Southern blot
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HAMIDOU Selma
HADJERSI Amina
Introduction:
 Les blots sont des techniques de transfert d'ADN, d'ARN
et de protéines sur un support de sorte qu'ils peu...
Le but de southern blot:
 Elle permet de détecter une séquence
d'ADN génomique dite unique
 Cette technique permet de lo...
Principe :
 La clé de ce procédé est l'hybridation.
Hybridation: Il est le processus de formation
d'une molécule d'ADN do...
Protocole :
 Extraction de l’ ADN
 Restriction de l’ADN
 l’électrophorése
 Transfert
 Hybridation
 autoradiographie
Les outils :
EXTRACTION D’ADN:
Traitement par l’ARNase
PouréliminerlesARNs
précipitation de l’ADN
=addition d'éthanol ou d'isopropanol ...
Restriction de l'ADN génomique:
Champ d’application :
 Pour identifier l'ADN spécifique dans un
échantillon d'ADN
 Pour isoler l'ADN désiré pour la cons...
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southern blot l'une des technique d'hybridation d'ADN

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    1. 1. Southern blot Préparé par: HAMIDOU Selma HADJERSI Amina
    2. 2. Introduction:  Les blots sont des techniques de transfert d'ADN, d'ARN et de protéines sur un support de sorte qu'ils peuvent être séparés  C'est une technique indirecte d'hybridation de l'ADN mise au point en 1975 par le biochimiste Edwrad Southern.  La technique est connue comme le transfert d'ADN ou «Southern blot »  Le Southern est une technique longue qui est la base de l'essor de la biologie moléculaire mais qui est souvent remplacée par la PCR.
    3. 3. Le but de southern blot:  Elle permet de détecter une séquence d'ADN génomique dite unique  Cette technique permet de localiser une séquence d’ADN parmi les fragments ayant migrés, grâce à une sonde marquée
    4. 4. Principe :  La clé de ce procédé est l'hybridation. Hybridation: Il est le processus de formation d'une molécule d'ADN double brin entre une sonde d'ADN simple brin et un ADN cible simple brin.  Il ya 2 éléments importants de l'hybridation: ◦ Les réactions sont spécifiques à des sondes vont seulement se lier à des cibles avec une séquence complémentaire. ◦ La sonde peut trouver une molécule de cible dans un mélange de millions de molécules apparentées mais non complémentaires.
    5. 5. Protocole :  Extraction de l’ ADN  Restriction de l’ADN  l’électrophorése  Transfert  Hybridation  autoradiographie
    6. 6. Les outils :
    7. 7. EXTRACTION D’ADN: Traitement par l’ARNase PouréliminerlesARNs précipitation de l’ADN =addition d'éthanol ou d'isopropanol dans la phase aqueuse déprotéinisationde la solution =extraction / solvants organiques, en général du phénol +/- chloroforme Lyse des cellules ou des tissus =broyage ou pas + extraction/détergents
    8. 8. Restriction de l'ADN génomique:
    9. 9. Champ d’application :  Pour identifier l'ADN spécifique dans un échantillon d'ADN  Pour isoler l'ADN désiré pour la construction d'ADNr  Identifier les mutations, délétions et des réarrangements de gènes  Utilisé dans le pronostic du cancer,EX:MYCN  Le diagnostic de VIH-1 et les maladies infectieuses  Dans RFLP Restriction Fragment Length Polymorphism:  Dans empreintes génétiques  le diagnostic prénatal et des maladies génétiques

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