Dont forget that you can make a whole document translation through online translation apps ! do it and share the knowledge !
ce cours est destiné aux étudiants graduant en médecine et en pharmacie. il regroupe les principaux aspect taxonomiques , bactériologiques et cliniques relatifs aux cocci a Gram positif catalase négatifs prinxipalement le Genre Streptococcus.
This course is destined to students graduating in medicine and pharmacy and regroups general data on Gram positive Catalase negative cocci mainly the Genus Streptococcus
La bactériologie médicale est une branche de la Biologie médicale qui consiste en l'analyse de divers liquides biologiques (parfois de tissus) dans le but d'isoler et/ou de caractériser une ou des bactéries pouvant être responsables de la pathologie suspectée à l'aide de techniques directes ou indirectes.
cette conférence de travaux pratique s'adresse aux étudiants graduant en sciences médicales , il aborde les aspects élémentaires de la pratique au laboratoire de microbiologie ainsi que des aspects relatifs au diagnostic microbiologique.
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ce cours est destiné aux étudiants graduant en médecine et en pharmacie. il regroupe les principaux aspect taxonomiques , bactériologiques et cliniques relatifs aux cocci a Gram positif catalase négatifs prinxipalement le Genre Streptococcus.
This course is destined to students graduating in medicine and pharmacy and regroups general data on Gram positive Catalase negative cocci mainly the Genus Streptococcus
La bactériologie médicale est une branche de la Biologie médicale qui consiste en l'analyse de divers liquides biologiques (parfois de tissus) dans le but d'isoler et/ou de caractériser une ou des bactéries pouvant être responsables de la pathologie suspectée à l'aide de techniques directes ou indirectes.
cette conférence de travaux pratique s'adresse aux étudiants graduant en sciences médicales , il aborde les aspects élémentaires de la pratique au laboratoire de microbiologie ainsi que des aspects relatifs au diagnostic microbiologique.
ce document s'adresse au étudiants en médecine dentaire et est une introduction simple au fonctionnement d'une bactérie et des méthodes utilisés pour leurs études.
La toxoplasmose est l'une des affections parasitaires les plus fréquentes. Si elle est généralement bénigne, sa survenue pendant la grossesse peut être grave en raison du risque de lésions du système nerveux central du fœtus.
La cellule de Nageotte est un hématimètre qui permet de compter le nombre de cellules en suspension dans une solution.
Classiquement, elle est utilisée en cytologie urinaire ou pour l'examen du liquide céphalo-rachidien.
Les tests de sensibilite aux antibiotiques / Antimicrobial susceptibility tes...Dr Taoufik Djerboua
Ce fichier destiné aux étudiants en graduation et en poste graduation en médecine et en pharmacie regoupe de manière détaillée la plupart des tests de sensibilité aux antibiotiques actuellement disponibles au laboratoire de microbiologie médicale. il aborde entre autre les différents aspects de normalisation de ces techniques.
this file is destined to graduation medicine and pharmacy students also microbiology post graduating residents.it regroups in detail the techniques used in microbiology laboratory to test the suceptibility of germs to antimicrobials. it also emphasizes the importance of standardization in this field
Ce cours s'adresse aux étudiants en graduation de médecine et de pharmacie. il contient une description simplifiée des différentes familles d'antibiotiques en vue de l'utilisation des connaissances acquises pour la systématique bactérienne
Guide des bonnes pratiques de laboratoire. S/Abdessemed
La bonne pratique des analyses de biologie est une condition essentielle pour atteindre cette qualité.
Le présent guide constitue un instrument au service de cette qualité, s’adressant à toutes les catégories de personnel travaillant au sein du laboratoire d’analyse médicale.
Son but est double :
1- Aider à rationaliser le fonctionnement des laboratoires d’analyses médicales.
2- Rappeler un certain nombre de règles et de recommandations dont le but n’est ni d’imposer des contraintes, ni d’empiéter sur la compétence propre du biologiste : le choix de la méthode utilisée pour l’exécution d’une analyse particulière relève de sa seule compétence. Toutefois, il est important que cette méthode soit adaptée aux connaissances théoriques et pratiques du moment et qu’elle suive, dans la mesure du possible, les recommandations des Sociétés Savantes Nationales ou Internationales afin d’assurer la qualité requise...
Les structures tridimensionnelles des protéines: comprendre le vivant à l'échelle de l'atome et proposer de nouveaux médicaments par une approche informatique.
Par Alexandre G. de Brevern
Conférence du 9 mars 2011 à l'Institut français d'Oslo. www.france.no
ce document s'adresse au étudiants en médecine dentaire et est une introduction simple au fonctionnement d'une bactérie et des méthodes utilisés pour leurs études.
La toxoplasmose est l'une des affections parasitaires les plus fréquentes. Si elle est généralement bénigne, sa survenue pendant la grossesse peut être grave en raison du risque de lésions du système nerveux central du fœtus.
La cellule de Nageotte est un hématimètre qui permet de compter le nombre de cellules en suspension dans une solution.
Classiquement, elle est utilisée en cytologie urinaire ou pour l'examen du liquide céphalo-rachidien.
Les tests de sensibilite aux antibiotiques / Antimicrobial susceptibility tes...Dr Taoufik Djerboua
Ce fichier destiné aux étudiants en graduation et en poste graduation en médecine et en pharmacie regoupe de manière détaillée la plupart des tests de sensibilité aux antibiotiques actuellement disponibles au laboratoire de microbiologie médicale. il aborde entre autre les différents aspects de normalisation de ces techniques.
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Ce cours s'adresse aux étudiants en graduation de médecine et de pharmacie. il contient une description simplifiée des différentes familles d'antibiotiques en vue de l'utilisation des connaissances acquises pour la systématique bactérienne
Guide des bonnes pratiques de laboratoire. S/Abdessemed
La bonne pratique des analyses de biologie est une condition essentielle pour atteindre cette qualité.
Le présent guide constitue un instrument au service de cette qualité, s’adressant à toutes les catégories de personnel travaillant au sein du laboratoire d’analyse médicale.
Son but est double :
1- Aider à rationaliser le fonctionnement des laboratoires d’analyses médicales.
2- Rappeler un certain nombre de règles et de recommandations dont le but n’est ni d’imposer des contraintes, ni d’empiéter sur la compétence propre du biologiste : le choix de la méthode utilisée pour l’exécution d’une analyse particulière relève de sa seule compétence. Toutefois, il est important que cette méthode soit adaptée aux connaissances théoriques et pratiques du moment et qu’elle suive, dans la mesure du possible, les recommandations des Sociétés Savantes Nationales ou Internationales afin d’assurer la qualité requise...
Les structures tridimensionnelles des protéines: comprendre le vivant à l'échelle de l'atome et proposer de nouveaux médicaments par une approche informatique.
Par Alexandre G. de Brevern
Conférence du 9 mars 2011 à l'Institut français d'Oslo. www.france.no
Le déficit en C1q , Si le système du complément NE s’active PAS, Si le système du complément s’active TROP,Le déficit en premieres fractions activatrices (qui précedent la molécule C3), La prise en charge des déficits en protéines activatrices du complément , L’exploration du système du complément au laboratoire , angio-œdème récurrent en l'absence de réactions allergiques, Cas clinique
Génie génétique - À la recherche d’une cible pour le traitement de l’athérosc...Xplore Health
Protocol for youngsters to carry out a bacterial transformation in a lab. The protocol follows a line of biomedical research which focuses on the study of a potential therapeutic target that could be recognised by a drug against atherosclerosis. The experiment protocol is an opportunity for science centres, museums and schools to replicate a real experiment done in a real lab doing research on drug discovery.
5. Fonctions des protéines
Structurale Le collagène. C’est une protéine qui forme des fibres.
Celles-ci se trouvent dans tous les animaux. Elles sont
secrétées par les cellules le tissu conjonctif comme les
fibroblastes, ainsi que par d’autres types des cellules. Le
collagène est le composant le plus abondante de la peau
les tendons et les os. Le collagène représente le 25% de
la masse totale de protéines chez les mammifères.
6. Fonctions des protéines
Immunitaire Les anticorps
Paratope
Groupe Groupe Groupe Groupe
A B AB O
Globules
rouges
Anticorps
Anti-B Anti-A Aucun Anti-A Anti-B
Antigènes
A B A et B Aucun
7. Fonctions des protéines
Catalytique Les enzymes. Ces protéines ont la
propriété de catalyser ou accélérer
les réactions chimiques qui ont lieu
dans les cellules et dans les milieux
extracellulaires. Si les enzymes
n’étaient pas présents, les réactions
chimiques se feraient à une vitesse
si faible que la vie ne serait pas
possible.
10. Production de protéines thérapeutiques
La déficit de production de certaines protéines
ou la production de certaines protéines non
fonctionnelles dans l’organisme amène
fréquemment à des maladies qui peuvent être Cependant, de nombreuses protéines
graves. humaines ayant une valeur
pharmaceutique importante sont
Ces maladies peuvent parfois être traitées par obtenues difficilement à partir de leur
l'administration clinique de la protéine source naturelle.
provenant de sources externes.
La technologie de protéines
recombinantes, apparue à la fin des
années 70, offre une plateforme
technique très puissante pour la
production contrôlée de protéines
d'intérêt par des procédures
relativement bon marché.
11. Recombinaison génétique
Les protéines recombinantes sont des
protéines produites par des cellules dont l'ADN
a été modifié par recombinaison génétique.
La recombinaison génétique est un
échange d‘information génétique
entre deux génomes différents.
Un gène codant une
protéine d'intérêt est
introduit dans le génome
de l'espèce productrice.
Les protéines recombinantes peuvent être purifiées
et utilisées à des fins thérapeutiques, industrielles
ou bien encore dans les activités de recherche.
16. Étapes pour la production de notre
protéine recombinante
Milieu
Pré-culture Culture Centrifuger
Culot : Cellules
Inoculer notre Inoculer 100 ml de milieu LB Collecter les cellules par Garder le culot cellulaire à
bactérie (souche avec notre pré-culture de centrifugation à 7000 -20°C jusqu'au jour de la
d’expression) dans 5 façon à obtenir une D0600 rpm/15min/4°C lyse.
ml de milieu LB ou TSB initiale de 0,05.
+ kan 30 µg/ml Laver le culot cellulaire avec
Incuber à 37°C/240rpm 70ml de tampon de lavage.
Incuber à 37°C/over
night/sous agitation Lors qu’une DO600 de 0,6 est Recollecter les cellules par
atteinte, induire avec 1 mM centrifugation à 7000
d’IPTG final rpm/15min/4°C
Incuber 2h de plus
17. Étapes pour la purification de notre
protéine recombinante
Culot : Cellules Lyse cellulaire Séparation de
fractions cellulaires
Lyse: Resuspendre le culot cellulaire Séparation des fractions cellulaires: Fraction
congelé à 20°C dans 6ml de tampon Centrifuger à 20000xg/30min/4°C Cytoplasmique
Fraction (surnageant)
de lyse Bugbuster®. pour décanter la fraction Membranaire
membranaire. (culot)
Vortexer pour détacher le culot des
parois du tube en plastique. Diluer le surnageant obtenu avec 6
ml de tampon d’imidazole 10mM.
Incuber sous agitation douce à Étant donné que notre protéine
température pièce pendant 20 Filtrer avec un filtre de 0,2µm pour recombinante se trouve soluble
minutes. éliminer les débris cellulaires en dans le cytoplasme, on purifiera
suspension. donc notre protéine à partir de
cette fraction.
18. Chromatographie d’absorption ou d’affinité
Les chromatographies d'adsorption est un méthode de séparation où la
molécule d'intérêt d'un mélange complexe est isolée des autres constituants
parce qu'elle se lie spécifiquement à la résine ou matrice sur laquelle on fait la
chromatographie.
Mélange Peu Beaucoup
complexe d’affinité d’affinité
Élimination
de protéines
non- Élution de la
spécifiques protéine
du mélange d’intérêt
pure
FPLC Fast protein liquid
chromatography
19. Étapes de la chromatographie d’affinité
1. Lavage de la colonne de nickel. Laver la colonne en passant 25ml de
l’eau distillée à débit de 5ml/miné. Cette étape permet d’éliminer
l’éthanol qui est présente dans la colonne.
2. Équilibration de la colonne: Équilibrer la colonne en passant 25ml d’une
solution d’imidazole 10mM à débit de 5ml/min.
3. Injecter l’échantillon contenant notre protéine à débit de 1ml/min.
20. 5. Lavage de la colonne: Laver la colonne avec une solution
d’imidazole 10mM pour éliminer les protéines non
spécifiques liées à la colonne. Débit 2ml/min pendant
7,5 minutes.
6. Élution: Éluer notre protéine recombinante en faisant un
gradient linéaire d’imidazole de 10mM à 250mM. Débit
2ml/min pendant 50 minutes.
Imidazole
21. Imidazole
250mM
Étape d’élution.
Concentration croissante
d’imidazole (Gradient)
Étape d’injection et lavage.
Concentration constante
d’imidazole (10mM)
Collecte le volume Fractions d’élution collectées de 2ml
mort
22. Électrophorèse de protéines en conditions dénaturantes ou SDS-PAGE
L'électrophorèse a pour but de séparer des molécules chargées au travers d'un gel (un polymère)
sous l'effet d'un champ électrique.
On fait bouillir un mélange de protéines en Ces charges se repoussent et déplient les
présence : chaînes polypeptidiques.
•d'un agent réducteur : le β-mercaptoéthanol En conséquence :
qui réduit les ponts disulfure. •les protéines sont dénaturées : elles ont perdu
leur structure tridimensionnelle native
•d'un détergent anionique fort : le SDS qui
enveloppe les chaînes polypeptidiques des •les protéines n'ont plus de ponts disulfure :
protéines de charges négatives. elles sont sous une forme monomérique
23.
24. Électrophorèse SDS-PAGE
Fractions à analyser:
Volume mort, fraction 10, 15, 20, 25, 30,
35, 40, 45, 50, contrôle positif.
Préparation des échantillons:
Volume de fraction: 80µl
Volume de loading buffer (5x) 20µl
Volume final: 100µl
Chauffer l’échantillon préparé à
95°C/5min.
Déposer entre 60 à 80µl dans les puits.
Direction de
l’électrophorèse Migrer à 70 volts/over night
Lorsque le gel aura migré complètement,
colorer à l’argent
Vérifier le présence d’une bande
correspondant à notre protéine d’intérêt.