Sérodiagnostic de l’échinococcose

1. S/A
RSérodiagnostic de
l’Echinococcose
(Par hémagglutination passive)
Par : S / Abdessemed

2. S/A
Généralités
L'échinococcose humaine est une
maladie parasitaire provoquée par des
ténias du genre Echinococcus. Ses deux
formes principales sont l'échinococcose
cystique (hydatidose) et l'échinococcose
alvéolaire.

3. S/A
L'infestation de
l'homme se fait
par l'ingestion
d'œufs de
parasites présents
dans les aliments,
l'eau ou la terre,
ou par le contact
direct avec les
animaux hôtes.

4. S/A
Le traitement, souvent coûteux et
complexe, peut nécessiter une
intervention chirurgicale lourde et/ou
une chimiothérapie prolongée.

5. S/A
Les programmes de prévention portent
sur la vermifugation du chien,
l'amélioration de l'hygiène des abattoirs
et les campagnes de sensibilisation du
grand public.
 La vaccination du mouton, actuellement
à l'étude, pourrait compléter ces
interventions.

6. S/A
• L'OMS va valider
d'ici à 2018 une
série de stratégies
efficaces de lutte
contre
l'échinococcose
cystique.

7. S/A
(Par hémagglutination passive)
Sérodiagnostic de
l’Echinococcose

8. S/A
Principe
Des hématies de mouton stabilisées par
la glutaraldéhyde et sensibilisées par un
extrait de liquide hydatique de mouton
sont agglutinées lorsqu’elles sont mises
en présence de dilutions de sérums
contenant les anticorps homologues.

9. S/A
Réactifs
Conservation à 2-8 C jusqu’à la date de
péremption indiquée sur le coffret.
Réactif 1 : hématies sensibilisées à 0.5%
Réactif 2 : hématies témoin à 0.5%
Réactif 3 : hématies pour absorption à 20%
Réactif 4 : PBS (phosphate buffered saline
0.15 mol/l)
Réactif 5 : sérum témoin positif (lapin)
lyophilisé
Réactif 6 : sérum témoin négatif (lapin)
lyophilisé

10. S/A
Matériel
Diluteur permettant d’effectuer les
dilutions de sérum sous un volume de
50µl
Plaques pour microtitration

11. S/A
Mode opératoire
N° des cupules
1 2 3 4 5 6 7 8
Dilutions
sériques
Sérum
témoin
1/100 1/200 1/400 1/800 1/1600 1/3200 1/6400
PBS (R4)
Sérum (1/100)
Hématies tests
Hématiestémoin
s
50
50
---
50
50
50
---
50
50
50
---
50
50
50
---
50
50
50
---
50
50
50
---
50
50
50
---
50
50
50
---
 Diluer les sérums à tester et les sérums témoins au 1/100 en PBS
 Répartir en µl :
 Homogénéiser.
 Laisser reposer 2 heures à la température du Laboratoire

12. S/A
Lecture
témoin sérum : sédimentation des
hématies.
réaction positive : hémagglutination
avec voile d’hématies tapissant au moins
la moitié de la cupule.
Le titre est l’inverse de la dernière
dilution présentant une telle
hémagglutination .

13. S/A
Remarque :
On doit retrouver le titre de sérum
témoin positif indiqué sur l’étiquette
(à -/+ 1 dilution )
En cas d’agglutination du témoin sérum
(cupule n° 1) il est nécessaire de
recommencer la réaction après avoir
absorbé les agglutinines naturelles :

14. S/A
Technique d’absorption :
Sérum : 50 µl.
Hématies pour absorption (R3) : 5
gouttes (soit 250µl)
 Agiter et laisser deux heures à la
température du laboratoire.
 Aprés centrifugation, décanter le
surnageant (= dilution au 1/5 du sérum).

15. S/A
Interprétation :
Cette réaction est quantitative : la
positivité de la réaction à la dilution du
1/100 du sérum peut évoquer une
échinococcose ( hydatidose –
échinicoccose alvéolaire).

16. S/A
Cependant, en raison des réactions
croisées existant avec d’autres
parasitoses, la spécificité de l’infection
devra être confirmée par une réaction
qualitative du type coélectrosynérèse ou
immunoélectrophorèse.

17. S/A