Le document traite des innovations en matière de sûreté alimentaire, en mettant l'accent sur la détection des OGM et l'étiquetage réglementaire de l'Union Européenne. Il explique également la méthode de la PCR en temps réel pour quantifier l'ADN des OGM et présente une liste d'espèces OGM autorisées en Europe. Enfin, le texte décrit les équipements nécessaires pour l'analyse des échantillons et la mise en œuvre des méthodes de détection.

1. Sûreté alimentaire
Quelles innovations pour
la maîtrise des contaminants
et l'authentification des produits
agricoles et alimentaires ?
> 13 & 14 novembre 2013
> Montpellier SupAgro INRA
www.rencontres-qualimediterranee.fr

2. Les outils de la biologie moléculaire
appliqués à la recherche d’OGM

3. Le génie génétique
Définition:
Méthode qui permet d'introduire dans une
cellule un gène (étranger) qu'elle ne possède pas.
Le fonctionnement de ce gène (son
expression) dans la cellule receveuse aboutit à la
production d'une protéine qui n'est pas normalement
fabriquée par cette cellule.
Nom Prénom Intervenant / Organisme

5. REGLEMENT CE n°1829/1830/2003 du 22 septembre 2003
L’Union Européenne a mis en place une
réglementation, afin de donner aux consommateurs
européens le libre choix de consommer ou non des
OGM, imposant que les produits contenant des OGM
fassent l’objet d’un étiquetage spécifique et a fixé le
seuil de détection de ces OGM à 0,9 %. La mise en
oeuvre de cette politique n’est possible que s’il existe
des méthodes de détection fiables et validées des
OGM et que les OGM non autorisés soient
détectables.

6. PCR (Polymerase Chain Reaction)
Le principe de base de la PCR est l’amplification
génique, après extraction d’ADN ou d’ARN. La PCR en
temps réel utilise le principe de base de la PCR classique
(amplification cyclique d’un fragment d’ADN, basée sur une
réaction enzymologique) avec pour différence une
amplification mesurée non pas en final mais tout au long de la
réaction, donc en temps réel.

7. PCR (Polymerase Chain Reaction)

8. Le résultat d’une PCR en temps réel est représenté graphiquement sous forme de
courbes sigmoïdes.

9. A chaque cycle d’amplification, la quantité d’ADN est
mesurée grâce à un marqueur fluorescent dont
l’émission est directement proportionnelle à la quantité
d’amplicons produits. Ceci permet d’obtenir une
cinétique de la réaction et donc la quantification de
l’ADN alors que la PCR classique ne donne que la
mesure finale.

10. Promoteur
(P35S)
Terminateur
(Tnos)
Gène codant pour le
caractère désiré
Méthode de criblage (screening)
Méthode spécifique

11. Tableau identification OGM
26/03/13
Date de mise à jour:
Identification espèces OGM
Espèces
Autorisé en
UE pour la
culture
Autorisé en UE dans
l'alimentation
humaine / animale
P35S
X
2008/730/CE
-
X
2008/933/CE
soja OGM DP-305423-1
-
En attente
-
soja OGM DP356043-5
-
X
2012/84/UE
soja OGM MON87705
-
En attente
-
soja OGM MON87708
-
En attente
-
soja OGM MON87701
Espèce plante Maïs
maïs OGM MON 810
-
X
2012/83/UE
X
X
98/294/CE
maïs OGM MON 863
-
X
2005/608/CE
maïs OGM Bt11
-
X
2010/419/UE
maïs OGM Bt10
-
-
2007/157/CE
maïs OGM MON88017
-
X
2009/814/CE
maïs OGM Bt176
-
Retiré
2007/304/CE
maïs OGM GA21
-
X
2008/280/CE
maïs OGM MIR 604
-
X
2009/866/CE
maïs OGM NK 603
-
X
2004/643/CE
maïs OGM Herculex 1507
-
X
2005/772/CE
maïs OGM DAS 59122
-
X
2007/702/CE
maïs OGM T25
-
X
2008/470/CE
maïs OGM Starlink CBH 351
-
-
-
maïs OGM MIR 162
-
X
2012/651/UE
maïs OGM MON 89034
-
X
2009/813/CE
maïs OGM EVENT 3272
Espèce plante colza
colza OGM RT/GT 73
-
En attente
-
-
X
2005/635/CE
colza OGM MS8/ RF3
-
X
2007/232/CE
colza OGM TOPAS 19/2
-
Retiré
2007/307/CE
colza OGM T45
-
X
2009/184/CE
colza OGM MS1/ RF1
Espèce plante riz
riz OGM LL62
-
Retiré
2007/305/CE
-
-
-
riz OGM LL601
-
-
-
riz OGM BT63
-
-
-
riz OGM KMD 1
-
-
-
riz OGM Kefeng 6
Espèce plante pomme de terre
AMFLORA EH92-527-1
Espèce plante lin
lin OGM Triffid FP967
Espèce plante papaye
63-1
-
-
-
X
X
2010/135/UE
NptII
Pat
-
-
+
+
-
Tnos
FMV
Bar
NptII
Pat
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
-
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
-
+
+
-
+
-
+
+
+
+
-
Tnos
FMV
Bar
NptII
Pat
+
+
-
+
+
+
-
+
+
+
+
+
+
-
Tnos
FMV
Bar
NptII
Pat
+
+
+
+
+
+
+
-
+
+
-
-
-
Tnos
FMV
Bar
NptII
Pat
-
+
-
-
+
-
P35S
-
soja OGM MON 89788
Bar
+
+
-
P35S
soja OGM A 2704-12
FMV
+
-
P35S
2012/82/UE
2012/81/UE
+
+
+
+
-
P35S
X
X
Tnos
P35S
-
X17-2
Multiscreening
Règlementation UE
Espèce plante Soja
soja OGM RRS (MON GTS40-3-2)
soja OGM A5547-127
Tnos
FMV
Bar
NptII
Pat
-
-
-
-
-
-
-
-
-
+
-
-
+
-
P35S
-
Tnos
FMV
Bar
NptII
Pat
+
+
+
+
-
-
+
+
-

12. Expression des résultats
Si le résultat est supérieur à la limite de détection (0,01% ) et inférieur à
la LQ (0,1%) le résultat est rendu positif <0,1 %
Si le résultat est > LQ la teneur en OGM peut être quantifiée:
Calcul de la teneur en ADN de végétaux génétiquement modifiés:
Teneur: (nb de copies ADN OGM/nb de copies ADN de l ’espèce ) x 100
La teneur est exprimée par rapport à l’espèce végétale ce qui signifie qu’il
faut passer par l ’identification si mélanges de plusieurs espèces dans
l’échantillon

13. Les équipements
- Spectrophotomètre (quantification de l’ADN) : Nanodrop
- Centrifugeuse réfrigérée
- Bain-marie
- Vortex
- Robot Epmotion (préparation et distribution des plaques PCR)
- Thermocycleur (amplification de l’ADN – RT PCR)

14. w w w . r e n c o n t r e s ‐ q u a l i m e d i t e r r a n e e . f r