La microscopie à fluorescence avec le cyscope®tb offre une méthode rapide et sensible pour détecter les mycobactéries tuberculeuses, surpassant la microscopie ordinaire. Un protocole modifié a réduit le temps de préparation des échantillons à dix minutes, tout en maintenant une excellente sensibilité et spécificité. Ce système, adapté aux zones reculées, utilise des LEDs pour rendre le diagnostic plus accessible et permet une documentation efficace des résultats.

1. Détection des Mycobactéries Tuberculeuses par la Microscopie à Fluorescence grâce à un nouvel outil: le CyScope®TB Leopold G. Lehman 1,2 , Arlette L. Ngapmen Yamadji 3 , Françoise Ngo Sack 2 , Charles F. Bilong Bilong 3 1 - Faculté des Sciences, Université de Douala 2 - Faculté de Médecine et des Sciences Pharmaceutiques, Université de Douala, 3 - Département de Biologie et physiologie animales, Faculté des Sciences, Université de Yaoundé I – Cameroun. 2011 Microbiologie Microbiology Poster 70

2. 2011 Microbiologie Microbiology Poster 70 9,27 millions de nouveaux cas de TB dans le monde chaque année, 31% en Afrique (OMS, 2009). 1,37 millions (15%) = co-infections avec le VIH/SIDA Profil endémique au Cameroun: 2515 cas recensés en 2008 par le PNLT avec 40% de VIH/TB. Contexte

3. 2011 Microbiologie Microbiology Poster 70 Matériel et Méthodes Microscopie sur CyScope®TB Collecte des échantillons Confection des frottis Séchage Fixation Coloration au Ziehl-Neelsen Coloration à l’auramine-rhodamine (AR)

4. 2011 Microbiologie Microbiology Poster 70 Résultats Bacilles tuberculeux vus au CyScope ® à la MO et à la MF Lumière blanche (MO) Lumière fluorescente (MF) BAAR

5. 2011 Microbiologie Microbiology Poster 70 Résultats 300 Echantillons de crachats étudiés 17 faux-négatifs en MO MO: sensibilité=83% spécificité=100% MF: sensibilité=100% spécificité=92,2% Un protocole modifi é a permis de r é duire le temps de coloration à l’AR de 21 à 10 min Résultats Microscopie Ordinaire (MO) Microscopie à la Fluorescence (MF) p Prélèvements Fréquence (%) Prélèvements Fréquence (%) Positifs 83 ( 27,7 ) 100 ( 33,3 ) 0,06 Négatifs 217 (72,3) 200 (66,7)

6. Discussion 2011 Microbiologie Microbiology Poster 70 La MF à l’auramine-rhodamine est relativement plus sensible que la MO au Ziehl-Neelsen à chaud couramment utilisée et présente une rapidité et une facilité de lecture. La différence entre les 2 techniques n’est pas significative ( p >0,05) à l’instar des travaux de Marais et al . (2008). Le temps de préparation des échantillons à la MF a été réduit d’environ 50% (10 minutes) grâce à un protocole modifié. Les frottis colorés à l’auramine-rhodamine se conservent moins longtemps que ceux colorés par la méthode de Ziehl-Neelsen.

7. Conclusion 2011 Microbiologie Microbiology Poster 70 La microscopie a fluorescence est une alternative intéressante dans le diagnostic rapide de la tuberculose dans les PVD. L’autonomie énergétique du CyScope permet son utilisation dans les zones reculées . Les nouvelles ampoules à diodes électroluminescentes (LED) rendent plus accessibles le diagnostic en fluorescence. La caméra CCD reliée au CyScope ® TB par un port USB permet une bonne documentation des observations. CyScope® TB Plus

8. 2011 Microbiologie Microbiology Poster 70 Merci !