Ce document décrit la méthode de numération des plaquettes dans le sang, en utilisant des solutions diluantes et un microscope. Les valeurs normales des thrombocytes sont comprises entre 150 000 et 400 000/mm3, et il aborde aussi les conditions pathologiques comme la thrombocytose et la thrombocythémie. La procédure implique différentes étapes de préparation et d'analyse pour obtenir le nombre de plaquettes par mm3.

1. S/Abdessemed
S/Abdessemed
Numération des
plaquettes
Par S / Abdessemed

2. S/Abdessemed
But :
• Déterminer le nombre de plaquettes présent dans
un volume de sang, soit le nombre de plaquettes
dans un litre de sang.
Principe :
• Le sang est dilué dans un liquide permettant la
lyse des hématies et évitant l’agrégation des
plaquettes entres elles, et la numération est ensuite
effectuée au microscope optique ou à contraste de
phase.

3. S/Abdessemed
Réactifs
 Solution A : chlorhydrate de procaïne………………..24,30g
Eau distillée……………………………qsp 100 ml
A conserver à +4°c quelques semaines.
 Solution B : chlorure de
Na…………………………………200mg
Eau distillée……………………………qsp 100 ml
A conserver à +4°c quelques semaines.
 La dilution à préparer extemporanément :
Solution A…………………………………….01ml
Solution B……………………………………09m
 Sang veineux recueilli sur EDTA (inhibe l’agrégation
plaquettaire),ou sang capillaire

4. S/Abdessemed
Prélèvement sur citrate de sodium
• NB : l’anticoagulant utilisé pour la réalisation
de l’hémogramme est EDTA mais dans le cas
d’agrégats plaquettaires et pour le contrôle de
la numération on utilise comme anticoagulant
le citrate de sodium et compte tenu de la
dilution du sang dans l’anticoagulant, le
résultat obtenu doit être majoré de 10% (x 1,1)

5. S/Abdessemed
Matériel
• Pipette de Potain à GR.
• Hématimètre de malassez préalablement lavée
à l’eau chlorhydrique à 5 %, passé à l’alcool et
essuyer avec un linge non pelucheux.
• Lamelles
• Agitateur de pipette (si possible)
• Microscope à contraste de phase

6. S/Abdessemed
Technique
• Aspirer le sang jusqu’au repère 1 de la pipette de
Potain des GR, essuyer la pointe.
• Aspirer le liquide de dilution jusqu’au repere101,
pour obtenir une dilution au 1/100.
• Agiter à la main au moins 1 mn, et laisser à plat
30 mn.
• Agiter à l’aide de l’agitateur mécanique 5 mn.
• Laisser couler les 3ou 4 premières gouttes et
remplir l’hématimètre.

7. S/Abdessemed
• Laisser reposer à plat 15 mn dans une chambre
humide (ou une boite de pétri au fond de
laquelle on place du papier filtre imbibé d’eau
distillé).
• Faire la numération en contraste de phase à
l’objectif 40x :les plaquettes apparaissent
comme des points noirs entourés d’un anneau
brillants.

8. S/Abdessemed
Calcul :
• Soit N le nombre de plaquettes comptées dans
10 rectangles quadrillés : le nombre de
plaquettes par mm3 =N x 1000.
Valeurs normales :
• Les valeurs normales des thrombocytes se
situent entre 150 000 et 400 000/mm3

9. S/Abdessemed
Valeurs pathologiques
• On peut observer deux types d’augmentation
du nombre de plaquettes :
• La thrombocytose est une augmentation des
thrombocytes secondaire, habituellement
transitoire et réversible selon la maladie
causale (infection, inflammation, hémorragie,
etc.).elle se rencontre après l’ablation de la
rate ; dans ce cas, elle est permanente.

10. S/Abdessemed
• La thrombocythémie est une augmentation du
nombre des thrombocytes accompagnant ou
non une atteinte des autres lignées
hématopoïétiques de la moelle osseuse
(syndromes myéloprolifératif).

11. S/Abdessemed
• Une diminution du nombre des thrombocytes
ou thrombocytopénie peut être causée par une
insuffisance de production de la moelle
(thrombopoiese inefficace),une anomalie de
répartition(séquestration splénique importante)
ou une destruction excessive des
thrombocytes(AC anti-plaquettaires ou CIVD).

12. S/Abdessemed