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09/05/2007 Atelier paludisme 2007
Entomologie moléculaire et étude de la
structuration génétique des populations
d’anophèles
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EVALUATION
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09/05/2007 Atelier paludisme 2007
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CAT INIST: Variabilité Génétique et Flux de Gènes chez les Moustiques
Anopheles arabiensis et Anopheles gambiae, Vecteurs du Paludisme en Afrique.
Apport des Loci Microsatellites.
http://cat.inist.fr/?aModele=afficheN&cpsidt=196505
IRD journal Sciences au Sud- dossier d’Avril 2003, Anophèles d’Afrique
http://www.ird.eu/fr/actualites/journal/dossiers/paludisme.
S. Manguin, D. Fontenilles, F. Chandre, L. Lochouarn, J. Mouchet, P.
Kengne & P.Guillet: Génétique des populations Anophéliennes
http://www.pathexo.fr/pdf/Articles-bull/1999/1999n4/T92-4-GMI-2.pdf
Didier Fontenille, ETUDES GENETIQUES ET MOLECULAIRES DES
MOUSTIQUES: des outils pour la lutte http://wcentre.tours.inra.fr/sfpar/j-
EntomologieMedicale/Fontenille.pdf
OMS (2000) Molecular entomology and prospects for malaria control. Bull.
WHO, 78, 1412-1423
Pock Tsy, J.B. Duchemin et al (2003) Distribution of Anopheles gambiae
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Madagascar. Malar J 2(1):33.
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Références bibliographiques
Charvolin Eléonore, Epinette Sébastien, Erny Cécile, Farcy Solenne, Fleury
Carinne, Guichoux Erwan: Les nouveaux outils d’investigation du génome :
base d’une meilleure connaissance du Paludisme ?
http://dessbiodiversite.free.fr/ancien/travaux/moustique.doc
Jean Mouchet, Pierre Carnevale, Marc Coosemans, Jean Julvez , Sylvie Manguin,
Dominique Richard-Lenoble, Jacques Sircoulon, 2004
Biodiversité du paludisme dans le monde.
Kengne P. et al. (2003) Développement d’une PCR (Polymerase Chain
Reaction) spécifique d’espèces du complexe Anopheles nili (Theobald) 1904 au
Cameroun. Bull.SOC.Exot, 96, 3, 165-167, 65-67.
IRD cmmuniqué de presse du 14 Avril 2000
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Entomologie moléculaire et étude de la structuration génétique des populations d'anophèles

  • 1. 09/05/2007 Atelier paludisme 2007 Entomologie moléculaire et étude de la structuration génétique des populations d’anophèles Mme AMADOU Hadiza MSP/LCE/PNLP/LAV Niger EVALUATION par les FACILITATEURS
  • 2. 09/05/2007 Atelier paludisme 2007 Plan Introduction Méthodes utilisées dans les études des populations d’Anophèles Les marqueurs morphologiques La cytogénétique La biologie moléculaire Structuration génétiques des populations d’ Anophèles Définition Facteurs influençant la structure génétique des populations Intérêt des études de la génétique des populations d’Anophèles et leur structuration génétique Conclusion
  • 3. 09/05/2007 Atelier paludisme 2007 Introduction Anophèles vecteurs des Plasmodium (environ 60 espèces) La plus part des espèces appartiennent à des complexes Mieux connaître la cible: pour mettre en place une stratégie de lutte contre les vecteurs.
  • 4. 09/05/2007 Atelier paludisme 2007 Marqueurs morphologiques Morphologie Établir la taxonomie des vecteurs Biogéographie Bionomique NB: ne révèle pas les différences entre espèces jumelles ESPECE ??
  • 5. 09/05/2007 Atelier paludisme 2007 Méthodes utilisées : la cytogénétique Analyse de l’alternance des bandes sur les chromosomes polythènes (cellules nourricières de l’ovaire) Identification des espèces jumelles (présence d’inversions chromosomiques) Identification des formes chromosomiques (différentes combinaisons d’inversions paracentriques du chromosome2) Ex: pour le complexe Gambiae: An. gambiae s.s, An. arabiensis , An. melas, An. merus ... An. gambiae s.s (Mopti, Bamako, Savane, Bissau, Forest)
  • 6. 09/05/2007 Atelier paludisme 2007 Figure 4. Diagrammatic representation of the fixed and polymorphic inversions observed in the seven species of the Anopheles gambiae complex. From Coluzzi, et al. 1979 Trans R Soc Trop Med Hyg 73:483-497. . La cytogénétique
  • 7. 09/05/2007 Atelier paludisme 2007 La biologie moléculaire: La PCR Etude de la phylogénie (ADN mitochondrial) Identification des membres d’un complexe d’espèces (Identification A et B par PCR-rDNA) kengne et al
  • 8. 09/05/2007 Atelier paludisme 2007 La connaissance du génome d’ An. gambiae Identification de gIdentification de gèènesnes dont certains sontdont certains sont impliquimpliquéés dans las dans la biologie des moustiques,biologie des moustiques, dans la transmissiondans la transmission desdes PlasmodiumPlasmodium, dans la, dans la rréésistance auxsistance aux insecticidesinsecticides Utilisation des marqueurs microsatellites pour l’étude (flux génétique; Identification M et S par PCR- RFLP)
  • 9. 09/05/2007 Atelier paludisme 2007 Limites de la PCR Laboratoire et équipement Personnel spécialisé Coût
  • 10. 09/05/2007 Atelier paludisme 2007 Structuration génétiques des populations d’ Anophèles Définition: Etude de la distribution spatiale des vecteurs (distribution de plusieurs espèces ou des génotypes au sein d’une même espèce) Facteurs influençant la structure génétique des populations Croisement préférentiel entre génotypes similaires: réduction du nombre des hétérozygotes Migration modifie la fréquence allélique Taille de la population influence la fréquence allélique Mutation apporte de nouveaux allèles Sélection change la fréquence des allèles
  • 11. 09/05/2007 Atelier paludisme 2007 Intérêt: apport à la compréhension de la transmission •Distribution of the species Anopheles gambiae complex in Madagascar. Jean Michel Léong Pock Tsy et al. 2003 4 15 122 0 4 000 0 2 4 6 8 10 12 14 16 juin juillet aout septembre octobre mois IAS An.gambiae s.s. An. Arabiensis Taux dTaux d’’infectioninfection àà ll’’antigantigèènene sporozosporozoïïtiquetique dd’’ An. gambiae s.sAn. gambiae s.s et det d’’AnAn arabiensisarabiensis dede juinjuin àà octobre 2004 au Malioctobre 2004 au Mali
  • 12. 09/05/2007 Atelier paludisme 2007 Intérêts Evaluation de la variation génétique Estimation de leurs capacités d’adaptation aux pressions de sélection Estimation des flux géniques( circulation des gènes parmi les populations; ex : gènes de résistance) Adapter les moyens de lutte
  • 13. 09/05/2007 Atelier paludisme 2007 Diagnostic PCR de la mutation Kdr et diffusion de cette mutation au sein du complexe An. gambiae Weill etWeill et alal, 2000, 2000
  • 14. 09/05/2007 Atelier paludisme 2007 Mutation Kdr au Niger Localisation géographique Population sensible An. gambiae M kdr/kdr An. gambiae M kdr/kds An. gambiae S kdr/kdr Niger/ CERMES LEGENDE ?
  • 15. 09/05/2007 Atelier paludisme 2007 Conclusion Meilleur compréhension de la transmission et perspectives pour le contrôle des vecteurs Mesurer l’impact des interventions en matière de Lutte Anti Vectorielle Orienter les nouvelles approches de Lutte Anti Vectorielle
  • 16. 09/05/2007 Atelier paludisme 2007 Références bibliographiques CAT INIST: Variabilité Génétique et Flux de Gènes chez les Moustiques Anopheles arabiensis et Anopheles gambiae, Vecteurs du Paludisme en Afrique. Apport des Loci Microsatellites. http://cat.inist.fr/?aModele=afficheN&cpsidt=196505 IRD journal Sciences au Sud- dossier d’Avril 2003, Anophèles d’Afrique http://www.ird.eu/fr/actualites/journal/dossiers/paludisme. S. Manguin, D. Fontenilles, F. Chandre, L. Lochouarn, J. Mouchet, P. Kengne & P.Guillet: Génétique des populations Anophéliennes http://www.pathexo.fr/pdf/Articles-bull/1999/1999n4/T92-4-GMI-2.pdf Didier Fontenille, ETUDES GENETIQUES ET MOLECULAIRES DES MOUSTIQUES: des outils pour la lutte http://wcentre.tours.inra.fr/sfpar/j- EntomologieMedicale/Fontenille.pdf OMS (2000) Molecular entomology and prospects for malaria control. Bull. WHO, 78, 1412-1423 Pock Tsy, J.B. Duchemin et al (2003) Distribution of Anopheles gambiae complex and first evidence of Anopheles merus as a malaria vector in Madagascar. Malar J 2(1):33.
  • 17. 09/05/2007 Atelier paludisme 2007 Références bibliographiques Charvolin Eléonore, Epinette Sébastien, Erny Cécile, Farcy Solenne, Fleury Carinne, Guichoux Erwan: Les nouveaux outils d’investigation du génome : base d’une meilleure connaissance du Paludisme ? http://dessbiodiversite.free.fr/ancien/travaux/moustique.doc Jean Mouchet, Pierre Carnevale, Marc Coosemans, Jean Julvez , Sylvie Manguin, Dominique Richard-Lenoble, Jacques Sircoulon, 2004 Biodiversité du paludisme dans le monde. Kengne P. et al. (2003) Développement d’une PCR (Polymerase Chain Reaction) spécifique d’espèces du complexe Anopheles nili (Theobald) 1904 au Cameroun. Bull.SOC.Exot, 96, 3, 165-167, 65-67. IRD cmmuniqué de presse du 14 Avril 2000 La caractérisation biologique et génétique des Anopheles en Afrique : un intérêt fondamental pour lutter contre la transmission du paludisme http://www.ird.eu/fr/actualites/communiques/2000/anopheles.htm