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Prévalence des infections à Plasmodium :
apport des nouvelles méthodes de détection du
parasite
Voahangy ANDRIANARANJAKA
8ème édition du cours international « Atelier Paludisme »
01 Avril 2011
Introduction
• Prévalence : Nombre de cas de maladie ou de malades,
ou de tout autre évènement tel qu'un accident, dans une
population déterminée, sans distinction entre les cas
nouveaux et les cas anciens (OMS 1966).
• Prévalence du paludisme: Nombre de cas de paludisme
(symptomatique ou asymptomatique) dans une
population déterminée, sans distinction entre les cas
nouveaux et les cas anciens.
• Intérêts de savoir la prévalence?
– Pour décider et orienter les stratégies de lutte
– Evaluer les impacts d’intervention de lutte
Comment ?
• Comment mesurer la prévalence ?
Recours au diagnostic parasitologique pour détecter les
parasites
• Dépistage actif
• Dépistage passif
• Comment détecter les parasites ?
Mise en évidence directe : Microscopie
Mise en évidence indirecte :
Test de Diagnostic Rapide (TDR)
Polymerase Chain Reaction (PCR) :
• PCR standard
• PCR en temps réel
Etc …
Contrôle vers l’élimination -> diminution globale du prévalence
du paludisme
-> Nécessité d’outil plus sensible pour estimer la prévalence
Contexte actuelle ?
Quels sont les méthodes adaptées et fiables?
Microscopie ?
Mise en évidence directe du parasite par confection des frottis
sanguins
Méthode de référence (WHO 2009, Malaria_microscopy_Quality Assurance)
Compétence du microscopiste -> sensibilité et fiabilité
Rakotonirina H et al., Am J Trop Med Hyg. 2008 ;78(2):217-21.
P. falciparum non P. falciparum
RT-PCR
Microscopie
98,8%
88,2%
100% 100%
0.99 de concordance
P. falciparum non P. falciparum
P.falciparum P. vivax P. malariae P. ovale
qPCR
nPCR
Microscopie
Surestimation ou sous estimation de la prévalence par la
microscopie
PHC
Facilities
PHC microscopy
reading (%)
MUCHS
reading (%)
Chalinze 55,5 29,5
Ubena 77.8 47.2
Mbwewe 43.7 46.1
Kikongo 22.3 35.1
Mwanabwito 75.4 36.4
Ngasala B et al., Malar J 2008.
Rosanas-Urgell et al. , Malar J 2010.
Microscopie ?
40,9%
65,7%
4,7%
7,3%
43,8%
73,2%
3,3%
3,8%
25,4%
54,9%
2,4%
0%
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Randrianasolo L et al., Cahiers d'études et de recherches francophones / Santé . 2007 Vol17
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Performance -> Qualité des lots et les conditions de stockage
Polymorphisme du gène HRP2
Lee N et al., J Clin Microbiol. 2006 Aug;44(8):2773-8.
Kweka EJ et al., J Infect Dev Ctries. 2011 ;5(3):204-8.
Happi CT et al., Afr J Med Med Sci. 2004 Mar;33(1):15-8.
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Mangold K. et al., J. Clin. Microbiol, 2005;5: 2435-2440.
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Conclusion
• La microscopie et le TDR restent les méthodes adaptées
sur terrain mais il faut toujours s’assurer de leur qualité.
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du contexte actuel mais est-ce qu’il serait envisageable de
les pratiquer sur terrain ?
• Peut-on espérer que les différentes recherches sur le
développement des nouvelles techniques de détection des
infections à Plasmodium, surmonterait les contraintes
actuels ?
Merci de votre attention
Prévalence des infections à Plasmodium :
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Voahangy ANDRIANARANJAKA
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01 Avril 2011

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Prévalence des infections à Plasmodium : apport des nouvelles méthodes de détection du parasite

  • 1. Prévalence des infections à Plasmodium : apport des nouvelles méthodes de détection du parasite Voahangy ANDRIANARANJAKA 8ème édition du cours international « Atelier Paludisme » 01 Avril 2011
  • 2. Introduction • Prévalence : Nombre de cas de maladie ou de malades, ou de tout autre évènement tel qu'un accident, dans une population déterminée, sans distinction entre les cas nouveaux et les cas anciens (OMS 1966). • Prévalence du paludisme: Nombre de cas de paludisme (symptomatique ou asymptomatique) dans une population déterminée, sans distinction entre les cas nouveaux et les cas anciens. • Intérêts de savoir la prévalence? – Pour décider et orienter les stratégies de lutte – Evaluer les impacts d’intervention de lutte
  • 3. Comment ? • Comment mesurer la prévalence ? Recours au diagnostic parasitologique pour détecter les parasites • Dépistage actif • Dépistage passif • Comment détecter les parasites ? Mise en évidence directe : Microscopie Mise en évidence indirecte : Test de Diagnostic Rapide (TDR) Polymerase Chain Reaction (PCR) : • PCR standard • PCR en temps réel Etc …
  • 4. Contrôle vers l’élimination -> diminution globale du prévalence du paludisme -> Nécessité d’outil plus sensible pour estimer la prévalence Contexte actuelle ?
  • 5. Quels sont les méthodes adaptées et fiables?
  • 6. Microscopie ? Mise en évidence directe du parasite par confection des frottis sanguins Méthode de référence (WHO 2009, Malaria_microscopy_Quality Assurance) Compétence du microscopiste -> sensibilité et fiabilité Rakotonirina H et al., Am J Trop Med Hyg. 2008 ;78(2):217-21. P. falciparum non P. falciparum RT-PCR Microscopie 98,8% 88,2% 100% 100% 0.99 de concordance P. falciparum non P. falciparum
  • 7. P.falciparum P. vivax P. malariae P. ovale qPCR nPCR Microscopie Surestimation ou sous estimation de la prévalence par la microscopie PHC Facilities PHC microscopy reading (%) MUCHS reading (%) Chalinze 55,5 29,5 Ubena 77.8 47.2 Mbwewe 43.7 46.1 Kikongo 22.3 35.1 Mwanabwito 75.4 36.4 Ngasala B et al., Malar J 2008. Rosanas-Urgell et al. , Malar J 2010. Microscopie ? 40,9% 65,7% 4,7% 7,3% 43,8% 73,2% 3,3% 3,8% 25,4% 54,9% 2,4% 0%
  • 8. Test de diagnostic rapide ? Randrianasolo L et al., Cahiers d'études et de recherches francophones / Santé . 2007 Vol17 − Détection des antigènes plasmodiaux par immuno- chromatographique − Adapté sur le terrain Performance -> Qualité des lots et les conditions de stockage Polymorphisme du gène HRP2 Lee N et al., J Clin Microbiol. 2006 Aug;44(8):2773-8.
  • 9. Kweka EJ et al., J Infect Dev Ctries. 2011 ;5(3):204-8. Happi CT et al., Afr J Med Med Sci. 2004 Mar;33(1):15-8. Test de diagnostic rapide ? 20% de faux négatif par TDR comparé à la microscopie 12% de faux négatif par TDR comparé à la PCR Sensibilité du TDR ParaHIT-f selon la parasitémie
  • 10. Mangold K. et al., J. Clin. Microbiol, 2005;5: 2435-2440. Oddoux O et al., Eur J Clin Microbiol Infect Dis. 2011 ;30(4):597-601. Biologie moléculaire : PCR ? PCR : Détection des acides nucléiques du parasite (ADN ou ARN) par utilisation des amorces spécifiques Couples d’amorce spécifique + grande sensibilité -> détection précis des infections à Plasmodium qPCR: Sondes spécifiques ->  spécificité des résultats
  • 11. ~ 80% non détectable par la microscopie détecté par PCR dans les zones à faible prévalence Biologie moléculaire ? Okell LC et al., J Infect Dis. 2009 Nov 15;200(10):1509-17. Faisabilité ? Nécessité des équipements et locaux appropriés Personnel qualifié Le coût et la gestion des réactifs PCR = technique sensible -> estimation précise de la prévalence Limite pour son utilisation à grande échelle
  • 12. Les nouvelles recherches amélioreraient- elles la détection du parasite?
  • 13. Conclusion • La microscopie et le TDR restent les méthodes adaptées sur terrain mais il faut toujours s’assurer de leur qualité. •Les outils de la biologie moléculaire répondent au besoin du contexte actuel mais est-ce qu’il serait envisageable de les pratiquer sur terrain ? • Peut-on espérer que les différentes recherches sur le développement des nouvelles techniques de détection des infections à Plasmodium, surmonterait les contraintes actuels ?
  • 14. Merci de votre attention
  • 15. Prévalence des infections à Plasmodium : apport des nouvelles méthodes de détection du parasite Voahangy ANDRIANARANJAKA 8ème édition du cours international « Atelier Paludisme » 01 Avril 2011