenir la forme et la polarité de la cellule; pistes pro vide pour organelle et mouvement des chromosomes; bouge un peu les cils et flagelles Contracter et déplacer les cellules; changer la forme de la cellule; transport et streaming de la cytokinèse micro cytoplasique Renforcer la structure cellulaire et tissulaire maintenir la forme de la cellule; maintenir la forme nucléaire (lamines) 13
  • 14. Chap.I. LES MICROTUBULES I.1. Déscription Dans le cytoplasme de toutes les cellules eucaryotes sont fines tubulaires, les structures connues sous le nom de microtubules (voir tableau 2-4 et figure 2-22). Les microtubules sont également organisés en plus grandes collections appelées axonèmes dans les extensions cytoplasmiques appelées cils et flagelles. Chaque microtubule est creux, avec un diamètre extérieur de 25 nm et une paroi de 5 nm d’épaisseur, une structure qui confère une rigidité importante pour aider à maintenir la forme des cellules. Les microtubules varient en longueur, mais peuvent devenir plusieurs micromètres de long. Deux microtubules ou plus sont souvent liés côte à côte par des bras ou des ponts protéiques, qui sont particulièrement importants dans les cils et les flagelles. 14
  • 15. LES MICROTUBULES I.1. Déscription Comme indiqué dans le tableau précédent, la sous-unité protéique d'un microtubule est un hétéro dimère de α et β tubuline . Dans des conditions appropriées, les hétéros dimères de la tubuline se polymérisent en formant des microtubules, qui ont une légère organisation en spirale globale. Un total de 13 unités est présenté dans un tour complet du spirale. Les sous-unités alignées forment des protofilaments longitudinaux, et 13 protofilaments parallèles constituent la paroi des microtubules. La polymérisation des tubulines est dirigée par les centres organisateurs des microtubules(MTOC), qui contiennent des assemblages de tubuline agissant comme sites de nucléation pour la polymérisation. 15
  • 16. LES MICROTUBULES I.1. Déscription Les microtubules sont des structures polarisées et la croissance (polymérisation) survient plus rapidement à l'extrémité (+) des microtubules existants (Figure 2-23). Les microtubules montrent une instabilité dynamique, avec des cycles continus de polymérisation et de dépolymérisation à l'état d'équilibre, qui dépendent des concentrations de la tubuline, Ca2 +, Mg2 +, et la présence de divers microtubules-protéines associées (MAP). L'énergie pour l'assemblage est dérivée du GTP lié à la tubuline, et des microtubules individuels raccourcis car la dépolymérisation dépasse la croissance. La stabilité des microtubules varie grandement avec l'emplacement et la fonction cellulaire; les microtubules des cils sont très stables, alors que ceux des bronches mitotiques sont de courte durée. 16
  • 17. LES MICROTUBULES I.1. Déscription Le MTOC dominant dans la plupart des cellules somatiques est le centrosome, qui s'organise autour de deux centrioles cylindriques, chacun d'environ 0,2 μm de diamètre et 0,3-0,5 μm de longueur. Chaque centriole est composé de neuf microtubules hautement organisés en triplets (Figure 2-24). 17
  • 18. LES MICROTUBULES (a) Les microtubules (MT) et les micros filaments d'actine (MF) Peuvent être clairement distingués dans ce TEM du cytoplasme de fibroblaste, qui fournit une bonne comparaison du diamètre relatif à ces deux composants du cytosquelette. X60,000. (b) Les réseaux de micro filaments et de microtubules sont facilement démontrés par immunocytochimie en utilisant des anticorps contre leurs protéines sous-unitaires, comme dans cette cellule cultivée. Les filaments d’actine (en rouge) sont les plus concentrés à la périphérie de la cellule pour former des faisceaux circonférentiels proéminents à partir desquels les filaments projettent dans les extensions cellulaires et poussent contre la membrane cellulaire. Les filaments d'actine forment un réseau dynamique important pour les changements de forme de cellule tels que ceux de la cellule pendant la division, la locomotion et la formation de processus cellulaires, plis, pseudopodes, lamellipodes, microvillosités, etc. pour changer la surface d'une cellule ou donner une direction à une cellule de mouvements rampants. Les microtubules (vert / jaune) sont orientés dans des réseaux s'étendant généralement à partir de la zone du centrosome près du noyau dans les extensions les plus périphériques. En plus de servir à stabiliser la forme des cellules, les microtubules forment les pistes de kinésie, le transport de vésicules et d'organites dans la périphérie de la cellule et le transport à base de dynéine vers le noyau de la cellule. 18
  • 19. LES MICROTUBULES À des concentrations stables de tubuline, certains microtubules se développent, tandis que d'autres rétrécissent, chacun existant dans une condition appelée instabilité dynamique. Dans les zones cytoplasmiques où la tubuline est en concentration élevée, la GTP de la tubuline est ajoutée au microtubule (+) et se termine plus rapidement que le GTP incorporé pouvant être hydrolysé. Le "plafond GTP" résulte de la stabilité de cette fin de microtubule et favorise une croissance plus rapide. Aussi libre, les concentrations de tubuline diminuent, le taux de croissance diminue et permettant ainsi à l'hydrolyse du GTP de se rattraper. Le "plafond du PIB" résultant à la fin des microtubules est instable et favorise une dépolymérisation rapide (appelée "catastrophe"). Cela augmente la concentration locale de monomère libre de tubuline qui "sauve" le microtubule avant de disparaître complètement et produit une autre courte période d’élongation de microtubules. L'instabilité dynamique permet la croissance des extrémités des microtubules d’explorer le cytoplasme et se stabiliser quand ils entrent en contact avec des structures stabilisatrices, telles que des kinétochores sur les chromosomes au début de la mitose. 19
  • 20. LES MICROTUBULES Le centrosome est le centre organisateur du fuseau mitotique des microtubules et se compose de centrioles appariés. Le TEM révèle que les deux centrioles d'un centrosome existent à perpendiculaires l'un à l'autre dans une matrice dense des sous-unités de tubuline libre et d'autres protéines. Chaque centriole se compose de neuf triplets micro tubulaires. Dans un processus mal compris, le centrosome se duplique et est divisé également pendant une interphase de la cellule, chaque moitié ayant une paire de centriole dupliquée. Au début de la mitose, les deux centrosomes de la fille se déplacent aux côtés opposés du noyau et deviennent les deux pôles du fuseau mitotique des microtubules se fixant aux chromosomes. 20
  • 21. LES MICROTUBULES I.1. Déscription Avec les longs axes à angle droit des microtubules, les centrioles appariés organisent des complexes de tubuline à proximité et d'autres protéines comme une matrice périe centriolaire trouvé près du noyau de cellules ne se divisant pas. Avant la division cellulaire, plus précisément pendant la période de réplication de l'ADN, chaque centrosome se duplique de sorte que maintenant chaque centrosome a deux paires de centrioles. Pendant la mitose, le centrosome se divise en deux, qui se déplacent aux pôles opposés de la cellule, et deviennent centres pour les microtubules du fuseau mitotique. 21
  • 22. LES MICROTUBULES I.1. Déscription Les microtubules font également partie du système intracellulaire transport de vésicules membraneuses, complexes macromoléculaires, et les organelles. Des exemples bien étudiés comprennent le transport axoplasmique dans les neurones, transport de la mélanine dans les cellules pigmentaires, les mouvements des chromosomes, et les mouvements des vésicules par le fuseau mitotique parmi les différents compartiments cellulaires. Dans chacun de ces exemples, le mouvement est suspendu si les microtubules sont perturbés. Le transport le long des microtubules est sous le contrôle de protéines appelées protéines motrices, qui utilisent l'ATP pour déplacer les structures plus grandes . 22
  • 23. LES MICROTUBULES I.1. Déscription Les kinésines transportent du matériel loin du MTOC près du noyau vers l'extrémité plus des microtubules (transport antérograde);les dyneins cytoplasmiques transportent le matériel le long des microtubules dans la direction opposée (transport rétrograde), généralement vers le noyau. Les rôles importants pour ce système comprennent l'extension du réticulum endoplasmique de l'enveloppe nucléaire au plasmalemme et le déplacement des vésicules vers et à travers l'appareil de Golgi. 23
  • 24. I.2.APPLICATION MÉDICALE Plusieurs composés inhibiteurs utilisés par les biologistes cellulaires pour étudier les détails de la dynamique des microtubules sont également largement utilisés dans la chimiothérapie du cancer pour bloquer l'activité du fuseau mitotique dans les cellules néoplasiques à croissance rapide. Tels médicaments comprennent la vinblastine, la vincristine et le paclitaxel, tous ont été initialement découverts en tant que dérivés de plantes. 24
  • 25. Chapitre II: LES MICROFILAMENTS (filaments d'actine) II.1. Déscription Les micro filaments sont des composés d'actine permettant la mobilité cellulaire et la plupart des activités contractiles dans les cellules, par assemblage réversible des filaments d'actine et interactions entre ces filaments et la protéine associée, la myosine. Les Filaments d'actine sont minces (diamètre de 5-7 nm), polymères polarisés, plus courts et plus flexible que les microtubules (Figure 2- 22).Elles sont composés de monomères G-actine globulaires qui s'assemblent, la présence de K + et Mg2 + dans une hélice double brin, F-actine filamenteuse (tableau 2-4). G-actine est généralement ajouté aux filaments préexistants, mais de nouveaux filaments peuvent être formés à partir d'un pool de G-actine par l'action des facteurs de nucléation comme le formin. 25
  • 26. LES MICROFILAMENTS II.1. Déscription Les filaments d'actine sont également très dynamiques. Les monomères sont ajoutées rapidement à l'extrémité (+) ou barbelée, avec hydrolyse ATP à chaque addition; en même temps, les monomères se dissocient à l'extrémité (-) ou pointue. Cela conduit à la migration des sous-unités à travers le polymère, qui se produit rapidement dans les filaments purifiés dans un processus appelé le moulin à rouler (Figure 2-25). Dans les cellules à la fois l'assemblage et le démontage des sous-unités de F-actine sont favorisées par d’autres protéines, telles que la profiline et la cofiline, respectivement. 26
  • 27. LES MICROFILAMENTS II.1. Déscription L'actine est très abondante dans toutes les cellules, généralement concentrée comme des réseaux de filaments d'actine et abondant libre globulaire sous-unités de G-actine concentrées près de la membrane cellulaire (une région parfois appelée le cortex cellulaire) et dans les extensions cellulaire. Les microvillosités sont des extensions qui augmentent la surface d'une cellule, zone d'absorption cellulaire améliorée, tandis que d'autres saillies sont utilisées dans la mobilité cellulaire. Dans les cellules attachées à l'entreprise substrat, les filaments d'actine peuvent être concentrés en parallèle des faisceaux appelés fibres de stress (voir la figure 2-13c). 27
  • 28. LES MICROFILAMENTS II.2.Propriétés Les propriétés physiques des filaments d'actine, en particulier leurs longueurs et interactions avec d'autres protéines, déterminent les propriétés mécaniques du cytoplasme local, notamment sa viscosité. Le Cross-linking dans les réseaux de F-actine augmente la viscosité cytoplasmique, tout en coupant (et coiffant) les filaments ont tendance à diminuer la viscosité. Les longueurs et autres propriétés physiques des filaments d'actine sont contrôlées par une grande variété de protéines liant l'actine, dont quelques-unes sont indiquées dans la figure 2-26. 28
  • 29. LES MICROFILAMENTS Fugure 2-13 (c) L'emplacement de l'appareil de Golgi peut être clairement vu intact dans les cellules cultivées traitées par immunocytochimie en utilisant un anticorps contre golgin-97 pour montrer les nombreux complexes de vésicules de Golgi (vertes), tout près du noyau, sur un fond de micro filaments organisés en fibres de stress et colorés avec phalloïdine fluorescente (violet). En raison de l'abondance de lipides dans ses nombreuses membranes, l'appareil de Golgi est difficile à être visualisé dans un système inclus en paraffine, les sections colorées H & E. En développant des globules blancs avec des complexes de Golgi actifs, l'organite peut parfois être vu comme une zone juxta nucléaire faible non colorée (parfois appelée "Golgi fantôme") entouré de cytoplasme basophile 29
  • 30. LES MICROFILAMENTS a) Les filaments d'actine ou les micro filaments sont hélicoïdaux à deux brins polymères assemblés à partir de sous-unités globulaires d'actine. (b) L'assemblage des filaments d'actine (F-actine) est polarisé, avec les sous- unités G-actine ajoutées à l'extrémité plus (+) et enlevées au moins (-) à la fin. Même les filaments d'actine d'une longueur constante sont des structures hautement dynamiques, équilibrant l'assemblage G-actine et le démontage aux extrémités opposées, avec un mouvement net ou s'écouler le long du polymère connu sous le nom de foulage. 30
  • 31. LES MICROFILAMENTS II.2.Propriétés L’activité importante de ces protéines inclue les éléments suivants:  Séparation et / ou plafonnement de la fin de l'actine (par exemple, gelsoline, capZ)  Réticulation (par exemple, filamine) ou groupage (par exemple, fimbrin,α-actinine) filaments d'actine Liaison F-actine aux protéines membranaires et autres filaments du cytosquelette (par exemple, spectrine) 31
  • 32. LES MICROFILAMENTS II.2.Propriétés Tout comme les moteurs moléculaires kinésines et dynéine se déplacent le long des microtubules, divers moteurs à myosine utilisent l'ATP pour le transport de marchandises le long de F- actine. Le mouvement est habituellement vers l'extrémité barbelée (+) des filaments d'actine; la myosine VI est la seul myosine connue qui se déplace dans l'autre sens. Les interactions entre F-actine et les myosines forment la base de divers mouvements cellulaires: Transport de divers organites, vésicules et granules à travers la cellule (diffusion cytoplasmique) 32
  • 33. LES MICROFILAMENTS II.2.Propriétés  Anneaux contractiles de micro filaments et de myosine II qui se construisent pour produire deux cellules à la fin de la mitose (Cytokines)  Molécules associées à la membrane de la myosine I dont les mouvements le long des micro filaments sont importants dans les changements de surface cellulaire qui sous-tendent la phagocytose et pinocytose  Contraction du cytoplasme qui raccourcit les cellules ou rapidement rétracte les extensions cellulaires. Les réseaux stabilisés de filaments d'actine intégrés à des réseaux des filaments de myosine plus épais (16 nm) permettent des très énergiques contractions dans des cellules spécialisées telles que celles des muscles. 33
  • 34. LES MICROFILAMENTS Un grand nombre de protéines régulent l'assemblage des micro filaments et les interactions de ces filaments avec un autre. En modifiant la longueur des micro filaments et la réticulation, ces protéines influent grandement sur les propriétés physiques du cytoplasme local. 34
  • 35. Chapitre III: LES FILAMENTS INTERMEDIAIRES III.1. Déscription En plus des microtubules et des filaments d'actine, le cytosquelette comprend une classe de filaments de taille intermédiaire entre deux autres et avec un diamètre moyen de 10 nm (tableau 2-4). Les filaments intermédiaires sont beaucoup plus stables que les microtubules et les filaments d'actine. De plus, ces filaments sont composés de différentes sous-unités protéiques dans différents types des cellules. Plus d'une douzaine de classes de protéines hétérogènes, allant en taille de 40 à 230 kDa, formant des sous-unités des filaments ont été identifiés et localisés immunocytochimiquement. 35
  • 36. LES FILAMENTS INTERMEDIAIRES III.1. Déscription Comme indiqué dans le tableau 2-4, presque toutes ces sous-unités sont des dimères enroulés en forme de bâtonnets formant des tétramères antiparallèles, qui s'auto-assemblent en gros faisceaux ou protofibrilles semblables à des câbles stabilisé par d'autres interactions latérales.(Tableau 2-5) listes six classes de protéines de filaments intermédiaires formant des bâtonnets sous-unités, leurs tailles et les distributions de cellules, et les maladies qui résultent de leur perturbation. III.2. Propriétés Les protéines de filaments intermédiaires avec des propriétés biologiques particulières comprennent l'importance histologique ou pathologique suivants: 36
  • 37. LES FILAMENTS INTERMEDIAIRES III.2. Propriétés III.2.1 Les kératines Les kératines (Gr. Keras, klaxon) ou les cytokératines sont des diverses familles d'iso formes acides et basiques qui composent les sous-unités hétéro dimères des filaments intermédiaires dans tous les cellules épithéliales. Ils sont codés par plus de 30 gènes apparentés et produisent des filaments avec différentes propriétés chimiques et immunologiques pour diverses fonctions. Dans les cellules épidermiques, les cytokératines s'accumulent dans le processus de différenciation appelé kératinisation, qui se traduit par une couche externe de cellules de peau non vivantes et cela réduit la déshydratation. L'évolution des kératines a rendu possible la vie terrestre. 37
  • 38. LES FILAMENTS INTERMEDIAIRES III.2. Propriétés La kératinisation fournit aussi une certaine protection contre les abrasions mineures et produit diverses structures protectrices dures de la peau, telles que les ongles (ainsi que les plumes, les becs, les cornes et les écailles des reptiles). Les filaments intermédiaires de kératines forment de grands faisceaux qui s'attachent à certaines jonctions entre les cellules épithéliales (Figure 2-27). III.2.2 La vimentine La vimentine est l'intermédiaire de classe III la plus commune de protéine filamentaire et se trouve dans la plupart des cellules provenant de mésenchyme. Les protéines importantes comme la vimentine comprennent une desmine trouvé dans presque toutes les cellules musculaires et les fibres gliales de protéine acide (GFAP) trouvée surtout dans les astrocytes, pour soutenir les cellules du tissu du système nerveux central. 38
  • 39. LES FILAMENTS INTERMEDIAIRES III.2. Propriétés Les filaments d'une cellule cultivée sont montrés immunocytochimiquement (figure 1-12a). Les protéines de neurofilaments de trois tailles distinctes font des hétéros dimères formant les sous-unités majeures de filaments intermédiaires de neurones. III.2.3 Les lamines Les lamines sont une famille de sept iso formes présentes dans le noyau de la cellule, où ils forment un cadre structurel appelé la lame nucléaire juste à l'intérieur de l'enveloppe nucléaire. 39
  • 40. Tableau 2-5 Les principales classes et les représentants des protéines de filaments intermédiaires, leurs tailles et emplacements CLASSE PROTEINES TAILLE (kDa) DISTRIBUTIO N CELLULAIRE IMPLICATION DE LA MALADIE (si connue) I Acide cytokeratine 40-65 Cellules épithéliales Certains troubles de brûlure dela peau II Cytokératine de Base 51-68 Cellules épithéliales Kératodermie; dystrophie cornéenne III Desmine 53 Cellules musculaires Myopathies Synemine 190 Cellules musculaires GFAP 50 Astrocytes (moins dans les autres cellules gliales) Maladie Alexander Peripherine 57 Neurones 40
  • 41. Vimentine 54 Cellules mésenchymateus es IV NF-L 68 Neurones NF-M 110 Neurones NF-H 130 Neurones α-internexine 55 Neurones embryonnaires V Lamine 62-72 Noyaux de toutes les cellules Cardiomyopathie; dystrophies musculaires; progeria VI Nestines 230 Quelques cellules souches et embryonnaires 41
  • 42. LES FILAMENTS INTERMEDIAIRES Les filaments intermédiaires (FI) affichent un diamètre moyen de 8-10nm, entre celui des filaments d'actine et des microtubules, et pour fournir la résistance mécanique ou la stabilité aux cellules. Une grande classe importante de filaments intermédiaires est composée des sous-unités de kératine, qui sont proéminentes dans les cellules épithéliales. Les liasses des filaments de kératine appelés tonofibrilles sont associés à certaines classes de jonctions intercellulaires (J) communes dans les cellules épithéliales et sont facilement visibles avec le TEM, comme indiqué ici dans deux extensions dans une cellule épidermique liée à une cellule voisine. 60 000X 42
  • 43. LES FILAMENTS INTERMEDIAIRES Figure 1–12 Pour localiser des protéines spécifiques, les méthodes immunocytochimiques peuvent être appliquées à des préparations microscopiques ou TEM en utilisant une variété d'étiquettes. (a) Une seule cellule utérine en culture colorée par fluorescence peut révéler un réseau de filaments intermédiaires (vert) dans tout le cytoplasme. Les anticorps primaires contre la protéine des filaments de desmine et l'isothiocyanate de fluorescéine. Des anticorps secondaires marqués au FITC ont été utilisés dans les techniques de coloration avec le noyau contre- bleu avec DAPI. X650. 43
  • 44. III.3. APPLICATION MÉDICALE La présence d'un type spécifique de filament intermédiaire dans les tumeurs peut souvent révéler l'origine cellulaire de cette dernière, informations importantes pour le diagnostic et le traitement du cancer. L’identification des protéines de filaments intermédiaires au moyen de méthodes immunocytochimiques est une routine procédure. Un exemple est l'utilisation des fibres gliales de protéine acide (GFAP) pour identifier les astrocytomes, le type le plus commun de tumeur cérébrale. 44
  • 45. IV. CONCLUSION Le cytosquelette est composé de des éléments essentiels entre autre : Les microtubules qui sont constitués des tubulines et jouent un rôle dans le transport cellulaire, en arrêtant les systèmes membranaires internes ; les micro filaments constitués d’actine et jouent un rôle dans le mouvement cellulaire et la stabilisation de la membrane ; et les filaments intermédiaires qui sont faits de six protéines qui varient d'un type cellulaire à l'autre; il joue un rôle dans l’union des cellules associées à l'intérieur d’unités structurales. Ces six protéines sont : la cytokératines situées dans les cellules épithéliales, la desmine située dans les muscles (lisse et strie), la protéine fibrillaire gluante acide (GFAP) située dans les astrocytes, les neurofilaments situés dans les neurones, la lamine nucléaire située dans les noyaux de toutes les cellules et la vimentine qu’on trouve dans les nombreux tissus mésodermiques. 45
  • 46. Bibliographie Stevens,A .et James,L. (2002) Histologie humaine , 2è𝑚𝑒 ed, Mostby, Département De Boek University. Bruxelles. Page 23 Anthony L. MESCHER, (2013) Junqueira’s Basic hitology, 13è 𝑚𝑒 ed, McGraw-Hill Education. Page 55-63 Jacques Quevauvilliers, (28 juin 2011) Dictionnaire Médical, 6ème ed, Elsevier Masson. Page 250 46

Notes de l'éditeur

  1. G-actine globulaire (42 kDa)