SlideShare une entreprise Scribd logo
Elaboré par :   DELLAA Ahmed
Les biotechnologies végétales reposent principalement sur les
cultures in vitro.
Les applications sont nombreuses aujourd’hui tant dans le domaine de
  l’horticulture que dans celui de la recherche (notamment en amélioration
  des plantes), ou encore pour conserver la diversité variétale
  (Conservatoires) ou sauvegarder des espèces menacées.




Les techniques de culture in vitro
cherchent à contrôler les facteurs de
l’environnement          (température,
lumière, composition du milieu…) du
fragment de plante mis en culture
afin de l’orienter vers un programme
d’évolution déterminé.
Dès 1902, Haberland, un biologiste allemand, observe les potentialités
naturelles de la multiplication végétative (bouturage). Suite à ces travaux, il
énonce le premier grand principe qui ouvrira la voie de la micropropagation
des végétaux. Il s’agit du principe de la totipotence cellulaire.
En 1934, WHITE réussit la
culture de racines de tomate
sur un milieu contenant de l'
eau, des sels minéraux ,un
extrait de levure et du sucre
et une hormone végétale, la
seule     connue  à l’époque :
l’auxine.


En 1939, Gautheret obtient à partir
de tissu carotte, un amas de
cellules dédifférenciées : un cal.
On       peut cultiver      ce      cal
indéfiniment dans le temps. Avec
lui démarre vraiment la
culture in vitro ("dans du verre").
Il s’agit un ensemble de méthodes faisant intervenir d'une part l'asepsie
(stérilisation du matériel, désinfection des explants) :




      Autoclave: sert a la stérilisation des    Hotte a flux laminaire : travail
       Milieux de culture et du matériel.         en condition aseptiques.
d'autre part des conditions de culture parfaitement contrôlées (milieux de
culture définis pour chaque type de plante, température, lumière,
humidité,...).
Ces méthodes s'appliquent des organes ou des fragments d’organes :
les explants.




    - graine immature,
    - embryon,
    - ovule,
    - pollen,
    - bourgeon terminal,
    - bourgeon axillaire,
    - morceau de tige,
    - morceau de feuille,
    - de pétale de fleur,
    - etc....
L'explant doit trouver dans le milieu de culture tout ce dont il a besoin

pour survivre, se multiplier et éventuellement       régénérer un nouvel

individu, en fait, tout ce que la plante mère peut fournir :



 par les racines : les éléments minéraux, l’eau ;

 par les feuilles et grâce à la photosynthèse : des sucres, des

  vitamines et des acides aminés ;

les hormones, pour orienter la formation des organes.
A- LES ÉLÉMENTS MINÉRAUX :



                 Macroéléments (g.l-1)   Microéléments (mg.l-1)


                      (N), (Ca), (K),      (Fe), (Cu), (Zn),

                      (S), (Mg), (P)       (Mn), (Mo), (B)
                                           (Cl), (Co), (Ni),




 interviennent   en     grande              ne sont nécessaires à la
 quantité 6 éléments présents               plante       qu'en    faibles
 à des concentrations élevée                concentrations, leur rôle est
                                            essentiel.
B) LES ELEMENTS ORGANIQUES :



           sucres                  vitamines                acides aminés

 Dès lors, on ajoute        L'emploi de diverses         Il a parfois été observé
 des sucres, le plus        vitamines        favorise    que l'apport d'acides
 souvent               du   fréquemment             le   aminés favorisait la
 saccharose,         aux
                            développement        des     prolifération.
 milieux de culture
 pour fournir à l'explant
                            cultures in vitro
 une     source        de
 carbone.
C) LES REGULATEURS DE CROISSANCE.

     Appelés généralement             hormones végétales , ils induisent les
     phénomènes de croissance et de néoformation des organes.
     On trouve ces substances de croissance naturellement dans toutes
     les plantes.

     Les hormones utilisées sont principalement :               les auxines*,       les
     cytokinines*, car ces hormones sont capables d’orienter les
     explants vers la formation de nouveaux organes.


* Les cytokinines ont été découvertes par le      * En effet, en 1934, on découvre l’auxine (AIA) :
biais de la culture in vitro en 1956. Ce groupe   il faut 100 kg de maïs immature pour obtenir
de substances de croissance végétales est         500 mg d’AIA. Cette substance naturelle est
responsable des divisions cellulaires. Les        principalement synthétisée dans les parties
cytokinines sont principalement synthétisées      apicales et agit sur l’élongation des cellules
dans les parties racinaires jeunes.               donc sur la croissance des plantes.
Le rapport auxines / cytokinines détermine le devenir des tissus en culture.
Notion de balance hormonale


          Cytokinines                                bourgeons
          Auxine                              formation de racines
          [ ] égales               division cellules indifférenciées
En 1962, Murashige et Skoog étudient la multiplication végétative
du tabac et mettent au point le premier milieu de base pour la culture in
vitro. Ce milieu contient des sels minéraux, des sucres, des vitamines B,
des auxines et des cytokinines.
Ce milieu rend possible la culture et la prolifération de méristèmes
de tiges jusqu’alors réfractaires à la multiplication végétative in vitro.
4 étapes de culture



 La mise en œuvre



 Multiplication in vitro



   Enracinement




    Acclimatation
SAUVEGARDE        DES     ESPECES       EN    DANGER.
 EXEMPLE : LES PLANTES CARNIVORES.



MULTIPLICATION D’ESPECES DIFFICILES A OBTENIR
PAR DES METHODES TRADITIONNELLES.




Enfin, les cultures in vitro permettent de mettre plus
rapidement sur le marché les plants certifiés, les
nouvelles créations, ou encore d'assainir des collections.
Obtention de clones sélectionnés pour leur vigueur, leur caractères

intéressants (Chrysanthème, Fraisier, Bananier), leur rareté (Orchidées)

Assainissement des végétaux (plantes sans virus)

Production rapide et en masse, à n'importe quel moment de l'année

Raccourcissement des cycles de développement
Diminution des coûts de production (peu de personnel) et des dépenses

énergétiques ( réduction des surfaces de culture et éclairement réduit)

Facilité de stockage et conservation (au froid) de millions de plantes sur de

très petites surfaces, à l'état sain et à l'abri des contaminations
Production de substances biochimiques intéressantes pour

l'industrie
Culture de méristème
                      Meristème



                    Apex caulinaire                                                      Plantules
                                               Tige feuillée           Enracinement



                         Nœud
                                         Caulogenèse directe


                          Morphogenèse
                                               Embryogenèse                                Semences
                          directe              somatique directe                           artificielles


   Explants divers
                                                                               Caulogenèse
   (racines, tige, feuilles…)
                                                                               indirecte
                                                               cal

                         Morphogenèse                                                 Embryogenèse
                         indirecte                                                    somatique
                                     Callogenèse                                      indirecte
                                                         Suspensions
D’après Lindsey et Jones 1989                            cellulaires
Les embryons obtenus après la fécondation peuvent être prélevés, mis en
culture in vitro et donner un nouvel individu. Le sauvetage d'embryons
consiste à prélever un embryon précocement, pour le cultiver in vitro, soit
pour accélérer les cycles végétatifs, soit parce qu'il ne pourrait pas se
développer dans les tissus maternels, par exemple lorsqu'il résulte d'un
croisement interspécifique.
Le processus d'haplodiploïdisation comprend l'obtention de plantes
haploïdes à partir des organes porteurs des cellules
reproductrices, appelés gamétophyte mâle ou femelle, et le retour vers
la phase diploïde.
La propriété la plus importante des protoplastes
                           est leur capacité à fusionner entre eux lorsqu'ils
                           sont placés dans un milieu approprié. Cette
                           technique permet de surmonter les barrières
                           liées à la reproduction sexuée et de créer de
                           nouvelles combinaisons entre noyau et
                           cytoplasme.


Du fait de l'absence
de        la       paroi
pectocellulosique,
l'introduction directe
de l'ADN dans les
cellules est facilitée.
Une source de gènes étendue.
On peut franchir la barrière des
espèces, des genres et des
règnes. Ainsi, il est possible
d'introduire des caractères qu'il
ne serait pas possible
d'introduire par sélection
classique.



Le transfert d'un gène précis.
Elle permet de transférer le seul gène désiré et non de
transférer plusieurs gènes comme lors de la
reproduction sexuée.
Etape 1   Etape 2   Etape 3   Etape 4
Etape 1   Etape 2     Etape 3    Etape 4


Identifier, isoler, intégrer et multiplier
            un gène d'intérêt



La     première      étape   est
l'identification d'un caractère
que l'on veut introduire dans
la plante, comme par exemple
des caractères de qualité
nutritionnelle, la résistance à
certains insectes, à certaines
maladies,           à       des
herbicides, etc. Le gène
d'intérêt peut provenir de tout
organisme
vivant, plante, animal ou
bactérie puisque le code
génétique est universel.
Etape 1   Etape 2     Etape 3    Etape 4


Identifier, isoler, intégrer et multiplier
            un gène d'intérêt



Il doit ensuite être isolé de
l'organisme donneur. Il est
intégré dans une construction
génétique associant souvent
un gène marqueur. Ce gène
marqueur         permet      de
sélectionner les cellules qui
ont intégré le gène d'intérêt.
La construction est ensuite
multipliée (clonée) afin de
disposer      d'une     quantité
suffisante d'ADN pour son
introduction dans les cellules
végétales que l'on veut
          transformer.
Etape 1    Etape 2   Etape 3   Etape 4


          Transférer le gène



  La transformation biologique
Etape 1    Etape 2   Etape 3   Etape 4


          Transférer le gène



La transformation biologique.


La transformation génétique est
réalisée en mélangeant une
culture       d'une       souche
d'Agrobacterium     transformée,
mise en suspension en milieu
liquide, avec des explants de la
plante, on parle de coculture.
C'est au cours de cette étape
que la construction génétique
introduite dans la bactérie est
transférée dans le génome de la
plante.
Etape 1    Etape 2   Etape 3   Etape 4


          Transférer le gène



La transformation biologique.
 La coculture est lavée pour
 éliminer les agrobactéries. Il faut
 ensuite sélectionner les cellules
 qui       sont       effectivement
            transformées.
 Pour cela, on apporte dans la
 culture des explants un agent
 sélectif approprié : herbicide,
 antibiotique ... Seules les
 cellules végétales transformées,
 c'est-à-dire celles possédant et
 exprimant le gène marqueur de
 sélection, soit de résistance à un
 herbicide, soit de résistance à
 un antibiotique, pourront se
 développer.
Etape 1    Etape 2   Etape 3   Etape 4


          Transférer le gène



    Le transfert direct.


Des méthodes dites de
transfert direct utilisent des
moyens physiques ou
chimiques pour permettre la
pénétration
d'ADN, généralement sous
forme de plasmides dans une
cellule végétale. Les plus
utilisées sont la biolistique et le
transfert sur protoplastes.
Etape 1   Etape 2   Etape 3   Etape 4


   Régénérer et évaluer les plantes
           transformées


Après sélection des cellules
transformées, il faut régénérer les
nouvelles plantes transgéniques.
Les cellules transformées se
développent         d'abord       en
cals, larges amas de cellules
indifférenciées. Après quelques
semaines,      on      observe     le
développement de pousses. Elles
sont alors placées dans un
nouveau      milieu     de   culture
permettant le développement des
racines. Quand les racines sont
suffisamment développées, les
plantules sont repiquées en pot et
acclimatées          en       serre.
Etape 1     Etape 2         Etape 3        Etape 4


   Régénérer et évaluer les plantes
           transformées

Les cellules transformées est une
étape difficile à maîtriser. Aussi,
le génotype, le type de tissus et
les conditions de culture sont
choisis      en     fonction          de     leur
aptitude      à        la     régénération.
Les       plantes      régénérées           sont
ensuite analysées pour confirmer
l'insertion       de    la     construction
génétique dans leur génomea
régénération           in      vitro        des.
Etape 1   Etape 2   Etape 3   Etape 4


     Incorporer dans une variété
            commerciale




   Les    plantes   transformées
   obtenues sont soumises à
   des croisements contrôlés
   pour étudier les modalités
   de transmission du nouveau
   caractère à la descendance.
Culture in vitro des plantes
Culture in vitro des plantes
Culture in vitro des plantes
Culture in vitro des plantes
Culture in vitro des plantes

Contenu connexe

Tendances

la Culture cellulaire
 la Culture cellulaire la Culture cellulaire
la Culture cellulaire
abir
 
Exposée clonage
Exposée clonageExposée clonage
Exposée clonage
pdromur
 
Polycopié TP : Physiologie des Stress_Boucelha_2021.pdf
Polycopié TP : Physiologie des Stress_Boucelha_2021.pdfPolycopié TP : Physiologie des Stress_Boucelha_2021.pdf
Polycopié TP : Physiologie des Stress_Boucelha_2021.pdf
Lilya BOUCELHA
 
Physiologie des stress (1ére partie) Boucelha-Djebbar
Physiologie des stress (1ére partie) Boucelha-Djebbar Physiologie des stress (1ére partie) Boucelha-Djebbar
Physiologie des stress (1ére partie) Boucelha-Djebbar
Lilya BOUCELHA
 
Cours Biotech Master.pdf
Cours Biotech Master.pdfCours Biotech Master.pdf
Cours Biotech Master.pdf
MOHAMED SLIM
 
Rapport du tp ; tqpa groupe 2 2
Rapport du tp ; tqpa groupe 2 2Rapport du tp ; tqpa groupe 2 2
Rapport du tp ; tqpa groupe 2 2
souhaila ennakhli
 
Chapitre 01 amélioration génétique
Chapitre 01 amélioration génétiqueChapitre 01 amélioration génétique
Chapitre 01 amélioration génétique
SELLANI Halima
 
exposé de l'apprenant Abdellatif Lotfi "Le clonage"
exposé de l'apprenant Abdellatif Lotfi "Le clonage"exposé de l'apprenant Abdellatif Lotfi "Le clonage"
exposé de l'apprenant Abdellatif Lotfi "Le clonage"
Ahmedd Slaoui
 
Le clonage
Le clonageLe clonage
Le clonage
Jessica Andraos
 
Le séquençage haut débit: NGS, une révolution de la biologie moléculaire au s...
Le séquençage haut débit: NGS, une révolution de la biologie moléculaire au s...Le séquençage haut débit: NGS, une révolution de la biologie moléculaire au s...
Le séquençage haut débit: NGS, une révolution de la biologie moléculaire au s...
Pasteur_Tunis
 
Extraction de l'huile essentielle
Extraction de l'huile essentielle Extraction de l'huile essentielle
Extraction de l'huile essentielle
Nora Mahfouf
 
extraction et purification des enzymes
extraction et   purification des enzymesextraction et   purification des enzymes
extraction et purification des enzymes
chebira hadjer
 
La cellule de malassez
La cellule de malassezLa cellule de malassez
La cellule de malassez
S/Abdessemed
 
Rapport de stage; analyse microbiologique de l'eau
Rapport de stage; analyse microbiologique de l'eauRapport de stage; analyse microbiologique de l'eau
Rapport de stage; analyse microbiologique de l'eau
Elyakine Benmebkhout
 
Phytopathology 1 papier
Phytopathology 1 papierPhytopathology 1 papier
Phytopathology 1 papier
Faiza Hamini
 
Identification des bactéries "Galerie biohimique "API"
Identification  des bactéries "Galerie biohimique "API"Identification  des bactéries "Galerie biohimique "API"
Identification des bactéries "Galerie biohimique "API"
S/Abdessemed
 
Les Plantes Génétiquement Modifiées
Les Plantes Génétiquement ModifiéesLes Plantes Génétiquement Modifiées
Les Plantes Génétiquement Modifiées
GreenFacts
 
Valorisation du Marc de Café
Valorisation du Marc de CaféValorisation du Marc de Café
Valorisation du Marc de Café
Mariem Hamza
 
Mécanismes biochimiques et moléculaire de tolérance au stress hydrique chez l...
Mécanismes biochimiques et moléculaire de tolérance au stress hydrique chez l...Mécanismes biochimiques et moléculaire de tolérance au stress hydrique chez l...
Mécanismes biochimiques et moléculaire de tolérance au stress hydrique chez l...
Marouane Ghandor
 

Tendances (20)

La culture cellulaire
La culture cellulaireLa culture cellulaire
La culture cellulaire
 
la Culture cellulaire
 la Culture cellulaire la Culture cellulaire
la Culture cellulaire
 
Exposée clonage
Exposée clonageExposée clonage
Exposée clonage
 
Polycopié TP : Physiologie des Stress_Boucelha_2021.pdf
Polycopié TP : Physiologie des Stress_Boucelha_2021.pdfPolycopié TP : Physiologie des Stress_Boucelha_2021.pdf
Polycopié TP : Physiologie des Stress_Boucelha_2021.pdf
 
Physiologie des stress (1ére partie) Boucelha-Djebbar
Physiologie des stress (1ére partie) Boucelha-Djebbar Physiologie des stress (1ére partie) Boucelha-Djebbar
Physiologie des stress (1ére partie) Boucelha-Djebbar
 
Cours Biotech Master.pdf
Cours Biotech Master.pdfCours Biotech Master.pdf
Cours Biotech Master.pdf
 
Rapport du tp ; tqpa groupe 2 2
Rapport du tp ; tqpa groupe 2 2Rapport du tp ; tqpa groupe 2 2
Rapport du tp ; tqpa groupe 2 2
 
Chapitre 01 amélioration génétique
Chapitre 01 amélioration génétiqueChapitre 01 amélioration génétique
Chapitre 01 amélioration génétique
 
exposé de l'apprenant Abdellatif Lotfi "Le clonage"
exposé de l'apprenant Abdellatif Lotfi "Le clonage"exposé de l'apprenant Abdellatif Lotfi "Le clonage"
exposé de l'apprenant Abdellatif Lotfi "Le clonage"
 
Le clonage
Le clonageLe clonage
Le clonage
 
Le séquençage haut débit: NGS, une révolution de la biologie moléculaire au s...
Le séquençage haut débit: NGS, une révolution de la biologie moléculaire au s...Le séquençage haut débit: NGS, une révolution de la biologie moléculaire au s...
Le séquençage haut débit: NGS, une révolution de la biologie moléculaire au s...
 
Extraction de l'huile essentielle
Extraction de l'huile essentielle Extraction de l'huile essentielle
Extraction de l'huile essentielle
 
extraction et purification des enzymes
extraction et   purification des enzymesextraction et   purification des enzymes
extraction et purification des enzymes
 
La cellule de malassez
La cellule de malassezLa cellule de malassez
La cellule de malassez
 
Rapport de stage; analyse microbiologique de l'eau
Rapport de stage; analyse microbiologique de l'eauRapport de stage; analyse microbiologique de l'eau
Rapport de stage; analyse microbiologique de l'eau
 
Phytopathology 1 papier
Phytopathology 1 papierPhytopathology 1 papier
Phytopathology 1 papier
 
Identification des bactéries "Galerie biohimique "API"
Identification  des bactéries "Galerie biohimique "API"Identification  des bactéries "Galerie biohimique "API"
Identification des bactéries "Galerie biohimique "API"
 
Les Plantes Génétiquement Modifiées
Les Plantes Génétiquement ModifiéesLes Plantes Génétiquement Modifiées
Les Plantes Génétiquement Modifiées
 
Valorisation du Marc de Café
Valorisation du Marc de CaféValorisation du Marc de Café
Valorisation du Marc de Café
 
Mécanismes biochimiques et moléculaire de tolérance au stress hydrique chez l...
Mécanismes biochimiques et moléculaire de tolérance au stress hydrique chez l...Mécanismes biochimiques et moléculaire de tolérance au stress hydrique chez l...
Mécanismes biochimiques et moléculaire de tolérance au stress hydrique chez l...
 

Similaire à Culture in vitro des plantes

cultureinvitro-130225021317-phpapp02.pdf
cultureinvitro-130225021317-phpapp02.pdfcultureinvitro-130225021317-phpapp02.pdf
cultureinvitro-130225021317-phpapp02.pdf
HICHAM215202
 
cultureinvitro-130225021317-phpapp02.pptx
cultureinvitro-130225021317-phpapp02.pptxcultureinvitro-130225021317-phpapp02.pptx
cultureinvitro-130225021317-phpapp02.pptx
MounirSaggai1
 
Technique culture in vitro vegetale. Et biotechnologie végétale.pdf
Technique culture in vitro vegetale. Et biotechnologie végétale.pdfTechnique culture in vitro vegetale. Et biotechnologie végétale.pdf
Technique culture in vitro vegetale. Et biotechnologie végétale.pdf
nouairiissam
 
Green Aesthetic Thesis Defense Presentation (4).pptx
Green Aesthetic Thesis Defense Presentation (4).pptxGreen Aesthetic Thesis Defense Presentation (4).pptx
Green Aesthetic Thesis Defense Presentation (4).pptx
soumiabasry8
 
Le développement des plantes
Le développement des plantesLe développement des plantes
Le développement des plantes
SELLANI Halima
 
Esposé samuel sur la transgénèse.pdf
Esposé samuel sur la transgénèse.pdfEsposé samuel sur la transgénèse.pdf
Esposé samuel sur la transgénèse.pdf
Elisée Samuel SOHOUNGBLE
 
Esposé samuel sur la transgénèse.pdf
Esposé samuel sur la transgénèse.pdfEsposé samuel sur la transgénèse.pdf
Esposé samuel sur la transgénèse.pdf
Elisée Samuel SOHOUNGBLE
 
Esposé de Elisée le Jeune Informaticien sur La Transgénèse.pdf
Esposé de Elisée le Jeune Informaticien sur La Transgénèse.pdfEsposé de Elisée le Jeune Informaticien sur La Transgénèse.pdf
Esposé de Elisée le Jeune Informaticien sur La Transgénèse.pdf
Elisée Samuel SOHOUNGBLE
 
La reproduction des champignons
La reproduction des champignonsLa reproduction des champignons
La reproduction des champignonsmicro bio
 
Élucidation de quelques mécanismes, à l’échelle embryonnaire, impliqués dans ...
Élucidation de quelques mécanismes, à l’échelle embryonnaire, impliqués dans ...Élucidation de quelques mécanismes, à l’échelle embryonnaire, impliqués dans ...
Élucidation de quelques mécanismes, à l’échelle embryonnaire, impliqués dans ...
Lilya BOUCELHA
 
n_-_Copie[1].pptx
n_-_Copie[1].pptxn_-_Copie[1].pptx
n_-_Copie[1].pptx
Bamon4
 
Génie génétique
Génie génétiqueGénie génétique
Génie génétiquePierreComeau
 
Introduction a la mycologie medicale DR BENLARIBI IMANE HALIMA
Introduction a la mycologie medicale DR BENLARIBI IMANE HALIMAIntroduction a la mycologie medicale DR BENLARIBI IMANE HALIMA
Introduction a la mycologie medicale DR BENLARIBI IMANE HALIMA
IMANE HALIMA BENLARIBI
 
Phylogenie moleculaire des plasmodies
Phylogenie moleculaire des plasmodiesPhylogenie moleculaire des plasmodies
Phylogenie moleculaire des plasmodies
Institut Pasteur de Madagascar
 
Génomique généralités jd
Génomique généralités jdGénomique généralités jd
Génomique généralités jdjudec12
 
Microorganismes
MicroorganismesMicroorganismes
Microorganismes
Francisco de la Flor
 
Le chapitre 6: Reproduction Sexuée
Le chapitre 6: Reproduction SexuéeLe chapitre 6: Reproduction Sexuée
Le chapitre 6: Reproduction Sexuée
mllemarin38
 
BV cours.pdf
BV cours.pdfBV cours.pdf
BV cours.pdf
MOHAMED SLIM
 
Les OGM
Les OGMLes OGM
Les OGM
Ahmed Dellaa
 

Similaire à Culture in vitro des plantes (20)

cultureinvitro-130225021317-phpapp02.pdf
cultureinvitro-130225021317-phpapp02.pdfcultureinvitro-130225021317-phpapp02.pdf
cultureinvitro-130225021317-phpapp02.pdf
 
cultureinvitro-130225021317-phpapp02.pptx
cultureinvitro-130225021317-phpapp02.pptxcultureinvitro-130225021317-phpapp02.pptx
cultureinvitro-130225021317-phpapp02.pptx
 
Technique culture in vitro vegetale. Et biotechnologie végétale.pdf
Technique culture in vitro vegetale. Et biotechnologie végétale.pdfTechnique culture in vitro vegetale. Et biotechnologie végétale.pdf
Technique culture in vitro vegetale. Et biotechnologie végétale.pdf
 
Green Aesthetic Thesis Defense Presentation (4).pptx
Green Aesthetic Thesis Defense Presentation (4).pptxGreen Aesthetic Thesis Defense Presentation (4).pptx
Green Aesthetic Thesis Defense Presentation (4).pptx
 
Le développement des plantes
Le développement des plantesLe développement des plantes
Le développement des plantes
 
Esposé samuel sur la transgénèse.pdf
Esposé samuel sur la transgénèse.pdfEsposé samuel sur la transgénèse.pdf
Esposé samuel sur la transgénèse.pdf
 
Esposé samuel sur la transgénèse.pdf
Esposé samuel sur la transgénèse.pdfEsposé samuel sur la transgénèse.pdf
Esposé samuel sur la transgénèse.pdf
 
Esposé de Elisée le Jeune Informaticien sur La Transgénèse.pdf
Esposé de Elisée le Jeune Informaticien sur La Transgénèse.pdfEsposé de Elisée le Jeune Informaticien sur La Transgénèse.pdf
Esposé de Elisée le Jeune Informaticien sur La Transgénèse.pdf
 
La reproduction des champignons
La reproduction des champignonsLa reproduction des champignons
La reproduction des champignons
 
Élucidation de quelques mécanismes, à l’échelle embryonnaire, impliqués dans ...
Élucidation de quelques mécanismes, à l’échelle embryonnaire, impliqués dans ...Élucidation de quelques mécanismes, à l’échelle embryonnaire, impliqués dans ...
Élucidation de quelques mécanismes, à l’échelle embryonnaire, impliqués dans ...
 
n_-_Copie[1].pptx
n_-_Copie[1].pptxn_-_Copie[1].pptx
n_-_Copie[1].pptx
 
Génie génétique
Génie génétiqueGénie génétique
Génie génétique
 
Introduction a la mycologie medicale DR BENLARIBI IMANE HALIMA
Introduction a la mycologie medicale DR BENLARIBI IMANE HALIMAIntroduction a la mycologie medicale DR BENLARIBI IMANE HALIMA
Introduction a la mycologie medicale DR BENLARIBI IMANE HALIMA
 
Phylogenie moleculaire des plasmodies
Phylogenie moleculaire des plasmodiesPhylogenie moleculaire des plasmodies
Phylogenie moleculaire des plasmodies
 
Génomique généralités jd
Génomique généralités jdGénomique généralités jd
Génomique généralités jd
 
Microorganismes
MicroorganismesMicroorganismes
Microorganismes
 
Le chapitre 6: Reproduction Sexuée
Le chapitre 6: Reproduction SexuéeLe chapitre 6: Reproduction Sexuée
Le chapitre 6: Reproduction Sexuée
 
BV cours.pdf
BV cours.pdfBV cours.pdf
BV cours.pdf
 
Les OGM
Les OGMLes OGM
Les OGM
 
Les differents règnes
Les differents règnesLes differents règnes
Les differents règnes
 

Dernier

Cycle de Formation Théâtrale 2024 / 2025
Cycle de Formation Théâtrale 2024 / 2025Cycle de Formation Théâtrale 2024 / 2025
Cycle de Formation Théâtrale 2024 / 2025
Billy DEYLORD
 
Iris van Herpen. pptx
Iris            van        Herpen.     pptxIris            van        Herpen.     pptx
Iris van Herpen. pptx
Txaruka
 
Burkina Faso library newsletter May 2024
Burkina Faso library newsletter May 2024Burkina Faso library newsletter May 2024
Burkina Faso library newsletter May 2024
Friends of African Village Libraries
 
Formation M2i - Onboarding réussi - les clés pour intégrer efficacement vos n...
Formation M2i - Onboarding réussi - les clés pour intégrer efficacement vos n...Formation M2i - Onboarding réussi - les clés pour intégrer efficacement vos n...
Formation M2i - Onboarding réussi - les clés pour intégrer efficacement vos n...
M2i Formation
 
Iris van Herpen. pptx
Iris         van         Herpen.      pptxIris         van         Herpen.      pptx
Iris van Herpen. pptx
Txaruka
 
Iris van Herpen. pptx
Iris         van        Herpen.      pptxIris         van        Herpen.      pptx
Iris van Herpen. pptx
Txaruka
 
Newsletter SPW Agriculture en province du Luxembourg du 12-06-24
Newsletter SPW Agriculture en province du Luxembourg du 12-06-24Newsletter SPW Agriculture en province du Luxembourg du 12-06-24
Newsletter SPW Agriculture en province du Luxembourg du 12-06-24
BenotGeorges3
 
Formation Intelligence Artificielle pour dirigeants- IT6-DIGITALIX 24_opt OK_...
Formation Intelligence Artificielle pour dirigeants- IT6-DIGITALIX 24_opt OK_...Formation Intelligence Artificielle pour dirigeants- IT6-DIGITALIX 24_opt OK_...
Formation Intelligence Artificielle pour dirigeants- IT6-DIGITALIX 24_opt OK_...
cristionobedi
 

Dernier (8)

Cycle de Formation Théâtrale 2024 / 2025
Cycle de Formation Théâtrale 2024 / 2025Cycle de Formation Théâtrale 2024 / 2025
Cycle de Formation Théâtrale 2024 / 2025
 
Iris van Herpen. pptx
Iris            van        Herpen.     pptxIris            van        Herpen.     pptx
Iris van Herpen. pptx
 
Burkina Faso library newsletter May 2024
Burkina Faso library newsletter May 2024Burkina Faso library newsletter May 2024
Burkina Faso library newsletter May 2024
 
Formation M2i - Onboarding réussi - les clés pour intégrer efficacement vos n...
Formation M2i - Onboarding réussi - les clés pour intégrer efficacement vos n...Formation M2i - Onboarding réussi - les clés pour intégrer efficacement vos n...
Formation M2i - Onboarding réussi - les clés pour intégrer efficacement vos n...
 
Iris van Herpen. pptx
Iris         van         Herpen.      pptxIris         van         Herpen.      pptx
Iris van Herpen. pptx
 
Iris van Herpen. pptx
Iris         van        Herpen.      pptxIris         van        Herpen.      pptx
Iris van Herpen. pptx
 
Newsletter SPW Agriculture en province du Luxembourg du 12-06-24
Newsletter SPW Agriculture en province du Luxembourg du 12-06-24Newsletter SPW Agriculture en province du Luxembourg du 12-06-24
Newsletter SPW Agriculture en province du Luxembourg du 12-06-24
 
Formation Intelligence Artificielle pour dirigeants- IT6-DIGITALIX 24_opt OK_...
Formation Intelligence Artificielle pour dirigeants- IT6-DIGITALIX 24_opt OK_...Formation Intelligence Artificielle pour dirigeants- IT6-DIGITALIX 24_opt OK_...
Formation Intelligence Artificielle pour dirigeants- IT6-DIGITALIX 24_opt OK_...
 

Culture in vitro des plantes

  • 1. Elaboré par : DELLAA Ahmed
  • 2. Les biotechnologies végétales reposent principalement sur les cultures in vitro.
  • 3. Les applications sont nombreuses aujourd’hui tant dans le domaine de l’horticulture que dans celui de la recherche (notamment en amélioration des plantes), ou encore pour conserver la diversité variétale (Conservatoires) ou sauvegarder des espèces menacées. Les techniques de culture in vitro cherchent à contrôler les facteurs de l’environnement (température, lumière, composition du milieu…) du fragment de plante mis en culture afin de l’orienter vers un programme d’évolution déterminé.
  • 4. Dès 1902, Haberland, un biologiste allemand, observe les potentialités naturelles de la multiplication végétative (bouturage). Suite à ces travaux, il énonce le premier grand principe qui ouvrira la voie de la micropropagation des végétaux. Il s’agit du principe de la totipotence cellulaire.
  • 5. En 1934, WHITE réussit la culture de racines de tomate sur un milieu contenant de l' eau, des sels minéraux ,un extrait de levure et du sucre et une hormone végétale, la seule connue à l’époque : l’auxine. En 1939, Gautheret obtient à partir de tissu carotte, un amas de cellules dédifférenciées : un cal. On peut cultiver ce cal indéfiniment dans le temps. Avec lui démarre vraiment la culture in vitro ("dans du verre").
  • 6. Il s’agit un ensemble de méthodes faisant intervenir d'une part l'asepsie (stérilisation du matériel, désinfection des explants) : Autoclave: sert a la stérilisation des Hotte a flux laminaire : travail Milieux de culture et du matériel. en condition aseptiques.
  • 7. d'autre part des conditions de culture parfaitement contrôlées (milieux de culture définis pour chaque type de plante, température, lumière, humidité,...).
  • 8. Ces méthodes s'appliquent des organes ou des fragments d’organes : les explants. - graine immature, - embryon, - ovule, - pollen, - bourgeon terminal, - bourgeon axillaire, - morceau de tige, - morceau de feuille, - de pétale de fleur, - etc....
  • 9. L'explant doit trouver dans le milieu de culture tout ce dont il a besoin pour survivre, se multiplier et éventuellement régénérer un nouvel individu, en fait, tout ce que la plante mère peut fournir :  par les racines : les éléments minéraux, l’eau ;  par les feuilles et grâce à la photosynthèse : des sucres, des vitamines et des acides aminés ; les hormones, pour orienter la formation des organes.
  • 10. A- LES ÉLÉMENTS MINÉRAUX : Macroéléments (g.l-1) Microéléments (mg.l-1) (N), (Ca), (K), (Fe), (Cu), (Zn), (S), (Mg), (P) (Mn), (Mo), (B) (Cl), (Co), (Ni), interviennent en grande ne sont nécessaires à la quantité 6 éléments présents plante qu'en faibles à des concentrations élevée concentrations, leur rôle est essentiel.
  • 11. B) LES ELEMENTS ORGANIQUES : sucres vitamines acides aminés Dès lors, on ajoute L'emploi de diverses Il a parfois été observé des sucres, le plus vitamines favorise que l'apport d'acides souvent du fréquemment le aminés favorisait la saccharose, aux développement des prolifération. milieux de culture pour fournir à l'explant cultures in vitro une source de carbone.
  • 12. C) LES REGULATEURS DE CROISSANCE. Appelés généralement hormones végétales , ils induisent les phénomènes de croissance et de néoformation des organes. On trouve ces substances de croissance naturellement dans toutes les plantes. Les hormones utilisées sont principalement : les auxines*, les cytokinines*, car ces hormones sont capables d’orienter les explants vers la formation de nouveaux organes. * Les cytokinines ont été découvertes par le * En effet, en 1934, on découvre l’auxine (AIA) : biais de la culture in vitro en 1956. Ce groupe il faut 100 kg de maïs immature pour obtenir de substances de croissance végétales est 500 mg d’AIA. Cette substance naturelle est responsable des divisions cellulaires. Les principalement synthétisée dans les parties cytokinines sont principalement synthétisées apicales et agit sur l’élongation des cellules dans les parties racinaires jeunes. donc sur la croissance des plantes.
  • 13. Le rapport auxines / cytokinines détermine le devenir des tissus en culture. Notion de balance hormonale Cytokinines bourgeons Auxine formation de racines [ ] égales division cellules indifférenciées
  • 14. En 1962, Murashige et Skoog étudient la multiplication végétative du tabac et mettent au point le premier milieu de base pour la culture in vitro. Ce milieu contient des sels minéraux, des sucres, des vitamines B, des auxines et des cytokinines. Ce milieu rend possible la culture et la prolifération de méristèmes de tiges jusqu’alors réfractaires à la multiplication végétative in vitro.
  • 15. 4 étapes de culture La mise en œuvre Multiplication in vitro Enracinement Acclimatation
  • 16. SAUVEGARDE DES ESPECES EN DANGER. EXEMPLE : LES PLANTES CARNIVORES. MULTIPLICATION D’ESPECES DIFFICILES A OBTENIR PAR DES METHODES TRADITIONNELLES. Enfin, les cultures in vitro permettent de mettre plus rapidement sur le marché les plants certifiés, les nouvelles créations, ou encore d'assainir des collections.
  • 17. Obtention de clones sélectionnés pour leur vigueur, leur caractères intéressants (Chrysanthème, Fraisier, Bananier), leur rareté (Orchidées) Assainissement des végétaux (plantes sans virus) Production rapide et en masse, à n'importe quel moment de l'année Raccourcissement des cycles de développement
  • 18. Diminution des coûts de production (peu de personnel) et des dépenses énergétiques ( réduction des surfaces de culture et éclairement réduit) Facilité de stockage et conservation (au froid) de millions de plantes sur de très petites surfaces, à l'état sain et à l'abri des contaminations
  • 19. Production de substances biochimiques intéressantes pour l'industrie
  • 20.
  • 21. Culture de méristème Meristème Apex caulinaire Plantules Tige feuillée Enracinement Nœud Caulogenèse directe Morphogenèse Embryogenèse Semences directe somatique directe artificielles Explants divers Caulogenèse (racines, tige, feuilles…) indirecte cal Morphogenèse Embryogenèse indirecte somatique Callogenèse indirecte Suspensions D’après Lindsey et Jones 1989 cellulaires
  • 22. Les embryons obtenus après la fécondation peuvent être prélevés, mis en culture in vitro et donner un nouvel individu. Le sauvetage d'embryons consiste à prélever un embryon précocement, pour le cultiver in vitro, soit pour accélérer les cycles végétatifs, soit parce qu'il ne pourrait pas se développer dans les tissus maternels, par exemple lorsqu'il résulte d'un croisement interspécifique.
  • 23.
  • 24. Le processus d'haplodiploïdisation comprend l'obtention de plantes haploïdes à partir des organes porteurs des cellules reproductrices, appelés gamétophyte mâle ou femelle, et le retour vers la phase diploïde.
  • 25.
  • 26. La propriété la plus importante des protoplastes est leur capacité à fusionner entre eux lorsqu'ils sont placés dans un milieu approprié. Cette technique permet de surmonter les barrières liées à la reproduction sexuée et de créer de nouvelles combinaisons entre noyau et cytoplasme. Du fait de l'absence de la paroi pectocellulosique, l'introduction directe de l'ADN dans les cellules est facilitée.
  • 27. Une source de gènes étendue. On peut franchir la barrière des espèces, des genres et des règnes. Ainsi, il est possible d'introduire des caractères qu'il ne serait pas possible d'introduire par sélection classique. Le transfert d'un gène précis. Elle permet de transférer le seul gène désiré et non de transférer plusieurs gènes comme lors de la reproduction sexuée.
  • 28. Etape 1 Etape 2 Etape 3 Etape 4
  • 29. Etape 1 Etape 2 Etape 3 Etape 4 Identifier, isoler, intégrer et multiplier un gène d'intérêt La première étape est l'identification d'un caractère que l'on veut introduire dans la plante, comme par exemple des caractères de qualité nutritionnelle, la résistance à certains insectes, à certaines maladies, à des herbicides, etc. Le gène d'intérêt peut provenir de tout organisme vivant, plante, animal ou bactérie puisque le code génétique est universel.
  • 30. Etape 1 Etape 2 Etape 3 Etape 4 Identifier, isoler, intégrer et multiplier un gène d'intérêt Il doit ensuite être isolé de l'organisme donneur. Il est intégré dans une construction génétique associant souvent un gène marqueur. Ce gène marqueur permet de sélectionner les cellules qui ont intégré le gène d'intérêt. La construction est ensuite multipliée (clonée) afin de disposer d'une quantité suffisante d'ADN pour son introduction dans les cellules végétales que l'on veut transformer.
  • 31. Etape 1 Etape 2 Etape 3 Etape 4 Transférer le gène La transformation biologique
  • 32. Etape 1 Etape 2 Etape 3 Etape 4 Transférer le gène La transformation biologique. La transformation génétique est réalisée en mélangeant une culture d'une souche d'Agrobacterium transformée, mise en suspension en milieu liquide, avec des explants de la plante, on parle de coculture. C'est au cours de cette étape que la construction génétique introduite dans la bactérie est transférée dans le génome de la plante.
  • 33. Etape 1 Etape 2 Etape 3 Etape 4 Transférer le gène La transformation biologique. La coculture est lavée pour éliminer les agrobactéries. Il faut ensuite sélectionner les cellules qui sont effectivement transformées. Pour cela, on apporte dans la culture des explants un agent sélectif approprié : herbicide, antibiotique ... Seules les cellules végétales transformées, c'est-à-dire celles possédant et exprimant le gène marqueur de sélection, soit de résistance à un herbicide, soit de résistance à un antibiotique, pourront se développer.
  • 34. Etape 1 Etape 2 Etape 3 Etape 4 Transférer le gène Le transfert direct. Des méthodes dites de transfert direct utilisent des moyens physiques ou chimiques pour permettre la pénétration d'ADN, généralement sous forme de plasmides dans une cellule végétale. Les plus utilisées sont la biolistique et le transfert sur protoplastes.
  • 35. Etape 1 Etape 2 Etape 3 Etape 4 Régénérer et évaluer les plantes transformées Après sélection des cellules transformées, il faut régénérer les nouvelles plantes transgéniques. Les cellules transformées se développent d'abord en cals, larges amas de cellules indifférenciées. Après quelques semaines, on observe le développement de pousses. Elles sont alors placées dans un nouveau milieu de culture permettant le développement des racines. Quand les racines sont suffisamment développées, les plantules sont repiquées en pot et acclimatées en serre.
  • 36. Etape 1 Etape 2 Etape 3 Etape 4 Régénérer et évaluer les plantes transformées Les cellules transformées est une étape difficile à maîtriser. Aussi, le génotype, le type de tissus et les conditions de culture sont choisis en fonction de leur aptitude à la régénération. Les plantes régénérées sont ensuite analysées pour confirmer l'insertion de la construction génétique dans leur génomea régénération in vitro des.
  • 37. Etape 1 Etape 2 Etape 3 Etape 4 Incorporer dans une variété commerciale Les plantes transformées obtenues sont soumises à des croisements contrôlés pour étudier les modalités de transmission du nouveau caractère à la descendance.