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A/S
La rétraction du caillot
Dosages basés sur le
temps de
prothrombine (facteurs II,
V, VII ou X)
Par : S/Abdessemed
A/S
A/S
1. Principe :
Les dosages des facteurs II, V, VII et X
peuvent être effectués par un test en un
temps basé sur le temps de prothrombine.
Le dosage consiste essentiellement en une
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Les facteurs de coagulation II, VII et
X peuvent être dosés de la même façon
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mais en utilisant le plasma déficient
approprié.
Il faut utiliser un plasma de référence
approprié dont la concentration en
facteur que l’on doit doser est connue.
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A/S
RÉACTIFS
Plasma déficient en facteur V
La déficience en facteur V peut être d’origine
congénitale ou artificielle (plasma vieilli).
Solution saline en tampon d’Owren
Plasma citraté pauvre en plaquettes : plasma à
tester et plasma étalon Pour le plasma étalon,
utiliser un pool de plasma normal de 20
donneurs (conservé à -70 °C ou à une
température inférieure) ou un plasma de
référence ou un étalon commercial.
 Thromboplastine/calcium (comme utilisé dans
les test de TP)
A/S
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MÉTHODE
1. Préparer des dilutions dans des tubes
en plastique pour le plasma à tester et
le plasma étalon
Dilution Plasma (ml) Solution saline tampon d’Owren (ml)
1/5 0,1 0,4
1/10 0,1 0,9
1/20 0,5 (1/10) 0,5
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A/S
A/S
2 Doser chaque dilution de plasma de
référence ou étalon comme suit :
Pipeter 0,1 ml de chaque dilution dans un
tube en verre de 75 X 10 mm.
Ajouter 0,1 ml de plasma déficient en
facteur V.
Chauffer à 37 °C pendant 2 minutes.
Ajouter 0,2 ml de thromboplastine/calcium
préchauffée.
Enclencher le chronomètre et mélanger.
A/S
A/S
3 Noter le temps de coagulation.
4 Répéter avec les dilutions de plasma à
tester.
Pour les plasmas à tester, doser des
dilutions de 1/10, 1/20 et 1/40 si l’on
prévoit qu’ils seront normaux. Pour les
plasmas à tester que l’on prévoit avoir
des taux réduits, tester des dilutions de
1/5, 1/10 et 1/20.
A/S
A/S
Un échantillon « tampon » doit aussi être
dosé comme suit :
- 0,1 ml solution tampon d’Owren
- 0,1 ml plasma déficient en facteur V
- 0,2 ml réactif à la thromboplastine/calcium
Le temps de coagulation de l’échantillon «
tampon » reflète la qualité du plasma
déficient dont le taux doit être inférieur à
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RÉSULTATS
Tracer la courbe des temps de
coagulation des plasmas contrôle et des
plasmas à tester en fonction des
concentrations du facteur V sur du
papier logarithmique.
Une valeur de 100 % est arbitrairement
assignée à la dilution de 1/10, donc une
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A/S
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Le taux en facteur V dans le plasma du
patient, par rapport au plasma normal ou
au plasma de référence étalon, est
extrapolé à partir des graphiques.
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Dosage des facteurs de la voie exogène

  • 1. A/S La rétraction du caillot Dosages basés sur le temps de prothrombine (facteurs II, V, VII ou X) Par : S/Abdessemed
  • 2. A/S A/S 1. Principe : Les dosages des facteurs II, V, VII et X peuvent être effectués par un test en un temps basé sur le temps de prothrombine. Le dosage consiste essentiellement en une comparaison entre la capacité des dilutions d’un plasma étalon ou de référence et celle du plasma à tester à corriger le temps de prothrombine d’un plasma totalement déficient dans le facteur que l’on veut mesurer.
  • 3. A/S A/S Dans un dosage du facteur V, par exemple (description ci-dessous), le plasma-réactif est déficient en facteur V mais contient des quantités normales des facteurs II, VII, X et de fibrinogène.
  • 4. A/S A/S Les facteurs de coagulation II, VII et X peuvent être dosés de la même façon que dans l’exemple décrit ci-dessous mais en utilisant le plasma déficient approprié. Il faut utiliser un plasma de référence approprié dont la concentration en facteur que l’on doit doser est connue.
  • 5. A/S A/S RÉACTIFS Plasma déficient en facteur V La déficience en facteur V peut être d’origine congénitale ou artificielle (plasma vieilli). Solution saline en tampon d’Owren Plasma citraté pauvre en plaquettes : plasma à tester et plasma étalon Pour le plasma étalon, utiliser un pool de plasma normal de 20 donneurs (conservé à -70 °C ou à une température inférieure) ou un plasma de référence ou un étalon commercial.  Thromboplastine/calcium (comme utilisé dans les test de TP)
  • 6. A/S A/S MÉTHODE 1. Préparer des dilutions dans des tubes en plastique pour le plasma à tester et le plasma étalon Dilution Plasma (ml) Solution saline tampon d’Owren (ml) 1/5 0,1 0,4 1/10 0,1 0,9 1/20 0,5 (1/10) 0,5 1/40 0,5 (1/20) 0,5
  • 7. A/S A/S 2 Doser chaque dilution de plasma de référence ou étalon comme suit : Pipeter 0,1 ml de chaque dilution dans un tube en verre de 75 X 10 mm. Ajouter 0,1 ml de plasma déficient en facteur V. Chauffer à 37 °C pendant 2 minutes. Ajouter 0,2 ml de thromboplastine/calcium préchauffée. Enclencher le chronomètre et mélanger.
  • 8. A/S A/S 3 Noter le temps de coagulation. 4 Répéter avec les dilutions de plasma à tester. Pour les plasmas à tester, doser des dilutions de 1/10, 1/20 et 1/40 si l’on prévoit qu’ils seront normaux. Pour les plasmas à tester que l’on prévoit avoir des taux réduits, tester des dilutions de 1/5, 1/10 et 1/20.
  • 9. A/S A/S Un échantillon « tampon » doit aussi être dosé comme suit : - 0,1 ml solution tampon d’Owren - 0,1 ml plasma déficient en facteur V - 0,2 ml réactif à la thromboplastine/calcium Le temps de coagulation de l’échantillon « tampon » reflète la qualité du plasma déficient dont le taux doit être inférieur à moins de 1 %.
  • 10. A/S A/S RÉSULTATS Tracer la courbe des temps de coagulation des plasmas contrôle et des plasmas à tester en fonction des concentrations du facteur V sur du papier logarithmique. Une valeur de 100 % est arbitrairement assignée à la dilution de 1/10, donc une dilution de 1/5 équivaut à 200 %, etc.
  • 11. A/S A/S Le taux en facteur V dans le plasma du patient, par rapport au plasma normal ou au plasma de référence étalon, est extrapolé à partir des graphiques. NB : Les personnes ayant des taux abaissés en facteur V devraient être soumises à un dosage du facteur VIII afin d’exclure une déficience combinée en facteurs V et VIII.
  • 12. A/S