CAT devant une Thrombose veineuse superficielle .pptx
PRF : Revue de la littérature
1. Staff du service de pathologie et de chirurgie buccales
CHU BENI-MESSOUS
Présenté par :
Harfouche. L, Chettouf. M, Benamara. S, Houali. Y, Benghrib. H,
Benzerouk. S
Jeudi 27/06/2019
Le fibrine riche en plaquettes (PRF) :
revue de la littérature
2. 2
plan
1- Introduction
2- Problématique
3- Historique
4- Les concentrés plaquettaires
5- Cicatrisation et facteurs de croissance
6- Indications et contre indications
7- Protocole de production des concentrés plaquettaires
8- Critères influençant l’architecture PRF
9- Conclusion
3. Près de deux décennies se sont écoulées depuis que la fibrine riche en
plaquettes (PRF) a été introduite. Depuis sa première publication en
2001, ce n’est qu’à partir de 2012- 2014 que ce matériau « à parler de
lui même ».
Il est à souligné que cette méthode de régénération relativement
«nouvelle» a remplacé diverses procédés cliniques en dentisterie.
De nos jours, plus de 500 articles scientifiques évaluant son utilisation
in vitro, in vivo et cliniquement ont documenté son potentiel
régénérateur pour la réparation des tissus mous ou durs de la cavité
orale.
Introduction
4. Certains biomatériaux ont été essentiellement remplacés par
cette modalité totalement naturelle pour régénérer les tissus à
un coût relativement faible.
Malgré cela, de nouveaux protocoles chirurgicaux ont été établis
et modifiés davantage le potentiel biologique du PRF.
L’objectif de ce travail est de mettre le point sur ce produit
« qui fait tant parler de lui » en chirurgie orale à travers une
revue de la littérature.
Introduction
6. Historique
Colle de fibrine
amélioration de la
cicatrisation
PRF
Cp
Promouvoir la
guérison
CGF Os collant A-PRF i-PRF
PRP
Concentré de
thrombocytes
1954
KINGSLEY
1970
MATRAS
1986
KINGHTON et al.
2001
CHOUKROUN et al.
2010
SOHN
2014
CHOUKROUN
2015
MOURAO et AL
Amit Arvind Agrawal, Evolution, current status and advances in application of platelet concentrate in periodontics and implantology,
World Journal of Clinical Cases, 2017.
2006
SACCO
7. Les concentrés plaquettaires
Additifs chirurgicaux bioactifs appliqués localement pour induire la
cicatrisation des plaies.
Deux générations de CP:
1ère génération: PRP
2ère génération: - PRF
- CGF
8. 1ère
génération
PRP
2ème
génération
PRF & CGF
Sang autologue
Plaquettes
Réseau de fibrine
Facteurs de croissance
Stimulation de la cicatrisation
Facteurs de
croissance en
fortes
concentrations
Matrice de
fibrine+
facteurs de
croissance
Les concentrés plaquettaires
9. Classification des concentrés plaquettaires
P-PRP
Préparation sans leucocytes;
Réseau de fibrine à faible densité.
L-PRP
Préparation à base de leucocytes ;
Réseau de fibrine à faible densité.
P-PRF
Préparation sans leucocytes ;
Réseau de fibrine à haute densité.
L-PRF
Préparation à base de leucocytes ;
Réseau de fibrine à haute densité.
NEIL BAKSHI et al, Growth Factors, Biologics in Orthopaedic Surgery. 2019.
Dohan Ehrenfest et al. 2009
10. Qu’est-ce que la fibrine?
• Forme activée du fibrinogène;
• Le fibrinogène est fait de six chaînes polypeptidiques;
• la fibrine peut changer de structure;
• La structure de fibrine affecte sa fonction biologique.
Un peu de biologie…
11. Un peu de biologie…
Fibrine et hémostase
Colmatage d’une brèche vasculaire à l’aide
d’un lit de fibrine.
Hémostase
12. Un peu de biologie…
Fibrine et cicatrisation
Caillot de
fibrine
Fibro-
blastes
CI CE
Tissu
conjonctif
mature
Tissu de
granulation
13. Dans une matrice tridimensionnelle de fibrine, des structures tubulaires
de type capillaire sont visibles dès le 2ème jour.
Une dégradation progressive de réseau de fibrine accompagne sa
colonisation par les cellules endothéliales.
Un peu de biologie…
Fibrine et angiogenèse
14. Les facteurs de croissance
peptides de petites tailles dont la fonction première est la
communication intercellulaire.
Présent en grande quantité dans le PRF.
Les plaquettes relarguent environ 300 types de facteurs de croissances.
initient les premières phases de la cicatrisation : néo-angiogenèse et
stimulation cellulaire.
Dohan et al «platelet-rich fibrin (PRF): a second-generation platelet concentrate. Part II: platelet related biologic features,
14
Cicatrisation et facteurs de croissance
15. Principaux facteurs de croissance
Uppada UK. Combination of Bio-Gen mix ® , platelet-rich fibrin and amnion membrane as a novel therapeutic option in regenerative periapical endodontic surgery:
A case series. Int J Case Report. 2017;37:139-144
16. Mécanismes d’action des facteurs de croissance
Fernandes G. Application of platelet-rich plasma with stem cells in boneand periodontal tissue engineering. Bone Research. 2016; 4: 16036
18. Contres indications
Absolues
• Syndrome de dysfonction plaquettaire
• Thrombocytopénie critique
• Instabilité hémodynamique
• Septicémie
• Infection locale sur le site de la procédure
• Patient n’acceptant pas les risques
Role of Platelet-rich Plasma: The Current Trend and Evidence Kailash Kothari Department of Pain Management, Pain Clinic of India Pvt. Ltd. and KEM Hospital,
Mumbai, India. 2017
19. Relatives
• Utilisation systématique d’AINS dans les 48h suivant
l’intervention
• Utilisation systémique de corticostéroide
• Usage du tabac
• Cancer notamment hématopoiétique ou osseux
• Fièvre récente
• Hémoglobine < 10g/dl
• NP <105
Contres indications
Role of Platelet-rich Plasma: The Current Trend and Evidence Kailash Kothari Department of Pain Management, Pain Clinic of India Pvt. Ltd. and KEM Hospital,
Mumbai, India. 2017
20. Chirurgie maxillofaciale
Chirurgie orthopédique: traitement des tendinopathies,
arthrose.
Chirurgie esthétique : rides superficielles, cicatrices d’acné,
alopécie.
ORL: tympanoplasties: support de greffe.
comblement des perforations
biomatériau de recouvrement d’une plaie de l’oreille externe,
Neurochirurgie
Applications de PRF en médecine générales
Platelet -rich fibrin -second generation platelet concentrate; and its clinical applications – a literature review
Dr. Saraswathi Gopal , K. and Dr. Padma, M. International Journal of Current Research Vol. 9, Issue, 01, pp.44778-44783, January, 2017
21. Dermatologie : syndrome de lyell: le PRF est utilisé pour
régénérer la nécrose cutanée provoquée par le syndrome de Lyell
Applications du PRF en médecine générales
Platelet Rich Fibrinin Regenerative Dentistry, Biological Background and Clinical Indications RichardJ.Miron and JosephChoukroun,MD
,
J 10 J 30
22. Endocrinologie: ulcères du pied chez le diabétique
• Les membranes sont utilisés comme pansement sur les plaies
cutanées ulcérées,
Applications du PRF en médecine générales
Platelet Rich Fibrinin Regenerative Dentistry, Biological Background and Clinical Indications RichardJ.Miron and JosephChoukroun,MD
J 30
23. En parodontie
Des défauts intra_osseux
Récessions parodontales
RTG
Améliorer la cicatrisation palatine
après une greffe libre conjonctive
Applications du PRF en chirurgie orale
En Endodontie
Traitement des apex
ouverts
Régénération pulpo-
dentinaire
En combinaison avec le
MTA dans le cas
d’apexification
Combler les défauts intra-
osseux après une chirurgie
endodontique
24.
25. En chirurgie orale
Comme matériau de comblement après une extraction ou
pour des défauts osseux
Augmentation du volume osseux lors d’un sinus lift
Blessures nerveuses: latéralisations du nerf alvéolaire
Lésions kystiques
Réimplantation dentaire
Péri-implantites
Prévention des complications hémorragiques après une
extraction chez des patients sous anticoagulants
Meilleure manipulation des greffes osseuses en association
avec le bio oss ou l’os autologue,
Traitement d’une communication buco-sinusienne CBS
Utilisation clinique du PRF en chirurgie orale
29. Concept général de production de cPRP
Dohan S, Dohan A, Choukroun J, Diss A, Simonpieri A, Girard MO, et al. De l’usage des concentrés plaquettaires autologues en application topique. EMC –
Odontologie. 2005 ; 1 (2) : 141-180
29
30. Concept général de production de cPRP
Dohan S, Dohan A, Choukroun J, Diss A, Simonpieri A, Girard MO, et al. De l’usage des concentrés plaquettaires autologues en application topique. EMC –
Odontologie. 2005 ; 1 (2) : 141-180
30
31. Protocoles Curasan et Friadent-Schutze
Une première centrifugation à 2400 tours/ min pendant 10 minutes (400 g selon Dohan)
Une seconde centrifugation à 3600 tours / min pendant 15 minutes (600 g selon Dohan)
31Dohan S, Dohan A, Choukroun J, Diss A, Simonpieri A, Girard MO, et al. De l’usage des concentrés plaquettaires autologues en application topique. EMC –
Odontologie. 2005 ; 1 (2) : 141-180
Concept général de production de cPRP
33. Les tubes sont immédiatement placés dans une centrifugeuse Medifuge
MF200 (Silfradent, Sofia, Italie), avec une centrifugation pdt 13 min :
Une accélération de 30’’
500 g (2700 rpm) pendant 2 min
400 g (2400 rpm) pendant 4 min
500 g (2700 rpm)pendant 4 min
600 g (3000 rpm) pendant 3 min
36’’ de décélération et arrêt
33
Concept général de production de CGF
Niyasri & al. Role of CGF in periodental regeneration. Journal of dental health, oral disorders and therapy. 2018 ; 9 (5)
34. 34
Niyasri & al. Role of CGF in periodental regeneration. Journal of dental health, oral disorders and therapy. 2018 ; 9 (5)
40. Mise à jour des protocoles de
préparation de PRF (2017)
40
Protocole du PRF (Temps de centrifugation)
Shah R & al. An Update on the Protocols and Biologic Actions of Platelet Rich Fibrin in Dentistry. European Journal Prosthodont Restor Dent. 2017; 25 (2): 64-72
42. Architecture de la membrane PRF
Couche leucocytaire
Culot d’hématies
Matrice de fibrine
Dohan Ehrenfest DM et al. Three-dimensional architecture and cell composition of a Choukroun’s platelet-rich fibrin clot and membrane. J periodontal. 2010 ; 81 :
546-555.
42
44. La moitié des leucocytes et la quasi-totalité des plaquettes sont piégés dans
le caillot de PRF
44
45. Les lymphocytes sont plus susceptibles d’être piégés dans la matrice de PRF
que les autres leucocytes qui ont tendance a être éliminer dans la base
résiduelle
45
47. Miron RJ, Dham A, Dham U, Zhang Y, Pikos MA, Sculean A. The effect of age, gender, and time between blood draw and start of centrifugation on the size outcomes
of platelet-rich fibrin (PRF) membranes. Clinical Oral Investigations. 2019: 23 (5) : 2179-2185.
47
Le Temps (prise de sang – centrifugation)
50. Résultats :
Temps :
Une réduction significative de la taille de la membrane PRF de 13
%, si > 90’’
Une réduction significative de la taille de la membrane PRF de 23
%, si > 120’’
Sexe :
Les femmes avaient en moyenne une membrane PRF 17 % plus
grande (P < 0.05)
Âge :
(61 – 80) > (41- 60) > (21 – 40) (P > 5%)
50
51. Dohan Ehrenfest et al. Slow release of growth factors and thrombospondin-1 in Choukroun’s plateletrich fibrin (PRF): a gold standard to achieve for all surgical
platelet concentrates technologies. 2016
TO 10’ 20’ 30’
Après 10’
Augmentation
de la partie
acellulaire
10 minutes
51
Le Temps (centrifugation - utilisation)
54. 54
La centrifugeuse
Dohan Ehrenfest et al. The impact of the centrifuge characteristics and centrifugation protocols on the cells, growth factors, and fibrin architecture of a leukocyte-
and platelet-rich fibrin (L-PRF) clot and membrane. Platelets. 2018;29(2):171-184
55. 55
La centrifugeuse
Dohan Ehrenfest et al. The impact of the centrifuge characteristics and centrifugation protocols on the cells, growth factors, and fibrin architecture of a leukocyte-
and platelet-rich fibrin (L-PRF) clot and membrane. Platelets. 2018;29(2):171-184
56. 56
La centrifugeuse
Dohan Ehrenfest et al. The impact of the centrifuge characteristics and centrifugation protocols on the cells, growth factors, and fibrin architecture of a leukocyte-
and platelet-rich fibrin (L-PRF) clot and membrane. Platelets. 2018;29(2):171-184
57. 57
La Force Centrifuge Relative
Les protocoles de centrifugation spécifient la quantité d’accélération à
appliquer à l’échantillon, plutôt que de spécifier une vitesse de rotation telle
que le nombre de tours par minute.
59. Miron R, Choukroun J, Ghanaati S. Controversies related to scientific report describing g-forces from studies on platelet-rich fibrin: Necessity for standardization of
relative centrifugal force values. Int J Growth Factors Stem Cells Dent 2018;1:80-9
59
La Force Centrifuge Relative
60. Miron R, Choukroun J, Ghanaati S. Controversies related to scientific report describing g-forces from studies on platelet-rich fibrin: Necessity for standardization of
relative centrifugal force values. Int J Growth Factors Stem Cells Dent 2018;1:80-9
60
La Force Centrifuge Relative
61. 61Dohan Ehrenfest et al. The impact of the centrifuge characteristics and centrifugation protocols on the cells, growth factors, and fibrin architecture of a leukocyte-
and platelet-rich fibrin (L-PRF) clot and membrane. Platelets. 2018;29(2):171-184
La Force Centrifuge Relative
2700 rpm
650 g
2400 rpm
650 g
2300 rpm
650 g
3400 rpm
> 650 g
65. 65
RCF (Intra Spin)= 1.118 x 10-6 X 80 x 27002
RCF = 1.118 x 10-6 X r x N2
RCF (Intra Spin)= 650 g
RCF (Rotofix 32)= 650 = 1.118 x 10-6 X 121 x N2
N2 (Rotofix 32)= 650/ 1.118 x 10-6 X 121
N(Rotofix 32) = 2200 rpm
RCF (Rotofix 32)= 1.118 x 10-6 X 121 x 27002
RCF (Rotofix 32)= 986 g
N (Intra Spin)= 3320 rpm
La Force Centrifuge Relative
67. 67
Micrographies obtained by SEM of the fragments of fibrin
membrane rich in platelets and leukocytes.
(A) Upper fragment, region #3
(B) Medial fragment, region #2
(C) Lower fragment, or region #1
68. Miron R, Choukroun J, Ghanaati S. Controversies related to scientific report describing g-forces from studies on platelet-rich fibrin: Necessity for standardization of
relative centrifugal force values. Int J Growth Factors Stem Cells Dent 2018;1:80-9
Concept de centrifugation basse vitesse (LSCC)
68
69. L-PRF Vs A-PRF
69Dohan Ehrenfest et al. The impact of the centrifuge characteristics and centrifugation protocols on the cells, growth factors, and fibrin architecture of a leukocyte-
and platelet-rich fibrin (L-PRF) clot and membrane. Platelets. 2018;29(2):171-184
A-PRF
1500 rpm
14 min
70. 70
RCF (Intra Spin)= 1.118 x 10-6 X 80 x 13002
RCF (Intra Spin)= 150 g
RCF (Rotofix 32)= 150 = 1.118 x 10-6 X 121 x N2
N2 (Rotofix 32)= 150/ 1.118 x 10-6 X 121
N(Rotofix 32) = 1050 rpm
RCF (Intra Spin)= 1.118 x 10-6 X 80 x 7002
RCF (Intra Spin)= 43.8 g
RCF (Rotofix 32)= 43.8 = 1.118 x 10-6 X 121 x N2
N2 (Rotofix 32)= 43.8/ 1.118 x 10-6 X 121
N(Rotofix 32) = 570 rpm
A-PRF I-PRF
71. 71
Résumé du protocole PRF
1- Prélèvement de sang veineux dans un tube de 10 ml sec (rouge)
2- Centrifugation immédiate ( ne pas dépasser 90 ‘’) :
o L-PRF : 2700 rpm pdt 12 min (650 g) 2200 rpm (Rotofix 32)
o A-PRF : 1300 rpm pdt 8 min ( 150 g) 1050 rpm (Rotofix 32)
o I-PRF : 700 rpm pdt 3 min (43,8 g) 570 rpm (Rotofix 32)
3- Utilisation de la membrane PRF dans les 10 min
73. Une revue systématique :
Est la synthèse rigoureuse et reproductible des résultats de
toutes les études originales existantes répondant à une même
question de recherche.
Une méta-analyse :
Est la synthèse statistique des études incluses dans la revue
systématique.
73
78. 16 Septembre 2017
Matériels et méthodes
Chirurgie de la 3e molaire mandibulaire
Procédure sinus lift
Préservation des crêtes alvéolaires
Implants dentaires et reconstitution des alvéoles déshabitées
78
79. Douleur
Œdème
Cicatrisation
osseuse
(09) articles dont (06) ont montré
une effet favorable de PRF à
réduire la douleur post-op
(06) articles ont été dont (03)
ont montré un effet favorable de
PRF pour réduire l'œdème
(04) études ont montré que la PRF
était nettement meilleure pour
favoriser la régénération osseuse
Chirurgie de la 3e molaire mandibulaire
79
83. Cicatrisation osseuse après avulsion 3e molaire:
radiographie
Hétérogénéité méthodologique:
pas de méta-analyse pour ces études
83
84. Cicatrisation osseuse par scintigraphie: aucune différence
d'activité ostéoblastique lorsque le PRF était utilisé ou non
Cicatrisation osseuse après avulsion 3e molaire: scintigraphie
84
85. ≠ significative nouvelles formations osseuses
lorsque PRF était ajouté ou non à un substitut
osseux
Sinus Lift
85
86. Effet positif après avoir comparé le PRF (seul ou combiné à un matériau de greffe)
Préservation de la crête alvéolaire
N.B. le groupe PRF a démontré une supériorité en maintenant la largeur de l’os 86
87. Deux articles ont évalué l'effet du PRF sur la résorption osseuse
marginale péri-implantaire
Ont confirmé le bienfait de l’effet du PRF dans la réduction de la
résorption osseuse péri-implantaire après extraction dentaire
avec mise en place immédiate de l'implant chez les patients
partiellement édentés
Implants dentaires
Pas une méta-
analyse
hétérogénéité
méthodologique
87
88. Utilisation de PRF augmente la stabilité de l'implant pdt la période de guérison initiale
1 mois
1 semaine
PRF sur la stabilité de l'implant
88
89. Points forts
Préserve les alvéolaires après les extractions dentaires
Réduire l’incidence des alvéolites sèches après avulsion chirurgicales
de la troisième molaire mandibulaire
Biomatériau prometteur pour réduire la résorption osseuse marginale
péri-implantaire
Augmentation du sinus n'a montré aucun avantage ds la formation de
nouvel os , mais le temps de guérison pourrait être réduit lorsque la
PRF est ajoutée
89
91. L’objectif principal
Evaluer si l'utilisation des CP (PRP, PRF, PRGF = plasma rich in growth factor)
chez les patients sous TRT antirésorptif peut améliorer le succès du trt
chirurgical de OCNM.
Les objectifs secondaires
Evaluer les bénéfices des CP :
amélioration de la guérison des os et des tissus mous au site chirurgical
réduction de l'incidence de OCNM ainsi que toute autre complication post-
chirurgicale et les effets secondaires après une chirurgie dentoalvéolaire
amélioration de la qualité de vie des patients (en réduisant la douleur, l’œdème
et d’autres symptômes ) au cours de la période postopératoire
91
93. Effet des concentrés autologues de plaquettes après une ostéonécrose de
la mâchoire chez les patients soumis à des médicaments anti-résorptifs
93
94. Effet des concentrés autologues de plaquettes après une extraction
dentaire chez les patients soumis à des médicaments anti-résorptifs
94
95. Effet bénéfique des concentrés de plaquettes autologues
dans prévention de l'ostéonécrose de la mâchoire liée aux
médicaments
Effet bénéfique des concentrés de plaquettes autologues dans
le traitement de l'ostéonécrose de la mâchoire liée aux
médicaments
A retenir :
95
96. les concentrés de plaquettes
pourraient être bénéfiques
pour réduire l'apparition et la
récurrence post-chirurgicale
OCNM
+
autres effets indésirables chez
des patients sous trt anti-
résorption.
Des études basées sur
des preuves+++
large échantillon
permettront de confirmer
ces résultats
à l'avenir
96
98. Révision de la terminologie du PRF
Activité commerciale des analogues de PRF et dérivés, CGF
développé par Sacco prend une part importante dans le marché au
Japon.
Le distributeur du la centrifugeuse Medifuge (spécifiée pour
la préparation CGF) recommande que les cliniciens utilisent le
terme «CGF : concentré de facteurs de croissance».
98
99. Normalisation des forces centrifuges relatives
dans les études concernant le PRF
1) Dimensions du rotor (rayon au niveau du caillot et de l'extrémité du tube)
2) Angulation du rotor pour le support de tube
3) Tours par minute (RPM) et le temps
4) Valeur de RCF calculée soit au RCF-max
5) Composition et taille des tubes utilisés pour produire du PRF
6) Modèle de centrifugeuse utilisé
Miron.R, Choukroun.J , Ghanaati.Sh. Controversies Related to Scientific Report Describing G-Forces from Studies on
Platelet-Rich Fibrin: Necessity for Standardization of Relative Centrifugal Force Values. International Journal of Growth Factors
and Stem Cells in Dentistry.2018
99
100. Concentré de plaquettes liquide en
dentisterie régénérative
i-PRF a démontré la capacité de libérer plus concentration de divers
facteurs de croissance et induit une augmentation de migration des
fibroblastes et expression de PDGF, TGF-β, et collagène.
La recherche future sur les animaux est maintenant nécessaire pour
valider l’utilisation de i-PRF en tant qu’agent bioactif capable de
stimuler
la régénération tissulaire osseuse en dentisterie.
Miron. R J, Fujioka-Kobayashi.M, Hernandez.M, U Kandalam,Y Zhang,Sh Ghanaati,J Choukroun. Injectable platelet
rich fibrin (i-PRF): opportunities in regenerative dentistry?. Clin Oral Invest.2017
100
101. Conclusion
l’intérêt croissant des cliniciens et des chercheurs du monde
entier sur les applications cliniques du PRF en chirurgie orale
ces dernières années.
Il a démontré un potentiel régénérateur avec absence de
complication liée à son utilisation .
L’amélioration de la cicatrisation avec ce matériau est une
voie de recherche intéressante pour traiter les patients.
Deux voies d’activation de la coagulation : la voie extrinsèque et la voie intrinsèque dont la voie finale commune correspond à l’activation du facteur X. Ce facteur s’intégrera dans un complexe appelé prothrombinase qui protéolyse la prothrombine en thrombine. Et la thrombine clive alors le fibrinogène soluble en monomère de fibrine permettant l’initiation de la polymérisation du gel de fibrine.
La centrifugation active les plaquettes, qui vont relarguées les facteurs de croissances contenues dans leurs granules alpha (les plaquettes contiennent trois types de granules : alpha, denses et lysosomes).
Les plaquettes relarguent environ 300 types de facteurs de croissances, les plus intéressants et qui ont été étudiés sont :
- VEGF (facteur de croissance de l’endothélium vasculaire) ; qui va agir sur les cellules vasculaires pour accroitre la vascularisation
IGF (facteur de croissance homologue de l’insuline); qui va agir sur les cellule mésenchymateuses et induire leur différentiation en cartilage et matrice de formation osseuse
TGF B (facteur de croissance transformant B) et le PDGF (facteur de croissance dérivé des plaquettes) qui vont accroitre la prolifération et le chimiotactisme des cellules mésenchymateuses
Ces derniers se transforment en ostéoblastes sous l’effet du BMP (protéine morphogénique osseuse) qui elle est sécrété par les leucocytes
Comment fonctionne un facteur de croissance ?
Généralement les récepteurs des facteurs de croissances impliqués dans la cicatrisation alvéolaire et muqueuse sont des récepteurs protéine kinase
Une protéine kinase est une enzyme qui va induire l’activation d’autres enzymes ou protéines par phosphorylation en ajoutant un groupement phosphate a celle qui vient en amant a partir d’un ATP.
Donc dès que le récepteur reçoit son ligand (GF), il va activer une autre protéine (enzyme) intracellulaire par phosphorylation, celle-ci activera a son tour une autre enzyme par phosphorylation et ainsi de suite jusqu’au dernier maillon de la chaine.
Remarque : il existe deux grands types de protéines kinase (tyrosine kinase, serine/thréonine kinase). C’est-à-dire que la phosphorylation (ajout du groupement phosphate) se fait soit sur l’acide aminé tyrosine ou la sérine/thréonine.
Le dernier maillon (enzyme) subira une translocation nucléaire (passage nucléaire) et activera des facteur de transcription dans le noyau qui seront responsable de la transcription des gènes reponsables de la prolifération, survie et différentiation cellulaire.
Dans de tels cas, l’antibiothérapie n’est pas toujours efficace,
Infection: problème secondaire à un déficit en sang,l’idée était d’introduire des doses supra physiologiques de facteurs de croissance a laide du prf,
Les plaies initialement recouvertes de PRF ont commencé à cicatriser en 10 jours ,
En 30 jours, de grandes améliorations cliniques pouvaient être observées en utilisant uniquement le PRF
Amputation d’un pied diabétique avec une infection après 15 jours,
Des caillots de prf sont appliqués
Guérison
1/ Le sang veineux est prélevé sous anticoagulant CPDA (citrate, phosphate, dextrose, adénosine) ou ACD-A (citrate-dextrose-adenosine acide). L’utilisation d’EDTA (ethylene diamine tetraacetic acid) est à éviter car cet anticoagulant fragmente les plaquettes. Le prélèvement sous anticoagulant permet d’éviter l’activation et la dégranulation plaquettaires. Une première centrifugation (soft spin) permet la séparation du sang en trois strates distinctes :
• au fond du tube, un culot d’hématies et de leucocytes, qui occupe 55 % du volume total ; • en surface, un plasma acellulaire, principalement constitué de molécules plasmatiques circulantes (en particulier le fibrinogène) et pauvre en plaquettes, dénommé platelet-poor plasma (PPP) ou plasma pauvre en plaquettes ; il occupe 40 % du volume total ;
• entre les deux, une strate où les concentrations en plaquettes (et en fibrinogène) sont largement accrues ; elle ne fait que 5 % du volume total et son aspect blanchâtre caractéristique l’a fait appeler buffy coat (manteau blanchâ- tre) ; c’est elle qui composera la majeure partie du futur cPRP mais à ce stade, elle est encore difficilement séparable de façon scientifique des autres strates, bien que quelques auteurs se soient attelés à prouver le contraire en allant la recueillir « à vue d’œil », à l’aide d’une seringue ; Anitua a ainsi réussi à décrire et à nommer quatre strates distinctes au sein de la fraction plasmatique obtenue après cette première centrifugation ; mais une telle manœuvre demeure très empirique.
2/ À l’aide d’une seringue stérile, on aspire le PPP, le PRP et un peu d’hématies (attirées de manière malencontreuse et systématique au cours de la manœuvre). Puis l’ensemble est transféré dans un autre tube, sans anticoagulant. Ce second tube subit à son tour une centrifugation, décrite comme devant être plus longue et plus rapide que la précédente (hard spin). Elle permet de faire sédimenter les plaquettes au fond du tube, de manière à obtenir à nouveau trois strates distinctes : • quelques hématies résiduelles piégées au fond du tube ; • une masse de plasma acellulaire (PPP) occupant 80 % du volume total ; • entre les deux, une couche blanchâtre, le cPRP.À ce stade, il devient aisé de recueillir le cPRP. Avec une seringue, on se débarrasse de la majeure partie du PPP, de manière à n’en laisser que le strict nécessaire à la remise en suspension des plaquettes concentrées. Puis on agite l’ensemble et l’on obtient un cPRP en suspension prêt à l’emploi.À noter que les hématies piégées au fond du tube sont, elles aussi, remises en suspension par cette dernière manœuvre, ce qui explique l’aspect rosé du cPRP final.
Il ne reste plus qu’à mélanger le cPRP avec de la thrombine bovine et du chlorure de calcium au moment de l’application grâce à une seringue d’automélange. Cette dernière étape permet la gélification du concentré plaquettaire par la polymérisation du fibrinogène (concentré également au cours de la préparation du cPRP) qui constitue une trame de fibrine aux propriétés hémostatiques et adhésives particulièrement intéressantes dans le cadre de nombreuses chirurgies.
C’est ainsi que tous les protocoles couramment utilisés pour obtenir du cPRP s’appliquent à maintenir des forces comprises entre 160 g et 800 g lors de la première centrifugation. À 400 g, le pourcentage d’activation des plaquettes est de l’ordre de 5 % seulement, contre entre 40 et 70 % à 3 000 g.
Au total, 60 patients inclus dans cette étude ont été divisés en 6 groupes de 10 patients, comprenant des hommes et des femmes classés dans les groupes d'âge 21–40, 41–60 et 61–80 ans. À partir de chaque patient, cinq membranes de PRF au total ont été fabriquées à partir de tubes de 10 ml après centrifugation commençant après 0, 30, 60, 90 et 120 s. Au total, 300 membranes de PRF ont été produites dans cette étude pour étudier les effets de l'âge, du sexe et du temps du patient sur les résultats de taille des membranes de PRF.
Un délai plus long du clinicien avant de commencer la centrifugation après le prélèvement de sang a conduit à une taille finale plus petite des membranes de PRF. 90 secondes après le prélèvement de sang, une réduction significative (13%) de la taille de la membrane de PRF a été observée. Après 120 s, une réduction significative (23%) a été observée. De plus, les patients de sexe féminin avaient en moyenne 17% de membranes plus grandes que les hommes ( p <0,05, 300 échantillons). Enfin, les résultats de taille des membranes de PRF étaient les plus importants chez les patients âgés de 61 à 80 ans, suivis de ceux âgés de 41 à 60 ans et de 21 à 40 ans. Cependant, aucune différence statistiquement significative dans les tailles de membrane de PRF n'a été rapportée entre les groupes d'âge.
En ce qui concerne la cinétique de libération de ces molécules, elle est lente et spécifique àchacune :- TGF-1, PDGF–AB, et TSP-1 sont libérées rapidement les premières 24 heures, puis tout au long des 7 jours de manière plus lente, constante et significative.- VEGF se différencie des autres par une libération très forte dès les 4 premières heures pour ensuite ralentir, tout en restant constante et significative.
Selon l’auteur :
Au dessus de 1m/S2 de vibration, la centrifugeuse présente un risque significatif de résonnance au niveau des tubes et y abime les cellules présentes.
Seule (l’Intra-spin L- PRF centrifuge) est en dessous de ce seuil.
Elle est la seule sur le marché agréé CE et FDA.
Pinto a utiliser une RPM de 2700 /12 min (IntraSpin de chez Intralock)
Choukroun et Dohan RPM / 10 min (PC-O2 de chez Process for PRF)
Low speed centrifugation concept
Comme indiqué précédemment, une augmentation du temps et de la vitesse de centrifugation a pour effet d'augmenter la taille du caillot de PRF et de réduire le contenu en cellules et en facteurs de croissance. Ce concept a été introduit en 2014 sous le nom de LSCC et constitue depuis la base de nombreuses études démontrant l'effet positif de la réduction des vitesses de centrifugation sur les échafaudages à base de PRF.
Etude de Doha 2014 :
L’analyse au MEB montre
L-PRF présente des mailles de fibrines plus polymérisées et une quantité de cellules viables considérables.
A-PRF ne présentent aucune cellule viable, elles apparaissent tous détruites et déformées.
L’auteur et son équipe ont comparé également la libération en facteur de croissance du L-PRF Vs A-PRF en quantifiant la libération de 4 molécules : TGFB, PDGF-AB, VEGF, BMP-2.
La libération des quartes est significativement supérieures pour le L-PRF.
L-PRF se dissout en plus d’une semaine, A-PRF se dissout complétement en moins de 3 jours
BMP-2 n’a pas été détecté dans le A-PRF