Le document détaille le sérodiagnostic de Wright pour détecter les anticorps anti-brucelliques dans le sérum à l'aide d'une réaction d'agglutination avec un antigène brucellique. La méthodologie implique la dilution du sérum et l'observation de l'agglutination après incubation, permettant de déterminer les titres de brucellose. Des situations pouvant entraîner des erreurs de diagnostic sont également mentionnées, telles que la phase pré-sérologique de la maladie et la présence d'anticorps bloquants.

1. Abdsalah
Sérodiagnostic
de Wright
Par : S / Abdessemed

2. Abdsalah
Principe
• C’est une réaction d’agglutination
permettant de mettre en évidence des
Anti corps anti brucellique dans le
sérum de sujet en présence de
l’antigène brucellique qui est obtenu à
partir de cultures smooth Brucella
abortus inactivées par la chaleur et le
phénol.

3. Abdsalah
• Il est standardisé par rapport au sérum
anti-abortus international (comité
experts OMS sur la standardisation
biologiques 1954).
• Employé par la technique classique
d’agglutination en tubes, il permet de
déterminer le titre d’un sérum suspect.

4. Abdsalah
Réactifs
Antigène brucellique pour agglutination
• A diluer au 1/10 dans une solution de
NaCl à 8.5 g/l pour l’utilisation. Agiter le
flacon avant de pratiquer la dilution.
Sérums à tester
• Les sérums peuvent être inactivés par
chauffage de 30 minutes à 56° C. Cette
opération n’est cependant pas
indispensable.

5. Abdsalah
N° des tubes 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Solution saline
Sérum au1/5
Antigène dilué
-
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0,5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
-
0.5
Dilution finale 1/10 1/20 1/40 1/80 1/160 1/320 1/640 1/1280 1/2560
Témoin
antigène
Mode opératoire :
• Diluer le sérum au 1/5 dans une solution de NaCl à 8.5 g/l
• Pratiquer la galerie de dilutions suivante : (en ml)
Mettre les tubes à l’étuve à 37°C pendant 24 heures.

6. Abdsalah
Lecture
• Une demi-Heure après la sortie de
l’étuve, examiner les tubes sur un fond
sombre.
• Noter la plus haute
dilution de sérum qui
provoque
l’agglutination
complète de l’antigène
(liquide surnageant
limpide).

7. Abdsalah
Interprétation
• Si le taux d’agglutination atteint ou
dépasse le titre de 1/80 (dilution finale),
le malade peut être considéré comme
atteint d’une brucellose en cours
d’évolution.
• Un titre de 1/40 peut indiquer un
brucellose commençante ou sur son
déclin. Un nouveau sérodiagnostic,
pratiqué une à deux semaines plus tard ,
permettra de le confirmer.

8. Abdsalah
Causes d’erreurs :
• Phase pré-sérologique de la maladie :
dure généralement 10 à 15 jours. Elle
peut être plus prolongée, notamment
chez l’enfant.
• Augmentation transitoire du taux des
agglutinines chez certains sujets,
anciens positifs, à la suite d’une
infection ou d’une vaccination
quelconque.

9. Abdsalah
• Pratiquer un nouvel examen 15 jours
après.
 Phénomène de zone : assez fréquent au
cours des brucelloses.
• Le sérum faiblement dilué ne provoque
pas l’agglutination de l’antigène, alors
qu’elle se produit avec les plus fortes
dilutions.

10. Abdsalah
Présence d’anticorps incomplets
(bloquants) donnant lieu a des réactions
faussement négatives. Dans ce cas :
• 1.Mettre en évidence le blocage de
l’antigène : Ajouter une goutte d’un sérum
témoin positif (sérum anti abortus par
exemple) dans les premiers tubes.

11. Abdsalah
• Porter à nouveau à l’étuve à 37°C. En
présence d’anticorps bloquants, le sérum
positif n’agglutine pas l’antigène.
• 2.Pratiquer un test indirect de Coombs.

12. Abdsalah