Le document présente une méthode pour déterminer le nombre de globules rouges dans un volume de sang à l'aide d'un microscope et d'un hématimètre. Il décrit le protocole de dilution, les équipements nécessaires, et fournit des valeurs normales ainsi que des variations physiologiques et pathologiques du nombre de globules rouges. Les résultats du comptage sont calculés et des exemples concrets sont donnés pour illustrer la méthode.

1. SS//AAbbddeessseemmeedd
La numération des
globules rouges
Par S / Abdessemed

2. S/Abdessemed
But
• Déterminer le nombre de globules
rouges présents dans un volume de sang
total, soit le nombre de GR
contenus dans un litre de sang

3. S/Abdessemed
Principe
• Le comptage au microscope optique à
l’état frais des GR contenus dans un
volume précis de sang dilué. Le diluant
utilisé prévient la lyse des GR et des GB,
mais ces derniers sont normalement si
peu nombreux par rapport aux GR qu’ils
n’interfèrent pas dans les résultats.

4. S/Abdessemed
Réactifs
Liquide de dilution :
• Solution de marcano : sulfate de Na
cristallisé………….5g
• Formol…………………………………….1ml
• Eau distillée……………………………..qsp 100ml
• Ou le soluté physiologique à 0,85g /dl
• L’échantillon sanguin : sang veineux recueilli
sur EDTA.

5. Matériel Pipette de dilution
S/Abdessemed
modèle Potain à GR : elle
comporte à la partie
supérieure un
renflement contenant
une bille de verre rouge,
on adapte ces pipettes
un tube de caoutchouc
terminé par un embout
buccal.
L’hématimètre de
malassez
Lamelles
Microscope

6. S/Abdessemed
Technique
• Bien agiter le flacon de sang.
• Aspirer le sang jusqu’au repère 2 de la pipette
de Potain.
• Essuyer l’extrémité inferieure de la pipette
avec un tampon de gaze ou un papier filtre afin
d’éviter la contamination du diluant par le sang.
• Aspirer le liquide de dilution jusqu’au repère
101, en position verticale (pour éviter la
formation de bulles d’air et de ne pas passer le
repère 101), on obtient une dilution au 1/200.

7. • Enlever le tubule de caoutchouc et
bloquer la pipette entre le pouce et
l’index.
• Homogénéiser, en agitant fortement en
position horizontale.
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8. • Appliquer la lamelle sur l’hématimètre
• Rejeter les 3à5 premières gouttes (ne
contenant que le diluant), appliquer
légèrement la pipette entre l’hématimètre
et la lamelle, puis soulever légèrement
l’index qui bouche l’extrémité supérieure
de la pipette de manière à laisser couler le
mélange lentement sous la lamelle qui se
remplie par capillarité.
S/Abdessemed

9. • Laisser reposer 2à3 mn pour permettre
aux globules de se déposer.
• Vérifier au faible grossissement (10x) la
répartition homogène des globules, sinon
recommencer.
• A l’objectif 40x, faire la numération des
GR dans 4 rectangles quadrillés (l’écart
entre eux ne doit pas dépasser 20
éléments).
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10. S/Abdessemed
Calcul
GR par mm3=N/4 X 200 X100
 N=le nombre d’éléments compté dans
les4 rectangles.
 200=le coefficient de dilution.
 100=le nombre de rectangles de
l’hématimètre.

11. S/Abdessemed
Exemple
o Rectangle 1 :198
o Rectangle 2 :202
o Rectangle3 :216
o Rectangle 4 :196
N=812
N/4 = 203 x200 x 100 =4.060.000/mm3

12. S/Abdessemed
Valeurs normales
 Homme………………….4,5 à 5,5 x 106/mm3
 Femme………………… 4,0 à 5,0 x 106/mm3
Nouveau-né……………..4,0 à 6,0 x 106/mm3
Enfant d’un an………….3,6 à 5,2 x 106/mm3

13. Variations physiologiques
• Les femmes ont un nombre de GR
inferieur à celui des hommes, mais sans
différence significative avant la puberté
ou après la ménopause.
• il est possible que cette différence soit
causée par l’effet inhibiteur des
oestrogènes sur l’érythropoïèse plutôt
que par les pertes menstruelles si celles-ci
sont normales.
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14. Variations physiologiques (suite)
• Les sujets qui vivent en altitude ont un
nombre de GR et un taux d’hémoglobine
plus élevés que ceux qui habitent au
niveau de la mer.
• Des efforts physiques intenses
produisent une augmentation des GR.
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15. Valeurs pathologiques
• On trouve une augmentation des GR
dans les polyglobulies et dans les
hémoconcentration (diminution du
volume plasmatique, chez les brulés par
exemple).
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16. • Une diminution des GR est observée
dans la majorité des anémies, soit par
hémorragie, par hémolyse, par carence
(fer, vitamine B12, acide folique, etc.)ou
par insuffisance de l’érythropoïèse.
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