Le document présente les moyens d'étude de la croissance microbienne, en détaillant les méthodes directes et indirectes pour mesurer le nombre de cellules et l'activité cellulaire. Il aborde également les facteurs essentiels à la croissance des micro-organismes et décrit la cinétique de la croissance, y compris les expressions mathématiques et graphiques associées. La conclusion souligne l'existence de différentes techniques de mesure de la croissance microbienne, nécessitant des conditions expérimentales adéquates.

1. Les moyens d’étude de la
croissance microbienne
2011/2012

2. PLANT DE TRAVAIL
INTRODUCTION
I-LA CROISSANCE MICROBIENNE
II- LES MOYENS D’ETUDE DE LA CROISSANCE
II-1 LES METHODES DIRECTES
II-1 MESURE DE NOMBRE DE CELLULES
1-Comptage total
2-Comptage des cellules viables cultivables
II-2/LES METHODES INDIRECTS
a-Mesure de la biomasse
1/ mesure de poids sec
2/ mesure de trouble
b-Mesure de l’activité cellulaire
III/ LA CINITIQUE DE LA CROISSANCE MICROBIENNE
1/Expression graphique
2/Expression mathématique
3/Rendement

3. INTRODUCTION
La croissance est un phénomène de grande intérêt
biologique , dont l’importance écologique et pratique
est considérable .
C'est Jacques MONOD, lauréat en 1965 du Prix
Nobel de médecine (avec André LWOFF et François
JACOB) qui le premier a étudié la croissance .
Dont notre exposé, on propose un problématique ;
est ce que les techniques d’étude de la croissance
sont nombreuses et montre qu'aucune n'est
parfaite ?

4. I- LA CROISSANCE MICROBIENNE
DEFINITION :
Accroissement ordonné de tous les
composants d’un organisme
Au niveau cellulaire, la conséquence est la
division de la cellule
On observe donc chez les organismes
Pluricellulaires : une augmentation de la
taille de l’individu
Unicellulaire : une augmentation de la
population
Chez les micro-organismes, croissance est
synonyme de multiplication

5. FACTEURS ESSENTIELS À LA CROISSANCE
Se divisent en deux catégories:
Physiques
- eau
- température
- pH
- pression osmotique
-lumière
Chimiques:
-
carbone, azote, soufre et
phosphore
- oligo-éléments
- oxygène

6. FACTEURS ORGANIQUES DE CROISSANCE
Composés organiques dont un
microorganisme a besoin mais qu’il
ne peut synthétiser lui-même.
Ex :
vitamines (coenzymes)
 acides aminés
Les purines et les pyrimidines à
cèle des acides nucléique

7. II- LES MOYENS D’ETUDE DE LA CROISSANCE
MICROBIENNE
II-1 Les méthodes directes
II-1-1Mesure de nombre des cellules
1-Comptage total
A- Lecture au microscope
Cellule de numération hématimétrie
(Cellule de Thoma, Cellule de Malassez
Cellule de Pétroff- Hauser)

8. B-Compteur de particules
*Fluidique
- Cellules en suspension
-Flux sur une file à travers
*Optique
- Un volume illuminé où elles
- Diffusent la lumière et fluorescent
*Electronique
-Signaux collectés, filtrés et Convertis
en valeurs numériques
-Stockées dans un ordinateur

9. COULTER

10. C- EPIFLUORESSENCE
Les cellules microbiennes sont colorées
par un fluorochrome de type Acridine
orangé.
-Cellules vivantes qui sont fluorescentes
dans le vert(ADN double brin).
-Cellules mortes dont la fluorescence
rouge résulte de la combinaison du
fluorochrome avec l'ADN dénaturé.

11. 2-COMPTAGE DES CELLULES VIABLES CULTIVABLES
Dénombrement après culture

12. II-2/LES METHODES INDIRECTS
A-MESURE DE LA BIOMASSE
1/ MESURE DE POIDS SEC
Microorganisme récolté par centrifugation ou par filtration
sur membrane
Lavage soigneux à l’aide d’un tampon approprié
Culot desséché à 10°C-110°C
Poids sec (gr de matière sèche par litre )

13. 2/ MESURE DE TROUBLE
l’absorption de la lumière traversant une
suspension microbienne obéit à la loi de
Beer Lambert :
A= log (I°)
I

14. B-MESURE DE L’ACTIVITÉ CELLULAIRE
On peut mesure soit :
1- La consommation de substrat
2- Mesure des produits d’excrétion
3-Mesure des variations physico-chimiques
du milieu

15. III/ LA CINITIQUE DE LA CROISSANCE
MICROBIENNE
III-1 Expression mathématique
peut être définie par deux constantes :
Temps de génération :
C’est l’intervalle de temps entre deux divisions
successives ou celui nécessaire au et doublement de la
population.: 1---2 ---- 4----8, etc
G = t/n
Taux de croissance :
le nombre de divisions par unité de temps :
µ = 1/G = n/t.

16. Une population avec la formule suivante :
N = N0 x 2 t /G
N nombre de bactéries
N0 nombre de bactéries au départ
t temps de culture
G temps de génération

17. 2/Expression graphique :
Courbe de croissance
Différentes phases
1-Latence µ = 0
2-Accélération µ augmente, N augmente, et G diminue
3-Phase exponentielle µ = µmax = cste ,G constant et
minimal, N augmente
4-Ralentissement µ diminue ,N augmente, et G
augmente.
5-Stationnement µ = 0, N est constante et maximale
6-Déclin mortalité μ est négatif , N diminue,.

18. Figure : Courbe de croissance .

19. 3/RENDEMENT
R= la masse cellulaire formée
la masse d’aliments consommés

20. CONCLUSION
On fin de notre petite recherche , on concluent qu’il existe
différentes méthodes de mesure de la croissance microbienne.
On utilise des méthodes directes et indirectes de quantification
des bactéries ou des levures : en fonction du temps, on suit
l’évolution du nombre de micro-organisme par unité de volume du
milieu.
Les conditions expérimentales de mesure de la croissance
nécessitent:
 Une population homogène.
 Des paramètres physico-chimiques optimum..
 Une certaines quantité de nutriments.