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AUTHENTIFICATION ET SÉCURITÉ DES PRODUITS
M. Yvon Gervaise
Expert de justice
Directeur SGS Multilab Rouen
Secur’Food – 14 octobre 2014
A NOUVELLES PRÉOCCUPATIONS, NOUVELLES APPROCHES
INNOVATIONS AU LABORATOIRE D’ANALYSES DE CONTRÔLES
ET D’EXPERTISES
65 rue Ettore Bugatti - BP 90014
76801 Saint Etienne du Rouvray
t 02 35 07 91 80 f 02 35 07 91 25
2
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NOUVELLES PRÉOCCUPATIONS EN RÉPONSE
AUX NOUVELLES EXIGENCES
Sûr
Conforme aux étiquetages
Conforme à la sécurité et aux
attentes consommateurs
Authenticité
Qualité SécuritéIntégrité
produit
alimentaire
3
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Authenticité -> l’authentification consiste à user d’outils
aptes à rendre un produit authentique aux yeux du
consommateur
Indication sur les produits, marque régionale (produits
locaux)
Multiplication des indications : naturel, tradition
Authentification via la communication : un message peut
véhiculer que la marchandise serait authentique
Evaluer l’efficacité de l’authentification
Préoccupations actuelles de sécurité, de qualité
Le débat sur le nouvel étiquetage nutritionnel
Authentification perçue – authentification prouvée
NOUVELLES PRÉOCCUPATIONS, TENDANCE :
L’AUTHENTICITÉ
4
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QUELLES NOUVELLES PRÉOCCUPATIONS
DANS LA FILIÈRE VÉGÉTALE ?
Origine
AOC? OGM?
Contaminants
chimiques?
Métaux
lourds?
Nouvel
ingrédient ?
Adjonction
d’eau au
produit?
Dioxines
PCB?
Présence de
pesticides?
L’emballage
est-il adapté?
Pays de
provenance?
5
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QUELLES NOUVELLES PRÉOCCUPATIONS
DANS LA FILIÈRE CARNÉE ET AQUATIQUE?
AOC?
OGM?
Contaminants
chimiques?
Mode
d’élevage?
Métaux
lourds?
Quelle
espèce
animale?
Dioxines
PCB?
Présence de
pesticides, de
bactéries?
Présence de
résidus
médicamenteux ?
Pays de
provenance?
Adjonction
d’eau au
produit?
Perturbateurs
endocriniens?
6
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NOUVELLES PRÉOCCUPATIONS
L.A.A.F (Loi Avenir Agriculture et Forêt)
Principe de mise en transparence des résultats de contrôle
Appui sur des organismes délégataires
Meilleure utilisation des phytosanitaires, antibiotiques
Qualité/Sécurité/Authenticité
Préserver l’authenticité initiative Food Integrity
• INCO DG SANCO (DG de la santé et de la protection du
consommateur) 1169/2011
• Indication origine pour les produits carnés (ex. : 1337/2013)
• Etiquetage nutritionnel : qui lit et comment
GFSI : Global Food Safety Initiative
7
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NOUVELLES PRÉOCCUPATIONS, NOUVELLES
APPROCHES :
LE CONTRÔLE NOUVEAU EST ARRIVÉ ?
Tirer les conséquences de la modernisation des moyens
de contrôle
Authenticité perçue – Authenticité prouvée
Décret 2014-1109 du 30 septembre publié le 20 octobre
Nouveaux pouvoirs de la DGCCRF
Performance et innovation méthodologique des analyses
de laboratoire
Capacité à apporter rapidement des réponses fiables et
pertinentes à la demande client
Innovation analytique du laboratoire Valeur ajoutée pour le
client
8
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DE NOUVELLES PRÉOCCUPATIONS À
NOUVELLES APPROCHES ANALYTIQUES
Quels étaient les verrous de l’analyse ?
Extraction des composés ou molécules d’intérêt
• Choix des techniques
• Effet des matrices
• Dispositif de prétraitement échantillon
Caractérisation et quantification
• Coût
• Mono-paramètre
• Processus lent
• Performance analytique limite
Préoccupations
Paramètres
déterminants
Méthodes
analytiques
9
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AUTHENTIFICATION ET SÉCURITÉ : QUELS
DÉTERMINANTS ?
Qualité nutritionnelle
Acides gras
Antioxydants
Minéraux
Vitamines
Fibres
…
Sécurité sanitaire
Métaux lourds
Contaminants
Pesticides
Résidus médicamenteux
Authenticité
Isotopes
Polyphénols
Carotenoïdes
Acides gras
Traceurs
10
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PERFORMANCE ET GESTION DU PROCESSUS DE
DÉVELOPPEMENT DE MÉTHODE PORTÉE FLEXIBLE
(9 PHASES CLEFS) :
Définir l’objectif
Constituer le groupe
de projet
Mise au point/optimisation :
Description de la méthode
Planifier
Définir le plan
d’expérimentationRéaliser les essais
Exploiter les données :
Caractérisation de la
méthode
Conclure sur les résultats :
Validation de la méthode
Méthode d’essai :
rédaction et mise sous
contrôle
11
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Optimisation du processus
• Mieux situer ce qu’il se passe
• Mieux comprendre
• Localiser les causes, les facteurs au niveau de chaque opération
• Évaluer les coûts non qualité
Capitalisation et retour d’expérience
• Echecs et réussites
Application à la méthode et innovation analytique :
Méthode polyvalente de détermination des résidus des pesticides par
CG-SM et SL/SM/SM avec extraction/partition avec de l'acétonitrile
et nettoyage par SPE dispersés - Méthode QuEChERS
AMÉLIORATION DE LA PERFORMANCE PAR
L’OPTIMISATION DES PROCESSUS
La performance appliquée à l’analyse en
GC/MS/MS & LC/MSMS :
Matrices étudiées.
Agroalimentaire
• Multi-résidus mycotoxines
• Multi-résidus antibiotiques
• Multi-résidus pesticides
• Multi-résidus médicaments vétérinaires
• Multi-résidus perturbateurs endocriniens
• Multi-résidus contaminants chimiques
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LA PERFORMANCE APPLIQUÉE À L’ANALYSE
EN GC/MS/MS & LC/MSMS :
PROBLÉMATIQUES :
Développement de méthodes multi-résidus
(Pesticides, Antibiotiques, Mycotoxines, Vitamines Organophosphorés, ….)
Forte sélectivité de l’analyseur pour compenser une préparation
d’échantillon non sélective
Forte sensibilité pour injecter la quantité de matrice la plus faible
possible
Optimisation du temps pré/in & post analytique
Problématique
Générale
LMR
nombre de molécules
Laboratoire
Coût
Qualité
Temps d’analyse
14
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EFFETS MATRICES
Utilisation d’EI marqués
Correction :
• Effets matrices
• Taux de récupération
• Variations analytiques
Coût important
Vérification des LQ
HCBHCB C13
Purification H2SO4
Perte de composés
Limite de quanti
Dilution 1/10
Pas de perte
Limite de Quanti x10
HCB C13
Famille de composés
Mono résidu
Multi-résidus
Réduction des effets matrices
GC conventionnelle
30m x 0,25mm x 0,25µm
29 min
Fast GC
20m x 0,15mm x 0,15µm
11 min
16
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GC CONVENTIONNELLE = POLYVALENCE
Huile de
poisson
Exemples
d’application
au
laboratoire
20 ppb
Huiles
essentielles
50 ppb
HCH
17
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30 min.
10 min.
HPLC
0.3 mL/min
UHPLC
0.5 mL/min
SCREENING DE 400 PESTICIDES : DIMINUTION PAR 3 DU TEMPS
D’ANALYSE
Sensibilité Vitesse d’acquisition Temps d’analyse
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-Aflatoxines
-Fumonisines
-HT-2 et T2
-DON
-ZEA
-DAS
-Neosolaniol
-Ochratoxine
ANALYSE DE MYCOTOXYNES PAR LC-MS/MS
FCTFCTFCTFCTFCTFCTFCTFCT°°°°°°°° DEMANDE CLIENTSDEMANDE CLIENTSDEMANDE CLIENTSDEMANDE CLIENTSDEMANDE CLIENTSDEMANDE CLIENTSDEMANDE CLIENTSDEMANDE CLIENTS
Attention aux effets matricesPréparation peu spécifique
19
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Diverses matrices :
- céréales
- alimentations animales
- fruits secs
- plats préparés
- épices
Utilisation d’EI nécessaire pour corriger les effets matrices
Coût de la méthode trop important dans le cas d’un screening de
plus d’une dizaine de molécules
Un étalon marqué par famille
Utilisation d’une gamme matrice
Adapté la purification
Dilution de l’extrait
ANALYSE DE MYCOTOXYNES PAR LC-MS/MS
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ANALYSE DES PESTICIDES DANS DU THÉ
0,0
20,0
40,0
60,0
80,0
100,0
120,0
Purification CaCl2
Purification GCB
Dopage à la LOQ : 10 µg/kg
Extraction de 2 grammes de thé
Utilisation de différentes méthodes de purification
Dilution de l’extrait avant injection
AMÉLIORATIONDES RENDEMENTS/ DIMINUTIONDES EFFETSMATRICESAMÉLIORATIONDES RENDEMENTS/ DIMINUTIONDES EFFETSMATRICESAMÉLIORATIONDES RENDEMENTS/ DIMINUTIONDES EFFETSMATRICESAMÉLIORATIONDES RENDEMENTS/ DIMINUTIONDES EFFETSMATRICESAMÉLIORATIONDES RENDEMENTS/ DIMINUTIONDES EFFETSMATRICESAMÉLIORATIONDES RENDEMENTS/ DIMINUTIONDES EFFETSMATRICESAMÉLIORATIONDES RENDEMENTS/ DIMINUTIONDES EFFETSMATRICESAMÉLIORATIONDES RENDEMENTS/ DIMINUTIONDES EFFETSMATRICES
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RETRAITEMENT DES DONNÉES : CALCUL DES
RENDEMENTS
Calcul des rendements de dopage (multirésidus)
Solution de dopage (étalon / SF) : LC1-2-3-4 SF3
Echantillon Non
Dopé :
Volume de dopage : 0,100 mL Echantillon Dopé :
Masse échantillon dopé : 5,024 g
Limite min ND 2 Limite max ND 20
Molécule
Concentration
(ng/mL)
Dopage
(µg/kg)
Teneur ND
(µg/kg)
Teneur D
(µg/kg)
Rendement
(%)
Rendement
hors de [70%
; 120%]
Acéphate 997,6 19,86 11,30 56,9 X
Acétamipride 995,4 19,81 17,60 88,8
Aclonifen 1003,2 19,97 18,10 90,6
Alachlor 1002,1 19,95 17,00 85,2
Aldicarbe 997,5 19,85 17,60 88,6
Aldicarbe-Sulfone 997,4 19,85 21,90 110,3
Amitraz 998,2 19,87 12,10 60,9 X
Atrazine 1000,6 19,92 19,40 97,4
Azimphos-Ethyl 1001,1 19,93 17,30 86,8
Azimphos-Methyl 1004,9 20,00 15,50 77,5
Azoxystrobine 994 19,79 20,30 102,6
Benalaxyl 1001,2 19,93 18,40 92,3
Bendiocarbe 997,8 19,86 16,90 85,1
Bifenox 998,6 19,88 14,20 71,4
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RETRAITEMENT DES DONNÉES : DÉTERMINATION
DE LA LQ
Rendements exportés le : 26/02/201415:35:38 Matrice : Blé
Volume d'extraction : 10,0 mL LQ limite : 10
Masse la plus petite : 4,950 g (de façon à majorer le calcul des LQ)
Molécule
Concentration
LQ (ng/mL)
Accuracy
QC (%)
Rendement
autocontrôle
(%)
LQ
calculée
(µg/kg)
Poivre Blé Thé
Baie de
Goji
Acéphate 2,0 81,9 66,5 6,1
Acétamipride 2,0 86,8 96,4 4,0
Aclonifen 4,0 88,4 76,7 8,1
Alachlor 2,0 40 94,0 10,1 X
Aldicarbe 2,0 87,6 95,4 4,0
Aldicarbe-Sulfone 2,0 89,9 101,6 4,0
Fenthion 2,0 48,9 73,9 8,3
Atrazine 2,0 113 91,8 4,0
Azimphos-Ethyl 4,0 81,7 94,4 8,1
Azimphos-Methyl 4,0 73,4 100,0 8,1
Azoxystrobine 2,0 88 100,3 4,0
Benalaxyl 2,0 98,2 90,0 4,0
Bendiocarbe 2,0 93,4 99,8 4,0
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RETRAITEMENT DES DONNEES SOUS EXCEL :
TENEURS SUPÉRIEURES À 2 PPB
Sample Name Sample TypeSample CommentDilution Factor Analyte Peak Name Analyte Peak AreaCalculated Concentration (µg/kg)Rdt% CV% Détection
2 140321 RN14-05381.001 d20 Unknown riz 40,064 Buprofezine 115,10 93,1 13,6 Positif
3 140321 RN14-05381.001 Unknown riz 2,003 Buprofezine 125,63 93,1 13,6 Positif
4 140321 RN14-05442.001 Unknown riz 2 Buprofezine 2,50 93,1 13,6
5 140321 RN14-05381.001 Unknown riz 2,003 Carbendazime 11,45 91,8 15,0 Positif
6 140321 RN14-05442.001 Unknown riz 2 Carbendazime 7,28 91,8 15,0
7 140321 RN14-05381.001 Unknown riz 2,003 Chlorpyrifos 3,60 99,3 19,9
8 140321 RN14-05625.001 d20 Unknown ble 40,38 Chlorpyrifos-Methyl 205,33 91,2 18,5 Positif
9 140321 RN14-05625.001 Unknown ble 2,019 Chlorpyrifos-Methyl 197,05 91,2 18,5 Positif
10 140321 RN14-05381.001 Unknown riz 2,003 Clothianidin 3,53 100,9 17,3
14 140321 RN14-05442.001 Unknown riz 2 Difenoconazole 8,16 87,9 16,7
15 140321 RN14-05381.001 Unknown riz 2,003 Hexaconazole 7,36 88,5 17,8
16 140321 RN14-05381.001 Unknown riz 2,003 Imidachlopride 10,16 102,5 19,4 Positif
17 140321 RN14-05442.001 Unknown riz 2 Imidachlopride 5,96 102,5 19,4
25 140321 RN14-05424.001 Unknown orge 2,012 Piperonyl Butoxyde 21,53 85,3 19,1 Positif
26 140321 RN14-05625.001 Unknown ble 2,019 Pirimiphos-Methyl 50,77 94,4 17,5 Positif
27 140321 RN14-05381.001 Unknown riz 2,003 Profenophos 10,85 91,0 18,4 Positif
28 140321 RN14-05381.001 Unknown riz 2,003 Propiconazole 66,92 90,3 19,0 Positif
29 140321 RN14-05442.001 Unknown riz 2 Propiconazole 4,33 90,3 19,0
33 140321 RN14-05625.001 Unknown ble 2,019 Terbacil 2,51 92,4 18,6
34 140321 RN14-05381.001 Unknown riz 2,003 Thiamethoxam 15,29 99,0 13,3 Positif
36 140321 RN14-05381.001 Unknown riz 2,003 Triazophos 31,32 98,0 16,6 Positif
37 140321 RN14-05442.001 Unknown riz 2 Triazophos 13,31 98,0 16,6 Positif
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CARTE DE CONTRÔLE : CV + RENDEMENTS MOYENS
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LA PERFORMANCE APPLIQUÉE À L’ANALYSE EN
GC/MS/MS & LC/MSMS : CONCLUSIONS
Lors du processus d’analyses, chaque étape est importante et
ne doit pas être négligée.
La qualité de l’analyse est la somme de toutes les étapes. Une
seule phase avec un mauvais rendement rend le résultat nul.
Les nouvelles préparations de type QuEChERS permettent
d’améliorer les performances des analyses. Toutefois cette
méthode a ses limites :
Matrices grasses ou complexes (huiles essentielles).
Certains composés ne sont pas extraits (polaires…) ou sont
bloqués par la purification.
Les solvants employés (Acétonitrile) ne sont pas adaptés à la
technique analytique.
26
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LA PERFORMANCE APPLIQUÉE À L’ANALYSE EN
GC/MS/MS & LC/MSMS : CONCLUSIONS
L’ajout de protectants améliore les résultats en
chromatographie en phase gazeuse.
L’ajout d’étalons internes marqués doit être fait le plus
souvent possible. Ils deviennent obligatoires lorsque des
extinctions ou des exaltations de signaux sont observées
(rendements inférieurs à 70% ou supérieurs à 130%) .
Le solvant d’extraction ACN peut être changer par d’autres
solvants.
Des purifications autres que celles de la norme (CaCl2)
27
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LA PERFORMANCE APPLIQUÉE À L’ANALYSE EN
GC/MS/MS & LC/MSMS : CONCLUSIONS
L’utilisation de ces méthodes d’extractions peu sélectives ont
été rendus possibles par l’arrivée sur le marché d’appareils plus
sensibles et plus sélectives (GC/MSMS et UPLC/MSMS).
Au niveau du laboratoire, la technique UPLC/MSMS nous
donne entière satisfaction (robustesse et sensibilité).
Pour la GC/MSMS, l’idéal serait d’avoir un appareil 10 fois plus
sensible pour les matrices type Baby Food ou des molécules
peu sensibles (Endrine – Aldrine…).
Screening LC-MS/MS Antibiotiques
169 molécules dans un extrait de produit carné
2-Amino-5-benzoylbenzimidazole Ceftiofur Erythromycin Leucogentian violet Ormetoprim Sulfamethazine
2-Aminoflubendazole Cephalosporine Etodolac Leucomalachite green Oxacillin Sulfamethizole
2-Hydroxymethyl-1-methyl-5-nitro-imidazol Cephalosporine Febantel Lincomycin Oxfendazole Sulfamethoxazole
2-mercaptobenzimidazole Chloramphenicol Fenbendazole Lomefloxacin Oxfendazole Sulfone Sulfamethoxypyridazine
2-Nitrobenzaldehyde Semicarbazone Chlormadinone acetate Fenbendazole Sulfone Maduramycin Oxibendazole Sulfamonomethoxine
2-NP-AHD Chlortetracycline Fenbendazole Sulfoxide Malachite green Oxolinic Acid Sulfamoxole
2-NP-AMOZ Cinoxacin Florfenicol Marbofloxacin Oxyphenbutazone Sulfanilamide
2-NP-AOZ Ciprofloxacin Florfenicol Amine Mebendazole Oxytetracycline Sulfanitran
2-quinoxalinecarboxylic acid Clindamycin Flubendazole Medroxyprogesterone 17-acetate Penicillin G Sulfaphenazole
6-phenyl-2-thiouracil Clopidol Flumequine Megestrol acetate Penicillin V Sulfapyridine
Acetylgestagene Closantel Flunixin Melengestrol acetate Phenylbutazone Sulfaquinoxaline
Albendazole Cloxacillin Fluorchinolone Metronidazole Ractopamine Sulfasalazine
Albendazole Sulfone Coccidiostat Fluoroquinolone Metronidazole-OH Rafoxanide Sulfathiazole
Albendazole Sulfoxide Danofloxacin Gentian Violet Minocycline Ronidazole Sulfisomidine
Albendazole-2-aminosulfone Dapsone Halofuginone Monensin Roxithromycin Sulfisoxazole
Amoxicillin Decoquinate Hydroxymebendazole Nafcillin Sarafloxacin Sulfonamide
Ampicillin Demeclocycline Hydroxythiabendazole Nalidixic Acid Semduramicin Tetracycline
Amprolium Desethylene Ciprofloxacin Ibuprofen Naproxen Spiramycin Tetramisole
Anti parasite Diaveridine Indomethacin Narasin Sulfabenzamide Thiabendazole
Antibiotic Diclofenac Nicarbazin Sulfacetamide Thiamphenicol
Aprinocid Dicloxacillin Ipronidazole Niclosamide Sulfachloropyridazine Thyrostatica
Bacitracin Difloxacin Ipronidazole-OH Nitrofurane Sulfaclozine Tiamulin
Benzimidazole Dimetridazole Isochlortetracycline Nitromidazole Sulfadiazine Tilmicosin
Brilliant green Dipyrone Josamycin Norfloxacin Sulfadimethoxine Tolfenamic acid
Cambendazole Doxycycline Ketoprofen Novobiocin Sulfadoxine Triclabendazole
Carbadox Enoxacin Ketotriclabendazole NSAID Sulfaguanidine Triclabendazole Sulfone
Cefazolin Enrofloxacin Laidlomycin propionate -Ammonium Ofloxacin Sulfamerazine Triclabendazole Sulfoxide
Cefoperazone epi-Tetracycline Lasalocid Orbifloxacin Sulfameter Trimethoprim
Tylosin
29
© SGS Multilab Rouen, Yvon Gervaise – Secur’Food – 14/10/2014
Amoxicillin (50 µg/kg) Doxycycline (50 µg/kg) Nafcillin (50 µg/kg)
Ampicillin (50 µg/kg) Halofuginone (10 µg/kg) Narasin (100 µg/kg) Sulfadiazine (50 µg/kg)
Chloramphenicol (0.3
µg/kg) Lasalocid (100 µg/kg) Oxacillin (50 µg/kg) Sulfadimethoxine (50 µg/kg)
Chlortetracycline (50 µg/kg) Leucomalachite green (1 µg/kg)
Oxytetracycline (50
µg/kg) Sulfadoxine (50 µg/kg)
Cloxacillin (50 µg/kg) Maduramycin (10 µg/kg) Penicillin G (50 µg/kg) Sulfamethoxypyridazine (50 µg/kg)
Demeclocycline (50 µg/kg) Malachite green (1 µg/kg) Penicillin V (50 µg/kg) Tetracycline (50 µg/kg)
Dicloxacillin (50 µg/kg) Monensin (100 µg/kg) Salinomycin (50 µg/kg)
MULTI RÉSIDUS ANTIBIOTIQUES DEVELOPPÉS À
SGS MULTILAB Rouen
- Technique performante en LC/MS/MS, prix de revient : très dépendant du
nombre d’échantillons, du prix des étalons, de la méthodologie utilisée (screening
ou quantification)
-4 Familles : Pénicillines, Anticoccidiens, Tétracyclines, Sulfamides
30
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AUTHENTIFICATION MÉTHODE ISOTOPIQUE ET
ISOTOPE STABLE ET INSTABLE
MESURE ÉMISSION RADIOACTIVITÉ
-Détermination origine naturelle
-Authentification du cru d’un vin
- Vérification allégation produit naturel :
o arôme,
o colorant,
o…
- Authentification
o matière première
o produit brut
o produit fini
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AUTHENTIFICATION DU CRU D’UN VIN
Mesure de la radioactivité
Contrôle non destructif :
• Bouteille fermée
• Quantité intacte
Datation de la bouteille
Datation du vin
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AUTHENTIFICATION DU CRU D’UN VIN :
PRINCIPE
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AUTHENTIFICATION DE L’ORIGINE :
ANALYSE DES ISOTOPES STABLES
QUANTIFICATION MULTI-MÉTAUX
LOURDS DANS LES PRODUITS
ALIMENTAIRES PAR ICP-MS
LE CONTRÔLE NOUVEAU DES
MÉTAUX LOURDS EST ARRIVÉ
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NÉCESSITÉ ET OPTIMISATION DE L’ANALYSE
MULTI-MÉTAUX LOURDS
Les métaux sont toxiques, ce qui signifie que la consommation
d'aliments contenant une concentration élevée de métaux lourds
peut causer de graves troubles de la santé
1) L'arsenic (As), Cadmium (Cd), Plomb (Pb) et l'étain
inorganique (Sn)
Ces métaux sont les plus toxiques des métaux lourds
agroalimentaires.
2) Les agences alimentaires ont introduit des directives qui
stipulent les concentrations maximales admissibles pour les
métaux lourds dans les aliments.
3) La Commission européenne, la directive 1881/2006 spécifie
les concentrations maximales pour Cd, inorganique Sn, Hg et Pb
dans une variété de produits alimentaires, avec, par exemple,
0,02 mg Pb/kg admissible dans les produits laitiers et jusqu'à 1,5
mg Pb/kg autorisé chez les mollusques bivalves.
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ANALYSES MULTI-MÉTAUX LOURDS ET
CONTEXTE NORMATIF DU DÉVELOPPEMENT
ANALYTIQUE ET EXIGENCES
- MODE DE MINÉRALISATION
- MODE DE QUANTIFICATION
L’analyse multi-métaux en deux normes: La minéralisation,
NF EN 13805, l’analyse, NF EN 15763
Pourquoi valider ? s’appuyer sur un plan d’expériences
afin de s’assurer de la justesse de notre analyse, de
pouvoir rendre des limites de quantification toujours de
plus en plus basses, et de pouvoir étendre le domaine
d’application (le nombre d’éléments et d’autres matrices
au-delà de la norme.
Être reconnu par le Comité Français d’Accréditation
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MODE DE MINÉRALISATION
Broyage /
Homogénéisation
Reprise du minéralisat/
dilution
Préparation
(ne garder que la partie comestible)
Pesée dans un tube 0.3-
0.5g + 3mL HNO3
Chauffage micro-ondes
fermé Ultrawave 15mn
Quantification et Analyse des éléments en un
run en ICP-MS
Céréales, légumes et fruits , produits diététiques et de régime produits riches en huile ( graines
oléagineuses), Produits laitiers ( fromage, lait), produits d’origine animales (poissons, matières
grasses, produits de la pêche) , aliments pour animaux ( farine de poissons, aliments composés…)
huile de poissons huiles végétales
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RÉSULTAT DE L’INNOVATION
précise et robuste : nécessaire pour les mesures de
métaux lourds dans les aliments afin d'assurer la
conformité aux règlements.
ICP-MS élémentaire et isotopique offre la possibilité
d'analyser toute une série d'éléments dans un même
essai,
Gain de productivité (coût et temps): fiabilité et rapidité
du résultat permettant un relais plus rapide auprès du
fabricant, de l’importateur, du consommateur
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INNOVATION ANALYTIQUE : UNE NOUVELLE APPROCHE
PLUS PERFORMANTE
VALEUR AJOUTÉE POUR LE LABORATOIRE ET LE CLIENT
La technologie permet aux laboratoires de sécurité
alimentaire afin d'améliorer sensiblement leur
productivité, avec plus de 50 échantillons analysés par
heure.
Autres avantages importants de l'ICP-MS comprenant une
sensibilité accrue, un rapport signal sur bruit élevé et la
flexibilité d'analyser n'importe quel élément du tableau
périodique.
La méthode offre de beaucoup plus faibles limites de
détection par rapport à l’absorption atomique en four
graphite (GFAA) et inductif spectrométrie d'émission
optique à plasma (ICP-OES) tout en produisant moins
d'interférences que ICP-OES.
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Peséede l’échantillon
Hydrolyse enzymatique
B12
Enzyme : pepsine et/ou α-
amylase
Bain 37°C-30min
Bain 100°C-30 min
B9/B8
Enzyme : pancréatine
Bain 37°C-30min
Bain 100°C- {20 min B9
{30 min B8
B5
Enzyme : pepsine et
phosphatasealcaline
Bain 50°C-3h
Bain 20°C-18h
Purificationsur colonnes immunoenzymatiquesspécifiques
Purificationsur cartoucheséchangeusesd’anions et de cations
B12
Eluant: TFA 0.025%
Détection: HPLC/UV
361 nm
Colonne Ascentis C18
Vinjecté:100µL
B9
Eluant: TFA 0.1%
Détection: HPLC/UV
280 nm
Colonne Aquasil C18
four 37 °C
Vinjecté:100µL
B8
Eluant: TFA 0.025%/CH3CN(90/10)
Détection: HPLC/UV
204 nm
Colonne NucleoshellRP 18,2,7 µm
Four 37°C
Vinjecté:100µL
B5
Eluant: tampon KH2PO4+ Eluant de dérivation post-colonne
Détection: HPLC/FLUO
Ex : 345 nm/Em :455 nm
Colonne Lichrospher 100RP18 end capped 5µm
Four 90°C
Vinjecté:100µL
QUALITÉ ALIMENTAIRE
PROFIL NUTRITIONNEL INNOVATION ANALYTIQUE
DOSAGE MULTI-VITAMINES
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GESTION D’ALERTE – INNOVATION VERS UNE
NOUVELLE MÉTHODE
Arsenic dans les boissons et aliment : le cas du riz
Méthode classique : mesure As total
As minéral, As organique ?
Spéciation méthode appliquée aux matrices riz, produits à
base de riz, jus de fruits
IC-ICP/MS : Chromatographie ionique couplée à la détection
ICP/MS
Implication de l’AOAC
Importance de la spéciation pour une mesure pertinente
de l’exposition de la population
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Règlement européen n°10/2011 du 14 janvier qui définit la limite
de migration spécifique pour les matériaux en contact
Phtalates : plastifiant, souplesse, PVC, Epoxy, PGT
Boissons alcoolisées, utilisation de nombreuses matières
plastiques : cuves, revêtement, tuyaux, transport
Phtalates solubles dans ETOH
Les seuils maximaux admis pour les phtalates dans les vins et
spiritueux sont les suivants :
0,3 mg/kg pour DBP
1,5 mg/kg pour DEHP
9 mg/kg pour DINP/DIDP
30 mg/kg pour BBP
Méthodes et technologie GC/MS conforme à la recommandation
OIV n°477-2013 et 521-2013
PHTALATES DANS LES BOISSONS ALCOOLISÉES
ET DOSAGE GC/MS
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CONCLUSION
Besoin qualité, sécurité, authenticité des produits
L’innovation en méthodologie d’analyses déterminé par de
nouvelles approches
Méthodes multi-analyte développée à SGS MULTILAB
Multi-résidus pesticides
Multi mycotoxines
Multi résidus médicamenteux
Multi métaux lourds
Optimisation des plans de contrôles en réponse aux
exigences de nos clients
PRÉOCCUPATION
INNOVATION
SOLUTION
OPTIMISATION
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DÉVELOPPEMENT PRESTATION ANALYTIQUE
Innovation réalisée sous la contrainte
Résolution de problématique des plans de contrôles
Suivi de la mise sur le marché : service à plus haute valeur
ajoutée
-> Suivi de l’usage qu’en feront nos clients par rapport à leurs
besoins
Derrière toute méthode il y a une philosophie
Ces innovations analytiques déterminent l’augmentation de la
valeur ajoutée des services et prestations de notre laboratoire
pour nos clients
CONCLUSION
45
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Innovation et création espace numérique
du laboratoire interaction avec ses clients
et veille technique, scientifique et
réglementaire
https://mobile.twitter.com/expertscience/st
atus/483882987285917696
13 janvier 2015 : INNOVATION AU
LABORATOIRE
Inauguration de l’extension du laboratoire
EN SAVOIR PLUS… POUR INFORMATION
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Yvon GERVAISE
yvon.gervaise@sgs.com
@expertscience : http://twitter.com/expertscience
http://expertscience.over-blog.com
https://plus.google.com/+YvonGervaise
http://slideshare.net/expertscience
Directeur, SGS Multilab Rouen
65 rue Ettore Bugatti - BP 90014 –
76801 Saint Etienne du Rouvray
t 02 35 07 91 80 f 02 35 07 91 25
Merci de votre attention
Les conférences
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du labo
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collaboratif
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CONFERENCE YVON GERVAISE Authentification et sécurité des produits

  • 1. AUTHENTIFICATION ET SÉCURITÉ DES PRODUITS M. Yvon Gervaise Expert de justice Directeur SGS Multilab Rouen Secur’Food – 14 octobre 2014 A NOUVELLES PRÉOCCUPATIONS, NOUVELLES APPROCHES INNOVATIONS AU LABORATOIRE D’ANALYSES DE CONTRÔLES ET D’EXPERTISES 65 rue Ettore Bugatti - BP 90014 76801 Saint Etienne du Rouvray t 02 35 07 91 80 f 02 35 07 91 25
  • 2. 2 © SGS Multilab Rouen, Yvon Gervaise – Secur’Food – 14/10/2014© SGS Multilab Rouen, Yvon Gervaise – Secur’Food – 14/10/2014 NOUVELLES PRÉOCCUPATIONS EN RÉPONSE AUX NOUVELLES EXIGENCES Sûr Conforme aux étiquetages Conforme à la sécurité et aux attentes consommateurs Authenticité Qualité SécuritéIntégrité produit alimentaire
  • 3. 3 © SGS Multilab Rouen, Yvon Gervaise – Secur’Food – 14/10/2014© SGS Multilab Rouen, Yvon Gervaise – Secur’Food – 14/10/2014 Authenticité -> l’authentification consiste à user d’outils aptes à rendre un produit authentique aux yeux du consommateur Indication sur les produits, marque régionale (produits locaux) Multiplication des indications : naturel, tradition Authentification via la communication : un message peut véhiculer que la marchandise serait authentique Evaluer l’efficacité de l’authentification Préoccupations actuelles de sécurité, de qualité Le débat sur le nouvel étiquetage nutritionnel Authentification perçue – authentification prouvée NOUVELLES PRÉOCCUPATIONS, TENDANCE : L’AUTHENTICITÉ
  • 4. 4 © SGS Multilab Rouen, Yvon Gervaise – Secur’Food – 14/10/2014© SGS Multilab Rouen, Yvon Gervaise – Secur’Food – 14/10/2014 QUELLES NOUVELLES PRÉOCCUPATIONS DANS LA FILIÈRE VÉGÉTALE ? Origine AOC? OGM? Contaminants chimiques? Métaux lourds? Nouvel ingrédient ? Adjonction d’eau au produit? Dioxines PCB? Présence de pesticides? L’emballage est-il adapté? Pays de provenance?
  • 5. 5 © SGS Multilab Rouen, Yvon Gervaise – Secur’Food – 14/10/2014© SGS Multilab Rouen, Yvon Gervaise – Secur’Food – 14/10/2014 QUELLES NOUVELLES PRÉOCCUPATIONS DANS LA FILIÈRE CARNÉE ET AQUATIQUE? AOC? OGM? Contaminants chimiques? Mode d’élevage? Métaux lourds? Quelle espèce animale? Dioxines PCB? Présence de pesticides, de bactéries? Présence de résidus médicamenteux ? Pays de provenance? Adjonction d’eau au produit? Perturbateurs endocriniens?
  • 6. 6 © SGS Multilab Rouen, Yvon Gervaise – Secur’Food – 14/10/2014© SGS Multilab Rouen, Yvon Gervaise – Secur’Food – 14/10/2014 NOUVELLES PRÉOCCUPATIONS L.A.A.F (Loi Avenir Agriculture et Forêt) Principe de mise en transparence des résultats de contrôle Appui sur des organismes délégataires Meilleure utilisation des phytosanitaires, antibiotiques Qualité/Sécurité/Authenticité Préserver l’authenticité initiative Food Integrity • INCO DG SANCO (DG de la santé et de la protection du consommateur) 1169/2011 • Indication origine pour les produits carnés (ex. : 1337/2013) • Etiquetage nutritionnel : qui lit et comment GFSI : Global Food Safety Initiative
  • 7. 7 © SGS Multilab Rouen, Yvon Gervaise – Secur’Food – 14/10/2014© SGS Multilab Rouen, Yvon Gervaise – Secur’Food – 14/10/2014 NOUVELLES PRÉOCCUPATIONS, NOUVELLES APPROCHES : LE CONTRÔLE NOUVEAU EST ARRIVÉ ? Tirer les conséquences de la modernisation des moyens de contrôle Authenticité perçue – Authenticité prouvée Décret 2014-1109 du 30 septembre publié le 20 octobre Nouveaux pouvoirs de la DGCCRF Performance et innovation méthodologique des analyses de laboratoire Capacité à apporter rapidement des réponses fiables et pertinentes à la demande client Innovation analytique du laboratoire Valeur ajoutée pour le client
  • 8. 8 © SGS Multilab Rouen, Yvon Gervaise – Secur’Food – 14/10/2014© SGS Multilab Rouen, Yvon Gervaise – Secur’Food – 14/10/2014 DE NOUVELLES PRÉOCCUPATIONS À NOUVELLES APPROCHES ANALYTIQUES Quels étaient les verrous de l’analyse ? Extraction des composés ou molécules d’intérêt • Choix des techniques • Effet des matrices • Dispositif de prétraitement échantillon Caractérisation et quantification • Coût • Mono-paramètre • Processus lent • Performance analytique limite Préoccupations Paramètres déterminants Méthodes analytiques
  • 9. 9 © SGS Multilab Rouen, Yvon Gervaise – Secur’Food – 14/10/2014© SGS Multilab Rouen, Yvon Gervaise – Secur’Food – 14/10/2014 AUTHENTIFICATION ET SÉCURITÉ : QUELS DÉTERMINANTS ? Qualité nutritionnelle Acides gras Antioxydants Minéraux Vitamines Fibres … Sécurité sanitaire Métaux lourds Contaminants Pesticides Résidus médicamenteux Authenticité Isotopes Polyphénols Carotenoïdes Acides gras Traceurs
  • 10. 10 © SGS Multilab Rouen, Yvon Gervaise – Secur’Food – 14/10/2014© SGS Multilab Rouen, Yvon Gervaise – Secur’Food – 14/10/2014 PERFORMANCE ET GESTION DU PROCESSUS DE DÉVELOPPEMENT DE MÉTHODE PORTÉE FLEXIBLE (9 PHASES CLEFS) : Définir l’objectif Constituer le groupe de projet Mise au point/optimisation : Description de la méthode Planifier Définir le plan d’expérimentationRéaliser les essais Exploiter les données : Caractérisation de la méthode Conclure sur les résultats : Validation de la méthode Méthode d’essai : rédaction et mise sous contrôle
  • 11. 11 © SGS Multilab Rouen, Yvon Gervaise – Secur’Food – 14/10/2014© SGS Multilab Rouen, Yvon Gervaise – Secur’Food – 14/10/2014 Optimisation du processus • Mieux situer ce qu’il se passe • Mieux comprendre • Localiser les causes, les facteurs au niveau de chaque opération • Évaluer les coûts non qualité Capitalisation et retour d’expérience • Echecs et réussites Application à la méthode et innovation analytique : Méthode polyvalente de détermination des résidus des pesticides par CG-SM et SL/SM/SM avec extraction/partition avec de l'acétonitrile et nettoyage par SPE dispersés - Méthode QuEChERS AMÉLIORATION DE LA PERFORMANCE PAR L’OPTIMISATION DES PROCESSUS
  • 12. La performance appliquée à l’analyse en GC/MS/MS & LC/MSMS : Matrices étudiées. Agroalimentaire • Multi-résidus mycotoxines • Multi-résidus antibiotiques • Multi-résidus pesticides • Multi-résidus médicaments vétérinaires • Multi-résidus perturbateurs endocriniens • Multi-résidus contaminants chimiques
  • 13. 13 © SGS Multilab Rouen, Yvon Gervaise – Secur’Food – 14/10/2014© SGS Multilab Rouen, Yvon Gervaise – Secur’Food – 14/10/2014 LA PERFORMANCE APPLIQUÉE À L’ANALYSE EN GC/MS/MS & LC/MSMS : PROBLÉMATIQUES : Développement de méthodes multi-résidus (Pesticides, Antibiotiques, Mycotoxines, Vitamines Organophosphorés, ….) Forte sélectivité de l’analyseur pour compenser une préparation d’échantillon non sélective Forte sensibilité pour injecter la quantité de matrice la plus faible possible Optimisation du temps pré/in & post analytique Problématique Générale LMR nombre de molécules Laboratoire Coût Qualité Temps d’analyse
  • 14. 14 © SGS Multilab Rouen, Yvon Gervaise – Secur’Food – 14/10/2014© SGS Multilab Rouen, Yvon Gervaise – Secur’Food – 14/10/2014 EFFETS MATRICES Utilisation d’EI marqués Correction : • Effets matrices • Taux de récupération • Variations analytiques Coût important Vérification des LQ HCBHCB C13 Purification H2SO4 Perte de composés Limite de quanti Dilution 1/10 Pas de perte Limite de Quanti x10 HCB C13 Famille de composés Mono résidu Multi-résidus Réduction des effets matrices
  • 15. GC conventionnelle 30m x 0,25mm x 0,25µm 29 min Fast GC 20m x 0,15mm x 0,15µm 11 min
  • 16. 16 © SGS Multilab Rouen, Yvon Gervaise – Secur’Food – 14/10/2014© SGS Multilab Rouen, Yvon Gervaise – Secur’Food – 14/10/2014 GC CONVENTIONNELLE = POLYVALENCE Huile de poisson Exemples d’application au laboratoire 20 ppb Huiles essentielles 50 ppb HCH
  • 17. 17 © SGS Multilab Rouen, Yvon Gervaise – Secur’Food – 14/10/2014© SGS Multilab Rouen, Yvon Gervaise – Secur’Food – 14/10/2014 30 min. 10 min. HPLC 0.3 mL/min UHPLC 0.5 mL/min SCREENING DE 400 PESTICIDES : DIMINUTION PAR 3 DU TEMPS D’ANALYSE Sensibilité Vitesse d’acquisition Temps d’analyse
  • 18. 18 © SGS Multilab Rouen, Yvon Gervaise – Secur’Food – 14/10/2014© SGS Multilab Rouen, Yvon Gervaise – Secur’Food – 14/10/2014 -Aflatoxines -Fumonisines -HT-2 et T2 -DON -ZEA -DAS -Neosolaniol -Ochratoxine ANALYSE DE MYCOTOXYNES PAR LC-MS/MS FCTFCTFCTFCTFCTFCTFCTFCT°°°°°°°° DEMANDE CLIENTSDEMANDE CLIENTSDEMANDE CLIENTSDEMANDE CLIENTSDEMANDE CLIENTSDEMANDE CLIENTSDEMANDE CLIENTSDEMANDE CLIENTS Attention aux effets matricesPréparation peu spécifique
  • 19. 19 © SGS Multilab Rouen, Yvon Gervaise – Secur’Food – 14/10/2014© SGS Multilab Rouen, Yvon Gervaise – Secur’Food – 14/10/2014 Diverses matrices : - céréales - alimentations animales - fruits secs - plats préparés - épices Utilisation d’EI nécessaire pour corriger les effets matrices Coût de la méthode trop important dans le cas d’un screening de plus d’une dizaine de molécules Un étalon marqué par famille Utilisation d’une gamme matrice Adapté la purification Dilution de l’extrait ANALYSE DE MYCOTOXYNES PAR LC-MS/MS
  • 20. 20 © SGS Multilab Rouen, Yvon Gervaise – Secur’Food – 14/10/2014© SGS Multilab Rouen, Yvon Gervaise – Secur’Food – 14/10/2014 ANALYSE DES PESTICIDES DANS DU THÉ 0,0 20,0 40,0 60,0 80,0 100,0 120,0 Purification CaCl2 Purification GCB Dopage à la LOQ : 10 µg/kg Extraction de 2 grammes de thé Utilisation de différentes méthodes de purification Dilution de l’extrait avant injection AMÉLIORATIONDES RENDEMENTS/ DIMINUTIONDES EFFETSMATRICESAMÉLIORATIONDES RENDEMENTS/ DIMINUTIONDES EFFETSMATRICESAMÉLIORATIONDES RENDEMENTS/ DIMINUTIONDES EFFETSMATRICESAMÉLIORATIONDES RENDEMENTS/ DIMINUTIONDES EFFETSMATRICESAMÉLIORATIONDES RENDEMENTS/ DIMINUTIONDES EFFETSMATRICESAMÉLIORATIONDES RENDEMENTS/ DIMINUTIONDES EFFETSMATRICESAMÉLIORATIONDES RENDEMENTS/ DIMINUTIONDES EFFETSMATRICESAMÉLIORATIONDES RENDEMENTS/ DIMINUTIONDES EFFETSMATRICES
  • 21. 21 © SGS Multilab Rouen, Yvon Gervaise – Secur’Food – 14/10/2014 RETRAITEMENT DES DONNÉES : CALCUL DES RENDEMENTS Calcul des rendements de dopage (multirésidus) Solution de dopage (étalon / SF) : LC1-2-3-4 SF3 Echantillon Non Dopé : Volume de dopage : 0,100 mL Echantillon Dopé : Masse échantillon dopé : 5,024 g Limite min ND 2 Limite max ND 20 Molécule Concentration (ng/mL) Dopage (µg/kg) Teneur ND (µg/kg) Teneur D (µg/kg) Rendement (%) Rendement hors de [70% ; 120%] Acéphate 997,6 19,86 11,30 56,9 X Acétamipride 995,4 19,81 17,60 88,8 Aclonifen 1003,2 19,97 18,10 90,6 Alachlor 1002,1 19,95 17,00 85,2 Aldicarbe 997,5 19,85 17,60 88,6 Aldicarbe-Sulfone 997,4 19,85 21,90 110,3 Amitraz 998,2 19,87 12,10 60,9 X Atrazine 1000,6 19,92 19,40 97,4 Azimphos-Ethyl 1001,1 19,93 17,30 86,8 Azimphos-Methyl 1004,9 20,00 15,50 77,5 Azoxystrobine 994 19,79 20,30 102,6 Benalaxyl 1001,2 19,93 18,40 92,3 Bendiocarbe 997,8 19,86 16,90 85,1 Bifenox 998,6 19,88 14,20 71,4
  • 22. 22 © SGS Multilab Rouen, Yvon Gervaise – Secur’Food – 14/10/2014 RETRAITEMENT DES DONNÉES : DÉTERMINATION DE LA LQ Rendements exportés le : 26/02/201415:35:38 Matrice : Blé Volume d'extraction : 10,0 mL LQ limite : 10 Masse la plus petite : 4,950 g (de façon à majorer le calcul des LQ) Molécule Concentration LQ (ng/mL) Accuracy QC (%) Rendement autocontrôle (%) LQ calculée (µg/kg) Poivre Blé Thé Baie de Goji Acéphate 2,0 81,9 66,5 6,1 Acétamipride 2,0 86,8 96,4 4,0 Aclonifen 4,0 88,4 76,7 8,1 Alachlor 2,0 40 94,0 10,1 X Aldicarbe 2,0 87,6 95,4 4,0 Aldicarbe-Sulfone 2,0 89,9 101,6 4,0 Fenthion 2,0 48,9 73,9 8,3 Atrazine 2,0 113 91,8 4,0 Azimphos-Ethyl 4,0 81,7 94,4 8,1 Azimphos-Methyl 4,0 73,4 100,0 8,1 Azoxystrobine 2,0 88 100,3 4,0 Benalaxyl 2,0 98,2 90,0 4,0 Bendiocarbe 2,0 93,4 99,8 4,0
  • 23. 23 © SGS Multilab Rouen, Yvon Gervaise – Secur’Food – 14/10/2014© SGS Multilab Rouen, Yvon Gervaise – Secur’Food – 14/10/2014 RETRAITEMENT DES DONNEES SOUS EXCEL : TENEURS SUPÉRIEURES À 2 PPB Sample Name Sample TypeSample CommentDilution Factor Analyte Peak Name Analyte Peak AreaCalculated Concentration (µg/kg)Rdt% CV% Détection 2 140321 RN14-05381.001 d20 Unknown riz 40,064 Buprofezine 115,10 93,1 13,6 Positif 3 140321 RN14-05381.001 Unknown riz 2,003 Buprofezine 125,63 93,1 13,6 Positif 4 140321 RN14-05442.001 Unknown riz 2 Buprofezine 2,50 93,1 13,6 5 140321 RN14-05381.001 Unknown riz 2,003 Carbendazime 11,45 91,8 15,0 Positif 6 140321 RN14-05442.001 Unknown riz 2 Carbendazime 7,28 91,8 15,0 7 140321 RN14-05381.001 Unknown riz 2,003 Chlorpyrifos 3,60 99,3 19,9 8 140321 RN14-05625.001 d20 Unknown ble 40,38 Chlorpyrifos-Methyl 205,33 91,2 18,5 Positif 9 140321 RN14-05625.001 Unknown ble 2,019 Chlorpyrifos-Methyl 197,05 91,2 18,5 Positif 10 140321 RN14-05381.001 Unknown riz 2,003 Clothianidin 3,53 100,9 17,3 14 140321 RN14-05442.001 Unknown riz 2 Difenoconazole 8,16 87,9 16,7 15 140321 RN14-05381.001 Unknown riz 2,003 Hexaconazole 7,36 88,5 17,8 16 140321 RN14-05381.001 Unknown riz 2,003 Imidachlopride 10,16 102,5 19,4 Positif 17 140321 RN14-05442.001 Unknown riz 2 Imidachlopride 5,96 102,5 19,4 25 140321 RN14-05424.001 Unknown orge 2,012 Piperonyl Butoxyde 21,53 85,3 19,1 Positif 26 140321 RN14-05625.001 Unknown ble 2,019 Pirimiphos-Methyl 50,77 94,4 17,5 Positif 27 140321 RN14-05381.001 Unknown riz 2,003 Profenophos 10,85 91,0 18,4 Positif 28 140321 RN14-05381.001 Unknown riz 2,003 Propiconazole 66,92 90,3 19,0 Positif 29 140321 RN14-05442.001 Unknown riz 2 Propiconazole 4,33 90,3 19,0 33 140321 RN14-05625.001 Unknown ble 2,019 Terbacil 2,51 92,4 18,6 34 140321 RN14-05381.001 Unknown riz 2,003 Thiamethoxam 15,29 99,0 13,3 Positif 36 140321 RN14-05381.001 Unknown riz 2,003 Triazophos 31,32 98,0 16,6 Positif 37 140321 RN14-05442.001 Unknown riz 2 Triazophos 13,31 98,0 16,6 Positif
  • 24. 24 © SGS Multilab Rouen, Yvon Gervaise – Secur’Food – 14/10/2014© SGS Multilab Rouen, Yvon Gervaise – Secur’Food – 14/10/2014 CARTE DE CONTRÔLE : CV + RENDEMENTS MOYENS
  • 25. 25 © SGS Multilab Rouen, Yvon Gervaise – Secur’Food – 14/10/2014© SGS Multilab Rouen, Yvon Gervaise – Secur’Food – 14/10/2014 LA PERFORMANCE APPLIQUÉE À L’ANALYSE EN GC/MS/MS & LC/MSMS : CONCLUSIONS Lors du processus d’analyses, chaque étape est importante et ne doit pas être négligée. La qualité de l’analyse est la somme de toutes les étapes. Une seule phase avec un mauvais rendement rend le résultat nul. Les nouvelles préparations de type QuEChERS permettent d’améliorer les performances des analyses. Toutefois cette méthode a ses limites : Matrices grasses ou complexes (huiles essentielles). Certains composés ne sont pas extraits (polaires…) ou sont bloqués par la purification. Les solvants employés (Acétonitrile) ne sont pas adaptés à la technique analytique.
  • 26. 26 © SGS Multilab Rouen, Yvon Gervaise – Secur’Food – 14/10/2014© SGS Multilab Rouen, Yvon Gervaise – Secur’Food – 14/10/2014 LA PERFORMANCE APPLIQUÉE À L’ANALYSE EN GC/MS/MS & LC/MSMS : CONCLUSIONS L’ajout de protectants améliore les résultats en chromatographie en phase gazeuse. L’ajout d’étalons internes marqués doit être fait le plus souvent possible. Ils deviennent obligatoires lorsque des extinctions ou des exaltations de signaux sont observées (rendements inférieurs à 70% ou supérieurs à 130%) . Le solvant d’extraction ACN peut être changer par d’autres solvants. Des purifications autres que celles de la norme (CaCl2)
  • 27. 27 © SGS Multilab Rouen, Yvon Gervaise – Secur’Food – 14/10/2014© SGS Multilab Rouen, Yvon Gervaise – Secur’Food – 14/10/2014 LA PERFORMANCE APPLIQUÉE À L’ANALYSE EN GC/MS/MS & LC/MSMS : CONCLUSIONS L’utilisation de ces méthodes d’extractions peu sélectives ont été rendus possibles par l’arrivée sur le marché d’appareils plus sensibles et plus sélectives (GC/MSMS et UPLC/MSMS). Au niveau du laboratoire, la technique UPLC/MSMS nous donne entière satisfaction (robustesse et sensibilité). Pour la GC/MSMS, l’idéal serait d’avoir un appareil 10 fois plus sensible pour les matrices type Baby Food ou des molécules peu sensibles (Endrine – Aldrine…).
  • 28. Screening LC-MS/MS Antibiotiques 169 molécules dans un extrait de produit carné 2-Amino-5-benzoylbenzimidazole Ceftiofur Erythromycin Leucogentian violet Ormetoprim Sulfamethazine 2-Aminoflubendazole Cephalosporine Etodolac Leucomalachite green Oxacillin Sulfamethizole 2-Hydroxymethyl-1-methyl-5-nitro-imidazol Cephalosporine Febantel Lincomycin Oxfendazole Sulfamethoxazole 2-mercaptobenzimidazole Chloramphenicol Fenbendazole Lomefloxacin Oxfendazole Sulfone Sulfamethoxypyridazine 2-Nitrobenzaldehyde Semicarbazone Chlormadinone acetate Fenbendazole Sulfone Maduramycin Oxibendazole Sulfamonomethoxine 2-NP-AHD Chlortetracycline Fenbendazole Sulfoxide Malachite green Oxolinic Acid Sulfamoxole 2-NP-AMOZ Cinoxacin Florfenicol Marbofloxacin Oxyphenbutazone Sulfanilamide 2-NP-AOZ Ciprofloxacin Florfenicol Amine Mebendazole Oxytetracycline Sulfanitran 2-quinoxalinecarboxylic acid Clindamycin Flubendazole Medroxyprogesterone 17-acetate Penicillin G Sulfaphenazole 6-phenyl-2-thiouracil Clopidol Flumequine Megestrol acetate Penicillin V Sulfapyridine Acetylgestagene Closantel Flunixin Melengestrol acetate Phenylbutazone Sulfaquinoxaline Albendazole Cloxacillin Fluorchinolone Metronidazole Ractopamine Sulfasalazine Albendazole Sulfone Coccidiostat Fluoroquinolone Metronidazole-OH Rafoxanide Sulfathiazole Albendazole Sulfoxide Danofloxacin Gentian Violet Minocycline Ronidazole Sulfisomidine Albendazole-2-aminosulfone Dapsone Halofuginone Monensin Roxithromycin Sulfisoxazole Amoxicillin Decoquinate Hydroxymebendazole Nafcillin Sarafloxacin Sulfonamide Ampicillin Demeclocycline Hydroxythiabendazole Nalidixic Acid Semduramicin Tetracycline Amprolium Desethylene Ciprofloxacin Ibuprofen Naproxen Spiramycin Tetramisole Anti parasite Diaveridine Indomethacin Narasin Sulfabenzamide Thiabendazole Antibiotic Diclofenac Nicarbazin Sulfacetamide Thiamphenicol Aprinocid Dicloxacillin Ipronidazole Niclosamide Sulfachloropyridazine Thyrostatica Bacitracin Difloxacin Ipronidazole-OH Nitrofurane Sulfaclozine Tiamulin Benzimidazole Dimetridazole Isochlortetracycline Nitromidazole Sulfadiazine Tilmicosin Brilliant green Dipyrone Josamycin Norfloxacin Sulfadimethoxine Tolfenamic acid Cambendazole Doxycycline Ketoprofen Novobiocin Sulfadoxine Triclabendazole Carbadox Enoxacin Ketotriclabendazole NSAID Sulfaguanidine Triclabendazole Sulfone Cefazolin Enrofloxacin Laidlomycin propionate -Ammonium Ofloxacin Sulfamerazine Triclabendazole Sulfoxide Cefoperazone epi-Tetracycline Lasalocid Orbifloxacin Sulfameter Trimethoprim Tylosin
  • 29. 29 © SGS Multilab Rouen, Yvon Gervaise – Secur’Food – 14/10/2014 Amoxicillin (50 µg/kg) Doxycycline (50 µg/kg) Nafcillin (50 µg/kg) Ampicillin (50 µg/kg) Halofuginone (10 µg/kg) Narasin (100 µg/kg) Sulfadiazine (50 µg/kg) Chloramphenicol (0.3 µg/kg) Lasalocid (100 µg/kg) Oxacillin (50 µg/kg) Sulfadimethoxine (50 µg/kg) Chlortetracycline (50 µg/kg) Leucomalachite green (1 µg/kg) Oxytetracycline (50 µg/kg) Sulfadoxine (50 µg/kg) Cloxacillin (50 µg/kg) Maduramycin (10 µg/kg) Penicillin G (50 µg/kg) Sulfamethoxypyridazine (50 µg/kg) Demeclocycline (50 µg/kg) Malachite green (1 µg/kg) Penicillin V (50 µg/kg) Tetracycline (50 µg/kg) Dicloxacillin (50 µg/kg) Monensin (100 µg/kg) Salinomycin (50 µg/kg) MULTI RÉSIDUS ANTIBIOTIQUES DEVELOPPÉS À SGS MULTILAB Rouen - Technique performante en LC/MS/MS, prix de revient : très dépendant du nombre d’échantillons, du prix des étalons, de la méthodologie utilisée (screening ou quantification) -4 Familles : Pénicillines, Anticoccidiens, Tétracyclines, Sulfamides
  • 30. 30 © SGS Multilab Rouen, Yvon Gervaise – Secur’Food – 14/10/2014© SGS Multilab Rouen, Yvon Gervaise – Secur’Food – 14/10/2014© SGS Multilab Rouen AUTHENTIFICATION MÉTHODE ISOTOPIQUE ET ISOTOPE STABLE ET INSTABLE MESURE ÉMISSION RADIOACTIVITÉ -Détermination origine naturelle -Authentification du cru d’un vin - Vérification allégation produit naturel : o arôme, o colorant, o… - Authentification o matière première o produit brut o produit fini
  • 31. 31 © SGS Multilab Rouen, Yvon Gervaise – Secur’Food – 14/10/2014© SGS Multilab Rouen, Yvon Gervaise – Secur’Food – 14/10/2014 AUTHENTIFICATION DU CRU D’UN VIN Mesure de la radioactivité Contrôle non destructif : • Bouteille fermée • Quantité intacte Datation de la bouteille Datation du vin
  • 32. 32 © SGS Multilab Rouen, Yvon Gervaise – Secur’Food – 14/10/2014© SGS Multilab Rouen, Yvon Gervaise – Secur’Food – 14/10/2014 AUTHENTIFICATION DU CRU D’UN VIN : PRINCIPE
  • 33. 33 © SGS Multilab Rouen, Yvon Gervaise – Secur’Food – 14/10/2014© SGS Multilab Rouen, Yvon Gervaise – Secur’Food – 14/10/2014 AUTHENTIFICATION DE L’ORIGINE : ANALYSE DES ISOTOPES STABLES
  • 34. QUANTIFICATION MULTI-MÉTAUX LOURDS DANS LES PRODUITS ALIMENTAIRES PAR ICP-MS LE CONTRÔLE NOUVEAU DES MÉTAUX LOURDS EST ARRIVÉ
  • 35. 35 © SGS Multilab Rouen, Yvon Gervaise – Secur’Food – 14/10/2014© SGS Multilab Rouen, Yvon Gervaise – Secur’Food – 14/10/2014 NÉCESSITÉ ET OPTIMISATION DE L’ANALYSE MULTI-MÉTAUX LOURDS Les métaux sont toxiques, ce qui signifie que la consommation d'aliments contenant une concentration élevée de métaux lourds peut causer de graves troubles de la santé 1) L'arsenic (As), Cadmium (Cd), Plomb (Pb) et l'étain inorganique (Sn) Ces métaux sont les plus toxiques des métaux lourds agroalimentaires. 2) Les agences alimentaires ont introduit des directives qui stipulent les concentrations maximales admissibles pour les métaux lourds dans les aliments. 3) La Commission européenne, la directive 1881/2006 spécifie les concentrations maximales pour Cd, inorganique Sn, Hg et Pb dans une variété de produits alimentaires, avec, par exemple, 0,02 mg Pb/kg admissible dans les produits laitiers et jusqu'à 1,5 mg Pb/kg autorisé chez les mollusques bivalves.
  • 36. 36 © SGS Multilab Rouen, Yvon Gervaise – Secur’Food – 14/10/2014© SGS Multilab Rouen, Yvon Gervaise – Secur’Food – 14/10/2014 ANALYSES MULTI-MÉTAUX LOURDS ET CONTEXTE NORMATIF DU DÉVELOPPEMENT ANALYTIQUE ET EXIGENCES - MODE DE MINÉRALISATION - MODE DE QUANTIFICATION L’analyse multi-métaux en deux normes: La minéralisation, NF EN 13805, l’analyse, NF EN 15763 Pourquoi valider ? s’appuyer sur un plan d’expériences afin de s’assurer de la justesse de notre analyse, de pouvoir rendre des limites de quantification toujours de plus en plus basses, et de pouvoir étendre le domaine d’application (le nombre d’éléments et d’autres matrices au-delà de la norme. Être reconnu par le Comité Français d’Accréditation
  • 37. 37 © SGS Multilab Rouen, Yvon Gervaise – Secur’Food – 14/10/2014 MODE DE MINÉRALISATION Broyage / Homogénéisation Reprise du minéralisat/ dilution Préparation (ne garder que la partie comestible) Pesée dans un tube 0.3- 0.5g + 3mL HNO3 Chauffage micro-ondes fermé Ultrawave 15mn Quantification et Analyse des éléments en un run en ICP-MS Céréales, légumes et fruits , produits diététiques et de régime produits riches en huile ( graines oléagineuses), Produits laitiers ( fromage, lait), produits d’origine animales (poissons, matières grasses, produits de la pêche) , aliments pour animaux ( farine de poissons, aliments composés…) huile de poissons huiles végétales
  • 38. 38 © SGS Multilab Rouen, Yvon Gervaise – Secur’Food – 14/10/2014© SGS Multilab Rouen, Yvon Gervaise – Secur’Food – 14/10/2014 RÉSULTAT DE L’INNOVATION précise et robuste : nécessaire pour les mesures de métaux lourds dans les aliments afin d'assurer la conformité aux règlements. ICP-MS élémentaire et isotopique offre la possibilité d'analyser toute une série d'éléments dans un même essai, Gain de productivité (coût et temps): fiabilité et rapidité du résultat permettant un relais plus rapide auprès du fabricant, de l’importateur, du consommateur
  • 39. 39 © SGS Multilab Rouen, Yvon Gervaise – Secur’Food – 14/10/2014© SGS Multilab Rouen, Yvon Gervaise – Secur’Food – 14/10/2014 INNOVATION ANALYTIQUE : UNE NOUVELLE APPROCHE PLUS PERFORMANTE VALEUR AJOUTÉE POUR LE LABORATOIRE ET LE CLIENT La technologie permet aux laboratoires de sécurité alimentaire afin d'améliorer sensiblement leur productivité, avec plus de 50 échantillons analysés par heure. Autres avantages importants de l'ICP-MS comprenant une sensibilité accrue, un rapport signal sur bruit élevé et la flexibilité d'analyser n'importe quel élément du tableau périodique. La méthode offre de beaucoup plus faibles limites de détection par rapport à l’absorption atomique en four graphite (GFAA) et inductif spectrométrie d'émission optique à plasma (ICP-OES) tout en produisant moins d'interférences que ICP-OES.
  • 40. 40 © SGS Multilab Rouen, Yvon Gervaise – Secur’Food – 14/10/2014 Peséede l’échantillon Hydrolyse enzymatique B12 Enzyme : pepsine et/ou α- amylase Bain 37°C-30min Bain 100°C-30 min B9/B8 Enzyme : pancréatine Bain 37°C-30min Bain 100°C- {20 min B9 {30 min B8 B5 Enzyme : pepsine et phosphatasealcaline Bain 50°C-3h Bain 20°C-18h Purificationsur colonnes immunoenzymatiquesspécifiques Purificationsur cartoucheséchangeusesd’anions et de cations B12 Eluant: TFA 0.025% Détection: HPLC/UV 361 nm Colonne Ascentis C18 Vinjecté:100µL B9 Eluant: TFA 0.1% Détection: HPLC/UV 280 nm Colonne Aquasil C18 four 37 °C Vinjecté:100µL B8 Eluant: TFA 0.025%/CH3CN(90/10) Détection: HPLC/UV 204 nm Colonne NucleoshellRP 18,2,7 µm Four 37°C Vinjecté:100µL B5 Eluant: tampon KH2PO4+ Eluant de dérivation post-colonne Détection: HPLC/FLUO Ex : 345 nm/Em :455 nm Colonne Lichrospher 100RP18 end capped 5µm Four 90°C Vinjecté:100µL QUALITÉ ALIMENTAIRE PROFIL NUTRITIONNEL INNOVATION ANALYTIQUE DOSAGE MULTI-VITAMINES
  • 41. 41 © SGS Multilab Rouen, Yvon Gervaise – Secur’Food – 14/10/2014© SGS Multilab Rouen, Yvon Gervaise – Secur’Food – 14/10/2014 GESTION D’ALERTE – INNOVATION VERS UNE NOUVELLE MÉTHODE Arsenic dans les boissons et aliment : le cas du riz Méthode classique : mesure As total As minéral, As organique ? Spéciation méthode appliquée aux matrices riz, produits à base de riz, jus de fruits IC-ICP/MS : Chromatographie ionique couplée à la détection ICP/MS Implication de l’AOAC Importance de la spéciation pour une mesure pertinente de l’exposition de la population
  • 42. 42 © SGS Multilab Rouen, Yvon Gervaise – Secur’Food – 14/10/2014© SGS Multilab Rouen, Yvon Gervaise – Secur’Food – 14/10/2014 Règlement européen n°10/2011 du 14 janvier qui définit la limite de migration spécifique pour les matériaux en contact Phtalates : plastifiant, souplesse, PVC, Epoxy, PGT Boissons alcoolisées, utilisation de nombreuses matières plastiques : cuves, revêtement, tuyaux, transport Phtalates solubles dans ETOH Les seuils maximaux admis pour les phtalates dans les vins et spiritueux sont les suivants : 0,3 mg/kg pour DBP 1,5 mg/kg pour DEHP 9 mg/kg pour DINP/DIDP 30 mg/kg pour BBP Méthodes et technologie GC/MS conforme à la recommandation OIV n°477-2013 et 521-2013 PHTALATES DANS LES BOISSONS ALCOOLISÉES ET DOSAGE GC/MS
  • 43. 43 © SGS Multilab Rouen, Yvon Gervaise – Secur’Food – 14/10/2014© SGS Multilab Rouen, Yvon Gervaise – Secur’Food – 14/10/2014 CONCLUSION Besoin qualité, sécurité, authenticité des produits L’innovation en méthodologie d’analyses déterminé par de nouvelles approches Méthodes multi-analyte développée à SGS MULTILAB Multi-résidus pesticides Multi mycotoxines Multi résidus médicamenteux Multi métaux lourds Optimisation des plans de contrôles en réponse aux exigences de nos clients PRÉOCCUPATION INNOVATION SOLUTION OPTIMISATION
  • 44. 44 © SGS Multilab Rouen, Yvon Gervaise – Secur’Food – 14/10/2014© SGS Multilab Rouen, Yvon Gervaise – Secur’Food – 14/10/2014 DÉVELOPPEMENT PRESTATION ANALYTIQUE Innovation réalisée sous la contrainte Résolution de problématique des plans de contrôles Suivi de la mise sur le marché : service à plus haute valeur ajoutée -> Suivi de l’usage qu’en feront nos clients par rapport à leurs besoins Derrière toute méthode il y a une philosophie Ces innovations analytiques déterminent l’augmentation de la valeur ajoutée des services et prestations de notre laboratoire pour nos clients CONCLUSION
  • 45. 45 © SGS Multilab Rouen, Yvon Gervaise – Secur’Food – 14/10/2014© SGS Multilab Rouen, Yvon Gervaise – Secur’Food – 14/10/2014 Innovation et création espace numérique du laboratoire interaction avec ses clients et veille technique, scientifique et réglementaire https://mobile.twitter.com/expertscience/st atus/483882987285917696 13 janvier 2015 : INNOVATION AU LABORATOIRE Inauguration de l’extension du laboratoire EN SAVOIR PLUS… POUR INFORMATION
  • 46. 46 © SGS Multilab Rouen, Yvon Gervaise – Secur’Food – 14/10/2014© SGS Multilab Rouen, Yvon Gervaise – Secur’Food – 14/10/2014
  • 47. 47 © SGS Multilab Rouen, Yvon Gervaise – Secur’Food – 14/10/2014 Yvon GERVAISE yvon.gervaise@sgs.com @expertscience : http://twitter.com/expertscience http://expertscience.over-blog.com https://plus.google.com/+YvonGervaise http://slideshare.net/expertscience Directeur, SGS Multilab Rouen 65 rue Ettore Bugatti - BP 90014 – 76801 Saint Etienne du Rouvray t 02 35 07 91 80 f 02 35 07 91 25 Merci de votre attention Les conférences et interventions du labo Vidéo du laboratoire Journal collaboratif © SGS Multilab Rouen, Yvon Gervaise – Secur’Food – 14/10/2014