SlideShare une entreprise Scribd logo
1  sur  16
Université Mohamed-Khaider Biskra
Faculté des sciences exactes es des sciences de la nature et de la vie
Département des sciences de la nature et de la vie
Filière : Biologie
Spécialité: Biochimie master 1
Préparée par :
Lemsara ibtissam
Guercif ilham
Lamamra aya
Leuli yousra
Meddas khaoula
Année universitaire :2021 /2022
Dirigé par :
Dr ATHAMENA Ahmed
Groupe : 07
1- la culture cellulaire
2-Les techniques d'obtention des cellules.
3- les types des cultures.
4-Les besoins nutritionnels
5-les conditions de culture.
6-les matériels .
7-l'exemple.
8-conclusion.
Plan de travaille:
La culture cellulaire est devenue un des outils majeurs utilise aujourd'hui dans les
sciences de la vie. Ce guide est conçu pour servir d'introduction basique à la culture de
cellules animales. Il convient parfaitement aux personnels de laboratoire qui utilisent
cette technique pour la première fois, ainsi qu'à ceux qui collaborent avec les
chercheurs en culture cellulaire et qui désirent mieux comprendre les concepts clés et la
terminologie de ce domaine passionnant et en pleine expansion.
La culture cellulaire ou culture in vitro est un
ensemble de techniques qui combinent
l’asepsie à un environnement parfaitement
contrôlé (milieu défini). Ces méthodes
s’appliquent aux plants, aux cellules animales
mais aussi aux tissu et bien entendu à des
cellules plus ou moins isolées.
Les technique d’obtention des cellules
Les cellules
organisées en tissu,
en cohésion les unes
avec les autres.
Les cellules libres et
circulants ex les cellules
du sang
Obtention
Peuvent être devisée en
2 méthodes :
la méthode de dissection
 la méthode enzymatique
les types des cultures
Culture stationnaire ou
monocouche:
Ce type de culture est basé sur
l’affinité des cellules pour un
support . Celui-ci peut être du
verre ou du plastique , il peut
être recouvert ou non de
collagène , de gélatine
Culture en suspension:
Sont généralement cultivées:
Dans des flacons spinner ou
dans Erlenmeyers agité dans
lesquels les cellules sont
activement gardées en
suspension dans le milieu
Les conditions de culture
la
température
• La température optimale de croissance est de 37 °C pour les cellules de
mammifères et de 27 °C pour les cellules d’insectes
PH
• Les cellules animales ne tolèrent que de faibles variations de pH et doivent
ainsi être cultivées dans un milieu dont le pH reste compris entre 6,5 et 7,8
selon les cellules, la valeur optimale se situant généralement autour de 7,3
OS
• L’osmolarité optimale pour la culture de cellules animale est de l’ordre de
300 mOsm . kg-1
Les besoins nutritionnels
La partie "nourriture" du milieu de culture est Constituée
Ils permettent aux cellules de
construire de nouvelles protéines et
autres composants essentiels à la
croissance et aux fonctions et
apportent l'énergie nécessaire au
métabolisme
Acides
amines
Vitamines
Sel
minéraux
glucides
Le matériel utilisées
Bioréacteur en verre 5l
Un post de
sécurité(hotte stérile
Un Microscope
Une centrifugeuse Un bain-marie à 37 ° C
Exemple: Culture de neurones corticaux de rat
•Les cultures de cellules neuronales corticales constituent un système modèle
important pour l'étude du développement et de la fonction neuronale, la découverte de
médicaments et les mécanismes des maladies neurologiques. Ce protocole fournit des
instructions étape par étape pour disséquer et cultiver des neurones corticaux à partir
de ratons embryonnaires
Milieu de culture:
.PBS, antibiotique
• Cultrex® Poly-D-Lysine
• (milieu de base neuronal
•Cultrex poly D_lysine
•Cultrex® Mouse Laminin I
Expérience
Jour 1
Préparer les plaques de
culture cellulaire en les
enduisant de poly-D-
Lysine et de laminine
de souris.I
Jour 2
Récupérer les
embryons de rat.
Décapiter.
Retirer les cerveaux des
têtes et les placer sur de
la glace dans du PBS
froid.
petits ciseaux
chirurgicaux
Séparez les hémisphères
corticaux et jeter le tronc
cérébral et le cervelet.
éliminer
le tronc
cérébral
et le
cervelet
Enlevez les méninges des
deux hémisphères et
jetez-les.
Découpez l'hippocampe en
deux hémisphères
et le jeter.
Couper le tissu cortical
isolé.
isolé en petits morceaux
#5 Pinces fines
rejeter
hippocampe
Pour les tissus
embryonnaires
Tissu cortical
Transférez le tissu cortical.
Triturer délicatement. Centrifuger.
Décanter le surnageant.
Remettre les cellules en suspension.
Centrifuger. Décanter le
surnageant.
5 mL
chauffés
Neuronal
de base
5 mL
chauffés
Neuronal
de base
Laver les cellules
deux fois.
Centrifuger.
Décanter le
surnageant
10ml chauffés
neuronal de base
Reconstituer les neurones corticaux
avec milieu de culture complet pour
neurones corticaux milieux de culture
Ensemencer les neurones sur
plaques de culture cellulaire revêtues
Culture de neurones corticaux
pendant la durée souhaitée
Changer de milieu tous les
3-4 jours
suspension de cellules
On conclure que la culture des cellules
animales jouent un grand rôle dans l’étude des
mécanismes de la physiologie cellulaire, dans
la médicine humaine, et dans l’industrie
pharmaceutique. Leur études se faire à l’aide
de plusieurs moyennes, comme la microscope
de fluorescence.
Merci pour votre attention
in vitro culture of an animal cell with an example

Contenu connexe

Tendances

Technique de cryodécapage
Technique de cryodécapageTechnique de cryodécapage
Technique de cryodécapage
liamaniouafia
 
Thèse kamel ben mbarek
Thèse kamel ben mbarekThèse kamel ben mbarek
Thèse kamel ben mbarek
souad06
 

Tendances (20)

Culture in vitro des plantes
Culture in vitro des plantesCulture in vitro des plantes
Culture in vitro des plantes
 
Téchnologie de lait ppt
Téchnologie de lait pptTéchnologie de lait ppt
Téchnologie de lait ppt
 
Physiologie bactérienne
Physiologie bactériennePhysiologie bactérienne
Physiologie bactérienne
 
Rapport de microbiologie
Rapport de microbiologieRapport de microbiologie
Rapport de microbiologie
 
Rapport du tp ; tqpa groupe 2 2
Rapport du tp ; tqpa groupe 2 2Rapport du tp ; tqpa groupe 2 2
Rapport du tp ; tqpa groupe 2 2
 
Technique de cryodécapage
Technique de cryodécapageTechnique de cryodécapage
Technique de cryodécapage
 
Rapport de stage; analyse microbiologique de l'eau
Rapport de stage; analyse microbiologique de l'eauRapport de stage; analyse microbiologique de l'eau
Rapport de stage; analyse microbiologique de l'eau
 
Livre des cours+tp microbiologie
Livre des cours+tp microbiologieLivre des cours+tp microbiologie
Livre des cours+tp microbiologie
 
EVALUATION ET PREVENTION DES RISQUES INFECTIEUX DANS LES LABORATOIRES DE MICR...
EVALUATION ET PREVENTION DES RISQUES INFECTIEUX DANS LES LABORATOIRES DE MICR...EVALUATION ET PREVENTION DES RISQUES INFECTIEUX DANS LES LABORATOIRES DE MICR...
EVALUATION ET PREVENTION DES RISQUES INFECTIEUX DANS LES LABORATOIRES DE MICR...
 
Cours Biotech Master.pdf
Cours Biotech Master.pdfCours Biotech Master.pdf
Cours Biotech Master.pdf
 
Thèse kamel ben mbarek
Thèse kamel ben mbarekThèse kamel ben mbarek
Thèse kamel ben mbarek
 
Cours 3 les cellules phagocytaires
Cours 3 les cellules phagocytairesCours 3 les cellules phagocytaires
Cours 3 les cellules phagocytaires
 
Techniques de concentration en parasitologie
Techniques de concentration en parasitologieTechniques de concentration en parasitologie
Techniques de concentration en parasitologie
 
Diagnostic mycologique dr benlaribi imane halima
Diagnostic mycologique  dr benlaribi imane halimaDiagnostic mycologique  dr benlaribi imane halima
Diagnostic mycologique dr benlaribi imane halima
 
La sécurité au laboratoire
La sécurité au laboratoireLa sécurité au laboratoire
La sécurité au laboratoire
 
Cours Microbio
Cours Microbio Cours Microbio
Cours Microbio
 
Amélioration des Plantes par les Biotechnologies.pdf
Amélioration des Plantes par les Biotechnologies.pdfAmélioration des Plantes par les Biotechnologies.pdf
Amélioration des Plantes par les Biotechnologies.pdf
 
Guide des bonnes pratiques de laboratoire.
Guide des bonnes pratiques de laboratoire.   Guide des bonnes pratiques de laboratoire.
Guide des bonnes pratiques de laboratoire.
 
Le diagnostic biologique du paludisme
Le diagnostic biologique du paludismeLe diagnostic biologique du paludisme
Le diagnostic biologique du paludisme
 
La callogenèse
La callogenèseLa callogenèse
La callogenèse
 

Similaire à in vitro culture of an animal cell with an example

Microsoft office power point presentation جديد ‫‬
Microsoft office power point presentation جديد ‫‬Microsoft office power point presentation جديد ‫‬
Microsoft office power point presentation جديد ‫‬
Miraj Microbio
 
Exposeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeee
ExposeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeExposeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeee
Exposeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeee
Miraj Microbio
 
Technique culture in vitro vegetale. Et biotechnologie végétale.pdf
Technique culture in vitro vegetale. Et biotechnologie végétale.pdfTechnique culture in vitro vegetale. Et biotechnologie végétale.pdf
Technique culture in vitro vegetale. Et biotechnologie végétale.pdf
nouairiissam
 
Production des anticorps monoclonaux
Production des anticorps monoclonauxProduction des anticorps monoclonaux
Production des anticorps monoclonaux
Asmae LGUENSAT
 
Les cellules !!
Les cellules !!Les cellules !!
Les cellules !!
niknad0173
 
Scientific Dossier Mustela : New Discoveries on infant skin from the first da...
Scientific Dossier Mustela : New Discoveries on infant skin from the first da...Scientific Dossier Mustela : New Discoveries on infant skin from the first da...
Scientific Dossier Mustela : New Discoveries on infant skin from the first da...
MustelaMedical
 

Similaire à in vitro culture of an animal cell with an example (20)

Cellules animales
Cellules animalesCellules animales
Cellules animales
 
CULTURE DE VIRUS
CULTURE DE VIRUSCULTURE DE VIRUS
CULTURE DE VIRUS
 
Microsoft office power point presentation جديد ‫‬
Microsoft office power point presentation جديد ‫‬Microsoft office power point presentation جديد ‫‬
Microsoft office power point presentation جديد ‫‬
 
cultureinvitro-130225021317-phpapp02.pptx
cultureinvitro-130225021317-phpapp02.pptxcultureinvitro-130225021317-phpapp02.pptx
cultureinvitro-130225021317-phpapp02.pptx
 
Élucidation de quelques mécanismes, à l’échelle embryonnaire, impliqués dans ...
Élucidation de quelques mécanismes, à l’échelle embryonnaire, impliqués dans ...Élucidation de quelques mécanismes, à l’échelle embryonnaire, impliqués dans ...
Élucidation de quelques mécanismes, à l’échelle embryonnaire, impliqués dans ...
 
cultureinvitro-130225021317-phpapp02.pdf
cultureinvitro-130225021317-phpapp02.pdfcultureinvitro-130225021317-phpapp02.pdf
cultureinvitro-130225021317-phpapp02.pdf
 
Fr-NutraStem-stress-oxydatif
Fr-NutraStem-stress-oxydatifFr-NutraStem-stress-oxydatif
Fr-NutraStem-stress-oxydatif
 
Participez à la recherche sur l’athérosclérose
Participez à la recherche sur l’athéroscléroseParticipez à la recherche sur l’athérosclérose
Participez à la recherche sur l’athérosclérose
 
Exposeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeee
ExposeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeExposeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeee
Exposeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeee
 
Technique culture in vitro vegetale. Et biotechnologie végétale.pdf
Technique culture in vitro vegetale. Et biotechnologie végétale.pdfTechnique culture in vitro vegetale. Et biotechnologie végétale.pdf
Technique culture in vitro vegetale. Et biotechnologie végétale.pdf
 
Production des anticorps monoclonaux
Production des anticorps monoclonauxProduction des anticorps monoclonaux
Production des anticorps monoclonaux
 
Fonds attribues en 2015 a la Recherche sur la Sclerose En Plaques
Fonds attribues en 2015 a la Recherche sur la Sclerose En PlaquesFonds attribues en 2015 a la Recherche sur la Sclerose En Plaques
Fonds attribues en 2015 a la Recherche sur la Sclerose En Plaques
 
Nc univers vivant chap 3
Nc univers vivant chap 3Nc univers vivant chap 3
Nc univers vivant chap 3
 
Le clonage
Le clonageLe clonage
Le clonage
 
Le clonage
Le clonageLe clonage
Le clonage
 
Les cellules !!
Les cellules !!Les cellules !!
Les cellules !!
 
Scientific Dossier Mustela : New Discoveries on infant skin from the first da...
Scientific Dossier Mustela : New Discoveries on infant skin from the first da...Scientific Dossier Mustela : New Discoveries on infant skin from the first da...
Scientific Dossier Mustela : New Discoveries on infant skin from the first da...
 
Le cytoplasme
Le cytoplasmeLe cytoplasme
Le cytoplasme
 
Cours 1 physiologie microbienne
Cours 1 physiologie microbienneCours 1 physiologie microbienne
Cours 1 physiologie microbienne
 
Le développement des plantes
Le développement des plantesLe développement des plantes
Le développement des plantes
 

Plus de ilham guercif (9)

Phytochemical profile and antioxidant activity of two varieties of dates (Pho...
Phytochemical profile and antioxidant activity of two varieties of dates (Pho...Phytochemical profile and antioxidant activity of two varieties of dates (Pho...
Phytochemical profile and antioxidant activity of two varieties of dates (Pho...
 
antioxidant activity of the two varieties of dates
antioxidant activity of the two varieties of datesantioxidant activity of the two varieties of dates
antioxidant activity of the two varieties of dates
 
Plants anti stress
Plants anti stressPlants anti stress
Plants anti stress
 
extraction of enzyme B amylase from plant arbus precatarius
extraction of enzyme B amylase from plant arbus precatarius extraction of enzyme B amylase from plant arbus precatarius
extraction of enzyme B amylase from plant arbus precatarius
 
growth hormone (GH)
growth hormone (GH)growth hormone (GH)
growth hormone (GH)
 
the SOS repair system in E Coli bacteria
the SOS repair system in E Coli bacteriathe SOS repair system in E Coli bacteria
the SOS repair system in E Coli bacteria
 
Gastrointestinal hormones
Gastrointestinal hormonesGastrointestinal hormones
Gastrointestinal hormones
 
Urinary tract infections
Urinary tract infectionsUrinary tract infections
Urinary tract infections
 
Les infections urinaire
Les infections urinaireLes infections urinaire
Les infections urinaire
 

Dernier

Dernier (6)

MÉMOIRE DE MASTER EN DIAGNOSTIC DES SYSTÈMES ÉNERGÉTIQUES
MÉMOIRE DE MASTER EN DIAGNOSTIC DES SYSTÈMES ÉNERGÉTIQUESMÉMOIRE DE MASTER EN DIAGNOSTIC DES SYSTÈMES ÉNERGÉTIQUES
MÉMOIRE DE MASTER EN DIAGNOSTIC DES SYSTÈMES ÉNERGÉTIQUES
 
RAPPORT PFE Projet urbain: -«El-Hamma d'un quartier à une ville» -«La créat...
RAPPORT  PFE Projet urbain: -«El-Hamma d'un quartier à une ville»  -«La créat...RAPPORT  PFE Projet urbain: -«El-Hamma d'un quartier à une ville»  -«La créat...
RAPPORT PFE Projet urbain: -«El-Hamma d'un quartier à une ville» -«La créat...
 
Intervention dans le cadre de la journée SOUND du 26 avril 2024
Intervention dans le cadre de la journée SOUND du 26 avril 2024Intervention dans le cadre de la journée SOUND du 26 avril 2024
Intervention dans le cadre de la journée SOUND du 26 avril 2024
 
rapport de stage Organisme d’accueil Centre National d'Etudes & de Recherche...
rapport de stage Organisme d’accueil  Centre National d'Etudes & de Recherche...rapport de stage Organisme d’accueil  Centre National d'Etudes & de Recherche...
rapport de stage Organisme d’accueil Centre National d'Etudes & de Recherche...
 
La constellation d'Andromède.présentation.pptx
La constellation d'Andromède.présentation.pptxLa constellation d'Andromède.présentation.pptx
La constellation d'Andromède.présentation.pptx
 
La face cachée des jeux vidéo - Conférence de 15/05 2024
La face cachée des jeux vidéo - Conférence de 15/05 2024La face cachée des jeux vidéo - Conférence de 15/05 2024
La face cachée des jeux vidéo - Conférence de 15/05 2024
 

in vitro culture of an animal cell with an example

  • 1. Université Mohamed-Khaider Biskra Faculté des sciences exactes es des sciences de la nature et de la vie Département des sciences de la nature et de la vie Filière : Biologie Spécialité: Biochimie master 1 Préparée par : Lemsara ibtissam Guercif ilham Lamamra aya Leuli yousra Meddas khaoula Année universitaire :2021 /2022 Dirigé par : Dr ATHAMENA Ahmed Groupe : 07
  • 2. 1- la culture cellulaire 2-Les techniques d'obtention des cellules. 3- les types des cultures. 4-Les besoins nutritionnels 5-les conditions de culture. 6-les matériels . 7-l'exemple. 8-conclusion. Plan de travaille:
  • 3. La culture cellulaire est devenue un des outils majeurs utilise aujourd'hui dans les sciences de la vie. Ce guide est conçu pour servir d'introduction basique à la culture de cellules animales. Il convient parfaitement aux personnels de laboratoire qui utilisent cette technique pour la première fois, ainsi qu'à ceux qui collaborent avec les chercheurs en culture cellulaire et qui désirent mieux comprendre les concepts clés et la terminologie de ce domaine passionnant et en pleine expansion. La culture cellulaire ou culture in vitro est un ensemble de techniques qui combinent l’asepsie à un environnement parfaitement contrôlé (milieu défini). Ces méthodes s’appliquent aux plants, aux cellules animales mais aussi aux tissu et bien entendu à des cellules plus ou moins isolées.
  • 4. Les technique d’obtention des cellules Les cellules organisées en tissu, en cohésion les unes avec les autres. Les cellules libres et circulants ex les cellules du sang Obtention Peuvent être devisée en 2 méthodes : la méthode de dissection  la méthode enzymatique
  • 5. les types des cultures Culture stationnaire ou monocouche: Ce type de culture est basé sur l’affinité des cellules pour un support . Celui-ci peut être du verre ou du plastique , il peut être recouvert ou non de collagène , de gélatine Culture en suspension: Sont généralement cultivées: Dans des flacons spinner ou dans Erlenmeyers agité dans lesquels les cellules sont activement gardées en suspension dans le milieu
  • 6. Les conditions de culture la température • La température optimale de croissance est de 37 °C pour les cellules de mammifères et de 27 °C pour les cellules d’insectes PH • Les cellules animales ne tolèrent que de faibles variations de pH et doivent ainsi être cultivées dans un milieu dont le pH reste compris entre 6,5 et 7,8 selon les cellules, la valeur optimale se situant généralement autour de 7,3 OS • L’osmolarité optimale pour la culture de cellules animale est de l’ordre de 300 mOsm . kg-1
  • 7. Les besoins nutritionnels La partie "nourriture" du milieu de culture est Constituée Ils permettent aux cellules de construire de nouvelles protéines et autres composants essentiels à la croissance et aux fonctions et apportent l'énergie nécessaire au métabolisme Acides amines Vitamines Sel minéraux glucides
  • 8. Le matériel utilisées Bioréacteur en verre 5l Un post de sécurité(hotte stérile Un Microscope Une centrifugeuse Un bain-marie à 37 ° C
  • 9. Exemple: Culture de neurones corticaux de rat •Les cultures de cellules neuronales corticales constituent un système modèle important pour l'étude du développement et de la fonction neuronale, la découverte de médicaments et les mécanismes des maladies neurologiques. Ce protocole fournit des instructions étape par étape pour disséquer et cultiver des neurones corticaux à partir de ratons embryonnaires Milieu de culture: .PBS, antibiotique • Cultrex® Poly-D-Lysine • (milieu de base neuronal •Cultrex poly D_lysine •Cultrex® Mouse Laminin I
  • 10. Expérience Jour 1 Préparer les plaques de culture cellulaire en les enduisant de poly-D- Lysine et de laminine de souris.I Jour 2 Récupérer les embryons de rat. Décapiter. Retirer les cerveaux des têtes et les placer sur de la glace dans du PBS froid. petits ciseaux chirurgicaux Séparez les hémisphères corticaux et jeter le tronc cérébral et le cervelet. éliminer le tronc cérébral et le cervelet
  • 11. Enlevez les méninges des deux hémisphères et jetez-les. Découpez l'hippocampe en deux hémisphères et le jeter. Couper le tissu cortical isolé. isolé en petits morceaux #5 Pinces fines rejeter hippocampe
  • 12. Pour les tissus embryonnaires Tissu cortical Transférez le tissu cortical. Triturer délicatement. Centrifuger. Décanter le surnageant. Remettre les cellules en suspension. Centrifuger. Décanter le surnageant. 5 mL chauffés Neuronal de base 5 mL chauffés Neuronal de base Laver les cellules deux fois. Centrifuger. Décanter le surnageant 10ml chauffés neuronal de base
  • 13. Reconstituer les neurones corticaux avec milieu de culture complet pour neurones corticaux milieux de culture Ensemencer les neurones sur plaques de culture cellulaire revêtues Culture de neurones corticaux pendant la durée souhaitée Changer de milieu tous les 3-4 jours suspension de cellules
  • 14. On conclure que la culture des cellules animales jouent un grand rôle dans l’étude des mécanismes de la physiologie cellulaire, dans la médicine humaine, et dans l’industrie pharmaceutique. Leur études se faire à l’aide de plusieurs moyennes, comme la microscope de fluorescence.
  • 15. Merci pour votre attention