Les plasmides
   Introduction   Définition des plasmides   Les types des plasmides   Autre propriétés   Les plasmides comme vecteur...
En 1952 JOSHUA LEDBERG découvert les plasmides lorsque leur études dessalmonelledans notre exposer en va voire les types ;...
    Les plasmides: sont des petites molécules circulaires d’ADN double brin qui existe    indépendamment du chromosome , ...
     1- des plasmides de fertilité:             Plasmide porteur des gènes de la conjugaison Bactérienne transforme sa c...
   Des plasmides R qui portent des gènes codants une résistance aux antibiotiques    sulfamides, streptomycine et à la sp...
   les plasmide de virulence rendent les bactéries plus pathogènes .   Exemple Ti: plasmides inducteur de tumeur trouvé ...
   Qui porte des gènes cordant pour des enzymes qui dégradent des substances telles    que composée aromatique ,glucides…...
     F Les plasmides sont des ADN CCC (Covalent Ly Cl osed Circles), mais si un des      deux brins est ouvert, ils sont ...
Certains plasmides ne cohabitent pas durablement dans la même bactérie (F’gal etF’lac), culture en milieux non sélectifs ....
- un vecteur faut contiens :   origine de réplication   Un marqueurs permette la sélection   Une région permette d’insé...
La plus utiliser => lyse alcaline    Lyse : altération des enveloppes bactériennes Alcaline : dénaturation ADN    après ...
    1- préparation du plasmide et l’insert par la coupure de même enzyme de      restriction.Fig4: préparation l’insert e...
Pour éviter la recirculationFig5 réparation par phosphatase alcaline.ftp.a.moi.chez-alice.fr/Ecole/.../Outils1.pdf
Fig6: mode d’insertion des plasmides http://commons.wikimedia.org/wiki/File:Recombinant_DNA.JPG
     Les plasmides peut inséré a laide d’une choc thermique ou électriqueFig7: l’utilisation de choc électrique pour l’in...
   Le taux de transformation des bactéries est généralement très faible.   Si on utilise un gène de résistance dans plas...
Fig8: la double sélectionmon.ftp.a.moi.chez-alice.fr/Ecole/.../Outils1.pdf
     En agriculture.    En médicine:-Production des hormones et des protéines :-insuline → traitement de diabète.-Interf...
Les plasmides sont utilisées par les bactéries comme moyen d’adaptation mais ily a un grand développement d’utilisation de...
   _MICHAEL T.MADIGANT et JOHN M. MARTTNKO               2007   Brock Biologie des micro – organismes 11 e Ed PEARSON Fr...
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Les plasmides groupe 02

  1. 1. Les plasmides
  2. 2.  Introduction Définition des plasmides Les types des plasmides Autre propriétés Les plasmides comme vecteurs Comment on obtient les plasmides? Mode d’insertion des plasmides La selection des bactéries transformé Application des plasmides Conclusion Référence
  3. 3. En 1952 JOSHUA LEDBERG découvert les plasmides lorsque leur études dessalmonelledans notre exposer en va voire les types ; des propriétés en plus les plasmidescomme des vecteurs de clonage .
  4. 4.  Les plasmides: sont des petites molécules circulaires d’ADN double brin qui existe indépendamment du chromosome , elles sont capables de se répliquer de manière autonome . Les plasmides ont relativement peu de gène généralement moins de 30leur information génétique n’est pas nécessaire à l’hôte et les cellules(Prescott et al;2010). Les plasmides transmissibles de façon stable à la descendance(primerose et al;2004). les plasmides ne sont pas circulaire toujours . Par exemple, les plasmides de Streptomyces sp et Bor relia burgdorferi sont linéaires et sont protégés de l’attaque desnucléases par une association covalente avec une protéine (Str eptomyces) ou par laformation d’une structure en épingle à cheveux (Bourrelai)(primorce et al;2004).
  5. 5.  1- des plasmides de fertilité: Plasmide porteur des gènes de la conjugaison Bactérienne transforme sa cellule hôte ou cellule donneuse , ex plasmide F E coli. (Prescott et al ; 2010). cest a dire qu’ont un rôle dans la formation d’un couple de cellules ( Michael Met John Martinko ;2007 ).
  6. 6.  Des plasmides R qui portent des gènes codants une résistance aux antibiotiques sulfamides, streptomycine et à la spectinomycine et ç la tétracycline ex:R100 ( Michael Met John Martinko ;2007)
  7. 7.  les plasmide de virulence rendent les bactéries plus pathogènes . Exemple Ti: plasmides inducteur de tumeur trouvé chez la bactérie agrobacteium tumefaciens .(Prescott et al ;2010).
  8. 8.  Qui porte des gènes cordant pour des enzymes qui dégradent des substances telles que composée aromatique ,glucides… (Prescott et al 2010). 5- plasmide col: col contiennent des gènes de synthèse de bactériocines connues sous le nom de colicine . Les bactériocines son des protéines bactériennes qui détruisent d’autres bactéries (Prescott et al;2010) .
  9. 9.  F Les plasmides sont des ADN CCC (Covalent Ly Cl osed Circles), mais si un des deux brins est ouvert, ils sont des ADN OC (Open Circle). (Primorse et al 2004). Forme I : forme relachéeOC Open Circleorme II : Forme normale surenrouléeCCC Covalent Close Circle Fig1: les formes des plasmides. www.sante.univ-nantes.fr/med/ticem/.../1444.pdf
  10. 10. Certains plasmides ne cohabitent pas durablement dans la même bactérie (F’gal etF’lac), culture en milieux non sélectifs . Elimination de l’un desplasmides => compétition(www.sante.univ-nantes.fr/med/ticem/.../1444.pdf)
  11. 11. - un vecteur faut contiens : origine de réplication Un marqueurs permette la sélection Une région permette d’inséré fragment d’ADN exogènes.Fig2 :vecteur plasmidiques (Lodish etal,2005)
  12. 12. La plus utiliser => lyse alcaline  Lyse : altération des enveloppes bactériennes Alcaline : dénaturation ADN  après => La neutralisation : LADN chromosomique étant très long narrive pas à se rapparier LADN plasmidique plus court arrive à se reformer à l‘état initiale  Ultracentrifugation à l’équilibre de densité: CsCl + bromure d’ethidium(http://bioinfo2010.wordpress.com/). Fig3: lextraction des plasmides apartire gradien de CsCl(Prescott et al;2010) .
  13. 13.  1- préparation du plasmide et l’insert par la coupure de même enzyme de restriction.Fig4: préparation l’insert et plasmide .ftp.a.moi.chez-alice.fr/Ecole/.../Outils1.pdf
  14. 14. Pour éviter la recirculationFig5 réparation par phosphatase alcaline.ftp.a.moi.chez-alice.fr/Ecole/.../Outils1.pdf
  15. 15. Fig6: mode d’insertion des plasmides http://commons.wikimedia.org/wiki/File:Recombinant_DNA.JPG
  16. 16.  Les plasmides peut inséré a laide d’une choc thermique ou électriqueFig7: l’utilisation de choc électrique pour l’introduction les vecteur plasmidique.mon.ftp.a.moi.chez-alice.fr/Ecole/.../Outils1.pdf
  17. 17.  Le taux de transformation des bactéries est généralement très faible. Si on utilise un gène de résistance dans plasmide on obtient une sélection séparer les bactéries comportant des plasmides et les bactéries sans plasmides car ces dernières sont tuées. cette méthode permet pas de distinguer les bactéries avec plasmides intacts des bactéries avec plasmides recombinants. On utilise pour cela une résistance à un second antibiotique , ou plasmide a un gène code (LacZ) pour un protéine β galactosidase.
  18. 18. Fig8: la double sélectionmon.ftp.a.moi.chez-alice.fr/Ecole/.../Outils1.pdf
  19. 19.  En agriculture.  En médicine:-Production des hormones et des protéines :-insuline → traitement de diabète.-Interférons α β, δ agent antiviraux , anti-tumoraux et anti-inflammatoires.-Streptokinase →anticoagulant (Prescott et la ; 2010).
  20. 20. Les plasmides sont utilisées par les bactéries comme moyen d’adaptation mais ily a un grand développement d’utilisation des plasmides permettre de développerplusieurs sciences et défend plusieurs maladies.
  21. 21.  _MICHAEL T.MADIGANT et JOHN M. MARTTNKO 2007 Brock Biologie des micro – organismes 11 e Ed PEARSON France , 1047P. _PRESCOTT , HARLEY , KLEIN , WILLEY , SHERWOOD et WOOLVERTON 2010 Microbiologie 3eEd De Boeck Paris . 1088 P. _S. PRIMROSE , TWYMAN et R. OLD 2004 GENIE GèNETIQUE 6eEd De Boeck Pris . 400 P . _ WILLIAM , S.KLUG , MICHAEL , R. CUMMINGS et CHARLOTTE , A. SPENCER , 2006 Genetique 8eEd PEARSON Paris .704 P http://commons.wikimedia.org/wiki/File:Recombinant_DNA.JPG .ftp.a.moi.chez-alice.fr/Ecole/.../Outils1.pdf www.sante.univ-nantes.fr/med/ticem/.../1444.pdf

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