La numération des réticulocytes permet d'évaluer l'activité érythropoiétique de la moelle osseuse en comptant les réticulocytes présents dans le sang via des colorants vitaux. Les procédures incluent la préparation de frottis à partir de sang et l'utilisation de microscopes pour observer et quantifier les réticulocytes, avec des valeurs normales variant selon l'âge. Des variations dans les taux de réticulocytes peuvent indiquer des conditions pathologiques comme les anémies hémolytiques ou l'aplasie médullaire.

1. A S
Numération des
réticulocytes
Par : S/Abdessemed

2. A S
But :
La numération des réticulocytes permet
d’apprécier l’activité érythropoiétique
de la moelle
Le réticulocyte est un globule rouge
sans noyau caractérisé par la présence
d’une substance granulo-filamenteuse
dans le cytoplasme ( restes d’acide
ribonucléique),

3. A S
Principe:
Il s’agit de déterminer le nombre de
réticulocytes présents dans le sang
circulant à l’aide de colorants vitaux qui
précipitent les ribosomes et font
apparaitre la substance granulo-
filamenteuse alors visible au microscope

4. A S
Matériel et Réactifs :
Sang veineux recueilli sur EDTA ou
prélevement cutané avec capillaires
héparinés
Colorants:
 Bleu de méthylène nouveau:Bleu de
méthylène nouveau, oxalate de potassium et
eau distillée,
 Bleu de crésyle brillant: Bleu de crésyle
brillant, chlorure de sodiumet eau distillée

5. A S
• Tubes à hémolyse
• Bain-marie ou étuve à 37°C
• Lames
• Microscope

6. A S
Technique:
• Prélever 3 à 5 gouttes de sang et les
placer dans un tube à hémolyse
• Ajouter une quantité égale de colorant,
mélanger par rotation
• Incuber au Bain-marie ou à l’étuve à 37°C
pendant 15 minutes
• Aprés l’incubation, mélanger pour
remettre les GR en suspension

7. A S
• Déposer une goutte du mélange sur
chacune des lames et préparer quelques
frottis par la technique habituelle en
faisant des étalements minces
• Les frottis sont examinés sans avoir été
fixés ou contre colorés,

8. A S
Numération:
 La numération se fait à l’objectif à
immersion (x100)
 Un oculaire avec un diaphragme réglable
aide à compter les globules
 Les réticulocytes sont colorés en bleu et
on voit dans leur cytoplasmes la
substance granulo-filamenteuse colorée,
soit en amas, en bandes ou en granules,

9. A S
Évolution cytologique durant 24 à 48
heures avec
charge progressive en hémoglobine
disparition des restes ribosomaux
Réticulocytes
Hématie

10. A S
 compter les réticulocytes présents par
rapport à 1000 ou 3000 GR et établir le
pourcentage selon les nombres comptés
 exemple, si 50 réticulocytes ont été
observés pour 3000 globules rouges:
50 x 100 = 1,6%
3000

11. A S
Causes d’erreur:
• Les erreurs peuvent provenir d’une
mauvaise préparation du colorant, d’un
mélange inadéquat du sang et du
colorant avant la confection des frottis,
d’une incubation prolongée, de la
présence sur le frottis de précipités de
colorant ou de lames malpropres,
Attention aux artéfacts

12. A S
• NB : habituellement, on ajoute la meme
quantité de sang que de colorant,
cependant, pour obtenir une coloration
optimale, on devrait ajouter un plus
grand volume de sang lorsque le taux
d’hématocrite du malade est bas
(anémie) et, par contre, une plus petite
quantité de sang lorsque l’hématocrite
est élevé (polyglobulie)

13. A S
Valeurs normales
 Adulte: 0,2 à 2,0%
 Nouveau né: 2 à 6%

14. A S
Valeurs pathologiques:
 On observe une
augmentation des
réticulocytes en
particulier dans les
anémies hémolytiques
aigues ou chroniques,
congénitales ou
acquises et après
traitement d’une
anémie ferriprive par
le fer on d’une
anémie de Biermer
par la vitamine B12

15. A S
 Une diminution des
réticulocytes se voit
dans l’aplasie ou
l’hypoplasie médullaire,
lorsqu’il y a
épuisement des
réserves médullaires
(fer et vitamines B12)
et au cours du
traitement pour
diverses néoplasie
(chimiothérapie et
radiations)

16. A S