Analyse et dosage des résidus de carbamates dans la pomme par HPLC

UNIVERSITE HASSAN II MOHAMMEDIA-CASABLANCA
Faculté des Sciences et Techniques Mohammedia
MASTER SCIENCES ET TECHNIQUES
Spécialité : Sécurité Alimentaire et Démarche Qualité
MEMOIRE DE STAGE DE FIN D’ETUDES
Intitulé
Présenté par : Imane HACHOUMI
Encadrée par :
- Pr F. ZKHIRI
- Mme N.RHADDIOUI
Soutenu publiquement le 25 Juin 2013 devant les membres de jury :
-Pr A. AMMAR Faculté des Sciences et Techniques Mohammedia Président
-Pr N. MESKINI Faculté des Sciences et Techniques Mohammedia Examinatrice
-Pr F. ZKHIRI Faculté des Sciences et Techniques Mohammedia Examinatrice
-Mme N.RHADDIOUI Institut National d’hygiène de Rabat Examinatrice
2012-2013
Analyse et dosage des résidus de carbamates
dans la pomme par HPLC

Dédicaces
Je dédie ce modeste travail :
A mes parents pour leur amour inestimable, leur confiance, leur
soutien, leurs sacrifices et toutes les valeurs qu'ils ont su m'inculquer.
A mes frères et ma sœur pour leur tendresse, leur complicité et leur
présence malgré la distance qui nous sépare.
A mes nièces et neveux Rania, Farès, Dina, Jinane et Louay, ma
plus grande source de bonheur, j'espère que la vie leur réserve le
meilleur.
A toute ma famille ainsi qu'à mes amies.

REMERCIEMENTS
Je remercie en premier lieu Monsieur Mustapha Lkhider le doyen de la faculté des
sciences et techniques de Mohammedia.
Je remercie Monsieur Mohamed Rhajaoui le directeur de l’Institut National d’Hygiène
de Rabat.
Je tiens à remercier le professeur Said EL ANTRI, Directeur du Laboratoire,
Biochimie, Environnement & Agroalimentaire, et responsable du Master Sécurité Alimentaire
et Démarche Qualité (SADQ) à la Faculté des Sciences et Techniques Mohammedia. Vos
encouragements inlassables, votre amabilité, votre gentillesse mérite toute admiration. Je
saisie cette occasion pour vous exprimer ma profonde gratitude tout en vous témoignant mon
respect.
Je remercie également mon encadrante Madame Fouzia ZKHIRI, enseignant-chercheur et
professeur de Toxicologie à la Faculté des Sciences et Techniques Mohammedia, pour le
privilège qu'elle m'a fait en acceptant de diriger ce travail. Elle a été particulièrement
disponible et consciencieuse durant tout mon travail, elle m’a accordé de son temps et de son
soutien et m’a toujours encouragée.
Elle m’a bien sûr transmis une partie de son savoir en toxicologie et m’a aidé à acquérir plus
d’assurance et une plus grande confiance dans mon sujet.
Je tiens à remercier également mon encadrante Madame Nabiha RHADDIOUI, Docteur et
administrateur scientifique à l’institut national d’Hygiène pour l'honneur qu'il m'a fait en
acceptant de diriger ce travail. Sa gentillesse, sa modestie, sa riche expérience et l'accueil cordial
qu'elle m'a toujours réservé m'ont inspiré une grande admiration à son égard.
Je le remercie vivement pour la confiance qu’elle m’a attribuée dès mon arrivée et pour toutes les
informations enrichissantes sur le fonctionnement de l’HPLC.
Au terme de ce travail, je remercie Madame Nezha BARAKATE, qui m’a aidé tout au long
de cette étude, avec ses conseils et ses encouragements, mais aussi en participant activement aux
expérimentations.
Je tiens à exprimer mes remerciements à Monsieur Abdallah EL ABIDI, chef du
département de toxicologie et hydrologie de l’Institut National d’Hygiène de m’avoir accueilli
au sein du département.
Je souhaite remercier Monsieur Abdellah CHBIHI pour son aide précieuse et pour m’avoir
fait partager ses nombreuses connaissances et qui m’a souvent donné le courage d’avancer dans
mes recherches.

Je remercie vivement Mme Naima MAHNENI, Ingénieur à l’Institut National d’Hygiène
de Rabat, pour sa serviabilité et ses conseils scientifiques ainsi que pour tout son soutien.
J’exprime toutes mes reconnaissances au personnel du Laboratoire de Toxicologie et
d’Hydrologie à l’Institut national d’Hygiène, en particulier Monsieur le Docteur Abdellah
ZINEDINE pour son aide inconditionnelle ainsi que son soutien.
Je remercie vivement Madame N. MESKINI et Monsieur A. AMMAR qui ont acceptés
de juger ce travail et d'en être les rapporteurs. Leurs remarques et suggestions contribueront à
améliorer la qualité de ce document, je leur en suis très reconnaissante.
Mes remerciements les plus chaleureux vont à tous mes camarades qui étaient avec moi au
laboratoire de Toxicologie et d’Hydrologie à l’Institut national d’Hygiène pour leurs
encouragements, leur aide ainsi que pour l'ambiance agréable tout au long de ce stage.
Ces 4 mois de stage au sein de l’institut national d’Hygiène ont été l’occasion de rencontres
enrichissantes, tant sur le plan personnel que professionnel. Merci à toutes les personnes qui ont
croisé mon chemin, et qui ont contribué à faire de moi ce que je suis aujourd’hui.
Que tous ceux qui m’ont aidé de près ou de loin dans l’élaboration de ce travail trouvent ici
l’expression de ma sincère gratitude.

Sommaire
Liste des figures ..........................................................................................................................1
Liste des tableaux…………………………………………………………............................................................... 3
Liste des abréviations................................................................................................................4
Avant-propos................................................................................................................................6
Introduction générale...............................................................................................................9
Revue bibliographique ...........................................................................................................12
I. Généralités sur les pesticides .................................................................................................13
I.1. Historique et définitions......................................................................................................13
I.2. Classification des pesticides................................................................................................14
I.3. Principales étapes de mise en marché d’un pesticide...........................................................17
I.4. Impacts des pesticides sur l’environnement et la santé.........................................................18
I.5. Résidus des pesticides dans les aliments..............................................................................20
I.6. Réglementation en relation avec les résidus de pesticides....................................................22
II. Les Carbamates......................................................................................................................25
II.1. Classification des carbamates............................................................................................25
II.2. Utilisations........................................................................................................................26
II.3. Les propriétés physico-chimiques des carbamates..............................................................27
II.4. La toxicité des carbamates.................................................................................................28
III. La culture du pommier au Maroc........................................................................................31
III.1. Présentation de la filière du pommier au Maroc ...............................................................31
III.2. Gestion des pesticides en culture du pommier au Maroc ...................................................32
IV. Le dosage des résidus de carbamates dans le pommier.....................................................33

IV.1. Les résidus de carbamates dans la pomme et réglementation ............................................34
IV.2.Principales analyses de résidus de carbamates dans le pommier........................................35
Matériel et Méthodes...............................................................................................................39
I. Prélèvement des échantillons.............................................................................................40
II. Réactifs ................................................................................................................................40
III. Appareillage…………………………………………………………………….....................................................41
IV. Préparation des solutions Standards ................................................................................41
V. Méthode d’extraction.........................................................................................................41
VI. Technique du Dopage .........................................................................................................41
VII. Expression des résultats.....................................................................................................42
Résultats et discussion............................................................................................................44
I. Résultats ..............................................................................................................................45
I.1. Le dosage des résidus de carbamates dans la pomme ..........................................................45
I.2. Les paramètres à déterminer...............................................................................................46
II. Discussion ..........................................................................................................................51
Conclusion et perspectives...................................................................................................54
Références Bibliographiques...............................................................................................57
Annexe
Résumé

Liste des figures
1
Liste des figures
Figure 1: L’organigramme de l’INH………………………………………………………………………………………….….7
Figure 2: Structures chimiques des principales familles de pesticides……………………………………..16
Figure 3: Structures chimiques des principales familles des Carbamates………………………………...16
Figure 4: Structures chimiques des principales familles organophosphorés…………....................17
Figure 5: Mécanismes de transferts et de transformations des pesticides dans
l’environnement ……………………………………………………………..…………………………………...........…18
Figure 6: Structure générale d’un carbamate………………………………………………..................................25
Figure 7: Structure du carbaryl (methyl carbamate)………………………………………………………...........…25
Figure 8: Structure du Pirimicarbe (methyl carbamate)………………………………………………………….….26
Figure 9: Structure de l’aldicarbe (N-methyl carbamate)…………………………..………………………………26
Figure 10: Structure de la molécule du méthomyl……………………………………………………………………...27
Figure 11: Structure de la molécule de l’Oxamyl…………………………………………………………………….…28
Figure 12: Inhibition de l’Acetylcholinesterase…………………………………………..................................29
Figure 13: Mode d’action de l'inhibition de l’Acétylcholinestérase par les carbamate.............30
Figure 14: La production du pommier par région ………………………………………………………….…….…...31
Figure 15: Schéma de principe du fonctionnement de l’HPLC………..……………............................37
Figure 16: Chromatogramme d’un mélange et les différents paramètres mesurable…………......38
Figure 17: Prototype d’un chromatogramme HPLC-UV d’un échantillon de pomme
dopé par un mélange de 3 carbamates………………..........................................................42
Figure 18-a: Chromatogramme HPLC-UV d’un l’échantillon de pomme jaune non pelée
à 280 nm…………………………………………………………………………………………………………………..45
Figure 18-b: Chromatogramme HPLC-UV d’un l’échantillon de pomme jaune non pelée
à 245 nm………………………………………………………………………………………………………………...45
Figure 19-a: Chromatogramme HPLC-UV d’une solution standard du Carbaryl………………….47
Figure 19-b: Chromatogramme HPLC-UV d’un échantillon de PJNP dopé avec du
Carbaryl……………………..................................................................................................47
7
16
16
17
18
25
26
26
26
27
28
29
30
31
37
38
42
45
45
47
47
25
25
26
26
27
28
29
30
38
42
45
45
47
47
30

Liste des figures
2
Figure 20-a: Chromatogramme HPLC-UV d’un mélange de carbamate
(Carbofuran, Carbaryl et Aldicarb).………………………………………………………………………48
Figure 20-b: Chromatogramme HPLC-UV d’un échantillon de PJNP dopé avec
un mélange de carbamate (Carbofuran, Carbaryl et Aldicarb)……………….............48
Figure 21 : Chromatogramme HPLC-UV d’un mélange de carbamate
(Méthomyl,Carbofuran, et Baygon).…………………………………………………..………………..49

Liste des TABLEAUX
3
Liste des tableaux
Tableau 1: Historique de l’évolution des trois plus grandes classes de pesticides
des années 1900 à 2000.………..........................................................................................13
Tableau 2: Propriétés physico-chimiques du Méthomyl…………………………………….........................27
Tableau 3: Propriétés physico-chimiques de l’Oxamyl………………………………………………………………28
Tableau 4: Matières actives utilisées dans la culture du pommier au Maroc………………………...…33
Tableau 5: Les LMR de carbamates admissibles sur la pomme ainsi que leur durée de
demi-vie dans l’environnement avant dégradation…………………………….......................…34
Tableau 6: Les échantillons de pommes analysés par HPLC-UV……………………………………….…..46
Tableau 7: Les temps de rétention des standards de carbamates à une concentration
de 5 ppm………………………………………………………………………………………………………………….......50
Tableau 8: Pourcentages de récupération des carbamates répertoriés dans les échantillons
de pommes jaunes non pelées.........................................................................................50
13
27
28
33
34
46
50
50

Liste des abréviations
4
ACHE : Acétylcholinestérases
Aech : Aire échantillon
Astd : Aire standard
BPA : Bonnes pratiques agricoles
CAPM : Centre anti poison du Maroc
CE : Commission Européenne
CEAEQ : Centre d’expertise en analyse environnementale du Québec
CRRAM : Centre régional de la recherche agronomique de Meknès
C18 : Chaine linéaire de 18 atomes de carbones
DAR : Délai avant récolte
DGCCRF : Direction générale de la concurrence de la consommation et de la
répression des fraudes.
DJA : Dose journalière admissible
DL50 : Dose létale qui entraine la mort de 50 % des animaux d’expérience
DSF : Dose sans effet
EACCE : Etablissement autonome de contrôle et de coordination des exportations
EHU : Environmental health unit
EPA : Agence américaine de protection de l’environnement
FAO : Food and agriculture organization
HPLC : Chromatographie liquide à haute performance
IAP : Intoxication aiguë par pesticide
INRA : Institut national de recherche agronomique
LMR : Limites maximales des résidus
L.O.A.R.C : Laboratoire officiel d’analyse et de recherches chimiques

5
MAAF : Ministère de l’agriculture, de l’agroalimentaire et de la forêt France
MARA : Ministère de l’agriculture et des ressources animales
OC : Organochlorés
OMS : Organisation mondiale de la santé
OP : Organophosphorés
PJNP : Pommes jaunes non pelées
PJP : Pommes jaunes pelées
PNUE : Programme des nations unies pour l’environnement
POP : Polluants organiques persistants
Ppm : Part par million
PRNP : Pommes rouges non pelées
PRP : Pommes rouges pelées
R : Le rendement (en %)
RE : Règlement Européen
SC : Suspension concentré
SPC : Service de protection de la consommation
Tr : Temps de rétention
UE : Union Européenne
UV : Ultra violet
WG : Granulé à disperser dans l’eau
WP : Poudre mouillable

Avant-propos
6
Avant-propos
I. Présentation du lieu de stage
L’Institut National d’Hygiène du Maroc a été inauguré le 30 décembre 1930 à Rabat par le
professeur Léon BERNARD, Président du Conseil Supérieur d'Hygiène de France. L’INH est
sous la tutelle du Ministère de la Santé et constitue l’organe de référence en matière de
biologie médicale et environnementale. Son champ d'intervention est très vaste et ses
laboratoires jouent le rôle de support technique et scientifique aux différents programmes
sanitaires tels la tuberculose, les méningites, les maladies entériques, les salmonelloses, les
infections sexuellement transmissibles, et la grippe.
L'INH assure également l'expertise technique en matière d'hygiène alimentaire, de
toxicologie de l'environnement, et dans le domaine médico-légal.
Pour assurer ses fonctions, l’Institut National d’hygiène dispose de plusieurs pôles ; le pôle
de Biologie médicale et le pôle Biologie environnementale. Chacun de ces pôles est constitué
de plusieurs départements et laboratoires.
En effet mon stage a été effectué au département de Toxicologie et d’Hydrologie qui
demeure le seul support en matière d’investigation toxicologiques et d’hygiène industrielle et
environnementale. Les activités du département de toxicologie sont multiples et touchent les
domaines de la toxicologie alimentaire, médico-légale, de l’hydrologie et de l’hygiène
industrielle et environnementale. Actuellement, il est le seul département à l’échelle national
en mesure d’effectuer des investigations toxicologiques, notamment dans le cadre des
intoxications collectives par les substances chimiques.
Par ailleurs, en plus de son rôle de support technique dans les programmes du Ministère de la
Santé, le département de Toxicologie entretient des relations constantes avec différents
départements ministériels (environnement, agriculture, pêches, industrie et mines, ...).

Avant-propos
7
II. L’organigramme
Direction Service des Engagements et
Suivi des Marchés
Service pour l’inventaire
des Stocks
Administratif
Secrétariat
Service pour la maintenance
des équipements
Service Informatique
Services des Appels d’Offres
Service du Personnel
Biologie
Médicale
Bureau des
Laboratoires
Biologie
Environnementale
Service d’Appui
Logistique
Service de
Communication
Département :
Bactériologie
Médicale
Département de
Microbiologie des
Eaux , Aliments et
Hygiène Alimentaire
Département de
Toxicologie Hydrologie
Laboratoire
d’Hydrologie et
Thermalisme
Laboratoire de
Toxicologie
Environnementale
Chimique et
Industrielle
Laboratoire de
Bromatologie et
Toxicologie
Alimentaire
Laboratoire de
Toxicologie
Médicolégale
Service
gestion des
Ressources
des
laboratoires
Santé
Publique
Service de
Coopération,
Promotion de la
Recherche &
Développement
Département
d’Immunologie
virologie
Service de
Contrôle de
Qualité
Service de
Qualité
Département
de Génétique
Médicale
Service
Epidémiologiqu
e
Département
Parasitologie-
Mycologie -
Entomologie
Médicale
Service de
Formation
et de la
Supervision
Service Hygiène
et Sécurité
BibliothèqueLaboratoire de
Biochimie -
Hématologie
Laboratoire
d’Anatomie
Pathologie
Laboratoire
d’Hygiène
Figure 1 : L’organigramme de l’INH

Avant-propos
8
III. But de stage
Dans le cadre d’une coopération scientifique entre la faculté des sciences et techniques de
Mohammedia et l’institut national d’hygiène de Rabat, Mon projet de recherche intitulé
Analyse et dosage des résidus de carbamates dans les pommes par HPLC a été effectué au
sein du laboratoire de toxicologie durant 5 mois.
Ce stage m’a permis d’acquérir un savoir faire et des connaissances dans les domaines de la
toxicologie alimentaire, du médico-légale, de l’hygiène industrielle et de l’hydrologie.
Cette découverte du monde du travail est fondamentale car elle nous permet d’en comprendre
l’environnement (conditions matérielles, humaines, organisationnelles, sécurité, formation
nécessaire…) et de participer à des travaux au laboratoire.

10
Introduction
Les pesticides sont aujourd'hui très largement utilisés en agriculture afin d'améliorer la
qualité des produits et d'augmenter le rendement des cultures. Toutefois, derrière ces
bienfaits, se cachent des effets indésirables qui ont un risque éventuel sur l’environnement,
sur la qualité des produits agricoles, et sur la santé des populations. Malheureusement, qui dit
traitement, dit résidus.
Nous sommes donc régulièrement exposés aux pesticides par le biais de notre
alimentation. Il est donc particulièrement important de contrôler les teneurs en résidus de
pesticides des produits afin de vérifier que les traitements phytosanitaires ont été effectués de
manière correcte et que les résidus sont en concentration la plus faible possible afin qu'il n'y
ait aucun risque pour la santé du consommateur.
Au Maroc, le pommier occupe une superficie d’environ 31.813 ha, qui représente 22% du
total du continent africain. A l’échelle nationale il représente 14% de la superficie des
rosacées fruitières (Lamhamdi, 2012). Toutefois la culture du pommier est sujette de
nombreuses attaques parasitaires par une gamme assez large de ravageurs (mouche blanche,
pucerons, acariens, moisissures, …) et maladies (l’oïdium, pourriture, tavelure, …) causant
ainsi des pertes remarquables en rendement. Face à cette situation, les producteurs marocains
de pommes font recours à une panoplie de méthodes de lutte. Cependant la lutte chimique
demeure le pilier de toute protection vue sa rapidité et sa facilité.
Néanmoins, l’utilisation irrationnelle des produits phytosanitaires et le non respect des
délais de carences pourraient à l’origine de l’accumulation des résidus dans les produits
végétaux.
Parmi les insecticides, les carbamates sont les plus utilisées dans la culture du pommier. Ils
ont en général une toxicité aiguë plus élevée que les organochlorés, mais ils se dégradent
beaucoup plus rapidement dans l’environnement.
Les carbamates sont des insecticides toxiques, à action systémique prédominante, dont le
mécanisme d'action principal est de bloquer la dégradation de l'acétylcholine au niveau des
synapses cholinergiques par inhibition réversible des cholinestérases (enzyme de régulation

11
de la transmission de l’influx nerveux), Ils déstabilisent la neurotransmission et peuvent
produire chez l'homme des contractions involontaires des muscles, la paralysie et des
contractions musculaires. Dans cette catégorie citons le carbaryl, l'aldicarbe, le carbofuran, le
methomyl et le propxur (baygon), etc.
Selon le rapport annuel, effectué par le centre anti poison du Maroc, Les carbamates
occupent la troisième place après les organophosphorés et les pyrèthrinoïdes dans les cas
d’intoxication aiguë par pesticide (IAP) (Idrissi, 2010).
L’objectif de ce travail est de doser les résidus de carbamates dans les pommes par la
chromatographie liquide à haute performance (HPLC) qui est un instrument d’analyse de très
grande sensibilité utilisé pour la séparation des molécules polaires et thermolabiles. Le choix
de la matrice est justifié par sa facilité à l’entretenir et selon des essais collaboratifs, la pomme
n’a pas été soumise à une étape de purification.
On a adopté une méthode multirésidus décrite par la norme européenne (NF EN 12393-2,
1998) qui permet effectivement d’identifier d’une façon précise et sélective des résidus de
carbamates par l’HPLC. IL s’agit aussi de prouver la fiabilité et l’efficacité de la méthode
d’extraction utilisée. Les différents composés carbamates testés ; le Carbaryl, le Carbofuran,
l’Aldicarb, le Bendiocarb, le Propoxur et le Méthomyl.

Projet de fin d’études MST SADQ Revue bibliographique
I.HACHOUMI 13
I. Généralités sur les pesticides
I.1. Historique et définitions
La première utilisation des pesticides en agriculture date de l’antiquité. Les composées
alors employés étaient des dérivés de composés minéraux ou de plantes comme par exemple,
ceux à base d’arsenic, de cuivre, de zinc, de manganèse ou de sulfate de nicotine. Puis, à
partir de la seconde guerre mondiale, les pesticides ont bénéficié du développement de la
chimie organique. Les composés synthétiques majoritaires ont d’ailleurs été à l’origine de
l’expansion rapide des produits phytosanitaires à partir des années 1940 (Tableau 1) (El
mrabet, Charlet et Lalere, 2008).
Tableau1: Historique de l’évolution des trois plus grandes classes de pesticides de 1900 à
2000.
Selon la directive européenne 91/414/CE du 15 juillet 1991, elle définit les pesticides étant
des composés qui visent à assurer la sûreté et la qualité des produits de consommation. De
manière plus concise, les pesticides ou produits phytosanitaires, sont définis comme des
substances dont les propriétés chimiques contribuent à la protection des plantes cultivées et

I.HACHOUMI 14
des produits récoltés des attaques de champignons, de parasites, d’insectes, d’acariens, ou à
détruire les mauvaises herbes (UE, 1991).
Le nom officiel d’un pesticide est le produit agrochimique, le nom scientifique est le produit
antiparasitaire à usage agricole, le nom employé par les professionnels est le produit
phytosanitaire et le mot utilisé par le grand public est le pesticide (Havrard, 1999).
Le terme pesticide regroupe l’ensemble des substances utilisées dans le but de protéger les
cultures et les animaux domestiques contre les prédateurs et certaines maladies parasitaires. Il
inclut: Les insecticides, les herbicides, les fongicides et les régulateurs de croissance végétale
(Druart, 2011).
Les pesticides sont disponibles en différentes formulations. Ils peuvent se présenter sous
forme de poudres mouillables, de liquides pâteux ou de liquides plus ou moins fluides, de
granulés solubles. Une bouillie liquide de pesticide est obtenue en additionnant de l’eau, la
substance active et l’adjuvant.
 Les matières actives sont des substances hautement toxiques. Le rôle de ces produits est
d’assurer la destruction et/ou de prévenir l'action des animaux, des végétaux, des
microorganismes ou des virus nuisibles.
 L’adjuvant est toute substance qu’on additionne à la bouillie pour assurer la stabilité des
matières actives durant le stockage et/ou l’utilisation. Ces matières additives sont souvent
appelées des adjuvants, des solvants, ou des excipients (El mouden, 2010).
Le Maroc importe annuellement une quantité moyenne de 8000 tonnes de pesticides à
usage agricole dont les insecticides occupent la première place (35-40 %) suivis des
fongicides (35 %), les herbicides (15 %) et les autres catégories de pesticides (nématicides,
acaricides, etc.) sont de 10% (Benzine, 2006).
I.2. Classification des pesticides
Les produits phytosanitaires ou pesticides qui sont disponibles sur le marché sont
caractérisés par une telle variété de structures chimiques, de groupes fonctionnels et
d’activités que leur classification est complexe. D’une manière générale, ces produits peuvent
être classés soit en fonction de la nature de l’espèce à combattre (1er
système de
classification), et/ou soit en fonction de la nature chimique de la principale substance active
qui les compose (2ème
système de classification) (Kouzayha, 2011).

I.HACHOUMI 15
I.2.1. Classification selon la nature de l’espèce à combattre
Le premier système de classification repose sur la cible à contrôler. Il existe
principalement trois grandes familles de produits phytosanitaires selon la nature des cibles
visées; qui sont les insecticides, les herbicides et les fongicides.
Les insecticides sont utilisés pour la protection des plantes contre les insectes. Ils
interviennent en les éliminant ou en empêchant leur reproduction, il existe ; des
neurotoxiques, des régulateurs de croissance et ceux agissant sur la respiration cellulaire (El
mrabet, Charlet et Lalere, 2008).
Les herbicides sont appelés parfois désherbants, notamment en horticulture. Ils
permettent de supprimer ou de limiter le développement de plantes non désirées et des
mauvaises herbes. Ils agissent sur les «
mauvaises herbes »
soit par contact en détruisant les
parties de plante sur lesquelles ils sont déposés, soit par pénétration et diffusion lorsqu’ils sont
absorbés par les feuilles ou les racines et exercent leurs effets toxiques sur l’ensemble du
végétal. Les herbicides peuvent être répertoriés suivant leurs caractéristiques physico
chimiques selon les familles suivantes: Les triazines, les acétamides, les urées (El mouden,
2010).
Les fongicides permettent quant à eux de combattre la prolifération des maladies des
plantes provoquées par des champignons ou encore des bactéries. Ils peuvent agir
différemment sur les plantes soit en inhibant le système respiratoire ou la division cellulaire,
soit en perturbant la biosynthèse des acides aminés, des protéines ou le métabolisme des
glucides.
I.2.2. Classification selon la nature chimique
Le deuxième système de classification tient compte de la nature chimique de la
substance active majoritaire qui compose les produits phytosanitaires. Les principaux groupes
chimiques comprennent les organochlorés, les organophosphorés, les carbamates, les triazines
et les urées substituées. Les structures chimiques des principales familles sont présentées en
figure 2 (Maysaloun, 2008).

I.HACHOUMI 16
Figure 2 : Structures chimiques des principales familles de pesticides.
a. Les organochlorés (OC)
Les organochlorés constituent la plus vieille classe d’insecticides de synthèse ; ce sont les
premiers à avoir été largement utilisés. Ils sont d’une grande efficacité mais leur très grande
persistance et leur accumulation dans l’écosystème et la santé humaine font que leur usage a
été progressivement et presque totalement abandonné (Callec, 1985).
b. Les Carbamates
Les carbamates sont des insecticides à large spectre utilisés couramment depuis leur mise
au point dans les années cinquante. Ce sont des esters de l’acide carbamique généralement
non hydrosolubles ; cependant certaines molécules (Aldicarbe et Carbofuran) sont
aliphatiques, ce qui leur confère un caractère hydrosoluble plus marqué et des propriétés
systémiques (Bloomquist, 1996).
Le carbaryl L’Aldicarbe
Figure 3 : Structures chimiques des principales familles des Carbamates.

I.HACHOUMI 17
c. Les Organophosphorés
La découverte des propriétés insecticides de cette famille est due aux chimistes militaires
allemands lors de la deuxième guerre mondiale, au cours de recherches sur les gaz
neurotoxiques. Ce sont actuellement les insecticides les plus répandus en agriculture (Pope,
Karanth, et Liu., 2005).
Les organophosphorés sont des esters de l’acide phosphorique, ils constituent une grande
famille aux structures et propriétés chimiques extrêmement variées. Leur mode d’action est
comparable à celui des carbamates : ce sont comme eux des inhibiteurs du cholinestérase. Les
effets ne sont pas immédiats mais l’inactivation de l’enzyme est irréversible, contrairement
aux carbamates. Il figure dans ce groupe le diazinon et le fenthion. (Figure 4).
Le fenthion le diazinon
Figure 4 : Structures chimiques des principales familles des organophosphorés.
I.3. Principales étapes de mise en marché d’un pesticide
Les laboratoires des firmes phytopharmaceutiques synthétisent chaque jour des dizaines
de molécules en micro quantités. Ces molécules subissent un screening biologique in vitro où
sont multipliées les souches des différents parasites. Lorsqu’un composé a montré une
efficacité intéressante, il est testé sur de petites parcelles, si les essais se sont montrés positifs,
la firme productrice dépose un brevet (durée 20 ans) entreprend des études toxicologiques sur
des animaux de laboratoire et poursuit les essais en plein champ. Un délai de 7 à 10 ans
s’écoule depuis la synthèse au laboratoire jusqu’à la commercialisation du produit (Benzine,
2006).

I.HACHOUMI 18
I.4. Impacts des pesticides sur l’environnement et la santé
I.4.1. Impacts sur l’environnement
Malgré un souci croissant de protection de l’environnement, lors de l’utilisation des
produits phytosanitaires, une certaine quantité de ces substances se retrouve dans
l’environnement, principalement dans l’air par dérive sous forme de gouttelettes ou sur le sol
(Pimentel, 1995).
La grande part de la substance active apportée qui n’atteint pas sa cible sera alors
susceptible, d’être transférée vers les eaux au terme d’un certain nombre de processus: la
volatilisation dans l’atmosphère, la rétention et l’adsorption dans le sol, le ruissellement à la
surface et le lessivage dans la profondeur du sol (Figure 5), les processus de dégradation
(biodégradation et photodégradation) et la décomposition chimique jouent également un rôle
dans la contamination environnementale (Maysaloun, 2008).
Le transport des produits de traitement est gouverné par des facteurs majeurs :
 Les propriétés chimiques du produit : solubilité dans l’eau, volatilité, persistance dans
le milieu, etc.
 Les propriétés du sol : structure d’argiles, pourcentage de matière organique, pH, taux
d’humidité, etc.
Figure 5: Mécanismes de transferts et de transformations des pesticides dans
l’environnement.

I.HACHOUMI 19
Le non respect des bonnes pratiques agricoles peut entrainer la contamination des trois
compartiments de la biosphère, à savoir : l’eau, le sol et l’air. Ainsi, le cycle géochimique des
pesticides est très complexe car ils peuvent être retrouvés à tous les niveaux (El mrabet;
Charlet et Lalere., 2008).
I.4.2. Impacts sur la santé
Les pesticides peuvent être absorbés par inhalation, par ingestion via l’alimentation et par
contact cutané. Les effets liés à une intoxication aigue se produisent généralement tout de
suite ou peu de temps après une exposition significative à des pesticides. Les malaises
généraux peuvent être légers (maux de tête, nausées, étourdissements, fatigue, perte d'appétit,
irritations de la peau et des yeux) ou graves (fatigue chronique, coma, mort). Les symptômes
varient selon les types de pesticides en cause (CE, 2003).
Le Centre Anti Poison du Maroc (CAPM) a fait une étude rétrospective de type descriptif,
basée sur des données de toxicovigilance, et dans cette étude sont inclus, les cas
d’intoxication aiguë par pesticide (IAP) ayant été notifiés au CAPM entre 1989 et 2007.
L’IAP représente toute maladie ou effet sur la santé résultant d’une exposition réelle ou
présumée à un pesticide dans les 48 heures ou peut être retardée de plus de 48 heures.
En effet, entre 1989 et 2007, le CAPM a collecté 10 332 cas d’IAP, soit 14 % de
l’ensemble des déclarations reçues pendant la même période. L’étude des cas d’IAP
répertoriés révèle une prédominance des cas pendant les saisons d’hiver et d’été, surtout issus
d’un milieu urbain (80%). L’étude de la répartition géographique montre que le taux le plus
élevé a été révélé au niveau de la région de Tadla-Azilal avec 6,66 pour 100 000 habitants,
suivi de la région de Rabat-Salé-Zemmour-Zaer avec 5,96 pour 100 000 habitants.
La principale voie d’exposition était orale (90% des cas d‘IAP), suivie de l’inhalation
dans 8%. Selon le mode d’action, 72,5 % des cas répertoriés étaient dues aux insecticides,
24,8 % aux rodenticides, alors que les herbicides ne représentaient que 1,7%. Et selon la
famille chimique, les organophosphorés ont été à l’origine de 66,22 % des cas répertoriés,
suivis des pyrèthrinoïdes et des carbamates.
L’étude des caractéristiques cliniques montre que 72% des cas d’IAP étaient
symptomatiques, avec des signes liés aux affections du système gastro-intestinal (60,4%), des

I.HACHOUMI 20
troubles du système nerveux central et périphérique (16,1%) et des affections de l’appareil
respiratoire (10,5%).
A l’échelle nationale, et selon les données du Centre Anti Poison du Maroc, l’IAP occupe
la 4ème position après les médicaments, les produits industriels et les aliments, mais le taux
d’incidence était très faible par rapport aux données internationales (Idrissi et al., 2010).
La toxicité chronique est nettement moins bien connue et beaucoup plus difficile à mettre
en évidence. Elle peut être associée à une absorption de faibles quantités de pesticides
présents dans différents milieux sur une longue période de temps. Elle peut provoquer
différents problèmes de santé : cancers, problèmes de reproduction et de développement,
affaiblissement du système immunitaire, troubles hormonaux et neurologiques (Tellier, 2006).
I.5. Résidus des pesticides dans les aliments
Les fruits et légumes sont des denrées particulièrement sensibles pour lesquelles l’aspect
est particulièrement important pour le consommateur. C’est pourquoi, les producteurs ont
recours très fréquemment à l’emploi d’insecticide pour éviter l’attaque des fruits par les
insectes et les fongicides afin de limiter la pourriture et d’assurer une bonne conservation du
fruit (SPC, 2002).
Mais dès que la matière active de ces produits phytopharmaceutiques a été déposée sur les
aliments, différents facteurs concourent à l’éliminer ; la pluie et le vent provoquent un
entraînement mécanique du dépôt vers les parties basses des plantes puis vers le sol ; le
produit peut être partiellement solubilisé, oxydé ou hydrolysé donnant ainsi naissance à des
métabolites plus ou moins toxiques que la molécule initiale, C’est ce qu'on appelle résidus.
Donc on peut qualifier le terme de résidus comme étant la somme de la molécule mère et de
tous ses métabolites issus de sa dégradation ou de sa métabolisation. Le résidu de pesticides
s’exprime en mg/kg ou en ppm (part par million) (Benzine, 2006).
I.5.1. Définition
Un résidu de pesticide, selon le Codex Alimentarius, est «
toute substance déterminée
présente dans les aliments, les denrées agricoles ou les produits pour l'alimentation animale à
la suite de l'utilisation d'un pesticide. Ce terme englobe tous les dérivés d'un pesticide, tels que

I.HACHOUMI 21
les produits de conversion et de réaction, les métabolites et les impuretés que l'on considère
comme ayant une importance sur le plan toxicologique »
(El fadl et Chtaina, 2010).
Ces résidus sont les plus souvent présents à de faibles concentrations, souvent inférieures
à 1mg de produit analysé par kg de nourriture (Geoffrey, 1993).
I.5.2. Des normes pour les résidus
L’emploi des pesticides est réglementé par la législation nationale ; il s’agit généralement
d’un système qui consiste à enregistrer chaque formulation d’un pesticide pour un certain
usage et pour une certaine culture.
La plupart des pays industrialisés ont aussi établi des lois stipulant les Limites maximales
résiduelles (LMR) autorisées dans les aliments. Un des objectifs des LMR fixées par le Codex
est de faciliter le commerce international (Davis, 1998).
Pour fixer les limites de résidus, on se base sur plusieurs concepts apparentés, à savoir :
a. La Dose sans effet
La dose sans effet (DES) c’est la dose la plus élevée d’une substance qui ne provoque
aucun effet toxique détectable chez les animaux soumis à des études expérimentales. La DES
est généralement exprimée en mg de substance par kg de poids corporel et par jour (Armand,
1999).
b. La dose journalière admissible
La DJA est définie comme un seuil de sécurité sanitaire et représente la quantité de produit
qui peut être ingérée (en mg/kg de poids corporel) chaque jour pendant toute la vie de
l’individu sans présenter le moindre risque pour sa santé (Davis, 1998).
c. Limite maximale de résidus
Selon le règlement CE n° 396/2005, la limite maximale résiduelle (LMR) est une
«
concentration maximale du résidu d'un pesticide autorisée dans ou sur des denrées
alimentaires ou aliments pour animaux, fixée conformément au règlement, sur la base des
bonnes pratiques agricoles (BPA) et de l'exposition la plus faible possible permettant de
protéger tous les consommateurs vulnérables »
(El fadl et Chtaina, 2010).

I.HACHOUMI 22
Elle est donnée par l’équation suivante :
LMR = (DJA× P)/C
DJA : dose journalière admissible.
P : poids d’un homme en kg.
C : quantité d’aliments consommée chaque jour (kg/j).
Cette LMR est exprimée en milligrammes (mg) de résidus par kilogramme (kg) de produit
récolté, ou en ppm (El mouden, 2010).
d. Bonnes pratiques agricoles (BPA)
Les BPA représentent le mode d’emploi d’un pesticide par l’agriculteur autorisé, à
l’échelle nationale, pour une utilisation sans danger des pesticides (quantité, méthode,
moment de l’application, etc.), dans les conditions effectivement présentes, de manière à
laisser une quantité minimale de résidu acceptable au plan toxicologique.
L’utilisation d’un pesticide laissera en général des résidus dans les aliments, et à condition
que l’utilisateur du pesticide respecte les instructions figurant sur l’étiquette et les BPA,
d’après les calculs des organismes de réglementation, les résidus devraient se situer dans les
limites de la LMR et de la DJA. Beaucoup de pays s’efforcent d’observer les LMR du Codex
pour pouvoir exporter leurs produits, mais cela ne veut pas forcément dire que ces pays ont
mis en place un système efficace de LMR nationales pour les produits cultivés et consommés
à l’intérieur de leurs frontières (Davis, 1998).
I.6. Réglementation en relation avec les résidus de pesticides
La protection contre les pesticides constitue donc un enjeu majeur de santé publique, c’est
pourquoi, des réglementations portant sur les pesticides ont été mises en place par les
différentes autorités gouvernementales.
I.6. 1. Niveau international et européen
La législation internationale s’intéresse aux substances chimiques incluant les pesticides
dont l’utilisation est très répandue. Ces composés sont à présent connus sous l’appellation de
Polluants Organiques Persistants (POP) (Protocole d’Aarhus, 1998). A présent, deux textes
internationaux concernent ces composés :

I.HACHOUMI 23
La Convention de Stockholm, signée en mai 2001. La persistance d’un pesticide dans
l’environnement, est lorsque sa période de demi-vie est supérieure à deux mois dans l’eau et
à six mois dans le sol et les sédiments (PNUE, 2005).
Le Protocole d’Aarhus, signé en juin 1998. Son objectif est de contrôler et réduire les
émissions de ces substances ainsi que celles de leurs métabolites dans l'environnement afin
d’aboutir à une élimination complète (RE, 2004).
Depuis le début des années 80, l’Union européenne a progressivement encadré l’utilisation
des pesticides par diverses réglementations visant à réduire les impacts avérés pour
l’environnement et les risques néfastes pour la santé humaine. La directive 91/414/CE adoptée
en 1991, par le conseil européen, vise à évaluer les risques pour la santé et l’environnement
des pesticides utilisés en agriculture afin d’optimiser la protection de l’homme et des milieux
(UE, 2001).
Le principal objectif de la législation phytosanitaire de l’Union Européenne consiste à
assurer la sécurité des denrées alimentaires produites à partir des végétaux et à garantir la
santé des consommateurs et la qualité des cultures dans tous les états membres (El mrabet,
Charlet et Lalere, 2008).
I.6.2. Législation dans le secteur des pesticides au Maroc
a. Programme de contrôle au Maroc
Le contrôle des résidus de pesticides dans les denrées alimentaires s’effectue au niveau des
produits importés et exportés.
a.1. Produits importés
Systématiquement des échantillons sont prélevés dans les différents ports du Royaume,
principalement à Casablanca et à Tanger pour le contrôle des résidus. Les résidus sont
analysés par des méthodes analytiques officielles dans le Laboratoire Officiel d’Analyse et de
Recherches Chimiques (L.O.A.R.C). Les produits qui présentent un excès par rapport aux
limites de résidus ne sont pas autorisés d’être commercialisés. Vu l’absence des L.M.R
nationales, l’application d’un contrôle rigoureux dans les produits domestiques
demeure difficile (Dahchour et Elamrani, 1999).

I.HACHOUMI 24
a.2. Produits exportés
Les produits destinés à l'export sont soumis aux impératifs des réglementations des pays
importateurs, en particulier les pays de I'UE. Ils ne sont acceptés sur ces marchés que s'ils
répondent parfaitement aux exigences en matière de LMR. Ces produits concernent
essentiellement les fruits et légumes. Les échantillons sont prélevés dans des stations de
conditionnement par les inspecteurs de l’Etablissement Autonome de Contrôle et de
Coordination des Exportations (EACCE, 2010).
b. Législation et réglementation Marocaine
La législation Marocaine relative aux pesticides est semblable dans ses grandes lignes à la
réglementation européenne. Cette législation qui est basée sur le Dahir du 2 décembre 1922,
classe les substances vénéneuses en deux sections, la première comprend les substances
destinées à l’industrie ou à l’agriculture tandis que l’autre comprend les substances destinées à
la médecine humaine ou vétérinaire (El bakouri, 2006).
L’arrêté ministériel n° 701/66 du 30 novembre 1966, classe les pesticides organochlorés
selon leur degré de toxicité. Ce texte de loi catalogue l’endosulfan dans la catégorie des
produits très dangereux. Cependant, il faut dire que cette liste est amplement dépassée et
nécessite d’être contrôlée (Bulletin Officiel, 1923).
L’arrêté du Ministère de l’Agriculture et des Ressources Animales (MARA) n°466/84 du
19 mars 1984, portant sur la réglementation des pesticides organochlorés, interdit
l’importation, la fabrication, la mise en vente et l’utilisation de ces substances (Bulletin
Officiel, 1967).

I.HACHOUMI 25
II. Les Carbamates
Les carbamates sont des esters de l'acide N-méthylcarbamique COH(O) NH2, avec la
structure générale suivante :
Figure 6 : Structure générale d’un carbamate.
R1: atome d'hydrogène ou un groupe méthyle (CH3) ;
R2 : un groupe méthyle (CH3) ;
R3 : un groupe alkyle, un groupe aryle, un dérivé d'oxime ou un autre groupe chimique plus
complexe.
II.1. Classification des carbamates
 les carbamates à structure cyclique phényl: Aminocarbe, Carbaryl, Methiocarbe,
Mexacarbe et Promecarbe.
Figure 7 : Structure du Carbaryl (methyl carbamate)

I.HACHOUMI 26
 les méthyl et dimethyl carbamates à structure hétérocyclique: Bendiocarbe,
Carbofuran, Dimetilan, Dioxacarbe, Pirimicarbe.
Figure 8 : Structure du Pirimicarbe (methyl carbamate)
 Les carbamates à chaîne alliphatique: Aldicarbe, Methomyl, Oxamyl, Thiodicarbe.
Figure 9 : Structure de l’Aldicarbe (N-methyl carbamate)
II.2. Utilisations
Les carbamates sont largement utilisés dans les maisons, les jardins, et dans l'agriculture et
sont utilisés comme des pulvérisations pour combattre les insectes, les champignons et les
mauvaises herbes (Annexe 1) (Ogah et Coker, 2012).
Le carbaryl, le premier carbamate de succès, a été introduit en 1956 car il a un spectre assez
large de lutte contre les insectes.

I.HACHOUMI 27
Le propoxur est très efficace contre les cafards qui ont développé une résistance aux
organophosphorés. Il est couramment utilisé par les opérateurs antiparasitaires pour la lutte
contre les insectes domestiques dans les restaurants, les cuisines et les maisons.
Plusieurs carbamates ont un usage systémique sur les plantes car ils possèdent une grande
solubilité dans l'eau qui leur permette d'être absorbés par les racines et par les feuilles des
plantes (EHU, 2002).
II.3. Les propriétés physico-chimiques des carbamates
II.3.1. Le méthomyl
Le méthomyl est un carbamate, son nom chimique est S-methyl N-(methylcarbamoyl)
thioacetimidate (C5H10N2O2S) (Figure10). Il est hautement toxique pour les humains,
enregistré en 1968 par l'EPA (Agence américaine de protection environnementale) comme un
usage restreint en raison de sa forte toxicité aiguë pour les humains et il est utilisé sur une
grande variété de cultures (Gary et al., 2000).
Le méthomyl est inscrit sur une grande variété de sites, y compris les légumes, le gazon et
les locaux commerciaux (EPA, 1998).
Figure10: Structure de la molécule du méthomyl
Tableau2: Propriétés physico-chimiques du Méthomyl (Omya, 2012).
Propriétés Informations
Poids moléculaire 162.2 g.mol-1
Forme ; couleur et odeur Poudre soluble dans l'eau ; vert et sulfureux(se)
Solubilité l’eau à 25°C
Température de décomposition 136°C

I.HACHOUMI 28
II.3.2. L’oxamyl
L’oxamyl est un carbamate, son nom chimique est N,N-dimethyl-2 méthyl
carbamoyloxyimino-2 acétamide (C
7
H
13
N
3
O
3
S ) (Figure 11). Il est actif contre de nombreuses
espèces d'insectes, les acariens et les nématodes (FAO, 2008).
Figure 11: Structure de la molécule de l’Oxamyl
L’Oxamyl est utilisé pour contrôler une grande variété de plante parasité par les insectes,
les acariens et les nématodes et il permet aussi de contrôler les fruits et les légumes.
Tableau 3: Propriétés physico-chimiques de l’Oxamyl
Propriétés Informations
Poids moléculaire 219.3 g.mol-1
Forme ; couleur et odeur solide cristallisé incolore et odeur légèrement
sulfureuse
Solubilité l’eau à 25 °C et le methanol
Température de décomposition 136 °C
II.4. La toxicité des carbamates
Les carbamates peuvent être absorbés par voie cutanée, respiratoire ou orale (l’annexe 2).
L'apparition d'effets cliniques en exposition au carbamate dépend de la dose, la voie
d'exposition, le type de carbamate impliqué et l'état de la victime (Samuel, Carrier, et
Lefebvre, 2007).
La toxicité de quelques carbamates est indiquée dans l’annexe 3 (Frank et Masson, 1992).

I.HACHOUMI 29
Comme les organophosphorés, les carbamates ont une activité résiduelle de courte durée,
ne s'accumulent pas dans les tissus adipeux et inhibent la cholinestérase. Toutefois, cette
action inhibitrice de l'enzyme serait réversible et de plus les carbamates sont rapidement
métabolisés dans l'organisme tandis que l’inhibition par les organophosphorés est
généralement irréversible. (CEAEQ, 2011).
Leur mécanisme d’action neurotoxique implique l’inhibition de l’AChE, cette enzyme
essentielle qui joue un rôle important dans le système nerveux des humains et d'autres espèces
animales. L’AChE est une enzyme estérase extracellulaire qui hydrolyse l’acétylcholine libre
dans la fente synaptique, en acétate et choline (Figure 12).
L’inhibition de l’AChE provoque une accumulation de l’acetylcholine libérée dans la fente
synaptique lors d’une stimulation nerveuse, menant à une hyperstimulation des récepteurs
cholinergiques, ce qui peut mener a l’apparition de divers troubles nerveux.
Figure 12 : Inhibition de l’Acétylcholinestérase

I.HACHOUMI 30
L’inhibition du cholinestérase par les carbamates est un processus qui s’effectue en plusieurs
étapes, la première étant la formation d'un complexe inhibiteur-enzyme, la seconde étant la
carbamylation de l'enzyme et la troisième est la régénération de l’enzyme (US EPA, 2004).
Figure 13 : Mode d’action de l'inhibition de l’Acétylcholinestérase par les carbamates.
Les carbamates herbicides (comme Carbétamide) ne sont pas des inhibiteurs du
cholinestérase mais ils sont des inhibiteurs de la division cellulaire (Morais, Dias et Pereira.,
2010).
Les principales manifestations cliniques de l'intoxication par le carbamate sont des signes
muscariniques (salivation, transpiration, des crampes abdominales, des vomissements, la
diarrhée, des sécrétions bronchiques, œdème pulmonaire et une insuffisance respiratoire) et
des signes nicotiniques (moins fréquent; contractions musculaires, paralysie, hypertension).
L’annexe 4 montre l’impact des carbamates sur l’environnement et résume les principaux
comportements des différents composés de carbamates dans le milieu aquatique.

I.HACHOUMI 31
III. La culture du pommier au Maroc
La pomme est le troisième fruit consommé dans le monde, après les agrumes et la banane.
Il se récolte environ 69 millions de tonnes de pommes annuellement dans le monde, dont 25
millions de tonnes en Chine (FAO, 2008).
III.1. Présentation de la filière du pommier au Maroc
Au Maroc, le pommier occupe une superficie d’environ 31.813 ha, qui représente 22% du
total du continent africain. A l’échelle nationale il représente 14% de la superficie des
rosacées fruitières (Lamhamdi, 2012). Le rendement moyen national est de 17.6 T/ha.
La production du pommier est de l’ordre de 600.000 Tonnes dont 65% dans la région de
Meknès-Tafilalet suivi de la région de Fès-Boulemane et de Marrakech-Tansifte-Al Haouz.
Ces trois régions produisent 86% de la production nationale (Figure 14).
Figure 14 : La production du pommier par région
Les premiers vergers commerciaux de pommier ont été créés en zones de montagnes où les
conditions climatiques sont favorables au développement de l'espèce. Les statistiques du
ministère de l'agriculture font état de l'existence du pommier même dans les régions à faibles
altitudes (Gharb, Rabat-Salé, Souss-Massa, ...). Toutefois, les plus importantes régions de la
production sont localisées en zones de hautes et moyennes altitudes (Midelt, Khénifra, Sefrou,

I.HACHOUMI 32
Imouzzer, Ifrane, ...) où les conditions écologiques, notamment le froid, sont propices au
développement et à la fructification de l'espèce.
Les principales variétées sont: Golden delicious, stark delicious, starkrimson, Golden
smothe, Royal Gala (Lamhamdi, 2012).
III.2. Gestion des pesticides en culture du pommier au Maroc
Pour être importé et commercialisé dans notre pays, un produit phytosanitaire est soumis à
une procédure d’homologation qui vise à garantir l'efficacité, la sélectivité et l'innocuité du
produit mis sur le marché à l’égard de l’homme ,des animaux et de l’environnement.
Il n’existe pas d’industrie de fabrication de produit phytosanitaire au Maroc, 95% des
produits sont importés prêt à l’emploi, le reste est formulé à base de pré-mix ou de concentré.
Par contre 35% à 45% de ce qui est importé est reconditionné en petits emballages adaptés,
pour satisfaire les besoins des petits agriculteurs.
La consommation des produits phytopharmaceutiques varient d’une année à l’autre, en
fonction principalement du changement du climat, de la pression des maladies et des insectes
ravageurs, mais aussi en fonction des régions et des modes de conduites culturales. Selon les
statistiques de l’office des changes, les importations des produits phytopharmaceutiques du
Maroc n’ont pas cessé de croitre depuis 2005 (El ouilani, 2010).
L’Office National de Sécurité Sanitaire des Produits Alimentaires (ONSSA) a réalisé une
liste des pesticides à usage agricole homologués au Maroc le 04 février 2013.

I.HACHOUMI 33
Le tableau 4 résume les matières actives utilisées sur la culture du pommier au Maroc. Les
pesticides utilisés sont répertoriés en fonction de leurs familles chimiques (ONSSA, 2013).
Tableau 4 : Matières actives utilisées dans la culture du pommier au Maroc.
Numéro
Homologation
Classe Formulat-
ion
Matière (s)
Active (s)
Type de
traitement
Ennemis DAR*
(jour)
E11-6-003 Fongicide WP Mancozèbe Parties
aériennes
Tavelure 45 j
B09-7-008 Insecticide WP Azinphos-
méthyl (OP)
Parties
aériennes
Carpocapse 30j
D09-3-003 Insecticide WP Méthomyl Parties
aériennes
Carpocapse 21 j
E11-9-019 Insecticide EC Chlorpyriphos-
éthyl (OP)
Parties
aériennes
Cochenilles 30j
E02-9-007 Fongicide SC Carbendazime Parties
aériennes
Tavelure 15j
0827 Insecticide EC Fenthion Parties
aériennes
Carpocapse 15j
1020 Insecticide EC Malathion Parties
aériennes
Carpocapse 7j
0526 Insecticide WP Carbaryl Parties
aériennes
Carpocapse 15j
EC : Concentré émulsionnable SC : Suspension concentrée WP : Poudre mouillable
*DAR: délai avant récolte
Les familles chimiques les plus populaires sur cette culture sont les organophosphorés et les
carbamates.
IV. Le dosage des résidus de carbamates dans la pomme
Le Maroc est le second producteur africain des pommes avec 30% de la production du
continent. Les pommes entreposées dans les frigos subissent malheureusement des
détériorations suite aux problèmes phytosanitaires. Ces pertes, économiquement importantes,
agissent sur le prix de vente de la pomme. Les méthodes de luttes utilisées sont
principalement de nature chimique. Par ailleurs, la plupart des pays importateurs de fruits, et

I.HACHOUMI 34
plus particulièrement les pays européens ont adopté des législations très strictes vis-à-vis de
l’emploi des pesticides. Ainsi, l’utilisation de certains produits est déjà limitée (Achbani et El
asri, 2010).
IV.1. Les résidus de carbamates dans la pomme et réglementation
Les exportateurs de pomme, savent désormais que l’usage de toute matière active non
autorisée ou tout dépassement des seuils tolérés de résidus seront sanctionnés. Au Maroc,
l’établissement autonome de contrôle et de coordination des exportations (EACCE) est
l’organisme compétent pour contrôler l’usage des pesticides appliqués sur les denrées
alimentaires destinées à l’exportation. Les exploitants désirant exporter doivent se conformer
à la réglementation des pays destinataires et plus particulièrement en matière d’autorisation et
de Limite maximale de résidus (LMR).
Bien que l’on ne dispose pas de LMR nationales, la procédure habituelle veut qu’en
l’absence de LMR, les résultats soient tout simplement comparés aux LMR du Codex
Alimentarius de la FAO et de l’OMS, une sorte de guide des bonnes pratiques et des normes
en matière de sécurité alimentaire (El fadl et Chtaina, 2010).
Tableau 5 : Les LMR de carbamates admissibles sur la pomme ainsi que leur durée de demi-
vie dans l’environnement avant dégradation
Carbamates LMR* mg/kg
Carbaryl 0.0500
Carbofuran 0.0200
oxamyl 0.0100
Méthomyl 0.2000
Baygon (propoxur) 0.0500
* (MAAF, 2008).
En dehors de l’aspect réglementation, le secteur des pesticides au Maroc demeure l’un des
secteurs les moins maîtrisés sur le plan de l’information statistique précise et régulière. Cette
situation est due en grande partie à l’absence d’une organisation professionnelle regroupant
toutes les sociétés intervenant dans l’importation, la formulation et la distribution des produits
phytosanitaires d’une part, et aux importations illicites de ces produits à partir des pays
voisins d’autre part (El bakouri, 2006).

I.HACHOUMI 35
IV.2.Principales analyses de résidus de carbamates dans le
pommier
Les pesticides sont présents dans les différents milieux terrestres et aquatiques à des
concentrations très faibles de l’ordre de ng.kg-1
ou ng.L-1
. Diverses méthodes permettent de
les doser dans les sols, les eaux, les sédiments et les denrées alimentaires (MAWUSSI, 2008).
L’analyse des résidus de carbamates dans la pomme, nécessite des méthodes sensibles et
fiables car sont des composés très polaires et thermolabiles et sont généralement analysés par
la chromatographie en phase liquide à haute performance (HPLC).
Plusieurs articles ont été publiés utilisant différentes méthodes d’extraction de carbamates
dans différentes matrices comme la pomme. Une étude menée en Iraq sur 2 types de fruits (les
pommes et les oranges) importés à partir de pays voisins (Jordanie, Syrie, Turquie et Iran) et
ont adopté une méthode d’extraction des pesticides (Chlorpyrifos, Deltaméthrine, Bendiocarb,
etc.) avec un solvant d’extraction qui est l’acétate d’éthyle (Alyaseri et al, 2012). Les
échantillons ont été analysés par HPLC-UV détecteur (Shimadzu) à 254 nm. La séparation du
pesticide a été effectuée sur (Colonne C18, 5 nm, 3.0 × 250 mm à 40°C). La phase mobile est
constituée de l’Acétonitrile – Eau distillée (90:10, v / v), le volume d'injection était de 5 µL.
ainsi que le débit 0,05 ml / min.
Zrostlikova et al., (2003) ont travaillé sur 2 matrices (la pomme et l’abricot), afin de
déterminer la présence des résidus de carbamates (Carbaryl, Carbofuran, Methiocarb) et ont
pris comme solvant d’extraction l’acétonitrile .Toutes les séparations ont été réalisées sur une
chromatographie liquide HP 1100 en utilisant une Colonne C18 (5 µm, 15 cm × 3 mm à
25°C). La phase mobile était un mélange méthanol-eau avec un débit de 0,5 ml/min et un
volume d’injection de 20 µL.
IV.2.1.Le pré-traitement des échantillons
Dans tous les cas, une étape de pré-traitement de l’échantillon à analyser est nécessaire.
Le pré-traitement permet d’obtenir une petite fraction de l’échantillon contenant la plus
grande quantité de pesticides recherchés.

I.HACHOUMI 36
IV.2.2. L’extraction des pesticides
L’extraction nécessite l’usage d’un solvant approprié (polaire ou apolaire selon la molécule
recherchée) et une technique d’extraction adaptée (extraction par solvants organiques,
extraction liquide/liquide, extraction super critique, extraction au soxhlet, extraction "ASE :
Accelerated Solvent Extraction", etc.). La technique d'extraction doit être aussi spécifique que
possible pour permettre d’isoler le plus sélectivement possible les pesticides sans altérer leur
structure (Mawussi, 2008).
Puisque les carbamates sont des pesticides très polaires donc le solvant d’extraction se fait
avec de l’acétate d’éthyle additionné de sulfate de sodium anhydre.
IV.2.3. La purification des extraits
Les extraits contiennent les pesticides recherchés et d’autres composés qui doivent être
éliminés avant l’analyse. L’élimination des interférents, qui est une étape plus ou moins
critique selon la nature de l’échantillon et le niveau de concentration recherché, est appelée
purification ou simplification de la matrice, lavage de l’échantillon, "clean-up"
Les méthodes de purification des extraits les plus répandues sont basées sur l’extraction
liquide-solide avec des adsorbants polaires (silice, alumine, silice greffée et florisil) (el
mouden, 2010).
IV.2.4. Analyse par Chromatographie en phase liquide(HPLC)
Les extraits une fois purifiés sont le plus souvent analysés par chromatographie pour
l’identification des pesticides et la quantification des teneurs.
La chromatographie en phase liquide (CPL) est une technique de séparation des
constituants d’un mélange en solution basée sur le partage des composés entre une phase
mobile dans laquelle ils sont solubles et une phase, dite fixe ou stationnaire, qui exerce sur
eux un effet retardateur. La chromatographie liquide à haute performance (HPLC), permet
d’analyser des substances thermiquement instables, peu volatils (El mrabet, 2008).
Les composés à séparer (solutés) sont mis en solution dans un solvant. Ce mélange est
introduit dans la phase mobile liquide (éluant). Suivant la nature des molécules, elles
interagissent plus ou moins avec la phase stationnaire dans un tube appelé colonne

I.HACHOUMI 37
chromatographique (Figure 15). La phase mobile poussée par une pompe sous haute pression,
parcourt le système chromatographique (Colomb, 2010).
Figure 15 : Schéma de principe du fonctionnement de l’HPLC
Le mélange à analyser est injecté puis transporté au travers du système chromatographique.
Les composés en solution se répartissent alors suivant leur affinité entre la phase mobile et la
phase stationnaire. En sortie de colonne grâce à un détecteur approprié les différents solutés
sont caractérisés par un pic. L'ensemble des pics enregistrés est appelé chromatogramme
(Figure 16).

I.HACHOUMI 38
Figure 16 : Chromatogramme d’un mélange et les différents paramètres mesurables.
L’adsorbant le plus employé comme phase stationnaire est la silice. Selon la polarité de la
phase mobile et de la phase sattionnaire on distingue :
 HPLC en phase mobile : Dans ce cas la phase stationnaire est constituée de gel de silice
qui est un matériau très polaire,par contre l’éluant est apolaire.Ainsi, lors de l’injection
d’une solution,les produits polaires sont retenus dans la colonne,contrairement aux
produits apolaires qui sortent en tête.
.
 HPLC en phase inverse : La phase inverse est majoritairement composée de silice
greffée par des chaines linéaires de 8 ou 18 atomes de carbones (C8 et C18). Cette
phase est apolaire et nécessite donc un éluant polaire (Acétonitrile,méthanol,H20). Dans
ce cas, ce sont les composés polaires qui seront élués en premier (El bakouri, 2006).
La détection des substances sortantes de la colonne se fait le plus souvent en HPLC par
des détecteurs à UV-visible, qui mesure l’absorbance de chaque molécule éluée.

Projet de fin d’études MST SADQ Matériel et méthodes
I.HACHOUMI 40
Le développement de méthodes multirésidus qui permettent le contrôle d’un grand nombre
de pesticides en une seule analyse est la stratégie la plus commune. Cependant, les différentes
classes et les propriétés physico-chimiques rendent difficiles le développement de méthodes
qui couvrent un grand nombre de composés en une seule étape. Une méthode multirésidus se
doit d’être sensible, sélective, exacte, précise, de coût modéré et applicable à une grande
variété de matrices (El mrabet, 2008).
C’est dans ce cadre que s’inscrit notre étude ; elle consiste à faire doser et à analyser les
résidus de carbamates présents dans les pommes prises de différentes régions marocaines. On
a adopté une méthode multirésidus selon la norme européenne (NF EN 12393-2, 1998) qui
permet d’identifier et de déterminer des résidus présents dans des aliments non gras (fruits et
légumes), par chromatographie liquide à haute performance (CLHP).
La méthode décrite par la norme européenne a été validée et largement appliquée dans
toute l’Europe et s’est imposée comme une technique analytique de choix dans le but
d’extraire les carbamates existants dans des échantillons d’aliments non gras en vue de les
doser.
L’HPLC peut être souvent avantageusement utilisée pour la confirmation de la présence de
résidus de pesticides, et elle peut, dans certaines circonstances, être la meilleure technique
quantitative car la sensibilité des carbamates à la chaleur les rend moins apte à la
chromatographie en phase gazeuse.
I. Prélèvement des échantillons
Les pommes arrivent de différentes origines de Dayaat Aoua, de Midelt et Arbor Oulmes.
Les échantillons sont étiquetés et stockés dans des boites en plastique pour les protéger de
l'humidité et de la contamination. Ils sont ensuite conservés au réfrigérateur jusqu'à leur
utilisation.
II. Réactifs
- l’acétonitrile 99%,
- l'acétate d'éthyle 99%,
- l'eau pure.

I.HACHOUMI 41
III. Appareillage
- HPLC-UV détecteur (Shimadzu) à 254 et 280 nm ;
- La colonne analytique (C18 Nucleosil CLMN) de 5 nm ; 4,6 × 250 mm à 30°C ;
- La phase mobile : Acétonitrile – eau pure (50:50, v/v) ;
- Le débit de la phase mobile est de 1 mL/min ;
- le volume d’injection est de 10 μL.
IV. Préparation des solutions Standards
Les standards analytiques des carbamates utilisés (Carbaryl, Carbofuran, Aldicarb,
Bendiocarb, Baygon (Prpoxur) et Méthomyl) présentent une pureté variant entre 98 et
99,8%.
La solution mère est préparée à partir des standards de carbamates dilués dans le mélange
Acétonitrile – eau (50:50, v/v) pour avoir une concentration de 100 ppm chacun.
V. Méthode d’extraction
Afin de déterminer les résidus présents dans les échantillons prélevés ; 50 g de pommes
(Pommes jaunes pelées et non pelées et pommes rouges pelées et non pelées) coupées
séparément en petits morceaux et sont macérées avec 50 g de sulfate de sodium anhydre pour
absorber l’eau de l’échantillon (annexe 5) jusqu’à l’obtention d’une pâte fine, puis on ajoute
100 mL d’acétate d’éthyle. Le mélange obtenu est filtré puis évaporé à sec dans un
évaporateur rotatif à 50°C. L’extrait subit ensuite l’étape de filtration sélective par la laine de
verre afin de retenir les interférents et le reste des solvants utilisés.
Une très nette différence de couleur est observée, l’échantillon avant filtration est de
couleur jaune avec un trouble alors qu’après il devient limpide et clair.
VI. Technique du Dopage
Pour vérifier la bonne démarche de la méthode d'extraction nous avons dopé les
échantillons de pommes avec une série de solutions multicarbamates afin de prouver
l’efficacité de l’extraction avec des échantillons contaminés. Ceci permet aussi de déterminer
la capacité de récupération de la méthode d’extraction.

I.HACHOUMI 42
50 g de pommes jaunes non pelées (PJNP) sont broyés avec 50 g de sulfate de sodium
anhydre. L’échantillon est extrait avec 100 mL d’acétate d’éthyle puis dopé avec 1 µL de la
solution multicarbamates de 5 ppm. On laisse reposer l’échantillon pendant 1 h, après on le
filtre. L’extrait est ensuite évaporé puis filtré afin d’obtenir un échantillon limpide. Le
dernier extrait est transféré dans une vial pour être analysé par HPLC.
On prépare 3 échantillons dopés avec une solution multicarbamates de 5 ppm:
1- Pommes jaunes non pelées (PJNP) + Carbaryl (5 ppm) ;
2- Pommes jaunes non pelées (PJNP) + Bendiocarb ;
3- PJNP+ mélange 1 (Carbofuran, Carbaryl, Aldicarb) ;
4- PJNP+ mélange 2 (Baygon, Méthomyl, Carbofuran).
VII. Expression des résultats
Les résultats sont exprimés sous forme d’un chromatogramme :
Figure17 : Prototype d’un chromatogramme HPLC-UV d’un échantillon de pomme dopé par
un mélange de 3 carbamates
Chaque pic correspond un type de carbamate :
- Le méthomyl,
- Le propoxur (ou baygon),
- La carbofuran.
Les pics qui ne sont pas entourés par le trait rouge correspondent aux constituants de la
pomme et solvants utilisés.

I.HACHOUMI 43
Et chaque carbamate a un temps de rétention spécifique à lui, qui nous permet de le
différencier par rapport aux autres.
Les paramètres à déterminé sont le temps de rétention (Tr) et le taux de récupération ;
Le temps de rétention (Tr): c’est le temps écoulé entre l’injection et le maximum du pic du
composé élué, il est exprimé en min. Le temps de rétention varie en fonction du débit, de la
température d'élution et de la composition de la phase mobile (CEAEQ, 2009).
Le taux de récupération: C’est le rapport entre l’aire du pic du produit extrait et l’aire du pic
du standard analytique (El mouden, 2010).
Il est défini par la formule suivante :
Aire du pic de l’échantillon dopé
R(%) = 
Aire du pic du standard analytique

Le taux de récupération est un paramètre très important qui permet de déterminer la
satisfaction et la conformité de la méthode d’extraction.

Projet de fin d’études MST SADQ Résultats et discussion
I.HACHOUMI 45
I. Résultats
I.1. Le dosage des résidus de carbamates dans la pomme
On a analysé plusieurs échantillons de pommes ; les pommes jaunes non pelées (PJNP), les
pommes jaunes non pelées (PJP), les pommes rouges non pelées et les pommes rouges pelées.
Les figures 18 (a et b) illustrent les chromatogrammes HPLC-UV d’un échantillon de pomme
jaune non pelée (PJNP) obtenu à 280 nm et 254 nm.
Figure 18-a : Chromatogramme HPLC-UV d‘un échantillon de pomme jaune non pelée à
280 nm.
Figure 18-b : Chromatogramme HPLC-UV d’un échantillon de pomme jaune non pelée à
245 nm.

I.HACHOUMI 46
Les 2 chromatogrammes obtenus de la figure 18 (a et b) à 280 nm et 245 nm montrent que
notre échantillon ne contient aucun composé carbamate, par contre les différents pics qu’on
remarque sur le chromatogramme correspondent aux constituants de la pomme (sucre,
minéraux, vitamines, …) et les solvants utilisés (Acétate d’éthyle et le solvant de la phase
mobile Acétonitrile/ eau).
Tableau 6 : Les échantillons de pommes analysés par HPLC-UV
Les résultats présentés dans le tableau 6, montrent que tous les échantillons de pommes
analysés par HPLC-UV ne contiennent aucune trace de carbamates.
I.2. Les paramètres à déterminer
I.2.1. Le temps de rétention
On a injecté différentes solutions standards de carbamates dans l’HPLC-UV afin de
déterminer leurs temps de rétention ce qui permet d’identifier et de confirmer exactement leur
présence dans un échantillon contaminé ou dopé, chaque carbamate a un temps de rétention
spécifique.
Echantillons Résultats
PJNP négatif
PJP négatif
PRNP négatif
PRP négatif

I.HACHOUMI 47
La figure 19-a correspond au chromatogramme du standard du Carbaryl et la figure 19-b à
celui de l’échantillon de PJNP dopé avec du Carbaryl.
Figure 19-a : Chromatogramme HPLC-UV d’une solution standard du Carbaryl
Figure 19-b: Chromatogramme HPLC-UV d’un échantillon de PJNP dopé avec du Carbaryl.

I.HACHOUMI 48
Le chromatogramme de la solution standard du carbaryl qui est représenté dans la figure 19-a
montre que le temps de rétention du Carbaryl est de 8,757 min alors que celui de son produit
de dégradation est de 8,951 min. Ainsi, on remarque que le temps de rétention du Carbaryl
dans un échantillon de PJNP dopé représenté dans la figure 19-b est de 8,777 min.
La figure 20 (a et b) illustre le chromatogramme HPLC-UV d’un mélange de carbamates
contenant 3 composés ; le Carbofuran, le Carbaryl et l’Aldicarb, ainsi que l’échantillon de
PJNP dopé avec le même mélange.
Figure 20-a: Chromatogramme HPLC-UV d’un mélange de carbamates (Carbofuran,
Carbaryl et Aldicarb).
Figure 20-b: Chromatogramme HPLC-UV d’un échantillon de PJNP dopé avec un mélange
de carbamates (Carbofuran, Carbaryl et Aldicarb).

I.HACHOUMI 49
Dans ce cas, on a dopé notre échantillon de pommes avec un mélange de carbamates
contenant 3 composés ; le carbofuran, le carbaryl et l’aldicarb afin d’obtenir des pics
chromatographiques bien séparés dans le même chromatogramme.
Les chromatogrammes présentant les pics chromatographiques du mélange de carbamates
seul et de l’échantillon dopé montrent que le temps de rétention du Carbofuran est de
6,521min tandis que celui de l’échantillon de PJNP dopé est de 6,588 min. Le temps de
rétention de l’aldicarb est de 5,514 min alors que celui de l’échantillon de PJNP dopé est de
5,598 min. Cela signifie que les pics chromatographiques des carbamates sont bien séparés et
on peut facilement les identifier grâce à leur temps de rétention dans un échantillon
contaminé.
La figure 21 illustre le chromatogramme d’un mélange de carbamates (Méthomyl, Baygon
et Carbofuran).
Figure 21 : Chromatogramme HPLC-UV d’un mélange de carbamate
(Méthomyl,Carbofuran, et Baygon).
Le chromatogramme de la figure 21 montre qu’il existe 2 carbamates (Baygon et
Carbofuran) qui ont presque le même temps de rétention. Le temps de rétention du
Carbofuran est de 6,521 min et celui du propoxur (Baygon) est de 6,500 min.

I.HACHOUMI 50
Par injection de solutions standards de carbamates à une concentration de 5 ppm, le tableau 7
résume le temps de rétention de chaque composé de carbamates.
Tableau 7 : Les temps de rétention des standards de carbamates
Standards de carbamates Temps de rétention (Tr) (min)
Carbaryl 8,757
Carbofuran 6,521
Aldicarb 5,514
Baygon 6,500
Methomyl 3,357
Bendiocarb 6,482
Les résultats du tableau 7 montrant que le temps de rétention des composés carbamates est
compris entre 3,357 min et 8,757 min.
I.2.2. Le taux de récupération
Pour tous les Carbamates analysés, Le taux de récupération (R%) de la méthode
d’extraction a été déterminé en réalisant une fortification avec une concentration connue de
carbamates de 5 ppm sur un échantillon de pomme jaune non pelée sans résidus. Le taux de
récupération est obtenu en faisant le rapport entre l’air de pic de l’échantillon et l’air de pic
du standard.
Durant l’étude, plusieurs essais ont été réalisés en fortifiant des échantillons de PJNP par les
standards mentionnés dans le tableau 8.
Tableau 8 : Pourcentages de récupération des carbamates répertoriés dans les échantillons de
pommes jaunes non pelées
Mélanges Carbamates Tr (min) Astd Aech (R%)
Carbaryl 8,757 5181 4862 93,84
Bendioacarb 6,482 797385 706639 88,61
Mélange 1
Carbaryl 8,757 60273 50100 83,12
Carbofuran 6,521 709385 607605 85,56
Aldicarb 5,514 41035 37962 92,51
Mélange 2
Baygon 6,500 90657 93476 103,10
Méthomyl 3,357 69273 59100 85,31
Carbofuran 6,521 90657 96231 106,14

I.HACHOUMI 51
Tr : temps de rétention, Astd : aire standard ; Aech : aire échantillon
Selon la définition de la norme le rendement doit se situer entre 80-100%.
Les résultats mentionnés sur le tableau 8 montrent que les taux de récupération des
carbamates testé sont satisfaisants étant donné qu’ils se trouvent dans la fourchette des
rendements de récupération de la méthode validée en matière de résidus de carbamates dans
les pommes et qui oscille entre 83 et 106 %, à l’exception de deux composés ; Baygon et
Carbofuran montre un rendement qui dépasse les 100%.
II. Discussion
La présente étude est surtout focalisée sur l’analyse des carbamates dans la pomme en
utilisant des méthodes chromatographiques utilisées à l’échelle mondiale. En effet,
l’utilisation de la méthode multirésidus selon la norme européenne pour la recherche des
pesticides, avait comme but, de doser les traces de carbamates dans les matrices végétales,
comme la pomme.
L’analyse des échantillons effectuée par HPLC-UV ne révèle aucun résultat positif.
L'absence de contamination de pommes par les résidus de carbamates utilisés pour le
traitement du pommier peut être attribuée à la période de stockage ou à leur dégradation dans
l’environnement. Les résidus de carbamates ne sont généralement pas persistants dans
l'environnement et sont présents pendant 10 à 20 jours après le traitement de pulvérisation.
En 2002, John et Coxl., ont montré que les résidus de l’aldicarb et du propoxur sont oxydés
dans le sol, mais conservent leur effet pendant environ 2 semaines.
En effet, les résidus de carbamates contenus dans les échantillons collectés peuvent être
dégradés beaucoup plus rapidement en présence de la chaleur ou l'humidité, il est donc
important que les échantillons soient transportés au laboratoire d'analyses, de manière à
minimiser le risque et la vitesse de dégradation (John et Cox1, 2002).
D'autres hypothèses pourraient expliquer l’absence de résidus de carbamates ou autres
pesticides dans les pommes, c’est l’utilisation de nouvelles techniques de lutte biologique
permettant, d'une part de réduire les dégâts dus aux maladies de post-récolte et d'autre part, de

I.HACHOUMI 52
répondre aux contraintes imposées par le marché international. Toute fois un programme
recherche multi-institutionnel a été lancé depuis 2004 par le Centre Régional de la Recherche
Agronomique de Meknès (CRRAM) au Maroc qui vise à l’amélioration des techniques de
conservation des pommes par le développement de méthodes de lutte biologique au lieu
d’utiliser des méthodes de lutte chimique. Ils ont mis en évidence deux biopesticides
hautement efficaces contre les principaux pathogènes de maladies de post-récolte des pommes
au Maroc. Il s’agit de deux levures Aureobasidiwnpullulon (Ach1-1) et A. pullulons var.
pullulons (1113-5) qui peuvent remédier au grand problème de résistance des pathogènes aux
différentes molécules chimiques et répondent parfaitement aux exigences d’homologation (El
Asri et al., 2010).
Nos résultats sont en accord avec les travaux effectués par Al yaseri et al, en 2012 qui ont
analysé des échantillons de pomme importés à partir de la Jordanie, Syrie, Turquie et Iran ;
afin de déterminer la présence des résidus du Bendiocarb et d’autres pesticides et ont trouvé
que les échantillons de pommes ne contenaient aucun composé carbamates.
Cette absence de traces de carbamates dans les pommes peut être expliquée aussi par le fait
que les échantillons de pommes ne contenaient probablement que de faibles traces qui restent
en dessous de la limite de détection par l’HPLC.
Pour vérifier l’efficacité et la fiabilité de la méthode d’extraction, on a fortifié nos
échantillons de pommes avec une concentration connue de carbamates de 5 ppm. Pour cela,
on a travaillé sur 2 paramètres ; Le temps de rétention et le taux de récupération.
En effet, connaître le temps de rétention de chaque composé de carbamate nous a permis
d’identifier et de confirmer exactement leur présence dans un échantillon contaminé ou dopé.
Selon des études antérieures concernant le temps de rétention, Ogah et Coker, en 2011 ont
effectué des analyses sur des haricots à la recherche et à la détermination des résidus de
carbamates, et ont trouvé que le temps de rétention du Carbaryl est de 7,42 min alors que celui
du Carbofuran est de 5,83 dans les haricots, et ces valeurs sont très proches de celle que nous
avons trouvée.
Le deuxième paramètre sur lequel on a travaillé est le taux de récupération (R%), qui
permet d’évaluer la fiabilité et la conformité de la méthode d’extraction utilisée. D’après les

I.HACHOUMI 53
résultats obtenus, la méthode d’extraction adoptée au laboratoire est performante. Par ailleurs,
2 carbamates ont montré un rendement qui dépassent les 100% ; Baygon et Carbofuran.
Ceci peut être attribué à des temps de rétention identiques pour les deux derniers composés,
ce qui a provoqué une coalition de deux pics au niveau du standard et nous avons pu avoir
l’aire d’un seul pic, ce qui était certainement difficile à les séparer et on remarque que l’aire
du standard de carbofuran (Astd=90657) est inferieure à celle de l’échantillon (Aech=
96231), nous voudrions bien supposer qu’il y a eu une contamination, mais probablement la
méthode d’extraction adoptée n’est pas si efficace pour extraire le carbofuran et le propoxur
(Baygon), et cela était prouvé par Zrostlikova et al., en 2003 puisqu’ils ont trouvé que le
Carbofuran était le seul composé dont le taux de récupération n'était pas satisfaisant dans la
pomme en raison de sa perte dans l'étape de filtration.

Projet de fin d’études MST SADQ Conclusion et perspectives
I.HACHOUMI 55
Dans ce travail, nous avons fait une analyse des échantillons de pommes, à la recherche des
résidus de carbamates mais tous les échantillons de pommes ne contenaient aucun résidu de
carbamates.
Nous avons décidé de poursuivre l’étude pour prouver l’efficacité de la méthode
d’extraction utilisée. Ceci dit, on a dopé nos échantillons de pommes avec différents
composés carbamates à une concentration de 5 ppm. Pour la détection de ces composés, on
s’est basé sur deux paramètres ; le temps de rétention (analyse qualitative) et le taux de
récupération (analyse quantitative).
En analysant les chromatogrammes des échantillons de pommes dopés on a constaté que la
plupart des carbamates testés peuvent être extraits avec une efficacité importante, mais pour
pouvoir différencier entres eux, nous avions besoin d’identifier les temps de rétention de
chaque composé de carbamate. Le temps de rétention des carbamates est satisfaisant à
l’exception de deux composés le carbofuran et le propoxur.
En ce qui concerne les taux de récupération des carbamates, ils étaient satisfaisants étant
donné qu’ils se trouvent dans la fourchette des rendements de récupération de la méthode
validée en matière de résidus de carbamates dans les pommes sauf 2 composés qui ont
présenté un rendement qui dépassent les 100 %.
Cependant, L’HPLC-UV peut ne pas être suffisante ou précise pour la détection des résidus
de carbamates ainsi les erreurs de manipulation peuvent avoir lieu lors de la préparation des
échantillons jusqu’à l'extraction.
Toutefois, il est urgent de mettre en place un laboratoire de contrôle de qualité équipé
d’appareillages plus performants tels que l’HPLC-MS pour déterminer le poids moléculaire
de chaque composé de carbamate.
Et par conséquent, il faut se concentrer sur l’amélioration de la récupération des composés
de carbamates, et d’essayer de travailler avec plusieurs matrices végétales. Il est possible
d’améliorer la performance de la méthode en faisant varier l’équipement utilisé, l’extraction et
les conditions chromatographiques. Nous signalons ainsi, qu’il y a des méthodes d’extraction
récentes qui sont aussi utilisées pour l’analyse des pesticides à savoir la méthode

Projet de fin d’études MST SADQ Conclusion et perspectives
I.HACHOUMI 56
QUECHERS ; qui est une technique d’extraction avec cartouches QUECHERS (Quick, Easy,
Cheap, Effective, Rugged, Safe - rapide, simple, économique, efficace, robuste, sure).

57
Références Bibliographiques

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