La sécurité au laboratoire

Cours Théorique
Troisième Année SACQA
2010-11
La Sécurité au Laboratoire
SUP’AGRO
Prof. A. Tantaoui El Araki

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Objectifs du module
• Prendre conscience de la nécessité d'intégrer le
« réflexe sécurité » dans les pratiques
quotidiennes, tant sur le plan individuel que sur le
plan collectif;
• Avoir des données sur les bonnes pratiques de
laboratoire, sur les moyens de communication;
• Acquérir un « comportement qualité » dans le
domaine de la prévention et mieux s'organiser au
laboratoire.

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Modalités
• Présentation Générale (par l’enseignant);
• Discussion encouragée;
• Exposés (par les étudiants)
- Sujets individuels (6 sujets)
- Note = contrôle
• Examen.

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Plan Général
• I- Généralités
• II- Règles générales de sécurité
- La prévention
- L’intervention
• III- Dangers spécifiques
- Dangers chimiques
- Dangers biologiques (microbiologiques)
- Radioactivité
• IV- Norme OHSAS 18001

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I- Généralités
• I.1- Introduction
• I.2- Définitions

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I.1- Introduction
• Le travail en laboratoire requiert:
– Des opérations et des montages délicats;
– La manipulation de produits dangereux
(toxiques, inflammables, explosifs…).
• L'exécution de ces travaux peut être à
l'origine d'accidents ou d'intoxications
graves.

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I.1- Introduction (suite)
Le personnel de laboratoire devrait:
– Connaître et appliquer rigoureusement les
règlements de sécurité;
– Etre au courant des implications et des risques
associés à la manipulation;
– Etre capable d'intervenir efficacement en cas
d'accident.

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Toute personne qui travaille dans un
laboratoire, qui ne tient pas compte des
règles de sécurité:
- court un risque très élevé
- dont les conséquences peuvent être
catastrophiques pour elle-même et ses
collègues
- sa responsabilité est très engagée.

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• La sécurité au laboratoire n'est pas uniquement
une question de moyens.
• Beaucoup de problèmes peuvent se résoudre de
façon peu coûteuse par:
- l'acquisition des bonnes pratiques de travail;
- une formation bonne connaissance de l'outil
de travail.
• Penser « sécurité » c'est réfléchir avant d'agir =
faire preuve de bon sens

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I.2- Définitions
• Laboratoire: local pourvu d’installations et
d’équipements nécessaires à des
manipulations et des expériences dans le
cadre de:
- recherches scientifiques;
- d’analyses médicales ou de matériaux
divers (aliments);
- de tests techniques;
- d’enseignement scientifique et technique.

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I.2- Définitions (suite)
• Sécurité : absence de danger, confiance et
tranquillité résultant de cette absence de
danger.
Synonymes (linguistiques): fiabilité,
sérénité, sûreté, tranquillité.
En laboratoire, ne pas confondre sécurité et
sûreté

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II- Règles générales de sécurité
• II.1- La prévention
• II.2- L’intervention

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II.1- La prévention
C’est la première démarche
élémentaire
de sécurité.

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I.1- La prévention (suite)
Prévenir les accidents, c'est, d’abord :
- avoir une bonne connaissance du travail à
effectuer;
- respecter l'affichage de sécurité;
- avoir un bon comportement au laboratoire;
- assurer une protection personnelle efficace;
- étiqueter, entreposer et éliminer
correctement les produits.

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II.1.1- Connaissance du travail à
effectuer
Avant de commencer un travail, il faut
rechercher le maximum d'informations sur :
- les produits utilisés;
- le matériel employé;
- les techniques adoptées;
- les réactions chimiques (ou autres
transformations éventuelles) mises en
œuvre.

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II.1.2- Affichage de sécurité
• Chacun doit connaître l'emplacement et
le mode de fonctionnement:
- des extincteurs;
- du disjoncteur général;
- des sorties d'urgence;
- des dispositifs d'alarmes (si existants).

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II.1.2- Affichage de sécurité (suite)
Il est aussi essentiel de connaître
l'emplacement et le mode de
fonctionnement :
- de la douche d'urgence;
- des bains oculaires;
- de la couverture ignifugée;
- de la trousse de premiers soins.

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II.1.3- Protection personnelle
• Protection oculaire
Porter des lunettes de sécurité en cas de
nécessité.
Les verres de contact sont à éviter : des
vapeurs organiques ou corrosives peuvent
les endommager de façon irréversible ou
s'infiltrer sous la lentille..

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II.1.3- Protection personnelle (suite)
• Blouse
La blouse doit être :
- en tissu de COTON résistant;
- équipée de boutons pression de préférence,
ce qui permet de l’enlever rapidement si
nécessaire ;
- assez longue pour protéger les jambes.

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• Chaussures:
Il est préférable de porter des
chaussures qui
recouvrent entièrement les pieds

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• Gants
Le port de gants en latex peut être recommandé ou
indispensable pour certaines manipulations :
- Celles de produits corrosifs ;
- Celles de produits très toxiques par voie cutanée.
NB: Le port des gants est strictement interdit pour les
manipulations nécessitant l’utilisation:
- d’un bec Bünsen,
- d’une plaque chauffante ou
- d’un bain d’huile.

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• Remarque:
Certaines activités exigent une protection
personnelle renforcée
Exemple: combinaisons à pression positive des
laboratoires de niveau maximum de
confinement.

23
• Attention: intégrer les diapos suivantes de
24 à 56 dans la partie « protection
personnelle »

24
Introduction
Les travaux en laboratoire exposent les personnes qui y sont
employées à une vaste gamme de risques et de dangers.
Vu la nature complexe et extrêmement variable de ces travaux
il est nécessaire de se protéger .

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Définition de l’Equipement de protection
individuel
L’appellation " EPI " s'applique à tout dispositif ou moyen
destiné à être porté ou tenu par une personne en vue de la
protéger contre un ou plusieurs risques susceptibles de
menacer sa santé ainsi que sa sécurité.
Les directives EPI touchent les équipements de protection à
usage professionnel, sportif ou de loisirs.

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1-Protection de la tête
Le couvre-tête évite la contamination des cheveux par des
aérosols

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2-Protection du corps
• Vêtements contre les risques mécaniques,
chimiques, microbiologiques, d’électricité
statique, de chaleur, de feu, de coupure, de
froid, de rayonnement ionisant et de la
contamination radioactive.

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Blouse en coton
Blouse en coton et non en polyester
Equipée de boutons pression de préférence

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Blouse impérmeable
Blouse de type chirurgical réutilisable
 une ouverture à l’arrière et s’attache à l’aide
des lacets.
Imperméable pour protéger l’utilisateur en
cas de déversement.

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Blouse résistante aux produits
chimiques

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Tenue contre les agents infectieux
Ce type de vêtements empêche les agents infectieux d’atteindre la peau et prévient également d
leur propagation vers d’autre personnes

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Vêtements anti acide et anti- feu
combinaison de protection anti-feu, anti-acide, antistatique. Convient pour tous types de
métiers où il faut manipuler des produits chimiques liquides. La combinaison possède des
poches, un col à fermeture par pression.

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Tablier de protection contre les
rayons X

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Scaphandre de protection biologique

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• Le scaphandre est lié à des prises à air dont le
renouvellement est totalement indépendant de
l'atmosphère du laboratoire.

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Laboratoire P4
La dénomination P4 fait référence à des micro-
organismes pathogènes faisant encourir des risques
mortels au personnel qui les manipule.
Le laboratoire P4 répond au double impératif de
préserver les chercheurs contre tous les risques
d'infections et d'assurer une protection totale de
l'environnement.

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Scaphandre de protection chimique

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1 -Protection des mains
• Gants contre les risques mécaniques,
chimiques, microbiologiques, d'électricité
statique, de chaleur et de feu, de coupure, de
froid, de rayonnement ionisant et la
contamination radioactive.

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Gants en latex
Le port de gants en latex peut être recommandé ou indispensable selon les
manipulations

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Gants isolants
Portés lorsqu’une personne manipule des tiges et boites de congélation dans un
congélateur à -80°C ou dans l’azote liquide.

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Gants de protection en latex et nitrile
Le personnel dans le NC3 doit enfiler une paire de gants protecteurs en latex et nitrile pour
éviter la contamination des mains par du matériel infectieux

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2-Protection des pieds
• définit les chaussures, bottes et surbottes
contre les chocs, l’écrasement, la
perforation, le glissement et les projections
de métal en fusion.

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Chaussures de sécurité
antidérapanteRôle: protection des sols glissants avec de
l'huile, l'eau ou autres liquides

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Protège chaussures
Exemple: Le personnel entrant dans le NC3
doit obligatoirement mettre des protèges
chaussures avant d’y pénétrer

45
Surbottes résistantes aux produits chimiques
Surbottes étanches aux particules. Protection contre les acides organiques et les bases,
Elastique en haut et lacets de serrage.
Résistantes aux produits chimiques
Semelles antidérapantes

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1-Protection du visage
• projections de produits
chimiques
L ’écran facial consiste en un écran protecteur de plastique protégeant le visage
entier

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2-Protection oculaire( des yeux)Les Lunettes de sécurité
• Il convient de se protéger les yeux en portant des
lunettes de sécurité dans les laboratoires, les salles
de distillation où des risques de projection ou
d’explosion sont possibles pour éviter les
projections oculaires.

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3-Protection de l'ouïe
• Equipements visant à atténuer les effets du bruit ambiant sur
l'être humain, limitant ainsi les risques de lésions de l'audition.
• Types : les bouchons d'oreilles, les casques antibruit, les
protections équipées (standard ou sur mesure), adaptées à
l'industrie grâce à des filtres étudiés.

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Bouchon anti-bruit
Bouchon anti-bruit très compact et fabriqué en silicone souple ce qui améliore le confort de
port. se place entièrement dans la conque de l’oreille.

51
Protection des voies respiratoires
Les manipulations présentant des risques
d’exposition par inhalation d'aérosols
provenant d’échantillons potentiellement
contaminés par des agents biologiques, ou de
gaz ou vapeurs chimiques dangereuses,
entraînant des pathologies respiratoires doivent
s'effectuer prioritairement sous PSM.

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Masque facial
Pour certaines manipulations avec du matériel infectieux concentré et /ou pouvant
générer beaucoup d’aérosols Les manipulations ou le port du masque est requis
sont les purifications virales sur gradient
Nécessaire dans le cas d’un déversement

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Masque respiratoire filtrant
Utilisé en combinaison avec une cagoule pour l’évacuation d’urgence en cas d’incendie ou de
catastrophe chimique.

54
Masque avec filtre HEPA
Porte 2 filtres biologiques, Utilisés en cas de déversement important du matériel infectieux
à l’intérieur du NC3

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Conclusion
• Le choix des vêtements doit reposer sur une
évaluation précise des risques prenant en
compte tous les paramètres pertinents.
• Critères: la nature du produit chimique ,sa
concentration ,sa température ,la durée et le
mode d’exposition ,les parties du corps à
protéger,les conditions climatiques, l’intensité
du travail….

56
Tous pour le respect des
Règles de sécurité

57
Combinaisons à
pression positive

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II.1.4- Étiquetage
• Les flacons et récipients contenant des
produits chimiques doivent être clairement
étiquetés pour faciliter leur identification.
• Pour les produits préparés que l'on souhaite
conserver, indiquer:
- la date de préparation;
- le nom du produit, la concentration, etc.;
- le nom du préparateur.

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II.1.5- Protection de l’environ-
nement et élimination des déchets
- Ne pas jeter la verrerie cassée dans la poubelle.
- L'élimination des produits chimiques doit être
soigneusement planifiée.
- De petites quantités de substances solubles dans
l'eau et peu toxiques peuvent être éliminées par
l'égout de l'évier, en faisant circuler l'eau.
- Pour recueillir les autres types de déchets
chimiques, on doit disposer de récipients résistants
(plastique ou métal) pour les entreposer avant de les
éliminer.

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II.1.5- Protection de l’environnement et élimination
des déchets
• Il est souvent possible de neutraliser un
produit toxique par une transformation
appropriée (traitement chimique) pour
pouvoir l'éliminer par l'égout de l'évier:
• 1. solution de pH compris entre 0 et 6: par
solution de soude .
• 2. solution de pH compris entre 8 et 14: par
solution d’acide chlorhydrique.

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II.1.6- Travail solitaire
• Ne jamais travailler seul au laboratoire;
• Les plaques électriques ou chauffe-ballons
(enveloppes chauffantes) et les réfrigérants
ne doivent pas être laissés en marche en
l’absence du personnel du laboratoire.

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II.1.7- Comportement au laboratoire
• Il faut être attentif et éviter tout
comportement irréfléchi ou précipité;
• Il faut avoir une connaissance suffisante
du travail réalisé par ses voisins et être
conscient des dangers qu'il peut présenter

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II.1.7- Comportement au laboratoire (suite)
• Les accidents de laboratoire sont fréquemment
provoqués par l'exécution trop rapide des
opérations
• Le laborantin doit donc :
- adopter une approche méthodique, prudente et
soignée;
- se concentrer sur ce qu'il est en train de faire;
- ne pas se laisser distraire;
- ne jamais croire que les accidents n'arrivent qu'aux
autres.

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• Eviter de courir, de se presser inutilement et de se
bousculer;
• Ne jamais préparer, consommer ou conserver la
nourriture et les boissons dans le laboratoire ;
• Ne jamais fumer au laboratoire;
• Garder les allées libres: ne pas laisser traîner des
objets par terre (morceaux de verre, bouchons)
• On doit assécher immédiatement les endroits
mouillés.

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 Pipeter à la bouche tout produit chimique ou culture
microbienne; utiliser par exemple les propipettes;
 déverser à l’évier des produits biologiques ou
radioactifs ou chimiques inflammables, toxiques ou
explosifs;
 manipuler un produit inflammable à proximité
d’une flamme ou d’un point chaud;
 manipuler sans lunettes de protection, sans blouse
et sans gants adaptés (selon les produits : latex,
nitrile, vinyle, etc.).
Toujours éviter de:

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II.2- L’intervention
Malgré le respect des mesures préventives, il
peut arriver que des produits soient
renversés sur le sol ou projetés sur des
personnes. Les risques de feu, d'explosion
ou d'intoxication peuvent alors augmenter,
selon la nature des produits.
Quelle marche à suivre alors?

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II.2.1- Renversement
• Si contamination du sol ou de la table de travail
par un produit peu toxique ou peu volatil: nettoyer
avec du papier absorbant ;
• pour les acides, neutraliser préalablement avec
une solution d'hydrogénocarbonate de sodium.
• N’oublier pas le port des gants de protection
pendant le nettoyage ;
• L'espace affecté doit être rincé à l'eau, puis séché.
A- Cas de faible gravité

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II.2.1- Renversement (suite)
• Lorsque la substance répandue est volatile,
inflammable ou toxique et que la quantité
renversée est importante, on doit:
- Eteindre les brûleurs;
- Couper le courant des appareils électriques;
- Appeler du personnel compétent pour le
nettoyage.
B- Cas de gravité élevée

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II.2.2- Projection sur une personne
• En cas de contact de produits chimiques
avec une grande partie du corps: utiliser
immédiatement la douche de sécurité et
retirer aussitôt que possible les vêtements
contaminés.
• Rincer pendant au moins 15 minutes à l’eau
froide
• Consulter un médecin.

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II.2.2- Projection sur une personne (suite)
• En cas de projections dans les yeux:
- laver immédiatement l'œil avec de l'eau
pendant au moins 15 minutes à l'aide du
bain oculaire ou d'un dispositif conçu pour
cet usage;
- Pour le lavage, on doit tenir l’œil ouvert, le
faire rouler constamment en rinçant
abondamment la muqueuse des paupières;
- Toujours œil touché en bas.

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II.2.3- Marche à suivre en cas
d'accident
• En cas d'accident grave penser à protéger la
victime;
• S'il persiste un risque (électrocution,
incendie, asphyxie), tenter d'éliminer le
danger (interruption du courant électrique,
utilisation de l'extincteur);
• Consulter un médecin.

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III- Dangers spécifiques
III.1- Dangers des produits chimiques
III.2- Dangers biologiques (microbiologiques)
III.3- Radioactivité

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III.1- Dangers des produits
chimiques
• III.1.1- Feu
• III.1.2- Explosion et réactivité
• III.1.3- Intoxication, brûlure, irritation
• III.1.4- Tableau des dangers chimiques
• III.1.5- Identification des risques

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III.1.1- Feu
Certains produits chimiques présentent un risque
d'incendie à cause de leur inflammabilité et de leur
volatilité;
Eviter toute proximité du feu ou de matériaux à haute
température (plaques chauffantes);
La consigne de ne pas fumer doit être strictement
observée

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III.1.2- Explosion et réactivité
Certaines substances peuvent exploser en raison de
leur extrême sensibilité ou réagir brutalement avec
d'autres substances;
Les garder loin du feu et des hautes températures;
Eviter les chocs;
Eviter de fumer..

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III.1.3- Intoxication, brûlure, irritation

77
III.1.3- Intoxication, brûlure, irritation(suite)
Certains produits chimiques présentent un risque
d'intoxication, de brûlure ou d'irritation, soit par action
immédiate, soit après une exposition prolongée ou
répétée.
On parle de:
Toxicité aiguë
Toxicité chronique

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A- Toxicité aiguë, due à l’exposition soudaine ou à
court terme (ex. : manipulation incorrecte)
Exemples:
 Inhalation de vapeurs acides en concentrations
élevées: graves brûlures à la bouche et aux voies
respiratoires;
 Contact de la peau avec des quantités
importantes de certains solvants organiques:
étourdissements, nausées;
 Inhalation de poussières: irritation des voies
respiratoires, assèchement de la gorge, toux.

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B- Toxicité chronique, due à une exposition répétée
sur une longue période.
Exemples :
 Inhalation de certaines vapeurs acides en
concentrations qui ne causent pas de toxicité aiguë,
sur une longue période : perte de l'émail dentaire,
d’où importantes caries;
 Inhalation et absorption par la peau de certains
solvants organiques en concentrations qui ne
causent pas de toxicité aiguë, sur une longue
période: dommages aux tissus nerveux.

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III.1.4- Tableau des dangers
chimiques
Énumère, pour chaque type de danger:
- Les règles de sécurité à respecter pour
l’éviter;
- Les gestes de première urgence en cas
d’accident.
À afficher dans un endroit accessible
Voir tableau des
dangers chimiques

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III.1.5- Identification des risques
• III.1.5.1- Fiche de données de sécurité
(FDS)
• III.1.5.2- Pictogrammes
• III.1.5.3- Etiquetage codé:
- Lettre R + chiffre (type de risque)
- Lettre S + chiffre (conseil de prudence)

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III.1.5.1- Fiche de données de
sécurité (FDS)
o Vise à renseigner les utilisateurs d’une substance ou
d’une préparation sur:
- ses données physico-chimiques, toxicologiques et
écotoxicologiques;
- ses données de sécurité ,
o Pour un usage correct de la substance;
o Pour prendre mesures nécessaires (protection de la
santé et de l'environnement, sécurité au travail).

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III.1.5.2- Pictogrammes
• Les pictogrammes sont des symboles
conventionnels qui:
- signifient un risque déterminé;
- appellent à des précautions particulières
• Leur signification doit être bien connue des
personnes qui travaillent dans les
laboratoires concernés
Voir tableau des
pictogrammes

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III.1.5.3- Etiquetage codé
La Communauté Européenne a prescrit un
système d'étiquetage codé comportant:
- la lettre R suivie d'un indice numérique
correspondant à un risque donné;
- la lettre S suivie d’un indice numérique se
rapportant aux conseils de prudence
correspondants
Voir tableaux des phrases
R & des Phrases S

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III.2- Dangers biologiques
• Introduction
• III.2.1- Bonnes Pratiques Microbiologiques
• III.2.2- Différents niveaux de risques
• III.2.3- ESB (Enceintes de Sécurité
Biologique)
• III.2.4- Identification du danger biologique

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Introduction
• La manipulation de microbes dangereux ou de
prélèvements pouvant en contenir expose à des
risques très importants (sécurité biologique);
• La sûreté biologique concerne la criminalité liée
aux produits biologiques.
Exemple: détournement de microorganismes
pathogènes ou de toxines microbiennes pour les
utiliser comme armes biologiques (crime isolé ou
acte terroriste)
Mesures spécifiques draconiennes

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III.2.1- Bonnes Pratiques
Microbiologiques (BPM)
• III.2.1.1- Généralités
• III.2.1.2- Mesures microbiologiques
• III.2.1.3- Mesures de protection
• III.2.1.3- Mesures d’urgence

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III.2.1.1- Généralités
• En général, les objectifs des BPM sont :
- La prévention de la contamination d’employés
de laboratoire et de l’environnement;
- La prévention de la contamination des
échantillons et des moyens de travail (matériel
stérile, milieux de culture)

89
• Les BPM sont un code de pratiques de base
qui devraient s’appliquer à tous les types de
travaux portant sur des micro-organismes,
quel que soit leur niveau de confinement
(niveau de risque; voir § III.2.2).
III.2.1.1- Généralités (suite)

90
III.2.1.1- Généralités (suite)
• Pour entreprendre une manipulation portant
sur des micro-organismes, le personnel doit:
- être conscient des dangers potentiels;
- avoir une bonne connaissance des
caractéristiques des agents manipulés;
- être formé et compétent dans les pratiques
et les techniques requises pour manipuler en
toute sécurité.

91
III.2.1.2- Mesures microbiologiques
• Se laver les mains avant et après les
expériences ou la manipulation
d’organismes et à tout moment si un cas de
contamination est soupçonné;
• Employer les précautions universelles lors
de l’utilisation d’agents pathogènes à
transmission hématogène.

92
III.2.1.2- Mesures microbiologiques (suite)
• Désinfecter :
- Les surfaces de travail avec un désinfectant
adéquat avant et après toute manipulation
d’organismes;
- Les matériaux qui ont été en contact avec
l’organisme.

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• Nettoyer les déversements immédiatement selon
les protocoles établis et désinfecter la zone
correctement.
• Garder le dessus de table libre.
• Réduire les déplacements et les mouvements non
essentiels autour de la zone de travail (courants
d’air qui transportent des contaminants dans la
zone de travail).

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• Tout travail avec une matière infectieuse devrait
être fait dans une zone spécifique, et la matière ne
devrait pas être transportée dans le laboratoire ou à
l’extérieur de celui-ci à moins d’être dans un
contenant hermétiquement fermé;
• Réduire la production d’aérosols; si la production
d’aérosols est inévitable, les activités devraient
être effectuées dans une enceinte de sécurité
biologique (ESB).

95
• Utiliser une technique aseptique appropriée
pour le transfert et la manipulation des
micro-organismes et des instruments;
• Garder les objets stériles et non stériles
séparément;
• Réduire l’exposition à l’air extérieur (c.-à-
d., garder les contenants stériles ouverts le
moins longtemps possible).

96
– Éviter le contact avec des surfaces et des articles
non stériles (c.-à-d., ne jamais mettre les
couvercles/bouchons sur une surface de travail,
poser les couvercles dans une position
d’ouverture vers le bas).
– Tenir les contenants ouverts en angle dans la
mesure du possible pour empêcher les
contaminants de tomber à l’intérieur.
– Disposer convenablement des déchets selon leur
type (verre et plastique, déchets biomédicaux,
chimiques ou radioactifs).

97
III.2.1.3- Mesures de protection
• Porter de l’équipement de protection
individuelle (chaussures fermées, protection
pour les yeux, blouse de laboratoire, gants).
• Les cheveux longs doivent être attachés en
arrière.
• Utiliser des dispositifs de pipetage
appropriés.

98
III.2.1.3- Mesures de protection (suite)
• Il est interdit de boire, de manger, de mâcher de la
gomme, d’appliquer des produits de beauté ou un
baume à lèvres et de manipuler des verres de
contact au laboratoire;
• Éviter de toucher le visage, les yeux et les autres
voies d’exposition directes;
• Toute plaie ouverte doit être évaluée, et la
protection appropriée doit être portée pour éviter
la contamination accidentelle ou le travail doit être
repoussé jusqu’à la guérison de la plaie.

99
III.2.1.4- Mesures d’urgence
• Signaler tous les incidents/accidents
immédiatement.
• Obtenir des soins médicaux immédiatement
si nécessaire (c.-à-d., en cas d’exposition
accidentelle).

100
III.2.1.4- Mesures d’urgence (suite)
• Tout le personnel du laboratoire doit savoir
où se trouve l’équipement d’urgence
(stations de lavage pour les yeux, trousses
de premiers soins, extincteurs, etc.) et savoir
comment l’utiliser.
• Suivre les protocoles établis en cas
d’urgence (c.-à-d., déversement, incendie,
panne d’électricité, etc.).

101
• III.2.2.1- Classification des
microorganismes par groupes de risques
• III.2.2.2- Classification des laboratoires
• III.2.2.3- Rapport groupes de risque / niveau
de sécurité biologique
• III.2.2.4- Normes applicables aux différents
niveaux de risques
III.2.2- Différents niveaux de risques

102
III.2.2.1- Classification des
microorganismes par groupes de
risques
• Groupe de risque 1 (risque faible ou nul
pour les individus ou la collectivité):
microorganisme qui, selon toute probabilité,
ne peut causer de maladie humaine ou
animale.

103
III.2.2.1- Classification des microorganismes par
groupes de risques (suite)
• Groupe de risque 2 (risque modéré pour les
individus, faible pour la collectivité):
- microorganisme pathogène capable de provoquer
une maladie humaine ou animale, mais
- ne présente vraisemblablement pas un sérieux
danger pour le personnel de laboratoire, la
collectivité, le bétail ou l’environnement;
- une exposition en laboratoire est susceptible
d’entrainer une infection grave, mais qui peut être
traitée ou prévenue efficacement;
- le risque de propagation de l’infection est limité.

104
groupes de risques (suite)
• Groupe de risque 3 (risque important pour
les individus, faible pour la collectivité):
- microorganisme pathogène qui cause
habituellement une grave maladie humaine
ou animale, mais
- qui ne se transmet généralement pas d’un
individu à l’autre;
- Il existe un traitement et des mesures
préventives efficaces.

105
groupes de risques
• Groupe de risque 4 (risque important pour les
individus comme pour la collectivité):
- microorganisme pathogène qui cause
habituellement une grave maladie humaine ou
animale;
- peut se transmettre facilement d’un individu à
l’autre, soit directement soit indirectement;
- Il n’existe généralement ni traitement ni mesures
préventives efficaces.

106
III.2.2.2- Classification des
laboratoires
• Laboratoire de base-sécurité biologique
niveau 1
• Laboratoire de base-sécurité biologique
niveau 2
• Laboratoire de confinement-sécurité
biologique niveau 3
• Laboratoire de confinement à haute sécurité-
sécurité biologique niveau 4

107
III.2.2.3- Rapport groupe de
risque/niveau de sécurité biologique
Groupe de
risque
Niveau de
sécurité
Type de labo Pratiques
de labo
Appareillage
de sécurité
1 de base-niv.
sécu. biol. 1
Enseignement
de base
BTM Aucun,
paillasse sans
protection
2 de base-niv.
sécu. biol. 2
Service de
santé
primaire, labo
d’analyses ou
de recherche
BTM,
vêtements
protecteurs,
logo de
risque
biologique
Paillasse sans
protection,
ESB contre
risques
d’aérosols
BTM: Bonnes Techniques Microbiologiques ESB: Enceinte de Sécurité Biologique

108
III.2.2.3- Rapport groupe de risque/niveau de
sécurité biologique (suite)
Groupe
de
risque
Niveau
de
sécurité
Type de
labo
Pratiques de labo Appareillage de
sécurité
3 de conf.-
niv. sécu.
biol. 3
Diagnostic
spécialisé,
recherche
cf niv. 2 + vêtements
spéciaux, accès
réglementé et flux d’air
dirigé
ESB ou autres
moyens de confin.
primaire pour
l’ensemble des
activités
4 de conf.
haute
sécu-niv.
sécu. biol.
4
Manipulat.
de germes
pathogènes
dangereux
cf niv. 3 + sas à air à
l’entrée, douche à la
sortie et élimination
spécifique des déchets
ESB classe III ou
combinaisons
pressurisées utilisées
avec une ESB classe
II, autoclave à 2
portes formant sas
mural, air filtré
ESB: Enceinte de Sécurité Biologique

109
III.2.2.4- Normes applicables aux
différents niveaux de sécurité
Niveau de sécurité
1 2 3 4
Isolement du laboratoire 1 non non oui oui
Salle étanche pour décontamination non non oui oui
Ventilation: circulation vers l’intérieur non S oui oui
Système de ventilation régulé non S oui oui
Filtre HEPA sur la sortie d’air non non O/N2 oui
S: souhaitable
O/N: oui ou non
1: isolement environnemental et fonctionnel par rapport aux points de passage
2: selon la situation de la sortie d’air

110
III.2.2.4- Normes applicables aux différents niveaux
de sécurité (suite)
1 2 3 4
Double porte d’entrée non non oui oui
Sas à air non non non oui
Sas à air avec douche non non non oui
Vestibule non non oui -
Vestibule avec douche non non O/N3 non
3: selon les agents microbiens qui sont manipulés

111
III.2.2.4- Normes applicables aux différents niveaux
de sécurité (suite)
1 2 3 4
Traitement des effluents non non O/N3 oui
Autoclave sur place non S oui oui
Autoclave dans une salle du laboratoire non non S oui
Autoclave à 2 portes formant sas non non S oui
Enceinte de sécurité biologique (ESB) non S oui oui
Système de surveillance de la sécurité du
personnel4
non non S oui
4: exemples: fenêtre, télévision en circuit fermé, émetteur-récepteur.

112
III.2.3- ESB (Enceinte de Sécurité
Biologique)
• Les ESB utilisées en association avec de
bonnes pratiques de laboratoire sont une
méthode de confinement primaire efficace,
adaptée à la manipulation d'agents pathogènes.
• Classes d’ESB :
- Classe I
- Classe II, types A1, A2, B1 & B2
- Classe III

113
III.2.3.1- ESB classe I
• Air aspiré vers l'intérieur de l'enceinte sans
être recyclé, et renvoyé dans l'atmosphère
après être passé par un filtre HEPA.
• Les ESB de classe I protègent le
manipulateur contre la contamination (le
produit), mais non la matière manipulée
dans l'enceinte.

114
III.2.3.1- ESB classe I
ESB-Classe I (Le port de gant est optionnel)

115
Filtre HEPA (High Efficiency Particulate Air)
- Filtres pour
stérilisation
de l’air
- Matériau :
fibres de
verre (0,5 à
2 µm)
- Taux de
rétention 85
(H10) à
99,995%
(H14)
cadrematériau
filtrant
séparateur
aluminium

116
III.2.3.1- ESB classe I (suite)
ESB-Classe I (complète avec l'assemblage interne d'un moteur/souffleuse.
L'air est évacué dans l'atmosphère après être passé par un filtre HEPA. Le
port de gant est optionnel)

117
III.2.3.2- ESB classe II
• Les ESB de classe II protègent le manipulateur, le
produit et l'environnement;
• Adaptées au travail avec des microorganismes
manipulés dans des laboratoires de niveaux 2, 3
et 4;
• 4 types d'enceintes de classe II (A1, A2, B1 et
B2), fonction de leur construction, de la vitesse et
de la direction des flux d'air ainsi que des
systèmes d'évacuation d'air.

118
III.2.3.2- ESB classe II (suite)
ESB-Classe II, Type A1 (L'air de la pièce peut être recyclé ou évacué à
l'extérieur du bâtiment par un raccordement "à bague".)

119
ESB-Classe II, Type A2 (L'air de la pièce peut être recyclé ou évacué à
l'extérieur du bâtiment par un raccordement "à bague".)

120
ESB-Classe II, Type B1
(Conduit réservé rigide.)

121
ESB-Classe II, Type B2 (Conduit réservé rigide.)

122
III.2.3.3- ESB classe III
• Les ESB de classe III sont totalement fermées et étanches
aux gaz. L'arrivée et l'évacuation d'air passent par des
filtres HEPA;
• Travail au moyen de longs gants fermés et fixés au
panneau de l'enceinte;
• L'enceinte est maintenue en dépression à au moins 120 Pa
(0,5 pouce colonne d'eau), et la ventilation se fait par un
système réservé d'évacuation vers l'extérieur;
• Protection de l’opérateur et du produit pour manipuler des
agents pathogènes de groupe de risque 4;
• Remplacent les combinaisons à pression positive des
laboratoires de niveau maximum de confinement.

123
III.2.3.3- ESB classe III (suite)
ESB-Classe III (Conduit réservé rigide.)

125
III.2.4- Identification du danger
biologique
Pictogramme signalant l'ensemble des risques biologiques

126
III.2.4- Identification du danger biologique (suite)
• Ce pictogramme doit être présent :
- à l'entrée d'un laboratoire de microbiologie ou de
biologie;
- sur les conteneurs destinés à recevoir les déchets
(boîtes de Petri en plastique, pipettes Pasteur, tubes à
hémolyse, etc.) ou des produits biologiques
(prélèvements, sang, etc.).
• Il signifie la contamination probable par un agent
biologique de nature connue ou non (bactéries,
protozoaires, virus, prions, etc.).

127
III.2.4- Identification du danger biologique (suite)
• À la vue de ce symbole, respecter les règles
d'asepsie, se laver les mains à l'eau et au savon
après les manipulations;
• En cas d'accident (déversement sur la paillasse,
coupure avec un matériel contaminé, etc.) laver et
désinfecter la plaie et/ou le plan de travail;
• Protéger les plaies par un pansement et des gants
en latex ou en vinyle;
• Tenir le carnet de vaccination à jour.

128
III.3- Radioactivité
• Émission de radiations dangereuses dans:
- Cabinets de radiologie médicale;
- Centrales nucléaires;
- Laboratoires de recherche sur les substances
radioactives (applications agricoles, agro-
alimentaires, médicales, énergétiques, etc.)
- Etc.

129
III.3- Radioactivité (suite)
• Locaux spécialement conçus;
• Règles de sécurité strictes;
• Personnel formé aux règles spécifiques de
sécurité;
• Suivi rigoureux de la radioactivité reçue par
les membres du personnel

130
Stylo dosimètre:
lecture instantanée
Badge dosimètre
photographique
Mesure de la
radioactivité reçue
par le personnel

131
Pictogramme identifiant les risques liés à
la radioactivité

132
• Pictogramme présent dans tous les centres de
radiologie ainsi que chez les médecins possédant
un équipement de radiologie. Il doit être visible à
l'entrée de chaque pièce possédant un équipement
dont le rayonnement présente un danger, que ce
soit pour une exposition à court ou à long terme.

133
IV- Norme OHSAS 18001
• IV.1- Introduction
• IV.2- Exigences générales
• IV.3- Politique SST (Santé & Sécurité au Travail)
• IV.4- Planification
• IV.5- Mise en œuvre et fonctionnement
• IV.6- Vérification
• IV.7- Revue de direction

134
IV.1- Introduction
• Référentiel « Occupational Health and
Safety Assessment Series » 18001, v. 2007:
système de management (SM) de la santé et
de la sécurité au travail (SST);
• Norme BS (British Standards); mais
appliquée à l’échelle mondiale;
• Certification obtenue si exigences de la
norme satisfaites.

135
IV.2- Exigences générales
• Établir, documenter, mettre en œuvre, tenir
à jour et améliorer le SM de la SST
conformément aux exigences de l’OHSAS;
• Déterminer la manière dont on satisfera
pleinement ces exigences;
• Établir et documenter le champ
d’application du SM de la SST

136
IV.3- Politique SST
• Définir la politique SST, qui doit:
- Être appropriée (nature & étendue des risques)
- Inclure un engagement envers la prévention des
préjudices personnels et l’amélioration continue
- Inclure un engagement à se conformer au moins
aux exigences légales
- Fournir un cadre visant à déterminer et à revoir
les objectifs de SST

137
IV.3- Politique SST (suite)
• La politique SST doit aussi être:
- Documentée, mise en œuvre et tenue à jour
- Diffusée (personnes informées de leurs
obligations individuelles)
- Mise à la disposition de toutes les parties
intéressées
- Revue régulièrement (maintenir pertinence
et caractère approprié à l’organisme)

138
IV.4- Planification
• IV.4.1- Identification des dangers et évaluation
des risques et mesures de contrôle
• IV.4.2- Exigences légales et autres
• IV.4.3- Objectifs et programmes

139
IV.4.1- Identification des dangers et
évaluation des risques et mesures de
contrôle
• Établir, mettre en œuvre et tenir à jour des
procédures pour:
- Identifier les dangers et évaluer les risques;
- Mettre en œuvre les mesures de contrôle
nécessaires

140
IV.4.1.1-Procédures d’identification des
dangers et d’évaluation des risques
• Doivent prendre en compte:
- Les activités (de routine et ponctuelles);
- Les activités de toutes personnes concernées
(même les visiteurs);
- Les facteurs humains (compétences,
comportements, etc.);
- Les dangers d’origine externe au lieu de
travail, mais pouvant nuire à la santé et la
sécurité au sein du lieu de travail

141
IV.4.1.1- Procédures d’identification des dangers et
d’évaluation des risques (suite)
- Les dangers créés au voisinage du lieu de
travail par des activités professionnelles sous
le contrôle de l’organisme;
- Les infrastructures, équipements et matériaux;
- Les modifications ou propositions de
modifications apportées à l’organisme, ses
activités, matériaux, etc.

142
IV.4.1.1- Procédures d’identification des dangers et
d’évaluation des risques (suite)
- Les modifications apportées au SM de SST
(même temporaires);
- Toute obligation légale applicable se
rapportant à l’évaluation des risques et à la
mise en œuvre des contrôles nécessaires;
- La conception d’espaces de travail, processus,
installations, équipement, procédures
d’exploitation et organisation du travail

143
IV.4.1.2- Mesures de contrôle
• Les mesures de contrôle découlent des évaluations
faites
• Veiller à réduire les risques selon la hiérarchie suivante:
- élimination;
- substitution;
- contrôles d’hygiène;
- signalisation/avertissements et/ou contrôles
administratifs
- équipement de protection individuelle

144
IV.4.2- Exigences légales et autres
• Identifier et accéder aux exigences légales et
autres en matière de SST;
• Les prendre en compte dans le SM de SST;
• Tenir à jour ces informations;
• Les communiquer au personnel et aux autres
parties pertinentes;

145
IV.4.3- Objectifs et programmes
• Caractéristiques d’un objectif:
T
R
A
S
M
Simple, Spécifique
Mesurable
Accord (choisi en …)
Réaliste
Temps (défini
dans le …)

146
IV.4.3- Objectifs et programmes (suite)
• L’organisme doit
- Désigner les responsables et autorités chargés
d’atteindre les objectifs aux niveaux et
fonctions pertinentes du laboratoire;
- Fixer les moyens et le calendrier en vertu
desquels les objectifs devront être atteints

147
IV.5- Mise en œuvre et fonctionnement
• IV.5.1- Ressources, rôles, responsabilités;
• IV.5.2- Compétences, formation;
• IV.5.3- Communication, participation;
• IV.5.4- Documentation;
• IV.5.5- Contrôle des opérations;
• IV.5.6- Prévention des situations d’urgence et
capacité de réagir.

148
IV.5.1- Ressources, rôles,
responsabilités, obligation de rendre
compte et autorités
• Responsabilité SST et SM de la SST: direction
• La direction doit faire preuve d’engagement en:
- Garantissant la disponibilité des ressources
(humaines, infrastructures, techniques, finances)
- Définissant les rôles et responsabilités (à
documenter et communiquer)
- Désigner un (des) membre(s) de la direction
responsable(s) de la SST (à communiquer)

149
IV.5.2- Compétences, formation et
sensibilisation
• Vérifier compétences des personnes si tâches
ont impact sur la SST;
• Assurer les formations nécessaires et évaluer
leur efficacité;
• Sensibiliser les personnes:
- Aux relations de leurs tâches avec la SST;
- À leurs rôles et responsabilités dans le SM de
SST;
- Aux possibles conséquences des écarts

150
IV.5.3- Communication,
participation et consultation
• Communication
Dans le cadre du SM de SST, procédures pour:
- La communication interne entre les divers
niveaux;
- La communication avec tout visiteur;
- La réception, documentation et réponse aux
communications pertinentes des parties
intéressées externes.

151
IV.5.3- Communication, participation et consultation
(suite)
• Participation des collaborateurs par leur
implication:
- Dans l’identification des dangers, l’évaluation
des risques et la détermination des mesures de
contrôle;
- Toute enquête en cas d’incident;
- L’élaboration et la révision des politiques SST
Aussi par leur représentation pour les questions
de SST

152
IV.5.3- Communication, participation et consultation
(suite)
• Consultation des sous-traitants en cas de
modification affectant leur santé et sécurité
au travail
• Consultation de toute partie intéressée
externe sur des questions de SST

153
IV.5.4- Documentation
• La documentation doit inclure, notamment:
- La politique et les objectifs SST;
- Une description du champ d’application du
SM de SST;
- Une description des principaux éléments du
SM de SST et leurs interactions;
• Les documents doivent être contrôlés (cf.
maîtrise des documents dans ISO 9001)

154
IV.5.5- Contrôle des opérations
• L’organisme doit déterminer les opérations
et activités associées à des dangers identifiés
lorsque la mise en œuvre de mesures de
contrôle est nécessaire pour gérer le (les)
risque(s) pour la SST;
• Cela doit inclure la gestion des
modifications.

155
IV.5.6- Prévention des situations
d’urgence et capacité de réagir
procédures pour:
- Identifier les situations d’urgence
potentielles;
- Répondre à ces situations d’urgence.
• Tester régulièrement ces procédures en
impliquant les parties intéressées pertinentes

156
IV.6- Vérification
• IV.6.1- Mesure et surveillance de
performance
• IV.6.2- Evaluation de conformité
• IV.6.3- Recherche d’incidents, non-
conformité, actions correctives et préventives
• IV.6.4- Maîtrise des enregistrements
• IV.6.5- Audit interne

157
IV.6.1- Mesure et surveillance de
performance
procédures pour surveiller et évaluer
régulièrement la performance du SST;
• Si équipements nécessaires, procédures
d’étalonnage et de maintenance exigées et
enregistrements de ces activités

158
IV.6.2- Evaluation de conformité
• Procédures pour évaluer périodiquement la
conformité aux exigences légales;
• Procédure pour évaluer conformité aux
autres exigences (incluse aux procédures
précédentes ou à part)

159
IV.6.3- Recherche d’incidents, non-
conformité, actions correctives et
préventives
• Recherche d’incidents; procédures pour:
- Déterminer tout facteur pouvant causer un
incident;
- Identifier la nécessité d’une action corrective;
- Identifier les opportunités pour une action
préventive;
- Identifier les opportunités pour une
amélioration continue

160
IV.6.3- Recherche d’incidents, non-conformité,
actions correctives et préventives (suite)
• Non-conformité, actions correctives et actions
préventives;
Procédures nécessaires pour :
- Traiter toute non-conformité (NC) réelle ou
potentielle;
- Prendre toute action corrective (AC) ou action
préventive (AP) nécessaire.

161
IV.6.3- Recherche d’incidents, non-conformité,
actions correctives et préventives (suite)
• Non-conformité, actions correctives et actions
préventives; procédures doivent permettre de:
- Identifier et corriger toute non-conformité;
- Analyser toute NC, déterminer ses causes et
prendre les mesures pour éviter sa réapparition;
- Évaluer la nécessité d’actions pour prévenir
toute NC et mettre en œuvre les actions
appropriées pour éviter sa réapparition;
- Revoir l’efficacité des AC et des AP

162
IV.6.4- Maîtrise des enregistrements
• Établir et tenir à jour des enregistrements
pour apporter la preuve de la conformité
aux exigences du SM de SST et au
référentiel OHSAS;
• Les enregistrements doivent être lisibles et
rester lisibles et identifiables et permettre de
retrouver les activités concernées

163
IV.6.5- Audit interne
• Réaliser des audits internes du SM de SST à
intervalles planifiés, notamment pour
déterminer si le système:
- Est conforme aux dispositions convenues
pour le SM de SST, y compris les exigences
du référentiel OHSAS;
- A été convenablement mis en œuvre et tenu
à jour;
- Répond efficacement à la politique et
objectifs fixés.

164
IV.7- Revue de Direction (RDD)
• La direction doit réexaminer le SM de SST à
intervalles planifiés pour garantir la continuité
de son applicabilité, son adéquation et son
efficacité;
• Réexaminer = évaluer les opportunités
d’amélioration et la nécessité d’apporter des
modifications au SM de SST, y compris
politique et objectifs SST;
• Conserver enregistrements de RDD

165
Conclusion
• La meilleure protection est garantie
par:
- la manipulation correcte des produits;
- un travail exécuté selon les
prescriptions;
- l’ordre, la propreté et l’hygiène au
niveau du poste de travail.

166
LA SECURITE AU LABORATOIRE
est une
AFFAIRE DE BON SENS
et c’est
L’AFFAIRE DE TOUS

174
• Etude sur le virus ebola en laboratoire
haute sécurité P4, ELISA sous hotte.
Fort Detrick, Maryland, Etats-Unis
© IRD/Jean-Jacques Lemasson.

181
Exposés « sécurité au laboratoire »
Sujet Intitulé Étudiant(e)
1 L’affichage de sécurité Rachdi R.
2 Le bon comportement Sawadogo R.
3 Protection personnelle Elmokhtari I.
4 L’étiquetage de sécurité Samra H.
5 Elimination des déchets Yettifti G. Z.
6 L’intervention en cas
d’accident
Aghaï H.

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