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Etude de la diversité génétique des schistosomes td.pptx

2 Mar 2023
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Etude de la diversité génétique des schistosomes td.pptx

  1. Etude de la diversité génétique des schistosomes Présenté par: TCHAKOUNTE WILLIAM Sous la supervision de: ANGORA K. Etienne, PharmD, PhD Maître de Conférences Agrégé 02/03/2023 1
  2. Plan • Généralités • Cycle de vie de la shistosomiase • Diversité génétique de schistosomes • Méthode de typage moléculaire des schistosomes • Conclusion 02/03/2023 2
  3. Généralités Les schistosomes sont des parasites hématophages appartenant à la famille des Schistosomatidae. Ils sont responsables de la schistosomiase, une maladie parasitaire qui affecte des millions de personnes dans le monde entier. 02/03/2023 5
  4. Généralités • Il existe 5 espèces de Schistosoma pathogènes pour l’Homme : – S. haematobium, – S. mansoni, – S. japonicum, – S. intercalatum/guineensis – S. mekongi. 02/03/2023 4
  5. Généralités 02/03/2023 5 Plus de 90% des quelque 200 millions de cas de bilharziose ont lieu en Afrique dont environ les deux tiers sont causés par Schistosoma haematobium.
  6. Cycle de vie de la shistosomiase 02/03/2023 6
  7. Diversité génétique de schistosomes • La diversité génétique se réfère à la variation de l'information génétique au sein d'une population d'organismes. • Elle peut se manifester par des différences dans les gènes, les allèles, les chromosomes, les génomes, ou même les phénotypes. • L'étude de la diversité génétique des schistosomes est importante pour comprendre la biologie et l'épidémiologie de ces parasites, ainsi que pour développer des stratégies de lutte efficaces 02/03/2023 7
  8. Méthode de typage moléculaire des schistosomes (2) • Plusieurs méthodes peuvent être utilisées pour étudier la diversité génétique des schistosomes: – SNP (Single Nucleotide Polymorphism) – ITS (Internal transcribed spacer) – Gènes ribosomial: Cox1, Cox2 (cytochrome oxidase sub-unit 1 and 2), – Les microsatellites – RFLP (restriction fragment length polymorphism): – AFLP (Amplified Fragment Length Polymorphism) et RAPD (Random Amplified Polymorphic DNA). 02/03/2023 8
  9. Méthode de typage moléculaire des schistosomes (3) 02/03/2023 9 - Les SNP sont utilisés pour étudier la diversité génétique des schistosomes en comparant les variations dans un seul nucléotide entre différentes souches. -Les SNP peuvent être génotypés à l'aide de différentes techniques, notamment la PCR multiplexe, le séquençage haut débit (NGS) et l'hybridation sur puce (SNP array).
  10. Méthode de typage moléculaire des schistosomes (4) • L'ITS est une région de l'ADN présent entre les gènes ribosomiques qui est transcrit en ARN ribosomique. • Les régions ITS1 et ITS2 sont les plus couramment utilisées, mais certaines études ont également utilisé la région ITS3. – La région ITS1 est située entre l'ARNr 18S et l'ARNr 5.8S – ITS2 est située l'ARNr5.8S l'ARNr 28S. • Les deux régions sont hautement variables entre les espèces de schistosomes et entre les individus, ce qui les rend utiles pour l'analyse de la diversité génétique. 02/03/2023 10
  11. Méthode de typage moléculaire des schistosomes (5) • Parmi les gènes mitochondriaux utilisés pour le typage des schistosomes, on peut citer: – Le cytochrome oxydase subunit 1 (Cox1) et le cytochrome oxydase subunit 2 (Cox2) : ces deux gènes sont des sous- unités de la chaîne de transport d'électrons de la mitochondrie. – Le gène nad4 : ce gène code pour une sous-unité de la NADH déshydrogénase, une enzyme impliquée dans la chaîne de transport d'électrons de la mitochondrie. – Les gènes codant pour les ARNr ribosomiques : le ribosome mitochondrial des schistosomes est constitué de deux sous-unités, une petite (rrnS) et une grande (rrnL), qui sont codées par des gènes mitochondriaux. 02/03/2023 11
  12. Méthode de typage moléculaire des schistosomes (6) • des techniques de PCR et de séquençage. • limitée par la présence de polymorphismes neutres ou de séquences d'ADN non fonctionnelles dans certaines régions des gènes • ce qui peut réduire la capacité de différenciation entre les populations de schistosomes. 02/03/2023 12
  13. Méthode de typage moléculaire des schistosomes (7) • microsatellites sont des séquences d'ADN courtes et répétées en tandem, généralement de deux à six nucléotides de longueur, qui peuvent varier en nombre de répétitions dans différentes souches de schistosomes. • Les différences dans le nombre de répétitions de ces microsatellites sont utilisées pour distinguer les souches de schistosomes. 02/03/2023 13
  14. Méthode de typage moléculaire des schistosomes (8) • Il existe plusieurs microsatellites qui ont été utilisés pour le typage des schistosomes: – SH1, SmLE2, SjMS1, Sh112, Sm21.8 • typage des microsatellites est effectué par: – PCR, séparés par électrophorèse sur gel d'agarose – l'hybridation de sondes, – le séquençage direct, – le séquençage de nouvelle génération (NGS) 02/03/2023 14
  15. Méthode de typage moléculaire des schistosomes (9) • restriction fragment length polymorphism (RFLP): utilise des enzymes de restriction pour cliver l'ADN en fragments de tailles différentes. • fragments obtenus sont séparés par électrophorèse et les profils obtenus sont comparés pour déterminer les variations génétiques. 02/03/2023 15
  16. Méthode de typage moléculaire des schistosomes (10) • Les marqueurs AFLP et RAPD sont des marqueurs moléculaires basés sur la PCR (Polymerase Chain Reaction) qui permettent d'amplifier des fragments d'ADN aléatoires. 02/03/2023 16
  17. Conclusion • l'étude de la diversité génétique des schistosomes est un domaine de recherche important pour comprendre leurs épidémiologie et la biologie. • Les techniques moléculaires, telles que les marqueurs microsatellites, SNP, ITS, gènes mitochondriaux et AFLP/RAPD, ont permis de décrire une grande variabilité génétique dans les populations de ces parasites. • L'utilisation de ces techniques moléculaires permette de mieux comprendre la répartition géographique des différents génotypes, d'identifier les schistosomes hybrides, de retracer l'origine géographique des souches de schistosomes et d'évaluer les migrations passées de ces parasites. • Ses recherche contribuent à la compréhension des mécanismes de transmission et d'infection des schistosomes, ce qui est essentiel pour lutter contre la schistosomiase et protéger la santé publique. 02/03/2023 17
  18. Je vous remercie pour votre attention 02/03/2023 18
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