TRAVAIL PRATIQUE D'HYSTOLOGIE GENERALE

1. REPUBLIQUE DEMOCRATIQUE
DU CONGO
ENSEIGNEMENT SUPERIEUR ET
UNIVERSITAIRE
UNIVERSITE DE GOMA

2. TRAVAIL PRATIQUE D’HYSTOLOGIE
GENEGALE

3. Travail réalisé par:
1) FURAHA WANZALUGHENDO GISELE
2) PALUKU TASIVIWE
3) BAKWETU HERMAN
4) LUKONGE BATECHI
5) DIOKO TEMA
6) BAHIZI AMULI
7) ATOCHA MUPENZI
8) KAGABO CHUKURU
9) JOEL BAYINGINGE
10) PROSPER ONGENYA
11) FURAHA BITWAYIKI
12) BUTU MUHIMA
13) KAHINDO KAHEHERO
14) BILANI ALLIANCE
15) FURAHA KASOKI

4. LES LYSOSOMES
des protéines synthétisées dans le RER, puis des paquets et
adresse ces protéines à des destinations appropriées. Nommé
après l' histologue Camillo Golgi qui l'a découvert en 1898, le
L'appareil de Golgi est composé de saccules membraneux lisses
contenant des enzymes pour ces fonctions (Figure 2-13).
Dans les cellules sécrétoires polarisées à extrémités apicale et basale,
comme des cellules caliciformes sécrétrices de mucus, l'appareil de Golgi occupe
une position caractéristique entre le noyau et le
membrane plasmique apicale .
Comme le montre la figure 2-13, l'appareil de Golgi
montre deux côtés distincts structurellement et fonctionnellement, qui
refléter le trafic complexe des vésicules dans les cellules. Matériel
se déplace des citernes de RER à l'appareil de Golgi en petit,
transporteurs membranaires appelés vésicules de transport qui
sont transportés le long des polymères cytosquelettiques par des protéines motrices.
Les vésicules de transport fusionnent avec le Golgi-récepteur
région , ou face cis . De l'autre côté du réseau de Golgi,
à sa face d'expédition ou trans , des saccules plus grands ou des vacuoles s'accumulent,
condenser , et générer d'autres vésicules qui portent terminé
produits protéiques à organelles loin du Golgi
(Figure 2-13).

5. La formation de vésicules de transport et de vésicules sécrétoires est
entraîné par l'assemblage de diverses protéines de l'enveloppe (y compris la clathrine),
qui régulent également le trafic vésiculaire vers, à travers et
au - delà de l'appareil de Golgi. Mouvement vers l'avant des vésicules
dans le réseau cis de Golgi de saccules est promu par le manteau
protéine COP-II , alors que les mouvements rétrogrades dans cette région
impliquer COP-I . D'autres protéines membranaires importantes pour
fusion de vésicules dirigée comprennent les golgins , qui interagissent avec
des enzymes ; les récepteurs et d'autres protéines de liaison; et fusionpromoting
protéines pour spécifier, organiser et façonner le Golgi
membranes . En fonction de leur teneur en protéines et de leur activité
de ces protéines, les vésicules sont dirigées vers différents Golgi
régions et ils donnent lieu à des lysosomes ou des vésicules sécrétoires
pour l' exocytose.
Comme indiqué à la figure 2-14, saccules de Golgi à séquentiel
les emplacements contiennent différentes enzymes à différents cis , médial , et
trans les niveaux. Les enzymes de l'appareil de Golgi sont importantes pour
glycosylation , sulfatation, phosphorylation et protéolyse limitée
des protéines. Parallèlement à ces activités, l'appareil de Golgi
initie l' emballage, la concentration et le stockage de la sécrétion
produits. Mouvements de protéines à travers le Golgi et le contrôledu traitement des protéines sont
des sujets de recherche active.

6. Granules de sécrétion
Provenant comme des vésicules de condensation dans l'appareil de Golgi,
les granules sécrétoires se trouvent dans les cellules qui stockent un produit
jusqu'à sa libération par exocytose est signalée par un métabolique, hormonal,
ou un message neuronal (sécrétion régulée). Les granules
sont entourés d'une membrane et contiennent un concentré
forme du produit sécrétoire (Figure 2-15). Le contenu de
certains granules sécrétoires peuvent être jusqu'à 200 fois plus concentrés
que ceux dans les citernes du RER. Granules sécrétoires
avec des contenus denses d'enzymes digestives sont également référés
en tant que granules de zymogène .

7. Lysosomes
Les lysosomes sont des sites de digestion intracellulaire et de renouvellement de
composants cellulaires . Lysosomes (Gr. Lyse , solution, + soma ,
corps ) sont des vésicules à membrane limitée qui contiennent environ 40
enzymes hydrolytiques différentes et sont particulièrement abondantes dans
cellules avec une grande activité phagocytaire (par exemple, macrophages, neutrophiles).
Bien que la nature et l'activité des enzymes lysosomales
varient en fonction du type de cellule, les plus courants sont acides
les hydrolyases telles que les protéases, les nucléases, les phosphatases, les phospholipases,
les sulfatases et la ß- glucuronidase. Comme on peut le voir
à partir de cette liste, les enzymes lysosomales sont capables de se briser
vers le bas la plupart des macromolécules.
Les lysosomes, qui sont généralement sphériques, ont un diamètre
de 0,05 à 0,5 μm et présente une granulométrie uniforme,
l' apparence dense aux électrons dans le TEM (Figure 2-16). Dans les macrophages
et les neutrophiles, les lysosomes sont légèrement plus grands et
visible au microscope optique, surtout après histochimie
coloration.

8. Les composants cytosoliques sont protégés de ces enzymes
par la membrane entourant les lysosomes et parce que le
les enzymes ont une activité optimale à un pH acide (~ 5,0). Tout
les enzymes lysosomales fuites sont pratiquement inactives au pH de
cytosol (~ 7.2) et inoffensif pour la cellule.
Les hydrolases lysosomales sont synthétisées et ségrégées
le RER, puis transféré à l'appareil de Golgi, où
les enzymes sont modifiées et emballées dans des vacuoles
cette forme de lysosomes. Le marqueur mannose-6-phosphate (M6P)
est ajouté par une phosphotransférase dans le cis Golgi seulement à la
Oligosaccharides N-liés des hydrolases destinés aux lysosomes.
Les récepteurs membranaires pour les protéines contenant M6P dans le
trans Le réseau de Golgi lie ensuite ces protéines et les détourne
de la voie sécrétoire pour la ségrégation en lysosomes.
Le matériel prélevé à l'extérieur de la cellule par endocytose est
digéré lorsque la membrane du phagosome ou pinocytose
vésicule fusionne avec un lysosome. Cela mélange l'endocytose
matériau avec les enzymes lysosomales et active le proton
pompes dans la membrane lysosomale qui acidifient le contenu,
permettant la digestion. Le composite, organite actif est maintenant
appelé secondaire ou hétérolysosome .

9. Hétérolysosomes sont généralement un peu plus grandes et ont un plus hétérogène
apparition dans le TEM en raison de la grande variété de matériaux
ils peuvent être en train de digérer (Figure 2-16c).
Au cours de cette digestion des macromolécules, les nutriments libérés
diffuser dans le cytosol à travers la membrane lysosomale.
Le matériel indigeste est retenu dans un petit reste vacuolaire
appelé un corps résiduel (Figure 2-17). Dans certains cas de longue durée
cellules (par exemple, les neurones, le muscle cardiaque), les corps résiduels peuvent accumuler
au fil du temps sous forme de granules de lipofuscine .
Outre la dégradation des macromolécules exogènes, les lysosomes
également fonctionner dans l'élimination de l'excès ou non fonctionnel
organites et autres structures cytoplasmiques dans un processus
appelé autophagie (Figures 2-17 et 2-18). Une membrane
des formes SER autour de l'organelle ou de la partie cytoplasmique
à éliminer, la production d' une automobile autophagosome (Gr., self,
+ phagein , à manger, + soma ). Ceux-ci fusionnent ensuite avec les lysosomes

11. L' appareil de Golgi est très plastique, morphologiquement
système complexe de vésicules membranaires et de citernes dans lesquelles
protéines et d'autres molécules faites dans le RER subissent encore
la modification et le tri en vésicules spécifiques destinées à différents
rôles dans la cellule.
a) Le TEM de l'appareil de Golgi a fourni des éléments de preuve
comment fonctionne cet organite. A gauche est une citerne de RER
et près de lui sont nombreuses petites vésicules à la face cis (CF) ,
ou le visage de réception, de l'appareil de Golgi, fusionnant avec le
premier de plusieurs citernes de Golgi aplaties. Au centre sont les
cisternae médiale aplatie, courbée et empilée caractéristique
du complexe. Les données cytologiques et moléculaires suggèrent que
d'autres vésicules de transport (TV) déplacent les protéines
les citernes jusqu'à la face trans (TF) , ou région d'expédition,
vésicules sécrétoires condensantes plus volumineuses (SV) et autres vacuoles
émerger pour porter les protéines modifiées ailleurs dans la cellule.
Formation et fusion des vésicules à travers l'appareil de Golgi
est contrôlée par des protéines membranaires spécifiques. X30 , 000 .
Encart: une petite région d'un appareil de Golgi dans une section de 1 μm
d' une cellule colorée à l'argent, démontrant des glycoprotéines abondantes
dans les citernes.

12. (b) Les aspects morphologiques de l'appareil de Golgi sont
révélé plus clairement par SEM, ce qui montre une tridimensionnelle
instantané de la région entre le RER et le
Compartiments à membrane de Golgi. Les cellules peuvent avoir plusieurs Golgi
appareils , chacun avec l'organisation générale montrée ici
et typiquement situé près du noyau de la cellule. 30,000X.
(c) L'emplacement de l'appareil de Golgi peut être clairement vu intact
cellules cultivées traitées par immunocytochimie en utilisant un anticorps
contre golgin-97 pour montrer les nombreux complexes de Golgi
vésicules (vertes), tout près du noyau, sur un fond
de microfilaments organisés en fibres de stress et colorés avec
phalloïdine fluorescente (violet). En raison de l'abondance de
les lipides dans ses nombreuses membranes, le Golgi
l'appareil est difficile à visualiser dans un système inclus en paraffine,
Sections colorées H & E. En développant des globules blancs avec
complexes de Golgi actifs , l'organite peut parfois être vu
comme une zone juxtanucléaire faible non colorée (parfois appelée
"Golgi fantôme") entouré de cytoplasme basophile.
( Figure 2-13b reproduite, avec permission, de Naguro T,
Iino A. Prog Clin Biol Res. 1989 ; 295: 250 ; Figure 2-13c, avec
permission , de Invitrogen .

14. Les principaux processus moléculaires sont listés à droite, avec
les principaux compartiments où ils se produisent. Dans le trans
Golgi
réseau , les protéines et les glycoprotéines se combinent avec
récepteurs qui les guident aux prochaines étapes vers leur
destinations .
qui digèrent le cytoplasme enfermé. L'autophagie est améliorée
cellules sécrétoires qui ont accumulé des granules de sécrétion en
excès
et en période de stress nutritionnel, comme la famine. Digéré
les produits des autophagosomes sont réutilisés dans le cytoplasme.

15. Les maladies classées comme des troubles de stockage lysosomale souches
de défauts dans une ou plusieurs des enzymes digestives
présent dans les lysosomes, généralement en raison d'une mutation
à une déficience de l'une des enzymes, ou des défauts dus à
traitement post-traductionnel défectueux . Dans les cellules qui doivent
digérer le substrat de l'enzyme manquante ou défectueuse
après autophagocytose, les lysosomes ne peuvent pas fonctionner
correctement . Ces cellules accumulent un grand secondaire
lysosomes ou corps résiduels remplis de l'indigeste
macromolécule . L'accumulation de ces vacuoles peut
finalement interférer avec la fonction normale des cellules ou des tissus,
produisant des symptômes de la maladie. Quelques lysosomaux
les maladies de stockage sont énumérées dans le tableau 2-3, avec l'enzyme
impliqué pour chacun et le tissu affecté.

17. Protéasomes
Les protéasomes sont de très petits complexes protéiques abondants
pas associé à la membrane, chacun environ la taille
de la petite sous-unité ribosomale. Ils fonctionnent pour se dégrader
des polypeptides dénaturés ou autrement non fonctionnels. Protéomes
supprime également les protéines dont la cellule n'a plus besoin
et fournir un mécanisme important pour restreindre l'activité
d'une protéine spécifique à une certaine fenêtre de temps. Tandis que
les lysosomes digèrent les organites ou les membranes par autophagie,
les protéasomes traitent principalement des protéines libres en tant
qu'individu
molécules.

18. Comme le montre la figure 2-9, le protéasome est cylindrique
structure composée de quatre anneaux empilés, composés chacun de sept
les protéines y compris les protéases. À chaque extrémité du cylindre est un règlement
particule qui contient de l'ATPase et reconnaît les protéines
avec des molécules d'ubiquitine attachées. L'ubiquitine est abondante
protéine cytosolique de 76 acides aminés trouvée dans toutes les cellules. Misfolded
ou des protéines dénaturées, ou des protéines avec des acides aminés oxydés,
sont reconnus par les chaperons et ciblés pour la destruction par
d'autres complexes enzymatiques qui conjuguent une molécule d'ubiquitine
à un résidu de lysine dans la protéine, suivie par la formation de
une chaîne multiubiquitine. Les protéines ubiquinées sont reconnues
par la particule régulatrice des protéasomes, dépliée par le
ATPase en utilisant l'énergie de l'ATP, puis translocation dans
le noyau de la structure cylindrique et dégradé en court
peptides. Ces peptides sont transférés au cytosol, et le
molécules d'ubiquitine sont libérées par les particules de régulation pour
réutilisation. Les peptides peuvent être décomposés en acides aminés
ou ils peuvent avoir d'autres destinations spécialisées, telles que
complexes présentant des antigènes de cellules activant un système immunitaire
réponse.
TEM d'une zone d'une cellule acineuse pancréatique montre de nombreux

19. granules sécrétoires matures et denses en électrons (S) en
association
avec des vacuoles condensantes (C) de l'appareil de Golgi (G) . Tel
granules forment comme le contenu des vacuoles Golgi deviennent
plus condensé. Dans les sections colorées H & E granules sécrétoires
sont souvent montrés comme des structures intensément éosinophiles,
qui dans
les cellules épithéliales polarisées sont concentrées dans la région
apicale
avant exocytose. X18 , 900 .

21. Les lysosomes sont des vésicules sphériques enfermées dans la membrane qui
fonctionnent comme des sites de digestion intracellulaire et sont particulièrement
nombreux dans les cellules actives après les différents types d'endocytose.
Les lysosomes ne sont pas bien représentés sur les cellules colorées par H & E
mais peut être visualisé par microscopie optique après coloration avec
bleu de toluidine.
(a) Les cellules d'un tubule rénal présentent de nombreux lysosomes violets
(L) dans la zone cytoplasmique entre les noyaux situés à la base
(N) et les extrémités apicales des cellules au centre du tubule.
En utilisant l'endocytose, ces cellules prennent activement de petites protéines
dans la lumière du tubule, dégrader les protéines dans les lysosomes,
puis relâchez les acides aminés résultants pour les réutiliser. X300.
(b) Les lysosomes des cellules endothéliales vasculaires cultivées peuvent être
spécifiquement coloré en utilisant des colorants fluorescents séquestrés dans
ces organites (verts), qui sont abondants autour du bleu
Noyau coloré par Hoechst. Les mitochondries (rouges) sont dispersées
parmi les lysosomes.
(c) Dans les lysosomes TEM (L) ont une caractéristique très

22. des citernes de Golgi (G) . Les lysosomes moins denses aux
électrons
représenter des hétérolysosomes dans lesquels la digestion
du contenu
est en cours. La cellule est un macrophage avec de
nombreux amende
extensions cytoplasmiques (flèches). X15 000.
( Figure 2-16b, avec la permission d'Invitrogen. )

23. TABLEAU

24. Maladie Enzyme défectueuse Organes principaux affectes
Syndrome de Hurler (MPS I) Squelette α -L-Iduronidase et système
nerveux
Syndrome de McArdle Muscle phosphorylase Muscles squelettiques
Tay-Sachs GM 2 -gangliosidase Système nerveux
Gaucher Glucocérébrosidase Foie et rate
Maladie des cellules I Phosphotransférase pour la formation de M6P
Squelette et système nerveux

26. La synthèse des enzymes lysosomales se produit dans le RER, avec
dans l'appareil de Golgi. L'endocytose produit des vésicules
qui fusionnent avec les endosomes avant de fusionner avec les lysosomes .
Les vacuoles phagocytaires (ou phagosomes) fusionnent avec les lysosomes
primaires
pour devenir des lysosomes secondaires (ou des hétérolysosomes),
dans lequel le matériel ingéré est dégradé. Les autophagosomes ,
tels que ceux représentés ici avec une mitochondrie dans le
processus de digestion, sont formés après non fonctionnel ou excédentaire
organites deviennent enfermés avec la membrane et le résultat
la structure fusionne avec un lysosome. Les produits de lysosomal
la digestion est recyclée dans le cytoplasme, mais les molécules indigestes
rester dans un corps résiduel enfermé dans la membrane , qui
peut s'accumuler dans les cellules à vie longue comme la lipofuscine. Dans
certaines cellules,
comme les ostéoclastes, les enzymes lysosomales sont sécrétées
une limité extracellulaire compartiment .

27. Bibliographie: jacquEira ‘S basic hystologY, HYSTOLOGIE HUMAINE