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Hôpital Militaire d’Instruction Mohammed V.
Laboratoire de Biochimie.




          DETERMINATION DU GLUCOSE
               DANS LES MILIEUX
          BIOLOGIQUES ET VARIATIONS
            PHYSIOPATHOLOGIQUES.




     Yassine Ben Lahlou                       Avril/2010
PLAN

Introduction
Rappels
Dosage du glucose dans les milieux
biologiques
             Intérêt physiopathologique
             Etape préanalytique
             Techniques de dosage
Interprétation des résultats
              Valeurs usuelles
              Variations biologiques
              Variations physiopathologiques
              HGPO.
Conclusion
Introduction............................................................................................
Rappels.................................................................................................
Dosage du glucose dans les milieux biologiques……………………….
Interprétation des résultats…………………………………………………
Conclusion.............................................................................................



                                                                                             INTRODUCTION

              Glucide présent aussi bien dans le règne animal que végétale et qui est la
           principale source d’énergie de l’organisme.

                 Transporté par le plasma dans les différents tissus de l’organisme

             Il est catabolisé en produisant de l’énergie ou en fournissant des substrats
           nécessaires à l’anabolisme des lipides (cycle de Krebs) ou des acides
           aminés (voie des pentoses phosphates).

             Le glucose est stocké principalement sous forme de glycogène qui est
           dégradé par les cellules en fonction de leurs besoins.
Introduction............................................................................................
Rappels.................................................................................................
Dosage du glucose dans les milieux biologiques……………………….
Interprétation des résultats…………………………………………………                                                                               PLAN
Conclusion.............................................................................................




                   INTRODUCTION


                             RAPPELS
                                                                                                           STRUCTURE




                                                                                                    MÉTABOLISME          APPORT
                                                                                                                        SYNTHÈSE/
                                                                                                                       DÉGRADATION

                                                                                                                       ELIMINATION

                                                                                                       REGULATION
Introduction............................................................................................
Rappels.................................................................................................structure
Dosage du glucose dans les milieux biologiques……………………….
Interprétation des résultats…………………………………………………
Conclusion.............................................................................................



                                                                                                         RAPPELS
                                                                                                         A. Structure

             Le glucose est un aldohexose, principal représentant des oses, symbolisé
           par Gls.

             C’est un isomère d’autres sucres, en particulier le mannose ou le fructose
           de formule C6H12O6




                                                                                                                        Figure2: D-glucose en
                             Figure1: D-glucose en
                                                                                                                        représentation chaise
                             projection Fischer


                 Une molécule polaire, thermodégradable et dialysalble.
Introduction............................................................................................
Rappels.................................................................................................Métabolisme
Dosage du glucose dans les milieux biologiques……………………….
Interprétation des résultats…………………………………………………
Conclusion.............................................................................................



                                                                                                     RAPPELS
                                                                                                B. Métabolisme
                                                                                              1.Apport et absorption
         Le glucose joue un vrai rôle de carburant pour les cellules grâce à sa
       combustion

         Source exogène: l’alimentation est la source principale
       d’approvisionnement

             Source endogène: les différentes voies de synthèse/dégradation


            Il est directement assimilable par l'organisme.


         Galactose et fructose rejoignent le métabolisme du glucose.(les voies
       de synthèse et de dégradation).
Introduction............................................................................................
Rappels.................................................................................................Métabolisme
Dosage du glucose dans les milieux biologiques……………………….
Interprétation des résultats…………………………………………………
Conclusion.............................................................................................



                                                                                                     RAPPELS
                                                                                                B. Métabolisme
                                                                                           1.Synthése/Dégradation
                                                                                                                                 Après repas

                                                                                                                      - la combustion du « carburant »
                                                                                                                      passe par la glycolyse.

                                                                                                                      - Les molécules de puruvate:
                                                                                                                           1. Dégradation partielle
                                                                                                                           (anaérobie)
                                                                                                                           2. Réaction aboutissant à
                                                                                                                           son oxydation (respiration
                                                                                                                           cellulaire).


          Glycolyse
Introduction............................................................................................
Rappels.................................................................................................Métabolisme
Dosage du glucose dans les milieux biologiques……………………….
Interprétation des résultats…………………………………………………
Conclusion.............................................................................................



                                                                                                     RAPPELS
                                                                                          B. Métabolisme 38
                                                                                           1.Synthése/Dégradation
                                                                                                                                 Aprés repas

                                                                                                                      -La voie métabolique qui permet
                                                                                                                      dans le foie et le muscule, la
                                                                                                                      synthése de glycogéne à partir du
                                                                                                                      glucose.

                                                                                                                      - Permet la mise en reserve du
                                                                                                                      glucose .
                                                                                                                      - n C6H12O6 (glucoses) →
                                                                                                                      (C6H10O5)n (glycogène) + (n-1)
                                                                                                                      H2O.

              Glycogénogenèse
Introduction............................................................................................
Rappels.................................................................................................Métabolisme
Dosage du glucose dans les milieux biologiques……………………….
Interprétation des résultats…………………………………………………
Conclusion.............................................................................................



                                                                                                     RAPPELS
                                                                                                B. Métabolisme
                                                                                           1.Synthése/Dégradation
                                                                                                                                    jeun

                                                                                                                      - Dégradation des molécules de
                                                                                                                      glycogéne en glucose.

                                                                                                                      - Glucose permet de maintenir la
                                                                                                                      glycémie à la valeur normale.




                         Glycogénolyse
Introduction............................................................................................
Rappels.................................................................................................Métabolisme
Dosage du glucose dans les milieux biologiques……………………….
Interprétation des résultats…………………………………………………
Conclusion.............................................................................................



                                                                                                     RAPPELS
                                                                                                B. Métabolisme
                                                                                           1.Synthése/Dégradation
                                                                                                                                Jeune prolongé

                                                                                                                      - La synthèse du glucose à partir de
                                                                                                                      précurseurs non-glucidiques. C'est
                                                                                                                      à proprement parler l'inverse de la
                                                                                                                      glycolyse

                                                                                                                      - les sources glucose par
                                                                                                                      néoglucogenèse sont
                                                                                                                      principalement les acides aminés
                                                                                                                      (45 %) et, à un moindre degré, le
                                                                                                                      lactate (30 %) et le glycérol (25 %).

                                                                                                                      - Cette opération est réalisée par le
            Néoglucogenèse                                                                                            foie. Elle permet de fournir du
                                                                                                                      glucose en permanence, aux
                                                                                                                      organes.
Introduction............................................................................................
Rappels.................................................................................................Métabolisme
Dosage du glucose dans les milieux biologiques……………………….
Interprétation des résultats…………………………………………………
Conclusion.............................................................................................



                                                                                                     RAPPELS
                                                                                          B. Métabolisme 38
                                                                                         1.Synthése et dégradation
Introduction............................................................................................
Rappels.................................................................................................
Dosage du glucose dans les milieux biologiques……………………….
Interprétation des résultats…………………………………………………                                                                              PLAN
Conclusion.............................................................................................




                   INTRODUCTION


                             RAPPELS

                                                                                                           STRUCTURE

                                                                                                    MÉTABOLISME         APPORT
                                                                                                                        SYNTHÈSE/
                                                                                                                       DÉGRADATION
                                                                                                                       ELIMINATION
Introduction............................................................................................
Rappels.................................................................................................Métabolisme
Dosage du glucose dans les milieux biologiques……………………….
Interprétation des résultats…………………………………………………
Conclusion.............................................................................................



                                                                                                     RAPPELS
                                                                                                B. Métabolisme
                                                                                                          3.Elimination

                                                                                                                          Le glucose est filtré à un taux
                                                                                                                          de 100mg/min.

                                                                                                                          Réabsorbé par un mécanisme
                                                                                                                          de transport actif, il s’agit d’un
                                                                                                                          co-transport avec les ions
                                                                                                                          sodium.
                                                                                                                          Quantité réabsorbée est
                                                                                                                          proportionnelle à la quantité
                                                                                                                          filtrée

                                                                                                                          Lorsque le taux de sucre dans le
                                                                                                                          sang dépasse 1,80 g/l, le sucre
                                                                                                                          commence à passer dans les
                                                                                                                          urines (on parle de seuil rénal du
                                                                                                                          glucose).
Introduction............................................................................................
Rappels.................................................................................................
Dosage du glucose dans les milieux biologiques……………………….
Interprétation des résultats…………………………………………………                                                                                          PLAN
Conclusion.............................................................................................




                     INTRODUCTION


                               RAPPELS

                                                                                                           STRUCTURE

                                                                                                      MÉTABOLISME

                                                                                                           REGULATION

               Physico-chimique                                                                                                   Nerveuse

                   - La glycogénosynthèse                                                                                   - Sympathique
                   - La glycogénolyse                                                                                       - Parasympathique
                   - La néoglucogenèse                                                                      Hormonale
                                                                                                 - Insuline.
                                                                                                 - Glucagon.
                                                                                                 - Adrénaline.
                                                                                                 - Cortisol.
                                                                                                 - Hormone de croissance.
Introduction............................................................................................
Rappels.................................................................................................Régulation
Dosage du glucose dans les milieux biologiques……………………….
Interprétation des résultats…………………………………………………
Conclusion.............................................................................................



                                                                                                       RAPPELS
                                                                                                     C. Régulation
                                                                                         1. Régulation hormonale
           Insuline                                                                    a. hormone hypoglycémiante
          - Seule hormone hypoglycémiante, hormone polypeptidique ; de PM=6000
          composée de 2 chaînes A et B reliées par 2 ponts dissulfure ; synthétisée et
          sécrétée par les ilôts β de pancréas.

                                           Actions de l’insuline
          - Elle ↑ la pénétration intracellulaire de glucose et son utilisation par les tissus
          insulinosensibles (muscles et tissu adipeux) ;
          - Elle ↓la libération du glucose par le foie en : Inhibant la glycogénolyse et la
          néoglucogenèse et en stimulant la glycogenèse et la glycolyse.
          - Elle stimule la captation des AG par le tissu adipeux et leur conversion en TG
          dans le foie : lipogenèse et dimunie la lipolyse du tissu adipeux et la cétogenèse
          hépatique.
          - Elle favorise la synthèse protéique en favorisant l’entrée des AA dans la cellule
          hépatique et musculaire.
Introduction............................................................................................
Rappels.................................................................................................Régulation
Dosage du glucose dans les milieux biologiques……………………….
Interprétation des résultats…………………………………………………
Conclusion.............................................................................................



                                                                                                       RAPPELS
                                                                                                     C. Régulation
                                                                                       1. Régulation hormonale
                                                                                   a. hormones hyperglycémiantes
           Glucagon
          - Produite par les cellules α de Langerhans.
          - Hyperglycémiante par stimulation de la glycogénolyse ; néoglucogenèse
          hépatique et inhibition de glycogenèse.Favorise la lipolyse et la protéolyse.
          adrénaline
          - Sa sécrétion est essentiellement nerveuse (sympathique). Elle est
          hyperglycémiante plus par blocage d’insulino-sécrétion que par la
          glygénolyse qu’elle provoque. Elle stimule aussi la néoglucogenèse ; et
          entraîne une lipolyse majeure au niveau du tissu adipeux.
Introduction............................................................................................
Rappels.................................................................................................Régulation
Dosage du glucose dans les milieux biologiques……………………….
Interprétation des résultats…………………………………………………
Conclusion.............................................................................................



                                                                                                       RAPPELS
                                                                                                     C. Régulation
                                                                                       1. Régulation hormonale
                                                                                   a. hormones hyperglycémiantes
           1. Les glucocorticoïdes : le cortisol
          - Au niveau du foie ; stimule la néoglucogenèse
          - Au niveau des tissus périphériques : ↓ la consommation du glucose et ↑ le
          catabolisme protidiques fournissant au foie des AA.

          2- L’hormone de croissance : Stimule la néoglucogenèse et la sécrétion
          du glucagon et entraîne une lipolyse.

          3 - Les autres hormones :
          Hormones thyroïdiennes : leur action hyperglycémiante est bcp + faible que
          celle des autres.
Introduction............................................................................................
Rappels.................................................................................................Régulation
Dosage du glucose dans les milieux biologiques……………………….
Interprétation des résultats…………………………………………………
Conclusion.............................................................................................



                                                                                                       RAPPELS
                                                                                                     C. Régulation
                                                                                              2. Régulation nerveuse


        Rôle du sympathique:
        Une diminution de glucose stimule les récepteurs hormonaux et par
       l’intermédiaire d’un mécanisme de réflexe qui agit sur la médullosurrénale→
       libération d’adrénaline qui a tendance à ↑ sécrétion de glucagon et ↓ celle
       d’insuline (stimulation α adrénergique).
         Rôle du parasympathique:
        Il intervient à la fois par son effet insulino-sécréteur et à moindre degré par
       stimulation de sécrétion de glucagon
Introduction............................................................................................
Rappels.................................................................................................
Dosage du glucose dans les milieux biologiques……………………….
Interprétation des résultats…………………………………………………                                                                          PLAN
Conclusion.............................................................................................




                   INTRODUCTION


                             RAPPELS

              DOSAGE DU
           GLUCOSE DANS LES
                MILIEUX
                                                                                                         INTERT
             BIOLOGIQUES                                                                           PHYSIOPHATOLOGIQUE

                                                                                                   ETAPE PREANALYTIQUE

                                                                                                TECHNIQUES DE DOSAGE
Introduction............................................................................................
Rappels.................................................................................................
Dosage du glucose dans les milieux biologiques……………………….intérêt physiopathologique
Interprétation des résultats…………………………………………………
Conclusion.............................................................................................



              Dosage du glucose dans les milieux biologiques
                                                  A. Intérêt physiopathologique

          Le glucose, c’est la principale source énergétique des cellules, catabolisé
        en produisant de l’énergie ou stocké sous forme de glycogène.



           les mécanismes de régulation sont très complexes et agissent sur le
        système enzymatique mis en jeu au cours du catabolisme ou de
        l’anabolisme du glucose et concourent au maintien de l’homéostasie
        glycémique.


            La perte de cette homéostasie se rencontre dans de nombreux contextes
           physiopathologiques.!!!!!!!!!!
Introduction............................................................................................
Rappels.................................................................................................
Dosage du glucose dans les milieux biologiques……………………….Etape préanalytique
Interprétation des résultats…………………………………………………
Conclusion.............................................................................................



               Dosage du glucose dans les milieux biologiques
                                                              B. Etape préanalytique
                                                                               1.Dans le sang
           Le sujet doit être à jeun depuis au moins 8 heures et 16 heures au plus.
           Le glucose peut être mesuré dans le plasma, dans le sérum ou dans le
        sang. Les valeurs obtenues dépendent du type de prélèvement effectué : les
        valeurs plasmatiques sont environ 11 à 13 % plus élevées que la glycémie
        mesurée sur le sang dans le cas d'un hématocrite normal, étant donné la
        différence de contenu en eau des érythrocytes et du plasma.

          Les échantillons provenant d'un sang veineux conduisent à des résultats
        plus bas que ceux des prélèvements capillaires.

           La stabilité du glucose dans le plasma est assurée pendant 5 jours à + 4
          C et 2 mois à - 20 C en l'absence de toute contamination bactérienne.

           La glycémie, dans les situations d'urgence, peut être effectuée
        directement à partir d'un échantillon prélevé au bout du doigt, du talon, ou du
        lobe de l'oreille. Dans ce cas on utilise des systèmes dédiés commercialisés
        (glucomètres ou lecteurs de glycémie).
Introduction............................................................................................
Rappels.................................................................................................
Dosage du glucose dans les milieux biologiques……………………….Etape préanalytique
Interprétation des résultats…………………………………………………
Conclusion.............................................................................................



               Dosage du glucose dans les milieux biologiques
                                                              B. Etape préanalytique
                                                                               1.Dans le sang
                                                                                             -La concentration de glucose diminue
                                                                                             immédiatement après le recueil du fait de la
                                                                                             glycolyse au niveau des érythrocytes et des
                                                                                             leucocytes.(courbe).

                                                                                             -Il convient d'éviter la glycolyse, c'est-à-dire
                                                                                             de procéder à la séparation du plasma dans
                                                                                             la demi-heure qui suit le prélèvement ou
                                                                                             d'ajouter un antiglycolytique (tube à bouchon
                                                                                             gris)

                                                                                             - Fluorure: Cette substance interdit la
                                                                                             détermination sur le même tube de l'urée par
                                                                                             une technique enzymatique.
Introduction............................................................................................
Rappels.................................................................................................
Dosage du glucose dans les milieux biologiques……………………….Etape préanalytique
Interprétation des résultats…………………………………………………
Conclusion.............................................................................................



               Dosage du glucose dans les milieux biologiques
                                                              B. Etape préanalytique
                                                                           2. Dans les urines
          Le dosage du glucose est effectué sur une miction ou sur un échantillon
        des urines de 24 heures.

          L'addition d'un antiseptique dans le flacon de recueil des urines est
        souhaitable, étant donné la consommation possible du glucose par
        d'éventuels germes

           Il est possible de dépister une glycosurie par des bandelettes réactives
        utilisant la glucose-oxydase. Celles-ci sont sensibles à l'interférence de
        nombreuses substances réductrices présentes dans les
        urines.
                                        3. Dans LCR.

             Il est recommandé d'effectuer le dosage dans les plus brefs délais
           après le prélèvement.
Introduction............................................................................................
Rappels.................................................................................................
Dosage du glucose dans les milieux biologiques……………………….
Interprétation des résultats…………………………………………………                                                                          PLAN
Conclusion.............................................................................................




                   INTRODUCTION


                             RAPPELS

              DOSAGE DU
           GLUCOSE DANS LES
                MILIEUX
                                                                                                         INTERT
             BIOLOGIQUES                                                                           PHYSIOPHATOLOGIQUE

                                                                                                   ETAPE PREANALYTIQUE

                                                                                                TECHNIQUES DE DOSAGE
Introduction............................................................................................
Rappels.................................................................................................
Dosage du glucose dans les milieux biologiques……………………….Techniques de dosage
Interprétation des résultats…………………………………………………
Conclusion.............................................................................................



               Dosage du glucose dans les milieux biologiques
                                                          C. Techniques de dosage
                                              1.Méthodes enzymatiques
                            a. Méthodes utilisant le système glucose-oxydase/peroxydase
        Principe
                                                                 Glucose oxydase
              Beta D glucose                +        O2                                                    Glucose 6 phosphate       H2O2
                                                                                                                                 +
                                                                         peroxydase
                                              H2O2                                                          H2O2



                                                                                               Chromogène oxydé
                                         Chromogène réduit
                                                                                               coloré
                                         incolore




          Différents modes d'évaluation de cette réaction sont possibles: Mesure
        photométrique, Mesure ampérométrique
Introduction............................................................................................
Rappels.................................................................................................
Dosage du glucose dans les milieux biologiques……………………….Techniques de dosage
Interprétation des résultats…………………………………………………
Conclusion.............................................................................................



               Dosage du glucose dans les milieux biologiques
                                                         C. Techniques de dosage
                                              1.Méthodes enzymatiques
                            a. Méthodes utilisant le système glucose-oxydase/peroxydase




        Mésure photométrique
        - Soit par la mesure de la concentration de peroxyde d'hydrogène par
        l'intermédiaire d'une réaction faisant intervenir une peroxydase et un
        chromogène donneur d'hydrogène pour donner naissance à un composé coloré
        dont l'absorbance est mesurée par spectrophotométrie

        Mesure ampérométrique
        - Soit par une électrode de mesure de la consommation d'oxygène. Les
        techniques mesurant la diminution de la pO2 sont peu sensibles à l'influence
        des substances réductrices.
Introduction............................................................................................
Rappels.................................................................................................
Dosage du glucose dans les milieux biologiques……………………….Techniques de dosage
Interprétation des résultats…………………………………………………
Conclusion.............................................................................................



               Dosage du glucose dans les milieux biologiques
                                                         C. Techniques de dosage
                                                    1.Méthodes enzymatiques
                                          a. Méthodes utilisant le système hexokinase +++
        Principe
                                                        Héxokinase
                  Beta D glucose                                                            Glucose 6 phosphate

                                                                                                                  NAD(P)+

                                                            Glucose-6-phosphate
                                                            déshydrogénase (G6PDH)
                                                                                                                  NAD(P)H,H+

                                                                                        6 phosphogluconolactone

        - l’absorbance est mesurée à 340 nm.
        Avantages:
        - C’est la méthode de référence.
        - Les deux réactions sont spécifiques.
Introduction............................................................................................
Rappels.................................................................................................
Dosage du glucose dans les milieux biologiques……………………….Techniques de dosage
Interprétation des résultats…………………………………………………
Conclusion.............................................................................................



               Dosage du glucose dans les milieux biologiques
                                                         C. Techniques de dosage
                                                       1.Méthodes enzymatiques
                                                a. Méthodes à la glucose déshydrogénase
        Principe
                                                              GDH
           Beta D glucose                                                                         D- gluconolactone

                               NAD(P)+                                             NAD(P)H,H+




        Avantages: - Bonne sensibilité et spécificité.
                  - Pas d’interférences( sauf mannose et xylose).
                  - Rapide et automatisable.
                  - Bonne corrélation avec la méthode de l’héxokinase
Introduction............................................................................................
Rappels.................................................................................................
Dosage du glucose dans les milieux biologiques……………………….Techniques de dosage
Interprétation des résultats…………………………………………………
Conclusion.............................................................................................



               Dosage du glucose dans les milieux biologiques
                                                         C. Techniques de dosage
                                                               2.Méthodes chimiques
                                                           a. Méthodes par oxydoréduction
        Principe
          Consiste à oxydé le glucose par Cu2+ en milieu alcalin à chaud:
           Ac gluconique+ Cu+.
          Cu+ est réoxydé par phosphomolybdate : Bleu de molybdène
          (660nm).



        Avantages:
        - Ne sont plus utilisés
        - Non spécifiques.
Introduction............................................................................................
Rappels.................................................................................................
Dosage du glucose dans les milieux biologiques……………………….Techniques de dosage
Interprétation des résultats…………………………………………………
Conclusion.............................................................................................



               Dosage du glucose dans les milieux biologiques
                                                         C. Techniques de dosage
                                                                  2.Méthodes chimiques
                                                               a. Méthodes à la O.toluidine
        Principe
          En milieu acétique concentré, le glucose est déshydraté en 5-
          hydroxy-méthyl-furfural. Le produit formé se condense en présence
          de thiourée sur l’ortho-toluidine pour donner un produit bleu-vert (630
          nm)

        Avantages:
        - Méthode simple, fiable et peu coûteuse.
        Inconvénients:
        - Peu applicable à l’automatisation (action corrosive de l’ac.acétique.)
        - Interférence avec la bilirubine.
        - O. toluidine cancérigène.
Introduction............................................................................................
Rappels.................................................................................................
Dosage du glucose dans les milieux biologiques……………………….Techniques de dosage
Interprétation des résultats…………………………………………………
Conclusion.............................................................................................



               Dosage du glucose dans les milieux biologiques
                                                         C. Techniques de dosage
                                                                   1. Lecteurs de glycémie

       Ces systèmes utilisent des bandelettes réactives ou des dispositifs faisant
     appel à un principe électrochimique.

        La Fédération internationale de chimie clinique (IFCC) a recommandé que
     ces systèmes qui mesurent le glucose dans le sang, fournissent des résultats
     équivalents à ceux obtenus avec le plasma correspondant, un facteur
     constant de 1.11 est conseillé pour convertir la concentration de glucose
     dans le sang en concentration plasmatique. Ceci permet d'utiliser des
     critères d'interprétation des résultats équivalents.

       Le diagnostic biologique de diabète doit être effectué avec une
     technique utilisant du plasma.
Introduction............................................................................................
Rappels.................................................................................................
Dosage du glucose dans les milieux biologiques……………………….
Interprétation des résultats…………………………………………………                                                                         PLAN
Conclusion.............................................................................................




                   INTRODUCTION


                             RAPPELS

              DOSAGE DU
           GLUCOSE DANS LES
                MILIEUX
             BIOLOGIQUES

                                                                                                     VALEURS USUELLES
                     INTERPRETATION

                                                                                             VARIATIONS BIOLOGIQUES

                                                                                                    VARIATIONS
                                                                                               PHYSIOPATHOLOGIQUES
Introduction............................................................................................
Rappels.................................................................................................
Dosage du glucose dans les milieux biologiques……………………….
Interprétation des résultats…………………………………………………valeurs usuelles
Conclusion.............................................................................................



                                                      Interprétation des résultats
                                                                      A. Valeurs usuelles
         Prélèvement
                                                                                                  URINES: : 0 g/l.


            URINE


                                                                                                  LCR: Enfants et adultes : 2,2 - 5,0 mmol/l
                                                                                                  (0,4 - 0,9 g/l).
               LCR                                                                                Quel que soit l'âge et l'état nutritionnel du
                                                                                                  sujet, la valeur de la glycorachie est
                                                                                                  comprise entre 60 et
                                                                                                  70 % de la valeur de la glycémie
             Sang




                     0            0.5             1             1.5
                                                                        Concentration
                                                                             2                    SANG :Adulte : 3,6 - 5,3 mmol/l (0,65 -
                                                                                                  1 g/l).
Introduction............................................................................................
Rappels.................................................................................................
Dosage du glucose dans les milieux biologiques……………………….
Interprétation des résultats…………………………………………………variations biologiques
Conclusion.............................................................................................



                                                 Interprétation des résultats
                                                          B. Variations biologiques

          Le glucose plasmatique augmente avec l'âge, et la glycémie est
        constamment plus élevée chez les hommes que chez les femmes.

             La glycémie serait en relation avec la masse corporelle.

          Pendant la grossesse, une baisse du glucose plasmatique est observée
        parallèlement à l'augmentation de la sécrétion d'insuline. Cette diminution
        peut atteindre 17 % en fin de grossesse.

         L'activité physique induit une diminution de la glycémie chez l'homme
        sain, comme chez le diabétique.
Introduction............................................................................................
Rappels.................................................................................................
Dosage du glucose dans les milieux biologiques……………………….
Interprétation des résultats…………………………………………………                                                                               PLAN
Conclusion.............................................................................................




                   INTRODUCTION


                             RAPPELS

              DOSAGE DU
           GLUCOSE DANS LES
                MILIEUX
             BIOLOGIQUES

                                                                                                 VALEURS USUELLES
               INTERPRETATION                                                                                                  DIABETE
                                                                                                                                SUCRE
                                                                                         VARIATIONS BIOLOGIQUES                DIABETE
                                                                                                                                SUCRE

                                                                                                VARIATIONS          HYPERGY    DIABETE
                                                                                                                     CEMIE      SUCRE
                                                                                           PHYSIOPATHOLOGIQUES

                                                                                                                                 CHEZ
                                                                                                                               L’ADULTE
                                                                                                                    HYPOGYC
                                                                                                                      EMIE       CHEZ
                                                                                                                               L’ENFANT
Introduction............................................................................................
Rappels.................................................................................................
Dosage du glucose dans les milieux biologiques……………………….
Interprétation des résultats…………………………………………………variations physiopathologiques
Conclusion.............................................................................................



                                             Interprétation des résultats                                          Diabète

                        C. Variations physiopathologiques dans le sang
                                                                  1. Hyperglycémies
                                                                   a. Diabète sucré
     Définition
        Affection chronique caractérisée par une hyperglycémie et une glycosurie
     [2]

        En 1997, la Société américaine de diabétologie (ADA) a proposé de
     nouveaux critères diagnostiques et un nouveau schéma de classification pour
     le diabète.

         On a laissé tomber les notions -«insulino-dépendant»
                                                                       - «non insulino-dépendant»
                                                                       -« diabète juvénile ou diabète sénile »
                                                                       - « La notion de diabète trophique a elle aussi
                                                                       été abandonnée »
Introduction............................................................................................
Rappels.................................................................................................
Dosage du glucose dans les milieux biologiques……………………….
Interprétation des résultats…………………………………………………variations physiopathologiques
Conclusion.............................................................................................



                                             Interprétation des résultats                                  Diabète

                        C. Variations physiopathologiques dans le sang
                                                                  1. Hyperglycémies
                                                                   a. Diabète sucré
       Critères diagnostiques: [1]
       Il existe en principe trois possibilités de diagnostiquer un diabète sucré.
       1. Glucose plasmatique à n’importe quel moment (2 g/l) et symptômes
            typiques d’un diabète sucré
                   - <1,1 g/l) pas de diabète sucré
                   - ( 1,1 g/l et <1,26 g/l) trouble du glucose à jeun (trouble de
                   l’homéostasie du glucose)
                   - ›( 1,26 g/l) diabète sucré (diagnostic provisoire, à vérifier par une
                   2e détermination
       2. Glucose plasmatique à jeun (c’est-à-dire après période de jeûne de >8
       heures) (1,26 g/l)

       3. Glucose plasmatique 2 heures après charge orale de glucose (75 g)
       ( 2 g/l)
Introduction............................................................................................
Rappels.................................................................................................
Dosage du glucose dans les milieux biologiques……………………….
Interprétation des résultats…………………………………………………variations physiopathologiques
Conclusion.............................................................................................



                                             Interprétation des résultats                                  Diabète

                        C. Variations physiopathologiques dans le sang
                                                                  1. Hyperglycémies
                                                                   a. Diabète sucré
       Classification du diabète sucré: [1]
       Classification selon l’étiologie:
           Diabète sucré de type 1
       1. Diabète sucré de type 1
                Auto-immune ou idiopathique
       2.       Diabète sucré de type 2
                2.
                 Résistance à l’insuline et défaut de sécrétion d’insuline
       3.       Types spécifiques de diabète
                a. Défaut génétique de la fonction des cellules β (Maturity Diabetes of the Young:
                MODY).
                b. Défaut génétique dans l’action de l’insuline…………...
                c. Maladies du pancréas exocrine .
                d. Endocrinopathies
                e. Induit par les médicaments.
                f.Infections…
                g. Formes rares de diabète immunogène

       4. Diabète gestationnel
Introduction............................................................................................
Rappels.................................................................................................
Dosage du glucose dans les milieux biologiques……………………….
Interprétation des résultats…………………………………………………variations physiopathologiques
Conclusion.............................................................................................



                                             Interprétation des résultats                                  Diabète

                        C. Variations physiopathologiques dans le sang
                                                                  1. Hyperglycémies
                                                                   a. Diabète sucré
       Critères pour le dépistage du diabète : [1]




            L'Organisation Mondiale de la Santé (OMS) a récemment modifié les critères de
           classification pour la détection des sujets diabétiques.

            L'intervalle des valeurs de glycémie à jeun (plasmatiques) au-delà desquelles
           une prise en charge est souhaitable a été réduit :< 1,26 g/l au lieu de < 1,40 g/l
Introduction............................................................................................
Rappels.................................................................................................
Dosage du glucose dans les milieux biologiques……………………….
Interprétation des résultats…………………………………………………variations physiopathologiques
Conclusion.............................................................................................



                                             Interprétation des résultats                                  Diabète

                        C. Variations physiopathologiques dans le sang
                                                           1. Hyperglycémies
                                                     a. Diabète sucré :Diabète type 1

         Diabète de type I (anciennement insulinodépendant), il se caractérise par
       un manque partiel ou total de production d'insuline par l'organisme.

         Diabète sucré de type 1 est dû à une atteinte de nature auto-immune des
       cellules β des îlots pancréatiques

         Découvert chez les sujets jeunes et maigres, il conduit à l'acidocétose.
       Lorsque l’hyperglycémie est cliniquement manifeste, l’atteinte touche déjà
       80% des cellules β. Pourtant, le trouble autoimmun de ces cellules débute
       déjà des années avant que le diabète ne soit manifeste

         Pour la constitution du diabète de type 1, il faut:une prédisposition immuno-
       génétique, un facteur déclenchant, ainsi qu’une réaction auto-immune dirigée
       contre les cellules β.
Introduction............................................................................................
Rappels.................................................................................................
Dosage du glucose dans les milieux biologiques……………………….
Interprétation des résultats…………………………………………………variations physiopathologiques
Conclusion.............................................................................................



                                             Interprétation des résultats                                  Diabète

                        C. Variations physiopathologiques dans le sang
                                                           1. Hyperglycémies
                                                     a. Diabète sucré :Diabète type 2
          Diabète de type II (auparavant nommé non insulinodépendant), Le
       diabète sucré de type 2, dont 85 à 90% des patients diabétiques sont
       atteints, est une maladie hétérogène

        Essentiellement insulinorésistant, soit insulinopénique, soit
       hyperinsulinique, découvert chez les sujets plus âgés et présentant le plus
       souvent une surcharge pondérale.

         Le traitement est dans un premier temps basé sur des mesures
       diététiques, puis en cas d'échec, sur la prise de normoglycémiants
       de synthèse.
Introduction............................................................................................
Rappels.................................................................................................
Dosage du glucose dans les milieux biologiques……………………….
Interprétation des résultats…………………………………………………variations physiopathologiques
Conclusion.............................................................................................



                                             Interprétation des résultats                                  Diabète

                        C. Variations physiopathologiques dans le sang
                                                         1. Hyperglycémies
                                                a. Diabète sucré :Diabète gestationnel
         Le diabète gestationnel (DG) est un trouble de la tolérance glucidique
       de gravité variable, survenant ou diagnostiqué pour la première fois
       pendant la grossesse, quel que soit le traitement nécessaire et quelle que
       soit son évolution après l'accouchement.

            Femmes à risque: surpoids, âge >40 ans.

        Diagnostic important car s'accompagne d'une augmentation de la
       morbidité périnatale.

            Refaire les tests un à deux mois après l'accouchement
Introduction............................................................................................
Rappels.................................................................................................
Dosage du glucose dans les milieux biologiques……………………….
Interprétation des résultats…………………………………………………variations physiopathologiques
Conclusion.............................................................................................



                                             Interprétation des résultats                                  Diabète

                        C. Variations physiopathologiques dans le sang
                                                         1. Hyperglycémies
                                                a. Diabète sucré : Diabète spécifiques

            Types spécifiques de diabète
                        a. Défaut génétique de la fonction des cellules β (Maturity Diabetes of the Young:
                                   MODY). Actuellement, cinq défauts différents sont connus dans le diabète de
                                   type MODY:
                        b. Défaut génétique dans l’action de l’insuline.
                        c. Maladies du pancréas exocrine .
                        d. Endocrinopathies
                        e. Induit par les médicaments.
                        f.Infections…
                        g. Formes rares de diabète immunogène (syndrome de Stiff-Man, anticorps
                                     anti-insuline-récepteurs, autres)
                        h. Autres syndromes génétiques associés au diabète (trisomie 21, syndrome de
                                     Klinefelter, syndrome de Turner, dystrophie myotonique, autres
Introduction............................................................................................
Rappels.................................................................................................
Dosage du glucose dans les milieux biologiques……………………….
Interprétation des résultats…………………………………………………variations physiopathologiques
Conclusion.............................................................................................



                                             Interprétation des résultats
                        C. Variations physiopathologiques dans le sang
                                                              1. Hyperglycémies
                                                          b. Le coma hyperosmolaire

        Le coma hyperosmolaire hyperglycémique non cétosique : il s'agit d'une
      entité clinicobiologique qui se définit par la coexistence de troubles de la
      vigilance de profondeur variable

        Signes: déshydratation massive et d'une hyperglycémie considérable
      responsable d'une hyperosmolarité, d'une glycosurie importante, sans cétose
      notable ni acidose. La glycémie peut alors dépasser 100 mmol/l et l'osmolarité
      être supérieure à 400 mosmol/l.

         Ce coma peut se développer à l'occasion d'un diabète non
      insulinodépendant, de processus pathologiques sévères et également après
      administration de médicaments tels les diurétiques, les hydantoïnes ou plus
      rarement les corticoïdes.
Introduction............................................................................................
Rappels.................................................................................................
Dosage du glucose dans les milieux biologiques……………………….
Interprétation des résultats…………………………………………………variations physiopathologiques
Conclusion.............................................................................................



                                             Interprétation des résultats
                        C. Variations physiopathologiques dans le sang
                                                                1. Hyperglycémies
                                                           c. . Autres hyperglycémies
         L'hyperglycémie peut être rencontrée lors
                         - d'affections pancréatiques (pancréatites aiguës ou
       chroniques, cancers du pancréas), ou
                         - endocriniennes (hypercorticismes, hyperthyroïdies,
       hyperaldostéronisme secondaire).
                         -Des hyperglycémies iatrogènes peuvent
       apparaître, entre autres, avec le glucagon, le diazoxide, les corticoïdes ou
       les diurétiques thiazidiques.
Introduction............................................................................................
Rappels.................................................................................................
Dosage du glucose dans les milieux biologiques……………………….
Interprétation des résultats…………………………………………………                                                                               PLAN
Conclusion.............................................................................................




                   INTRODUCTION


                             RAPPELS

              DOSAGE DU
           GLUCOSE DANS LES
                MILIEUX
             BIOLOGIQUES

                                                                                                 VALEURS USUELLES
               INTERPRETATION                                                                                                  DIABETE
                                                                                                                                SUCRE
                                                                                         VARIATIONS BIOLOGIQUES                DIABETE
                                                                                                                                SUCRE

                                                                                                VARIATIONS          HYPERGY    DIABETE
                                                                                                                     CEMIE      SUCRE
                                                                                           PHYSIOPATHOLOGIQUES

                                                                                                                                 CHEZ
                                                                                                                               L’ADULTE
                                                                                                                    HYPOGYC
                                                                                                                      EMIE       CHEZ
                                                                                                                               L’ENFANT
Introduction............................................................................................
Rappels.................................................................................................
Dosage du glucose dans les milieux biologiques……………………….
Interprétation des résultats…………………………………………………variations physiopathologiques
Conclusion.............................................................................................



                                           Interprétation des résultats
                       A. Variations physiopathologiques dans le sang
                                                                  2. Hypoglycémies
                                                                   a. Chez l’adulte
       L’hypoglycémie est définie par une glycémie à jeun à 0.6g/l
       Urgence absolue.
        Les principaux états d'hypoglycémie chez l'adulte se rencontrent :
               - Dans certaines intoxications : alcoolisme aigu, absorption de
      substances hépatotoxiques (éthylèneglycol, tétrachlorure de carbone...).

                       - Dans l'insuffisance hépatique, rénale, le choc septique

               - Dans le jeûne prolongé ou la malnutrition (déficit en substrat
      énergétique)

               - Lors de l'utilisation de médicaments dont l'action hypoglycémiante
      est recherchée dans un but thérapeutique (l'insuline, les sulfamides
      hypoglycémiants), ou d'autres pour lesquels l'hypoglycémie constitue un effet
      indésirable (salicylés, quinine, maléate de perhexilline...)
Introduction............................................................................................
Rappels.................................................................................................
Dosage du glucose dans les milieux biologiques……………………….
Interprétation des résultats…………………………………………………variations physiopathologiques
Conclusion.............................................................................................



                                             Interprétation des résultats
                         A. Variations physiopathologiques dans le sang
                                                                   2. Hypoglycémies
                                                                    a. Chez l’adulte
                 - Dans certains déficits enzymatiques héréditaires, notamment au
       niveau de la néoglucogenèse (déficit en fructose-1,6 diphosphatase, en
       phosphoénolpyruvate carboxykinase, ou en glucose- 6 phosphatase...), de
       l'oxydation des acides gras (déficit en MCAD, LCHAD, VLCAD...)

                 - Dans des dysfonctionnements hormonaux : hyperinsulinisme, ou
       déficit de sécrétion des hormones hyperglycémiantes (hypopituitarisme, déficit
       en hormone de croissance ou en glucagon, insuffisance surrénalienne)

                        - Dans les insulinomes (rare)

                - Après les repas, précocement (2-3 heures) ou tardivement (3-5
       heures) correspondant à une vidange trop rapide du glucose dans l'intestin
       responsable d'un hyperinsulinisme
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Rappels.................................................................................................
Dosage du glucose dans les milieux biologiques……………………….
Interprétation des résultats…………………………………………………variations physiopathologiques
Conclusion.............................................................................................



                                             Interprétation des résultats
                         A. Variations physiopathologiques dans le sang
                                                                   2. Hypoglycémies
                                                                    a. Chez l’enfant
       - Les hypoglycémies de l'enfant ont des étiologies propres, elles sont définies
       par des glycémies inférieures à 2,5 mmol/l et peuvent être observées sans
       ou avec cétose.

            Les principales causes des hypoglycémies hypocétosiques de l'enfant
                    - Hyperinsulinisme
                    - Anomalies de la cétogenèse
                    - Insuffisance hépatique.

           Les principales causes des hypoglycémies hypercétosiques de l'enfant
                   - Infections€
                   - Causes hormonales : déficit en cortisol par déficit en ACTH,
         hypopituitarisme, déficit en glucocorticoïdes, en hormone de croissance,
         insuffisance surrénalienne, hyperplasie congénitale des surrénales, déficit
         en glucagon€ Anomalies mitochondriales de la chaine respiratoire
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Dosage du glucose dans les milieux biologiques……………………….
Interprétation des résultats…………………………………………………variations physiopathologiques
Conclusion.............................................................................................



                                             Interprétation des résultats
                     D. Variations physiopathologiques dans les urines


         Une glycosurie est détectable en cas de dépassement du seuil de
       réabsorption tubulaire du glucose (TmG). Ainsi, lorsque la glycémie dépasse
       10 mmol/l (soit 1,8 g/l), une glycosurie apparaît.

         Le TmG peut être abaissé de manière permanente (c'est le cas du diabète
       rénal associant une glycémie normale à la présence d'une glycosurie) ou de
       manière transitoire (dans la grossesse).
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Rappels.................................................................................................
Dosage du glucose dans les milieux biologiques……………………….
Interprétation des résultats…………………………………………………variations physiopathologiques
Conclusion.............................................................................................



                                             Interprétation des résultats
                         D. Variations physiopathologiques dans le LCR


         L'hyperglycorachie est pratiquement toujours le reflet d'une
       hyperglycémie.

         L'hypoglycorachie est observée dans certaines méningites (bactériennes
       ou mycosiques), dans certaines tumeurs malignes ; elle peut être le reflet
       d'une éventuelle hypoglycémie
Introduction............................................................................................
Rappels.................................................................................................
Dosage du glucose dans les milieux biologiques……………………….
Interprétation des résultats…………………………………………………variations physiopathologiques
Conclusion.............................................................................................



                                             Interprétation des résultats
                   E. Hyperglycémie provoquée par voie orale (HGPO)
     Permet de classer trois groupes de sujets en fonction des anomalies constatées :
     -Les sujets normaux ;
     -Les sujets diabétiques ;
     -Les sujets intolérants au glucose : leur état est intermédiaire, stable ou évoluant
     vers le diabète vrai, comportant par lui seul un risque d'athérosclérose
       Indications :
       - Glycémie à jeun supérieure à la normale.
       - Glycémie à jeun normale, mais présence de facteurs de risque diabétique
       (obésité, hérédité,
       hyperlipidémies à triglycérides ou mixtes).
       -Glycémie à jeun normale, mais accompagnée d'une glycosurie
       -Contre-indications de l'HGPO
       Sujets de plus de 70 ans             Uniquement sur la glycémie à jeun).
       Antécédents de gastrectomie, de vagotomie,              Hyperglycémie
       provoquée par voie intraveineuse). [4]
Introduction............................................................................................
Rappels.................................................................................................
Dosage du glucose dans les milieux biologiques……………………….
Interprétation des résultats…………………………………………………variations physiopathologiques
Conclusion.............................................................................................



                                             Interprétation des résultats
                   E. Hyperglycémie provoquée par voie orale (HGPO)
       Déroulement de l'épreuve :
         la charge de glucose est de 75 g chez l'adulte (100 g pour la femme
       enceinte) et de 1,75 g/kg de poids corporel chez l'enfant,
         administrée en moins de 5 minutes avec 250 ml d'eau ;
         la technique de dosage utilise la glucose-oxydase ; les dosages de
       glycémie (et éventuellement de l'insuline et du C-peptide plasmatiques),
         dans la technique simplifiée, sont effectués avant la charge puis 2 heures
       après.
         L'extension de l'épreuve à 3 et 5 heures n'est plus recommandée et elle
       n'est désormais plus pratiquée.
                                                       Précautions
            Les patients doivent être strictement à jeun depuis 12 heures au moins et 16 heures au plus. Leur
          apport alimentaire et leur activité physique doivent être normaux les 3 jours qui précèdent. L'absence
                de maladie aiguë les 2 semaines précédentes, ainsi que l'arrêt depuis au moins 3 jours des
                           médicaments qui influencent la tolérance au glucose sont exigés [4]
Introduction............................................................................................
Rappels.................................................................................................
Dosage du glucose dans les milieux biologiques……………………….
Interprétation des résultats…………………………………………………
Conclusion.............................................................................................



                                                                                                 Conclusion

                  Le glucose , élément clé du maintien de l’homéostasie de l’organisme.

             Son dosage est une urgence biologique et technique, méthode de
           référence à l’Héxokinase.

             Le diagnostic de diabète est établi exclusivement à partir des données
           biologiques.

             La fiabilité des dosages du glucose dans les liquides biologiques repose
           sur le respect de rigoureuses procédures préanalytiques pour évaluer les
           états d'hypoglycémie ou d'hyperglycémie.
[ 1] A. Vassault, Glucose, hyperglycémie provoquée.
Biologie clinique [90-10-0485].2008

[2] Dictionnaire médicale Larousse.


[3] G. A. Spinas, R. Lehmann, Diabète sucré:
Diagnostic, classification et pathogenèse. Forum Med
Suisse No 20 16 mai 2001.

[4] Lehninger A.L., Nelson D.L., Cox M.M. Glycolyse et
catabolisme des hexoses. Principes de biochimie Paris:
Flammarion; 1993. (p. 400-45).
MERCI



        B.Y   AVRIL/2010

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