C’est une réaction d’agglutination permettant de mettre en évidence des Anti corps anti brucellique dans le sérum de sujet en présence de l’antigène brucellique qui est obtenu à partir de cultures smooth Brucella abortus inactivées par la chaleur et le phénol.

1. Abdsalah
Sérodiagnostic
de Wright
Par : S / Abdessemed

2. Abdsalah
Principe
• C’est une réaction d’agglutination
permettant de mettre en évidence des
Anti corps anti brucellique dans le
sérum de sujet en présence de
l’antigène brucellique qui est obtenu à
partir de cultures smooth Brucella
abortus inactivées par la chaleur et le
phénol.

3. Abdsalah
• Il est standardisé par rapport au sérum
anti-abortus international (comité
experts OMS sur la standardisation
biologiques 1954).
• Employé par la technique classique
d’agglutination en tubes, il permet de
déterminer le titre d’un sérum suspect.

4. Abdsalah
Réactifs
Antigène brucellique pour agglutination
• A diluer au 1/10 dans une solution de
NaCl à 8.5 g/l pour l’utilisation. Agiter le
flacon avant de pratiquer la dilution.
Sérums à tester
• Les sérums peuvent être inactivés par
chauffage de 30 minutes à 56° C. Cette
opération n’est cependant pas
indispensable.

5. Abdsalah
N° des tubes 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Solution saline
Sérum au1/5
Antigène dilué
-
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0,5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
-
0.5
Dilution finale 1/10 1/20 1/40 1/80 1/160 1/320 1/640 1/1280 1/2560
Témoin
antigène
Mode opératoire :
• Diluer le sérum au 1/5 dans une solution de NaCl à 8.5 g/l
• Pratiquer la galerie de dilutions suivante : (en ml)
Mettre les tubes à l’étuve à 37°C pendant 24 heures.

6. Abdsalah
Lecture
• Une demi-Heure après la sortie de
l’étuve, examiner les tubes sur un fond
sombre.
• Noter la plus haute
dilution de sérum qui
provoque
l’agglutination
complète de l’antigène
(liquide surnageant
limpide).

7. Abdsalah
Interprétation
• Si le taux d’agglutination atteint ou
dépasse le titre de 1/80 (dilution finale),
le malade peut être considéré comme
atteint d’une brucellose en cours
d’évolution.
• Un titre de 1/40 peut indiquer un
brucellose commençante ou sur son
déclin. Un nouveau sérodiagnostic,
pratiqué une à deux semaines plus tard ,
permettra de le confirmer.

8. Abdsalah
Causes d’erreurs :
• Phase pré-sérologique de la maladie :
dure généralement 10 à 15 jours. Elle
peut être plus prolongée, notamment
chez l’enfant.
• Augmentation transitoire du taux des
agglutinines chez certains sujets,
anciens positifs, à la suite d’une
infection ou d’une vaccination
quelconque.

9. Abdsalah
• Pratiquer un nouvel examen 15 jours
après.
 Phénomène de zone : assez fréquent au
cours des brucelloses.
• Le sérum faiblement dilué ne provoque
pas l’agglutination de l’antigène, alors
qu’elle se produit avec les plus fortes
dilutions.

10. Abdsalah
Présence d’anticorps incomplets
(bloquants) donnant lieu a des réactions
faussement négatives. Dans ce cas :
• 1.Mettre en évidence le blocage de
l’antigène : Ajouter une goutte d’un sérum
témoin positif (sérum anti abortus par
exemple) dans les premiers tubes.

11. Abdsalah
• Porter à nouveau à l’étuve à 37°C. En
présence d’anticorps bloquants, le sérum
positif n’agglutine pas l’antigène.
• 2.Pratiquer un test indirect de Coombs.

12. Abdsalah