LE SPERMOGRAMME
TOUKAM KAPTUE
MASTER BIOLOGIE CLINIQUE
option cytopathologie
24/06/2021
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GENERALITES (1)
• La stérilité reste un problème de santé publique
puisque 16 % des couples consulteront pour
obtenir une grossesse.
– Une cause masculine est retrouvée chez 40 % de ces
couples.
– Le diagnostic d’hypofertilité ou de stérilité masculine
ne sera posé qu’après différents examens
spermiologiques.
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GENERALITES (2)
• Parmi ceux-ci, le spermogramme et le spermocytogramme
constituent la clé de voûte du dispositif de diagnostic positif et
étiologique.
• Le spermogramme est l’analyse du sperme qui permet d’évaluer
les qualités morphologiques et fonctionnelles des
spermatozoïdes et de mesurer l’activité sécrétoire des différentes
glandes exocrines de l’appareil génital.
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GENERALITES (3)
• C’est un examen médical essentiel au cours duquel on analyse le sperme d'un
homme, généralement dans le cadre d'un bilan de stérilité d'un couple.
• Il est effectué tant par des technologistes médicaux exerçant en biologie
médicale ou en cytopathologie que par des cytologistes;
• L’échantillon de sperme est soumis à différentes analyses ayant pour but de le
quantifier et d’en évaluer la qualité des spermatozoïdes.
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GENERALITES (4)
• Les rapports produits par les laboratoires
biomédicaux varient selon l’établissement et ne
sont donc pas uniformes.
– Toutefois, Les renseignements qu’il fournit se doivent
d’être justes et représentatifs de l’échantillon obtenu.
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GENERALITES (5)
• L’interprétation des résultats déterminera le
pronostic et la conduite à tenir.
• Il est essentiel que cet examen soit effectué
dans des conditions rigoureuses :
– Dans sa phase pré analytique : conditions
spécifiques du recueil,
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GENERALITES (6)
– Dans sa phase analytique : précision des quantifications
(concentration des gamètes, classification des trajectoires de
mobilité, comptage des différents types d’anomalies cytologiques),
– Dans sa phase post analytique : interprétation des résultats,
orientation étiologique, suggestion des examens complémentaires
à mettre en œuvre et suggestion des indications possibles.
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LE SPERMATOZOIDE (1)
• La production de spermatozoïdes est assurée
après la puberté par les testicules au niveau des
tubes séminifères.
• La spermatogenèse s’effectue dans l’épithélium
séminal
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LE SPERMATOZOIDE (2)
• Elle aboutit à la formation , à partir de cellules
germinales somatiques, les spermatogonies, aux
spermatozoïdes : cellules haploïdes pourvues
d’une tête de petite taille contenant le noyau et
l’acrosome et d’une queue, mobile, épaisse dans sa
partie proximale et effilée dans sa partie terminale.
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LE SPERMATOZOIDE (3)
Ultra structure du spermatozoïde :
– En coupe longitudinale :
• la tête du spermatozoïde a une forme de poire.
• Le noyau occupe la partie postérieure et large de la tête.
• Sa chromatine est dense.
• L’acrosome forme un sac recouvrant les deux tiers
antérieurs du noyau.
• Il est limité par une membrane propre et comporte deux
parties d’épaisseur inégale. Le contenu acrosomal est
homogène et dense.
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LE SPERMATOZOIDE (4)
• La queue commence par la pièce intermédiaire qui comporte
la gaine mitochondriale, entourant l’axonème et les fibres
denses.
• Dans la partie principale du flagelle, l’ axonème est entouré
d’une gaine fibreuse dense aux électrons qui s’arrête dans la
partie terminale; celle-ci renferme seulement l’axonème,
réduit au niveau de l’extrémité à quelques microtubules isolés
.
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LA SPERMATOGENESE (1)
• La spermatogenèse comporte :
– Une étape de multiplication des spermatogonies
situées à la partie basale de l’épithélium séminal.
– Ces cellules donnent naissance après mitose aux
spermatocytes I qui doublent leur capital d’ADN et
entrent en prophase de la première division
réductionnelle de la méiose.
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LA SPERMATOGENESE (2)
• Celle-ci aboutit à la formation des spermatocytes II, de
taille plus faible et qui donnent rapidement à l’issue de
la deuxième division équationnelle, deux cellules
rondes et haploïdes, les spermatides.
– Les spermatides, situées dans la partie haute de
l’épithélium séminal se différencient en
spermatozoïdes au cours de la spermiogenèse.
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LA SPERMATOGENESE (3)
• La spermiogenèse est le processus de
différenciation des spermatides qui
correspond à un ensemble de modifications
cellulaires sans division cellulaire, aboutissant
à la mise en place dans la cellule d’une tête et
d’un flagelle.
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LA SPERMATOGENESE (4)
• Elle est habituellement résumée en cinq
phases qui chevauchent dans le temps:
- Formation de l’acrosome à partir du Golgi.
- Formation du flagelle à partir du centre cellulaire.
- Formation du manchon mitochondrial.
- Elimination des restes cytoplasmiques.
- Condensation du noyau
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Etapes de la spermiogenèse
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CONTRÔLE ENDOCRINIEN DE LA SPERMATOGENÈSE (1)
• Le "chef d'orchestre" de la fonction testiculaire
est l’axe hypothalamohypophysaire : c'est grâce
à l’augmentation de la production pulsatile en
période pubertaire du GnRH (Gonadotropin
Releasing Hormone) par l'hypothalamus, que
s'installe la fonction testiculaire.
– La GnRH provoque la sécrétion pulsatile de deux
hormones : la FSH et la LH par l’hypophyse.
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CONTRÔLE ENDOCRINIEN DE LA SPERMATOGENÈSE (2)
• La FSH joue un rôle dans la croissance
testiculaire et le déclenchement de la
spermatogenèse à la puberté, ainsi que dans la
stimulation de l'activité mitotique de l'épithélium
séminal.
• La LH stimule la synthèse d'hormones
androgènes, notamment la testostérone
élaborée par les cellules interstitielles, et agit sur
l'apparition des caractères sexuels secondaires.
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CONTRÔLE ENDOCRINIEN DE LA SPERMATOGENÈSE (3)
• Les androgènes, notamment la testostérone, élaborés pas les
cellules interstitielles de Leydig diffusent dans l’épithélium
séminal, contrôlent l'activité des cellules de Sertoli et stimulent la
spermatogenèse,
• L’inhibine produite par la cellule de Sertoli exerce un
rétrocontrôle négatif sur l’hypophyse et freine la synthèse de FSH.
• L’activine a un effet inverse.
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BUT DU SPERMOGRAMME (1)
• L'examen vise à :
– Quantifier les spermatozoïdes normaux et
anormaux,
– Étudier leur mouvement et leur morphologie,
– Doser différentes substances que le sperme doit
normalement contenir.
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PRINCIPE DU SPERMOGRAMME (1)
• Le spermogramme est un examen d’analyse
médical qui comporte deux principales étapes :
– une étape d’examen macroscopique qui consiste à
mesurer le volume de l’éjaculat et à évaluer certains
paramètres physiques et chimiques du sperme (pH,
aspect, odeur et viscosité).
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PRINCIPE DU SPERMOGRAMME (2)
• Une étape d’examen microscopique qui
étudie les paramètres cyto-morphologiques
et fonctionnels du sperme :
– Il permet d’évaluer :
• la concentration et le nombre de spermatozoïdes,
• la concentration des cellules rondes;
• il donne une appréciation du pourcentage de formes
mobiles et vivantes
• Il étudie la morphologie des spermatozoïdes.
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PRINCIPE DU SPERMOGRAMME (3)
– Cette dernière étape correspond au
spermocytogramme qui constitue une étape très
importante et difficile du spermogramme. Elle est
effectuée sur un frottis de sperme coloré.
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LE SPERME EJACULE (1)
• Le sperme est un liquide complexe qui se constitue
de manière extemporanée au cours de l’éjaculation.
• Il se compose d’une phase cellulaire (10%), les
spermatozoïdes et d’une phase liquide (90%), le
plasma séminal.
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LE SPERME EJACULE (2)
• Celui-ci est principalement constitué des sécrétions des
vésicules séminales, de la prostate mais aussi des testicules et
épididymes.
• Il a une composition biochimique riche et complexe. Certains
composants constituent des marqueurs des fonctions
glandulaires et peuvent être dosés au cours de l’exploration
biochimique du sperme.
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CINETIQUE DU SPERME EJACULE
• Immédiatement après l’éjaculation, le liquide séminal
apparaît comme un liquide visqueux, dense, blanchâtre,
d’aspect floconneux dont le pH varie entre 7,2 et 8.
• Dans les 10 à 20 minutes suivant l’éjaculation, le sperme se
liquéfie sous l’action de plusieurs enzymes protéolytiques
d’origine testiculaire et prostatique (spermine).
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LE SPERME EJACULE (4)
• En plus des spermatozoïdes, le sperme comporte aussi :
– Une faible quantité de cellules rondes correspondant à des
cellules immatures de la lignée germinale,
– Quelques cellules épithéliales desquamées à partir des voies
excrétrices,
– Des fragments cellulaires
– Et un nombre variable de polynucléaires.
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LE SPERME EJACULE (5)
• Les spermatozoïdes libérés des tubes
séminifères sont immobiles et non fécondants.
• Des échanges complexes de glycoprotéines à
la surface des spermatozoïdes, tout au long du
trajet épididymaire, permettent aux cellules
d'acquérir leur mobilité et leur capacité de
féconder l'ovocyte (capacitation ).
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LE SPERME EJACULE (6)
• Le plasma séminal est constitué :
– des sécrétions épididymo-déférentielles (10 % du
volume de l'éjaculat),
– des sécrétions des glandes annexes :
• prostate (15 à 30 %)
• et vésicules séminales (50 à 80 %).
• Des marqueurs biochimiques du sperme peuvent
aider à préciser le niveau de l'obstacle sur les voies
excrétrices
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PROCEDURE DU SPERMOGRAMME (1)
• 1. Conditions :
– Le spermogramme se fait après une période
d'abstinence sexuelle de trois à cinq jours (période
qui doit être connue et rappelée dans le rapport,
car elle peut expliquer un volume moindre de
sperme et une moindre densité de spermatozoïdes)
• Les bains chauds sont à éviter dans ce laps de temps.
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PROCEDURE DU SPERMOGRAMME (2)
– Pour réduire le délai entre le recueil et l'analyse,
on recueille généralement le sperme du sujet
directement au laboratoire, où il se masturbe dans
une pièce prévue à cet effet, après s'être
soigneusement lavé les mains et le pénis.
– Le sujet ne doit pas être atteint d'une maladie
infectieuse ou être en cours de traitement
antibiotique.
– le recueil doit avoir lieu après miction;
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PROCEDURE DU SPERMOGRAMME (3)
– En cas de tabagisme ou d’alcoolisme, un arrêt
temporaire est recommandé lors de l’intervalle
d’abstinence de même que le café et les autres
excitants (thé, kola, …) ;
– Il peut être nécessaire de recourir à des revues ou
à la partenaire du patient
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PROCEDURE DU SPERMOGRAMME (4)
2. Accueil du patient :
À l’accueil du patient, certains détails doivent
être vérifiés :
• S’assurer que l’échantillon est bien identifié;
• Vérifier si la collecte de l’échantillon de sperme a
été effectuée à l’hôpital ou au domicile (l’échantillon
doit être maintenu à la température du corps (37 ºC)
durant le transport jusqu’au laboratoire);
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PROCEDURE DU SPERMOGRAMME (5)
• Inscrire la date et l’heure de la réception de l’échantillon (si
l’échantillon a été prélevé au domicile, le patient doit se
rendre dans l’heure suivant l’éjaculation);
• Le spécimen doit être recueilli après un minimum de
quarante-huit heures d’abstinence sans toutefois dépasser
7 jours.
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PARAMETRES D’ANALYSE DU SPERMOGRAMME
(1)
• 1. La liquéfaction
– Avant de commencer l’analyse du sperme, une période de temps
doit être accordée pour la liquéfaction. La durée normale de
liquéfaction est de 30 minutes. Si celle-ci n’est pas réalisée à
l’intérieur de ce délai, on dira qu’elle est lente plutôt que normale.
• 2.Le volume
– À l’aide d’une pipette ou d’un cylindre gradué, le volume de
l’éjaculat est mesuré.
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PARAMETRES D’ANALYSE DU SPERMOGRAMME
(2)
• 3.La viscosité
– Celle-ci s’évalue selon 4 niveaux à l’aide d’une
pipette :
• Viscosité normale : si l’échantillon se sépare bien goutte
à goutte;
• Viscosité 1 : si l’échantillon forme un filet liquide entre
chaque goutte;
• Viscosité 2 : si l’échantillon est suffisamment visqueux
pour que le filet soit continu;
• Viscosité 3 : si l’échantillon est tellement visqueux qu’il
ne peut s’écouler par la pipette.
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PARAMETRES D’ANALYSE DU SPERMOGRAMME
(3)
• 4.Le pH
– Celui-ci est mesuré à l’aide de papier pH.
• 5.La mobilité
– Pour évaluer la mobilité, un examen à l’état frais doit
être effectué : placer 10 microlitres (μL) de sperme
entre une lame et une lamelle.
– Un décompte est réalisé en visualisant au moins 200
spermatozoïdes (2 X 100) et l’évaluation des grades se
fait comme suit :
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PARAMETRES D’ANALYSE DU SPERMOGRAMME
(4)
– Grade A : progression rapide : les spermatozoïdes bougent
bien en ligne droite à travers le champ du microscope;
– Grade B : progression lente : les spermatozoïdes bougent
lentement, en zigzaguant;
– Grade C : agitation sans progression : les spermatozoïdes
bougent mais n’avancent pas (seules les flagelles bougent);
– Grade D : immobiles : les spermatozoïdes son
complètement immobiles.
– Note : il est préférable d’effectuer la lecture à plus de 5 mm
du rebord de la lamelle.
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PARAMETRES D’ANALYSE DU SPERMOGRAMME
(5)
6. La viabilité - Coloration Éosine - Nigrosine
– a. généralités :
• La vitalité des spermatozoïdes est évaluée par une
technique basée sur l’exclusion de colorants par les
spermatozoïdes vivants, le test de Williams à l’éosine-
nigrosine.
– Les spermatozoïdes morts subissent des modifications
membranaires se traduisant par une augmentation de la
perméabilité aux colorants, tel que l’éosine.
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PARAMETRES D’ANALYSE DU SPERMOGRAMME
(6)
b. Principe de la technique de Williams :
– Perméabilité des cellules mortes à certains
colorants comme l’éosine (membranes plasmiques
lésées) et la sélectivité membranaire des cellules
vivantes.
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PARAMETRES D’ANALYSE DU SPERMOGRAMME
(7)
• De plus, ce test nous donne l’occasion de faire
un contrôle interne en ce qui a trait à
l’estimation de la mobilité.
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PARAMETRES D’ANALYSE DU SPERMOGRAMME
(8)
– C. procédure :
• Ajouter 2 gouttes de sperme.
• Ajouter 2 gouttes de solution aqueuse à l’éosine 1
%,
• Bien mélanger au vortex.
• Attendre 30 secondes.
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PARAMETRES D’ANALYSE DU SPERMOGRAMME
(9)
•Ajouter 2 gouttes de solution aqueuse à la
Nigrosine 10 %,
•Bien mélanger au vortex.
–Déposer une goutte entre une lame et une lamelle.
–Faire un décompte de 200 spermatozoïdes à 40 X.
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PARAMETRES D’ANALYSE DU SPERMOGRAMME
(10)
– d. Résultats :
• Déposer une goutte entre une lame et une lamelle.
• Faire un décompte de 200 spermatozoïdes à 40 X.
• Celle-ci nous permet d’évaluer, en faisant un
décompte de 200 spermatozoïdes, le pourcentage
de spermatozoïdes vivants : vitalité
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PARAMETRES D’ANALYSE DU SPERMOGRAMME
(11)
– Ceux en blanc ont une membrane qui n’est pas lésée,
c’est-à-dire qu’ils résistent à la coloration à l’éosine,
– tandis que ceux en rouge ont une membrane lésée
permettant à l’éosine de pénétrer à l’intérieur de la
cellule.
• Quant à la Nigrosine, elle sert seulement à colorer le fond
du frottis.
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Spermatozoïdes morts (tête
rouge) et vivants (tête incolore)
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PARAMETRES D’ANALYSE DU SPERMOGRAMME
(13)
• 7. La numération
– Cette étape permet de déterminer la concentration
de spermatozoïdes dans l’éjaculat à analyser. Les
résultats s’expriment en milliard/L (SI).
– Voici un tableau pouvant nous aider à choisir la
bonne dilution pour effectuer la numération :
– *Nbre : nombre de spermatozoïdes comptés dans
les 5 carrés de l’hématimètre (4 coins + centre). Les
résultats s’expriment en milliard de
spermatozoïdes/L.
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Type
d’échantillons
dilution Volume de
diluant
Volume de
sperme
Facteur
ajustement
Oligospermie
sévère
--- --- Goutte
échantillon
pure
N*/20
Oligospermie 1/10 180 ul 20 ul Nbre/2
Normal 1/20 190 ul 10 ul Nbre
Décompte
élevé
(donneur)
1/40 390 ul 10 ul Nbre X 2
195 ul 5 ul
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PARAMETRES D’ANALYSE DU
SPERMOGRAMME (14)
– Cette procédure est proposée à titre d’exemple :
• Avec une dilution de 1 sur 20 (10 μL de sperme avec
190 μL de liquide immobilisant),
– On compte en examinant les 4 coins + le centre du carré E
(voir le schéma de l’hématimètre);
• Étaler la dilution sur un hématimètre des 2 côtés et
laisser reposer dans une chambre humide (boîte de
Pétri) 10 minutes avant d’en faire la lecture;
• Le nombre de spermatozoïdes comptés X 1 000 000
nous donne directement le nombre en milliard par litre
(voir la formule).
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LIQUIDES UTILISES POUR LA NUMERATION
• Pour effectuer une numération, on utilise un liquide
immobilisant les spermatozoïdes. En voici quelques
exemples :
– • Liquide maison :
• 15 g de bicarbonate de sodium
• 3 g de phénol
• 300 ml d’eau distillée
– • Liquide de Dacie :
• 10 ml de formol à 40 %
• 990 ml de citrate de sodium à 3 %
– • Eau très froide
24/01/2025 54
PARAMETRES D’ANALYSES DU SPERMOGRAMME
(16)
• La morphologie/ le spermocytogramme :
– a. généralités :
• La morphologie des spermatozoïdes est évaluée après
coloration d’un frottis et examen de celui-ci au
microscope optique le plus souvent.
• • Faire un frottis sur une lame chargée positivement
(évite le décollement et la contamination);
24/01/2025 55
PARAMETRES D’ANALYSES DU
SPERMOGRAMME (17)
• Buts :
– L’observation microscopique à l’objectif
x100,permet d’analyser les différentes parties du
spermatozoïdes et de distinguer les spermatozoïdes
de forme normale des spermatozoïdes présentant
une ou plusieurs anomalies morphologiques au
niveau de la tête et/ou au niveau du flagelle.
24/01/2025 56
PARAMETRES D’ANALYSES DU
SPERMOGRAMME (18)
• Cette observation microscopique du frottis
permet également d’identifier les cellules
germinales immatures (spermatogonies,
spermatocytes et spermatides) et les cellules
de défenses (polynucléaires, lymphocytes et
monocytes).
24/01/2025 57
PARAMETRES D’ANALYSES DU SPERMOGRAMME
(19)
• b.procédure :
– Autant que possible, une normalisation de la
quantité de sperme utilisée est préférable pour
faire le frottis : exemple : 10 μL de sperme étalé en
frottis et fixé au « cytospray »;
– Différentes colorations peuvent être utilisées mais
les répandues sont le papanicolaou et le schorr
24/01/2025 58
PARAMETRES D’ANALYSES DU SPERMOGRAMME
(20)
– • Différentes colorations peuvent être utilisées:
Hématoxyline et Éosine, Papanicolaou+++ ou Diff-
Quick;
– • Un décompte d’au moins 200 spermatozoïdes
est effectué avant d’établir une moyenne. Les
résultats sont exprimés en pourcentage (%).
24/01/2025 59
PARAMETRES D’ANALYSES DU SPERMOGRAMME
(13)
1.1.La classification de Kruger
• (La classification stricte de Kruger es t recommandée par l’Organisation
mondiale de la Santé)
• La classification de Kruger recense une seule anomalie par spermatozoïde.
• L’anomalie est recensée par ordre d’importance comme suit :
– • ACROSOME
– • TÊTE
– • PIÈCE INTERMÉDIAIRE
– • FLAGELLE
• Aussitôt qu’une anomalie est recensée, le spermatozoïde est directement
classé dans les « anormaux ».
• Les évaluations de la morphologie selon Kruger sont beaucoup plus
strictes; on parle
24/01/2025 60
PARAMETRES D’ANALYSES DU SPERMOGRAMME
(14)
• de morphologie normale à partir de 15 % lors d’évaluation de la morphologie sur
frottis coloré.
• Bien que la classification des spermatozoïdes « normaux » comparativement à «
anormaux » prime, nous pouvons, si l’on veut, détailler les anomalies, par exemple :
• • 22 % de spermatozoïdes normaux
• • 12 % d’acrosomes absents
• • 5 % de têtes allongées
• • 17 % de microcéphales
• • 29 % de têtes amorphes
• • 3 % de reste cytoplasmique
• • 12 % de flagelles enroulés
• Total : 100 %
• S'il y a une prédominance d’une anomalie en particulier, il est important de la noter.
Par exemple, on peut noter une prédominance de spermatozoïdes à têtes rondes
(sans acrosome);
24/01/2025 61
PARAMETRES D’ANALYSES DU SPERMOGRAMME
(15)
• Les principales anomalies recensées sont les
suivantes :
– ANOMALIES DE LA TÊTE :
• Acrosome anormal, absent, vacuolé
• Tête allongée, amincie, microcéphale,
macrocéphale ,multiple
– ANOMALIES DE LA PIÈCE INTERMÉDIAIRE :
• Reste cytoplasmique (extrusion)
• Pièce grêle
• Pièce angulée
24/01/2025 62
PARAMETRES D’ANALYSES DU
SPERMOGRAMME (16)
• ANOMALIES DU FLAGELLE :
– Absent
– Écourté
– De calibre irrégulier
– Enroulé
– Multiple
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PARAMETRES D’ANALYSES DU
SPERMOGRAMME (17)
• En complément, l'observateur évalue :
– le taux de flagelles isolés et/ou de spermatozoïdes
en lyse
– le taux de cellules de la lignée,
– le taux d'autres cellules (cellules du tractus uro-
génital
– le taux de fragments cellulaires.
– d'autres anomalies : présence de globules rouges
ou résidus sanguins
24/01/2025 64
•NORMES OMS
• DU
•SPERMOGRAMME
24/01/2025 65
INTERPRETATION D’UN SPERMOGRAMME (1)
• Le spermogramme tient la première place dans
le bilan d'une infertilité masculine.
• Mais cet examen doit être interprété de façon
critique :
– Il faut prendre en considération plusieurs paramètres
d’analyse du sperme :
• Conditions de collecte de l’échantillon,
• Imperfection des mesures,
• Mais aussi ceux qui sont liés aux fluctuations
physiologiques du sperme comme :
24/01/2025 66
INTERPRETATION D’UN SPERMOGRAMME (2)
– le rythme des éjaculations,
– la saison,
– l’âge,
– la médication,
– le stress,
– le tabagisme
– et l’alcool,
– …
24/01/2025 67
INTERPRETATION D’UN SPERMOGRAMME (3)
• En effet, l'extrême variabilité des paramètres,
à la fois inter et intra individuelle, rend difficile
l'établissement de critères précis de
normalité.
• Toutefois, les normes de références sont celles
établies par l’OMS
24/01/2025 68
INTERPRETATION D’UN SPERMOGRAMME (4)
• il a été montré que la fécondance est
étroitement corrélée à la mobilité et au
pourcentage des atypies cellulaires.
• Une affection même bénigne et de courte
durée, telle un épisode grippal, est susceptible
de retentir sur les caractéristiques du sperme
émis 2 à 3 mois plus tard en raison de la durée
de 74 jours du cycle de la spermatogénèse.
24/01/2025 69
INTERPRETATION D’UN SPERMOGRAMME (5)
• Enfin, il est parfaitement établi que même
dans des conditions strictement
physiologiques, les caractéristiques du sperme
sont soumises à d'importantes fluctuations.
• Lorsqu'il apparaît pathologique, le
spermogramme doit être recontrôlé 3 mois
plus tard.
24/01/2025 70
QUELQUES VARIABILITES NON PATHOLOGIQUES
DU SPERMOGRAMME (1)
• Abstinence sexuelle (délai : 3-5j)
– • Trop court : Numération - Volume
– • Trop long : tératospermie - asthénospermie –
nécrospermie
• Perturbation temporaire de la spermatogenèse
– (Fièvre, maladie aiguë, chirurgie)
• Spermatogenèse : 74 jours
• Trajets dans les voies excrétrices : 1-12 jours
24/01/2025 71
QUELQUES VARIABILITES NON PATHOLOGIQUES
DU SPERMOGRAMME (2)
• Recueil du sperme
– • Si manque le début : Oligo ou Azoospermie
– • Si manque la fin : augmentation relative de la concentration
– • Masturbation au Laboratoire +++
– • Masturbation à domicile : délai - température ambiante
– • Coït avec préservatif : Préservatif non toxique
• Variabilité entre les laboratoires
– • Sperme : liquide non homogène
– • Paramètres "Subjectifs"
• Problème de l'établissement des normes
– • Chevauchement des valeurs pour des hommes féconds et
• des hommes inféconds
24/01/2025 72
Tête allongée
Spermatozoïde normal Tête
microcéphale
macrocéphalie
24/01/2025 73
Tête double
Acrosome
anormal
Base anormale
Flagelle double
Restes
cytoplasmiques
24/01/2025 74
Angulation de
la pièce
intermédiaire
Flagelle court
Flagelle
enroulé
24/01/2025 75
spermatogonie Spermatocyte 1
Cellule épithéliale Polynucléaire (1) et
lymphocyte (2)
24/01/2025 76
Aspect microscopique du sperme et des
spermatozoïdes
24/01/2025 77
Spermatozoide dans un hémocytomètre
traditionnel
24/01/2025 78
EXAMENS COMPLEMENTAIRES DU SPERME
(1)
• 1.SPERMOCULTURE
– Antécédents infectieux génito-urinaires
– Anomalie du spermogramme
• • Allongement du temps de liquéfaction
• • Asthénospermie et ou tératospermie
• • Agglutinats
• • Cellules rondes (> 10% numération des spzs)
• • Leucocytes ≥ 1million/ml
24/01/2025 79
EXAMENS COMPLEMENTAIRES DU SPERME
(2)
• 2.L’étude de l’éjaculat fractionné (pour oligospermie
confirmée)
• 3. Le test de migration-survie des spermatozoïdes
• 4. examens immunologiques :
– La recherche d’une immunisation anti-spermatozoïde
chez l’homme-
– La recherche d'anticorps fixés sur les spermatozoïdes
(Martest) ou immunobilles
– La recherche indirecte d’anticorps anti-spermatozoïdes
dans le sérum sanguin et dans le plasma séminal
24/01/2025 80
EXAMENS COMPLEMENTAIRES DU SPERME
(3)
• 5. Etude d’une éjaculation rétrograde :
Coloration des spermatozoïdes au bleu
d’aniline
24/01/2025 81
CONCLUSION (1)
• Le spermogramme est un examen qui gagnerait à
être normalisé à l’échelle des laboratoires
biomédicaux qui utilisent ces techniques.
• La précision et l’exactitude des résultats se
traduiront par de meilleurs suivis auprès du
patient.
• A RETENIR
• Au moins 2 spermogrammes concordants pour
retenir une anomalie.
24/01/2025 82
BRAINSTORMING (1)
• Question 1 : Combien de temps le patient
dispose t-il pour apporter son échantillon au
laboratoire si la collecte fut effectuée à
domicile?
• Question 2 : Veuillez décrire la mobilité
observée d’un spermatozoïde de grade B.
• Question 3 : Que signifie la présence d’un
spermatozoïde de couleur rouge lors d’une
coloration à l’éosine-nigrosine?
24/01/2025 83
BRAINSTORMING (2)
• Question 4 : Nommer trois fluctuations
physiologiques qui peuvent affecter le résultat
du spermogramme.
• Question 5: Nommer trois anomalies de la
tête des spermatozoïdes qui peuvent être
recensées selon la classification de Kruger?
24/01/2025 84
BRAINSTORMING (3)
• Question 6
– • Monsieur X. âgé de 35 ans vient avec une ordonnance de
spermogramme rédigée par le gynécologue de madame
– Monsieur dit avoir respecté les 3 jours d'abstinence
– Au spermogramme, on a noté :
• – Un volume de sperme : 1,2ml
• – Une concentration : 20.106 /ml
• – Une mobilité a : 5% a+b : 30%
• – Une nécrospermie : 80 %
• – Leucospermie : 0,5.106 /ml
• – Formes typiques : 30 %
24/01/2025 85
BRAINSTORMING (4)
• Question 7 :
– Monsieur X. âgé de 35 ans vient avec une ordonnance de
spermogramme rédigée par le gynécologue de madame
– Monsieur dit avoir respecté les 3 jours d'abstinence
• Au spermogramme, on a noté :
• – Volume: 0.7 ml
• – Couleur: blanchâtre
• – Viscosité: type 3
• – PH: 6.7
• – Numération des spermatozoïdes : 0
• – Numération des cellules rondes : 4 Millions/ml
24/01/2025 86
BRAINSTORMING (5)
• • Quels sont les signes biologiques évocateurs
d’une infection du sperme de ce patient?
24/01/2025 87
MERCI DE VOTRE AIMABLE ATTENTION !!!

LE SPERMOGRAMME - EPSE-CPF.pptx plus d'explications

  • 1.
    LE SPERMOGRAMME TOUKAM KAPTUE MASTERBIOLOGIE CLINIQUE option cytopathologie 24/06/2021
  • 2.
    24/01/2025 2 GENERALITES (1) •La stérilité reste un problème de santé publique puisque 16 % des couples consulteront pour obtenir une grossesse. – Une cause masculine est retrouvée chez 40 % de ces couples. – Le diagnostic d’hypofertilité ou de stérilité masculine ne sera posé qu’après différents examens spermiologiques.
  • 3.
    24/01/2025 3 GENERALITES (2) •Parmi ceux-ci, le spermogramme et le spermocytogramme constituent la clé de voûte du dispositif de diagnostic positif et étiologique. • Le spermogramme est l’analyse du sperme qui permet d’évaluer les qualités morphologiques et fonctionnelles des spermatozoïdes et de mesurer l’activité sécrétoire des différentes glandes exocrines de l’appareil génital.
  • 4.
    24/01/2025 4 GENERALITES (3) •C’est un examen médical essentiel au cours duquel on analyse le sperme d'un homme, généralement dans le cadre d'un bilan de stérilité d'un couple. • Il est effectué tant par des technologistes médicaux exerçant en biologie médicale ou en cytopathologie que par des cytologistes; • L’échantillon de sperme est soumis à différentes analyses ayant pour but de le quantifier et d’en évaluer la qualité des spermatozoïdes.
  • 5.
    24/01/2025 5 GENERALITES (4) •Les rapports produits par les laboratoires biomédicaux varient selon l’établissement et ne sont donc pas uniformes. – Toutefois, Les renseignements qu’il fournit se doivent d’être justes et représentatifs de l’échantillon obtenu.
  • 6.
    24/01/2025 6 GENERALITES (5) •L’interprétation des résultats déterminera le pronostic et la conduite à tenir. • Il est essentiel que cet examen soit effectué dans des conditions rigoureuses : – Dans sa phase pré analytique : conditions spécifiques du recueil,
  • 7.
    24/01/2025 7 GENERALITES (6) –Dans sa phase analytique : précision des quantifications (concentration des gamètes, classification des trajectoires de mobilité, comptage des différents types d’anomalies cytologiques), – Dans sa phase post analytique : interprétation des résultats, orientation étiologique, suggestion des examens complémentaires à mettre en œuvre et suggestion des indications possibles.
  • 8.
    24/01/2025 8 LE SPERMATOZOIDE(1) • La production de spermatozoïdes est assurée après la puberté par les testicules au niveau des tubes séminifères. • La spermatogenèse s’effectue dans l’épithélium séminal
  • 9.
    24/01/2025 9 LE SPERMATOZOIDE(2) • Elle aboutit à la formation , à partir de cellules germinales somatiques, les spermatogonies, aux spermatozoïdes : cellules haploïdes pourvues d’une tête de petite taille contenant le noyau et l’acrosome et d’une queue, mobile, épaisse dans sa partie proximale et effilée dans sa partie terminale.
  • 10.
  • 11.
    24/01/2025 11 LE SPERMATOZOIDE(3) Ultra structure du spermatozoïde : – En coupe longitudinale : • la tête du spermatozoïde a une forme de poire. • Le noyau occupe la partie postérieure et large de la tête. • Sa chromatine est dense. • L’acrosome forme un sac recouvrant les deux tiers antérieurs du noyau. • Il est limité par une membrane propre et comporte deux parties d’épaisseur inégale. Le contenu acrosomal est homogène et dense.
  • 12.
    24/01/2025 12 LE SPERMATOZOIDE(4) • La queue commence par la pièce intermédiaire qui comporte la gaine mitochondriale, entourant l’axonème et les fibres denses. • Dans la partie principale du flagelle, l’ axonème est entouré d’une gaine fibreuse dense aux électrons qui s’arrête dans la partie terminale; celle-ci renferme seulement l’axonème, réduit au niveau de l’extrémité à quelques microtubules isolés .
  • 13.
  • 14.
    24/01/2025 14 LA SPERMATOGENESE(1) • La spermatogenèse comporte : – Une étape de multiplication des spermatogonies situées à la partie basale de l’épithélium séminal. – Ces cellules donnent naissance après mitose aux spermatocytes I qui doublent leur capital d’ADN et entrent en prophase de la première division réductionnelle de la méiose.
  • 15.
    24/01/2025 15 LA SPERMATOGENESE(2) • Celle-ci aboutit à la formation des spermatocytes II, de taille plus faible et qui donnent rapidement à l’issue de la deuxième division équationnelle, deux cellules rondes et haploïdes, les spermatides. – Les spermatides, situées dans la partie haute de l’épithélium séminal se différencient en spermatozoïdes au cours de la spermiogenèse.
  • 16.
    24/01/2025 16 LA SPERMATOGENESE(3) • La spermiogenèse est le processus de différenciation des spermatides qui correspond à un ensemble de modifications cellulaires sans division cellulaire, aboutissant à la mise en place dans la cellule d’une tête et d’un flagelle.
  • 17.
    24/01/2025 17 LA SPERMATOGENESE(4) • Elle est habituellement résumée en cinq phases qui chevauchent dans le temps: - Formation de l’acrosome à partir du Golgi. - Formation du flagelle à partir du centre cellulaire. - Formation du manchon mitochondrial. - Elimination des restes cytoplasmiques. - Condensation du noyau
  • 18.
    24/01/2025 18 Etapes dela spermiogenèse
  • 19.
    24/01/2025 19 CONTRÔLE ENDOCRINIENDE LA SPERMATOGENÈSE (1) • Le "chef d'orchestre" de la fonction testiculaire est l’axe hypothalamohypophysaire : c'est grâce à l’augmentation de la production pulsatile en période pubertaire du GnRH (Gonadotropin Releasing Hormone) par l'hypothalamus, que s'installe la fonction testiculaire. – La GnRH provoque la sécrétion pulsatile de deux hormones : la FSH et la LH par l’hypophyse.
  • 20.
    24/01/2025 20 CONTRÔLE ENDOCRINIENDE LA SPERMATOGENÈSE (2) • La FSH joue un rôle dans la croissance testiculaire et le déclenchement de la spermatogenèse à la puberté, ainsi que dans la stimulation de l'activité mitotique de l'épithélium séminal. • La LH stimule la synthèse d'hormones androgènes, notamment la testostérone élaborée par les cellules interstitielles, et agit sur l'apparition des caractères sexuels secondaires.
  • 21.
    24/01/2025 21 CONTRÔLE ENDOCRINIENDE LA SPERMATOGENÈSE (3) • Les androgènes, notamment la testostérone, élaborés pas les cellules interstitielles de Leydig diffusent dans l’épithélium séminal, contrôlent l'activité des cellules de Sertoli et stimulent la spermatogenèse, • L’inhibine produite par la cellule de Sertoli exerce un rétrocontrôle négatif sur l’hypophyse et freine la synthèse de FSH. • L’activine a un effet inverse.
  • 22.
    24/01/2025 22 BUT DUSPERMOGRAMME (1) • L'examen vise à : – Quantifier les spermatozoïdes normaux et anormaux, – Étudier leur mouvement et leur morphologie, – Doser différentes substances que le sperme doit normalement contenir.
  • 23.
    24/01/2025 23 PRINCIPE DUSPERMOGRAMME (1) • Le spermogramme est un examen d’analyse médical qui comporte deux principales étapes : – une étape d’examen macroscopique qui consiste à mesurer le volume de l’éjaculat et à évaluer certains paramètres physiques et chimiques du sperme (pH, aspect, odeur et viscosité).
  • 24.
    24/01/2025 24 PRINCIPE DUSPERMOGRAMME (2) • Une étape d’examen microscopique qui étudie les paramètres cyto-morphologiques et fonctionnels du sperme : – Il permet d’évaluer : • la concentration et le nombre de spermatozoïdes, • la concentration des cellules rondes; • il donne une appréciation du pourcentage de formes mobiles et vivantes • Il étudie la morphologie des spermatozoïdes.
  • 25.
    24/01/2025 25 PRINCIPE DUSPERMOGRAMME (3) – Cette dernière étape correspond au spermocytogramme qui constitue une étape très importante et difficile du spermogramme. Elle est effectuée sur un frottis de sperme coloré.
  • 26.
    24/01/2025 26 LE SPERMEEJACULE (1) • Le sperme est un liquide complexe qui se constitue de manière extemporanée au cours de l’éjaculation. • Il se compose d’une phase cellulaire (10%), les spermatozoïdes et d’une phase liquide (90%), le plasma séminal.
  • 27.
    24/01/2025 27 LE SPERMEEJACULE (2) • Celui-ci est principalement constitué des sécrétions des vésicules séminales, de la prostate mais aussi des testicules et épididymes. • Il a une composition biochimique riche et complexe. Certains composants constituent des marqueurs des fonctions glandulaires et peuvent être dosés au cours de l’exploration biochimique du sperme.
  • 28.
    24/01/2025 28 CINETIQUE DUSPERME EJACULE • Immédiatement après l’éjaculation, le liquide séminal apparaît comme un liquide visqueux, dense, blanchâtre, d’aspect floconneux dont le pH varie entre 7,2 et 8. • Dans les 10 à 20 minutes suivant l’éjaculation, le sperme se liquéfie sous l’action de plusieurs enzymes protéolytiques d’origine testiculaire et prostatique (spermine).
  • 29.
    24/01/2025 29 LE SPERMEEJACULE (4) • En plus des spermatozoïdes, le sperme comporte aussi : – Une faible quantité de cellules rondes correspondant à des cellules immatures de la lignée germinale, – Quelques cellules épithéliales desquamées à partir des voies excrétrices, – Des fragments cellulaires – Et un nombre variable de polynucléaires.
  • 30.
    24/01/2025 30 LE SPERMEEJACULE (5) • Les spermatozoïdes libérés des tubes séminifères sont immobiles et non fécondants. • Des échanges complexes de glycoprotéines à la surface des spermatozoïdes, tout au long du trajet épididymaire, permettent aux cellules d'acquérir leur mobilité et leur capacité de féconder l'ovocyte (capacitation ).
  • 31.
    24/01/2025 31 LE SPERMEEJACULE (6) • Le plasma séminal est constitué : – des sécrétions épididymo-déférentielles (10 % du volume de l'éjaculat), – des sécrétions des glandes annexes : • prostate (15 à 30 %) • et vésicules séminales (50 à 80 %). • Des marqueurs biochimiques du sperme peuvent aider à préciser le niveau de l'obstacle sur les voies excrétrices
  • 32.
  • 33.
    24/01/2025 33 PROCEDURE DUSPERMOGRAMME (1) • 1. Conditions : – Le spermogramme se fait après une période d'abstinence sexuelle de trois à cinq jours (période qui doit être connue et rappelée dans le rapport, car elle peut expliquer un volume moindre de sperme et une moindre densité de spermatozoïdes) • Les bains chauds sont à éviter dans ce laps de temps.
  • 34.
    24/01/2025 34 PROCEDURE DUSPERMOGRAMME (2) – Pour réduire le délai entre le recueil et l'analyse, on recueille généralement le sperme du sujet directement au laboratoire, où il se masturbe dans une pièce prévue à cet effet, après s'être soigneusement lavé les mains et le pénis. – Le sujet ne doit pas être atteint d'une maladie infectieuse ou être en cours de traitement antibiotique. – le recueil doit avoir lieu après miction;
  • 35.
    24/01/2025 35 PROCEDURE DUSPERMOGRAMME (3) – En cas de tabagisme ou d’alcoolisme, un arrêt temporaire est recommandé lors de l’intervalle d’abstinence de même que le café et les autres excitants (thé, kola, …) ; – Il peut être nécessaire de recourir à des revues ou à la partenaire du patient
  • 36.
    24/01/2025 36 PROCEDURE DUSPERMOGRAMME (4) 2. Accueil du patient : À l’accueil du patient, certains détails doivent être vérifiés : • S’assurer que l’échantillon est bien identifié; • Vérifier si la collecte de l’échantillon de sperme a été effectuée à l’hôpital ou au domicile (l’échantillon doit être maintenu à la température du corps (37 ºC) durant le transport jusqu’au laboratoire);
  • 37.
    24/01/2025 37 PROCEDURE DUSPERMOGRAMME (5) • Inscrire la date et l’heure de la réception de l’échantillon (si l’échantillon a été prélevé au domicile, le patient doit se rendre dans l’heure suivant l’éjaculation); • Le spécimen doit être recueilli après un minimum de quarante-huit heures d’abstinence sans toutefois dépasser 7 jours.
  • 38.
    24/01/2025 38 PARAMETRES D’ANALYSEDU SPERMOGRAMME (1) • 1. La liquéfaction – Avant de commencer l’analyse du sperme, une période de temps doit être accordée pour la liquéfaction. La durée normale de liquéfaction est de 30 minutes. Si celle-ci n’est pas réalisée à l’intérieur de ce délai, on dira qu’elle est lente plutôt que normale. • 2.Le volume – À l’aide d’une pipette ou d’un cylindre gradué, le volume de l’éjaculat est mesuré.
  • 39.
    24/01/2025 39 PARAMETRES D’ANALYSEDU SPERMOGRAMME (2) • 3.La viscosité – Celle-ci s’évalue selon 4 niveaux à l’aide d’une pipette : • Viscosité normale : si l’échantillon se sépare bien goutte à goutte; • Viscosité 1 : si l’échantillon forme un filet liquide entre chaque goutte; • Viscosité 2 : si l’échantillon est suffisamment visqueux pour que le filet soit continu; • Viscosité 3 : si l’échantillon est tellement visqueux qu’il ne peut s’écouler par la pipette.
  • 40.
    24/01/2025 40 PARAMETRES D’ANALYSEDU SPERMOGRAMME (3) • 4.Le pH – Celui-ci est mesuré à l’aide de papier pH. • 5.La mobilité – Pour évaluer la mobilité, un examen à l’état frais doit être effectué : placer 10 microlitres (μL) de sperme entre une lame et une lamelle. – Un décompte est réalisé en visualisant au moins 200 spermatozoïdes (2 X 100) et l’évaluation des grades se fait comme suit :
  • 41.
    24/01/2025 41 PARAMETRES D’ANALYSEDU SPERMOGRAMME (4) – Grade A : progression rapide : les spermatozoïdes bougent bien en ligne droite à travers le champ du microscope; – Grade B : progression lente : les spermatozoïdes bougent lentement, en zigzaguant; – Grade C : agitation sans progression : les spermatozoïdes bougent mais n’avancent pas (seules les flagelles bougent); – Grade D : immobiles : les spermatozoïdes son complètement immobiles. – Note : il est préférable d’effectuer la lecture à plus de 5 mm du rebord de la lamelle.
  • 42.
    24/01/2025 42 PARAMETRES D’ANALYSEDU SPERMOGRAMME (5) 6. La viabilité - Coloration Éosine - Nigrosine – a. généralités : • La vitalité des spermatozoïdes est évaluée par une technique basée sur l’exclusion de colorants par les spermatozoïdes vivants, le test de Williams à l’éosine- nigrosine. – Les spermatozoïdes morts subissent des modifications membranaires se traduisant par une augmentation de la perméabilité aux colorants, tel que l’éosine.
  • 43.
    24/01/2025 43 PARAMETRES D’ANALYSEDU SPERMOGRAMME (6) b. Principe de la technique de Williams : – Perméabilité des cellules mortes à certains colorants comme l’éosine (membranes plasmiques lésées) et la sélectivité membranaire des cellules vivantes.
  • 44.
    24/01/2025 44 PARAMETRES D’ANALYSEDU SPERMOGRAMME (7) • De plus, ce test nous donne l’occasion de faire un contrôle interne en ce qui a trait à l’estimation de la mobilité.
  • 45.
    24/01/2025 45 PARAMETRES D’ANALYSEDU SPERMOGRAMME (8) – C. procédure : • Ajouter 2 gouttes de sperme. • Ajouter 2 gouttes de solution aqueuse à l’éosine 1 %, • Bien mélanger au vortex. • Attendre 30 secondes.
  • 46.
    24/01/2025 46 PARAMETRES D’ANALYSEDU SPERMOGRAMME (9) •Ajouter 2 gouttes de solution aqueuse à la Nigrosine 10 %, •Bien mélanger au vortex. –Déposer une goutte entre une lame et une lamelle. –Faire un décompte de 200 spermatozoïdes à 40 X.
  • 47.
    24/01/2025 47 PARAMETRES D’ANALYSEDU SPERMOGRAMME (10) – d. Résultats : • Déposer une goutte entre une lame et une lamelle. • Faire un décompte de 200 spermatozoïdes à 40 X. • Celle-ci nous permet d’évaluer, en faisant un décompte de 200 spermatozoïdes, le pourcentage de spermatozoïdes vivants : vitalité
  • 48.
    24/01/2025 48 PARAMETRES D’ANALYSEDU SPERMOGRAMME (11) – Ceux en blanc ont une membrane qui n’est pas lésée, c’est-à-dire qu’ils résistent à la coloration à l’éosine, – tandis que ceux en rouge ont une membrane lésée permettant à l’éosine de pénétrer à l’intérieur de la cellule. • Quant à la Nigrosine, elle sert seulement à colorer le fond du frottis.
  • 49.
    24/01/2025 49 Spermatozoïdes morts(tête rouge) et vivants (tête incolore)
  • 50.
    24/01/2025 50 PARAMETRES D’ANALYSEDU SPERMOGRAMME (13) • 7. La numération – Cette étape permet de déterminer la concentration de spermatozoïdes dans l’éjaculat à analyser. Les résultats s’expriment en milliard/L (SI). – Voici un tableau pouvant nous aider à choisir la bonne dilution pour effectuer la numération : – *Nbre : nombre de spermatozoïdes comptés dans les 5 carrés de l’hématimètre (4 coins + centre). Les résultats s’expriment en milliard de spermatozoïdes/L.
  • 51.
    24/01/2025 51 Type d’échantillons dilution Volumede diluant Volume de sperme Facteur ajustement Oligospermie sévère --- --- Goutte échantillon pure N*/20 Oligospermie 1/10 180 ul 20 ul Nbre/2 Normal 1/20 190 ul 10 ul Nbre Décompte élevé (donneur) 1/40 390 ul 10 ul Nbre X 2 195 ul 5 ul
  • 52.
    24/01/2025 52 PARAMETRES D’ANALYSEDU SPERMOGRAMME (14) – Cette procédure est proposée à titre d’exemple : • Avec une dilution de 1 sur 20 (10 μL de sperme avec 190 μL de liquide immobilisant), – On compte en examinant les 4 coins + le centre du carré E (voir le schéma de l’hématimètre); • Étaler la dilution sur un hématimètre des 2 côtés et laisser reposer dans une chambre humide (boîte de Pétri) 10 minutes avant d’en faire la lecture; • Le nombre de spermatozoïdes comptés X 1 000 000 nous donne directement le nombre en milliard par litre (voir la formule).
  • 53.
    24/01/2025 53 LIQUIDES UTILISESPOUR LA NUMERATION • Pour effectuer une numération, on utilise un liquide immobilisant les spermatozoïdes. En voici quelques exemples : – • Liquide maison : • 15 g de bicarbonate de sodium • 3 g de phénol • 300 ml d’eau distillée – • Liquide de Dacie : • 10 ml de formol à 40 % • 990 ml de citrate de sodium à 3 % – • Eau très froide
  • 54.
    24/01/2025 54 PARAMETRES D’ANALYSESDU SPERMOGRAMME (16) • La morphologie/ le spermocytogramme : – a. généralités : • La morphologie des spermatozoïdes est évaluée après coloration d’un frottis et examen de celui-ci au microscope optique le plus souvent. • • Faire un frottis sur une lame chargée positivement (évite le décollement et la contamination);
  • 55.
    24/01/2025 55 PARAMETRES D’ANALYSESDU SPERMOGRAMME (17) • Buts : – L’observation microscopique à l’objectif x100,permet d’analyser les différentes parties du spermatozoïdes et de distinguer les spermatozoïdes de forme normale des spermatozoïdes présentant une ou plusieurs anomalies morphologiques au niveau de la tête et/ou au niveau du flagelle.
  • 56.
    24/01/2025 56 PARAMETRES D’ANALYSESDU SPERMOGRAMME (18) • Cette observation microscopique du frottis permet également d’identifier les cellules germinales immatures (spermatogonies, spermatocytes et spermatides) et les cellules de défenses (polynucléaires, lymphocytes et monocytes).
  • 57.
    24/01/2025 57 PARAMETRES D’ANALYSESDU SPERMOGRAMME (19) • b.procédure : – Autant que possible, une normalisation de la quantité de sperme utilisée est préférable pour faire le frottis : exemple : 10 μL de sperme étalé en frottis et fixé au « cytospray »; – Différentes colorations peuvent être utilisées mais les répandues sont le papanicolaou et le schorr
  • 58.
    24/01/2025 58 PARAMETRES D’ANALYSESDU SPERMOGRAMME (20) – • Différentes colorations peuvent être utilisées: Hématoxyline et Éosine, Papanicolaou+++ ou Diff- Quick; – • Un décompte d’au moins 200 spermatozoïdes est effectué avant d’établir une moyenne. Les résultats sont exprimés en pourcentage (%).
  • 59.
    24/01/2025 59 PARAMETRES D’ANALYSESDU SPERMOGRAMME (13) 1.1.La classification de Kruger • (La classification stricte de Kruger es t recommandée par l’Organisation mondiale de la Santé) • La classification de Kruger recense une seule anomalie par spermatozoïde. • L’anomalie est recensée par ordre d’importance comme suit : – • ACROSOME – • TÊTE – • PIÈCE INTERMÉDIAIRE – • FLAGELLE • Aussitôt qu’une anomalie est recensée, le spermatozoïde est directement classé dans les « anormaux ». • Les évaluations de la morphologie selon Kruger sont beaucoup plus strictes; on parle
  • 60.
    24/01/2025 60 PARAMETRES D’ANALYSESDU SPERMOGRAMME (14) • de morphologie normale à partir de 15 % lors d’évaluation de la morphologie sur frottis coloré. • Bien que la classification des spermatozoïdes « normaux » comparativement à « anormaux » prime, nous pouvons, si l’on veut, détailler les anomalies, par exemple : • • 22 % de spermatozoïdes normaux • • 12 % d’acrosomes absents • • 5 % de têtes allongées • • 17 % de microcéphales • • 29 % de têtes amorphes • • 3 % de reste cytoplasmique • • 12 % de flagelles enroulés • Total : 100 % • S'il y a une prédominance d’une anomalie en particulier, il est important de la noter. Par exemple, on peut noter une prédominance de spermatozoïdes à têtes rondes (sans acrosome);
  • 61.
    24/01/2025 61 PARAMETRES D’ANALYSESDU SPERMOGRAMME (15) • Les principales anomalies recensées sont les suivantes : – ANOMALIES DE LA TÊTE : • Acrosome anormal, absent, vacuolé • Tête allongée, amincie, microcéphale, macrocéphale ,multiple – ANOMALIES DE LA PIÈCE INTERMÉDIAIRE : • Reste cytoplasmique (extrusion) • Pièce grêle • Pièce angulée
  • 62.
    24/01/2025 62 PARAMETRES D’ANALYSESDU SPERMOGRAMME (16) • ANOMALIES DU FLAGELLE : – Absent – Écourté – De calibre irrégulier – Enroulé – Multiple
  • 63.
    24/01/2025 63 PARAMETRES D’ANALYSESDU SPERMOGRAMME (17) • En complément, l'observateur évalue : – le taux de flagelles isolés et/ou de spermatozoïdes en lyse – le taux de cellules de la lignée, – le taux d'autres cellules (cellules du tractus uro- génital – le taux de fragments cellulaires. – d'autres anomalies : présence de globules rouges ou résidus sanguins
  • 64.
  • 65.
    24/01/2025 65 INTERPRETATION D’UNSPERMOGRAMME (1) • Le spermogramme tient la première place dans le bilan d'une infertilité masculine. • Mais cet examen doit être interprété de façon critique : – Il faut prendre en considération plusieurs paramètres d’analyse du sperme : • Conditions de collecte de l’échantillon, • Imperfection des mesures, • Mais aussi ceux qui sont liés aux fluctuations physiologiques du sperme comme :
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    24/01/2025 66 INTERPRETATION D’UNSPERMOGRAMME (2) – le rythme des éjaculations, – la saison, – l’âge, – la médication, – le stress, – le tabagisme – et l’alcool, – …
  • 67.
    24/01/2025 67 INTERPRETATION D’UNSPERMOGRAMME (3) • En effet, l'extrême variabilité des paramètres, à la fois inter et intra individuelle, rend difficile l'établissement de critères précis de normalité. • Toutefois, les normes de références sont celles établies par l’OMS
  • 68.
    24/01/2025 68 INTERPRETATION D’UNSPERMOGRAMME (4) • il a été montré que la fécondance est étroitement corrélée à la mobilité et au pourcentage des atypies cellulaires. • Une affection même bénigne et de courte durée, telle un épisode grippal, est susceptible de retentir sur les caractéristiques du sperme émis 2 à 3 mois plus tard en raison de la durée de 74 jours du cycle de la spermatogénèse.
  • 69.
    24/01/2025 69 INTERPRETATION D’UNSPERMOGRAMME (5) • Enfin, il est parfaitement établi que même dans des conditions strictement physiologiques, les caractéristiques du sperme sont soumises à d'importantes fluctuations. • Lorsqu'il apparaît pathologique, le spermogramme doit être recontrôlé 3 mois plus tard.
  • 70.
    24/01/2025 70 QUELQUES VARIABILITESNON PATHOLOGIQUES DU SPERMOGRAMME (1) • Abstinence sexuelle (délai : 3-5j) – • Trop court : Numération - Volume – • Trop long : tératospermie - asthénospermie – nécrospermie • Perturbation temporaire de la spermatogenèse – (Fièvre, maladie aiguë, chirurgie) • Spermatogenèse : 74 jours • Trajets dans les voies excrétrices : 1-12 jours
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    24/01/2025 71 QUELQUES VARIABILITESNON PATHOLOGIQUES DU SPERMOGRAMME (2) • Recueil du sperme – • Si manque le début : Oligo ou Azoospermie – • Si manque la fin : augmentation relative de la concentration – • Masturbation au Laboratoire +++ – • Masturbation à domicile : délai - température ambiante – • Coït avec préservatif : Préservatif non toxique • Variabilité entre les laboratoires – • Sperme : liquide non homogène – • Paramètres "Subjectifs" • Problème de l'établissement des normes – • Chevauchement des valeurs pour des hommes féconds et • des hommes inféconds
  • 72.
    24/01/2025 72 Tête allongée Spermatozoïdenormal Tête microcéphale macrocéphalie
  • 73.
    24/01/2025 73 Tête double Acrosome anormal Baseanormale Flagelle double Restes cytoplasmiques
  • 74.
    24/01/2025 74 Angulation de lapièce intermédiaire Flagelle court Flagelle enroulé
  • 75.
    24/01/2025 75 spermatogonie Spermatocyte1 Cellule épithéliale Polynucléaire (1) et lymphocyte (2)
  • 76.
    24/01/2025 76 Aspect microscopiquedu sperme et des spermatozoïdes
  • 77.
    24/01/2025 77 Spermatozoide dansun hémocytomètre traditionnel
  • 78.
    24/01/2025 78 EXAMENS COMPLEMENTAIRESDU SPERME (1) • 1.SPERMOCULTURE – Antécédents infectieux génito-urinaires – Anomalie du spermogramme • • Allongement du temps de liquéfaction • • Asthénospermie et ou tératospermie • • Agglutinats • • Cellules rondes (> 10% numération des spzs) • • Leucocytes ≥ 1million/ml
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    24/01/2025 79 EXAMENS COMPLEMENTAIRESDU SPERME (2) • 2.L’étude de l’éjaculat fractionné (pour oligospermie confirmée) • 3. Le test de migration-survie des spermatozoïdes • 4. examens immunologiques : – La recherche d’une immunisation anti-spermatozoïde chez l’homme- – La recherche d'anticorps fixés sur les spermatozoïdes (Martest) ou immunobilles – La recherche indirecte d’anticorps anti-spermatozoïdes dans le sérum sanguin et dans le plasma séminal
  • 80.
    24/01/2025 80 EXAMENS COMPLEMENTAIRESDU SPERME (3) • 5. Etude d’une éjaculation rétrograde : Coloration des spermatozoïdes au bleu d’aniline
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    24/01/2025 81 CONCLUSION (1) •Le spermogramme est un examen qui gagnerait à être normalisé à l’échelle des laboratoires biomédicaux qui utilisent ces techniques. • La précision et l’exactitude des résultats se traduiront par de meilleurs suivis auprès du patient. • A RETENIR • Au moins 2 spermogrammes concordants pour retenir une anomalie.
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    24/01/2025 82 BRAINSTORMING (1) •Question 1 : Combien de temps le patient dispose t-il pour apporter son échantillon au laboratoire si la collecte fut effectuée à domicile? • Question 2 : Veuillez décrire la mobilité observée d’un spermatozoïde de grade B. • Question 3 : Que signifie la présence d’un spermatozoïde de couleur rouge lors d’une coloration à l’éosine-nigrosine?
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    24/01/2025 83 BRAINSTORMING (2) •Question 4 : Nommer trois fluctuations physiologiques qui peuvent affecter le résultat du spermogramme. • Question 5: Nommer trois anomalies de la tête des spermatozoïdes qui peuvent être recensées selon la classification de Kruger?
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    24/01/2025 84 BRAINSTORMING (3) •Question 6 – • Monsieur X. âgé de 35 ans vient avec une ordonnance de spermogramme rédigée par le gynécologue de madame – Monsieur dit avoir respecté les 3 jours d'abstinence – Au spermogramme, on a noté : • – Un volume de sperme : 1,2ml • – Une concentration : 20.106 /ml • – Une mobilité a : 5% a+b : 30% • – Une nécrospermie : 80 % • – Leucospermie : 0,5.106 /ml • – Formes typiques : 30 %
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    24/01/2025 85 BRAINSTORMING (4) •Question 7 : – Monsieur X. âgé de 35 ans vient avec une ordonnance de spermogramme rédigée par le gynécologue de madame – Monsieur dit avoir respecté les 3 jours d'abstinence • Au spermogramme, on a noté : • – Volume: 0.7 ml • – Couleur: blanchâtre • – Viscosité: type 3 • – PH: 6.7 • – Numération des spermatozoïdes : 0 • – Numération des cellules rondes : 4 Millions/ml
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    24/01/2025 86 BRAINSTORMING (5) •• Quels sont les signes biologiques évocateurs d’une infection du sperme de ce patient?
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    24/01/2025 87 MERCI DEVOTRE AIMABLE ATTENTION !!!