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1. souris
transgénique
Présentée par HIBA SADIKI
Encadrée par D.MOHAMED BOUHRIM

2. Ordre du jour
Introduction
01
02
Souris knock-out
03
.
Différence entre Souris
transgéniques et Souris
knock-out
04
Souris transgénique

3. Introduction

4. La trangenése
• La transgenèse est le fait d'incorporer un ou plusieurs gènes dans
le génome d'un organisme vivant. Ce transgène pourra être
exprimé dans l'organisme transformé. Stratégie servant
initialement aux chercheurs pour étudier la fonction des gènes,
cette approche est également utilisée par les industries
pharmaceutique et agro-alimentaire. Elle est entre autres une
nouvelle stratégie d’obtention de variétés végétales ou animales
résistantes au stress biotique (parasites, insectes) ou abiotique
(sécheresse, faible luminosité). Ces nouvelles variétés sont
généralement regroupées sous le terme d'organismes
génétiquement modifiés (OGM).
• Les transformations génétiques d'organismes unicellulaires ou de
virus sont relativement simples à aborder. Elles font appel à des
techniques nettement plus complexes pour les animaux et
végétaux.

5. La transgenèse comporte plusieurs étapes
1 2 3
Etape 1 :
Identifier
Le géne d’un
caractère
spécifique est
identifié
Etape 2 : Isoler
Lors de l’étape
d’isolement les vecteurs
sont crées en cassant les
cellules collectant la
séquence d’ADN cible en
la répliquant et en
l’insérant dans le génome
bactérien
Etape 3 : Transformation
Le vecteur contenant le
transgène est inséré dans
l’animal cible, pour certain
organismes comme les
souris le moyen le plus
efficace de transférer l’ADN
dans ces cellules est la
micro-injection dans le
pronucléus male

6. Souris transgénique

7. Souris normale
Souris transgénique
Souris
transgénique
01
02
Une souris transgénique est une souris dans
les chromosomes ont été modifiés afin que
ces gènes contiennent de l'ADN étranger. Ces
gènes se situent dans le noyau de chacune
des cellules de l'organisme. Par conséquent,
toutes les cellules de la souris contiennent le
nouvel ADN
Dans les laboratoires, les chercheurs utilisent des
souris pour tester sur elles des traitements, car ces
rongeurs ont 90 % de leurs gènes en commun avec
l’espèce humaine. Sont très faciles à manipuler et
sont suffisamment petites pour permettre aux
laborantins de réaliser des tests sur de nombreux
individus dans un espace limité.
Enfin, elles se reproduisent et grandissent très
rapidement, la durée de gestation étant de moins de
trois semaines et l’animal devient adulte au bout de
deux mois seulement.

8. principales techniques permettant d'introduire de l'ADN étranger dans une
souris:
2
techniques
Dans le cas de l'injection pronucléaire, l'ADN
étranger est injecté dans le pronucléus d'un
ovocyte de souris, qui se forme juste après qu'il
était fécondé. L'ADN étranger s'intègre dans le
génome à une position aléatoire, généralement
après que le premier ou deuxième cycle de
division cellulaire ait eu lieu. Cela signifie que
l'ADN étranger ne sera pas porté par toutes les
cellules de la souris; cette souris ne sera donc
que partiellement transgénique. Les ovocytes
ou spermatozoïdes transgéniques de ces
souris sont ensuite utilisés pour créer la
génération suivante de souris entièrement
transgéniques.
l'injection pronucléaire
Avec l'utilisation de cellules souches
embryonnaires, l'ADN introduit s'intègre
généralement dans le génome de façon
aléatoire. Néanmoins, si sa structure est
similaire à une partie existante du génome, il
peut alors être 'reconnu' par l'ADN. Il subit alors
une recombinaison homologue et une copie
unique s'intègre au génome à un endroit
spécifique. Ces cellules embryonnaires doivent
alors se développer, puis sont injectées dans un
embryon-hôte; elles feront donc partie intégrante
de la souris qui sera créée à partir de cet
embryon. La souris, créée à partir de l'embryon-
hôte, est appelée une chimère. Elle est
constituée de cellules embryonnaires de deux
souris différentes. Certains des spermatozoïdes
produits par la chimère seront transgéniques,
car ils contiendront l'ADN étranger. Lorsque ces
spermatozoïdes féconderont un ovocyte normal,
la souris qui naîtra sera totalement transgénique
et aura de l'ADN étranger dans chacune de ses
cellules.
l'utilisation de cellules souches embryonnaires

9. l'injection
pronucléaire
l'utilisation de
cellules
souches
embryonnaires

10. Ont un oncogène inactive ce qui les prédispose
à développer un cancer.Ces souris ont été
éssentielles pour la conpréhension de nombreux
cancers et pour le développement de techniques
destinées à les traiter.
Exemple de
s o u r i s
trangéniques
Ont une meilleure mémoire et sont capables
d’apprendre,elles ont une function améliorée au
niveau des récepteures NMDA;récepteures dont
le cerveau a besoin pour stocker les novelles
informations.
Ont un gène d'hormone de croissance de rat,ells
grandissent donc plus vite que la normale et sont
utilisées pour étudier la croissance et le
développement.

11. Souris knock-out

12. Le développement plus récent, dans les années 1980, des souches knock-out (ou knock-in) a constitué une avancée majeure
dans la génétique. Cette technologie permet de modifier, le plus souvent supprimer, des gènes particuliers sur le brin d'ADN;
ils peuvent également être inactivés ou insérés. Cela permet aux chercheurs de déterminer la fonction exacte d'un gène
particulier et ces souris génétiquement modifiées ont été d'excellents modèles de maladies humaines, qui avant ne pouvaient
pas être étudiées sur des animaux. Le séquençage et l'analyse du génome de la souris a permis de cibler et d'étudier de
nombreux gènes au moyen de cette technologie. Les créateurs de la première souris knock-out ont reçu le prix Nobel de
médecine 2007.
Souris Knock-out
Les souris knock-out sont des souris domestiques
qui ont été génétiquement modifiées pour inactiver un
ou plusieurs gènes dans les cellules souches
embryonnaires dont elles sont issues. Ces cellules
souches étant pluripotentes, elles sont donc toutes
initialement identiques mais une fois réimplantées
dans un blastocyste, peuvent former l'ensemble des
types cellulaires d'une souris qui porteront alors la
mutation introduite. Il faut distinguer le knock-out d'une
simple recherche de mutants. Le knock-out est
une mutagenèse ciblée dans la mesure où elle n'altère
que la séquence du gène étudié.

13. Comment fabriquer des souris knock-out?
1
2

14. Exemple de
s o u r i s
Knock-out
Sujettes à l’obésité en raison
d’une carence en
carboxypeptidase E.
Souris corpulentes
Ayant un géne de la myostatine
inactive.
Souris musclées

15. Différence entre Souris
transgéniques et Souris knock-out

16. Différence entre Souris transgéniques et Souris knock-out
Les souris knock-out
Les souris transgéniques
Les souris knock-out
Les souris transgéniques
• Les souris transgéniques sont des
souris génétiquement modifiées
dont le génome a été modifié grâce
à l’utilisation de techniques de génie
génétique.
• les souris transgéniques ont des
gènes étrangers insérés dans leur
génome.
• Des souris transgéniques sont
fabriquées à l’aide de micropipettes
en verre pour injecter une solution
contenant de l’ADN d’une source
choisie dans le noyau d’un œuf de
souris fécondé. Parfois, l’ADN
étranger sera intégré avec succès
dans les chromosomes du noyau de
l’œuf de souris. Les œufs sont
• les souris knock-out ont inactivé
ou “assommé” un gène existant
en le remplaçant ou en le
perturbant par un morceau d’ADN
artificiel.
• les souris knock-out ont un gène
d’intérêt fonctionnellement
inactivé.
• Pour produire des souris knock-
out, les chercheurs utilisent l’une
des deux méthodes pour insérer
de l’ADN artificiel dans les
chromosomes contenus dans les
noyaux des cellules ES. En règle
générale, cela se fait en
introduisant un morceau d’ADN

17. Thank Y u