DIAGNOSTIC BIOLOGIQUE
DU PALUDISME
Elisabeth BEUGRE
Institut Pasteur de Côte d’Ivoire
Atelier Paludisme 2006
EVALUATION
par les FACILITATEURS
Pourquoi un diagnostic biologique?
• Clinique non spécifique
• Meilleure prise en charge / utilisation plus
rationnelle des antipaludiques
• Frein à l’extension des résistances
• Bénéfices pour le malade et la communauté
Atelier Paludisme 2006
MOYENS
• Microscopie
• Tests de diagnostic rapide (TDR)
• Biologie moléculaire
• Sérologie
Atelier Paludisme 2006
1-MICROSCOPIE
Goutte épaisse et frottis sanguin
-Méthode de référence +
-GE: sensibilité (20 p/µl)
-FS:spécificité
-Quantitatif
-Lecture rétrospective
-Faible coût
-Matériels
-Personnel qualifié
-Durée
Atelier Paludisme 2006
2-Tests de diagnostic rapide
Détection d’Ag parasitaire (HRP-2 et pLDH)
-Rapidité
-Réalisation facile
-Adapté au terrain
-Absence d’équipement
spécifique
- Bonne sensibilité (> 90%)
-Diagnostic rétrospectif
(HRP-2+++)
-Coût (0.5 - 2 USD)
-Pas quantitatif
-Viabilité des parasites?
-Identification d’espèces?
-Stades parasitaires?
-Faux positifs (HRP-2 +++)
-Stabilité des réactifs?
Atelier Paludisme 2006
Principe du test
Atelier Paludisme 2006
HRP-2:
-P.falciparum+++
-antigénémie >1sem
-seuil sensibilité:10 HPM
pLDH:
-4 espèces
-moins de faux positifs
-moins sensible (100-200p/µl)
positif
négatif
pLDH
(plasmodium Lactate Deshydrogenase)
HRP- 2
(Histidin Rich Protein -2)
Atelier Paludisme 2006
3-Biologie moléculaire
-Outil de recherche
(détection de mutations)
-Petit prélèvement (blood spot)
-Bonne sensibilité (1-3 p/µl)
-Etudes rétrospectives
-Bonne spécificité (fiable)
-Coût +++
-Appareillage
-Bonne technicité (contamination)
-Durée de réalisation
V M F O
Atelier Paludisme 2006
Agarose gel (2%) analysis of a PCR diagnostic test for
species-specific detection of Plasmodium DNA. Snounou et
al,1993.
Comparaison des méthodes
!
"
# $
%
&
' () **(' ++, + (- -'+, %*-
! .!.%+/ .
'!(! +%!+(
'!(! +%
Points
forts
Points
faibles
Atelier Paludisme 2006Source: Thierry Fandeur (Atelier paludisme 2003)
Quelle méthode choisir ?
Fonction du contexte:
Afrique, Asie et Amérique du sud
En zone rurale: TDR +++ (personnel, équipement….)
En zone urbaine:
Si structure hospitalière (ex:CHU): -Microscopie+++ et/ou
-TDR ++
Si institut de recherche (ex:IPM,IPCI…): - Microscopie
-TDR
-PCR
Europe, Amérique du nord
Microscopie,TDR,PCR+++
Atelier Paludisme 2006
CONCLUSION
-Erreur diagnostique morbidité et mortalité
diagnostic biologique du paludisme =urgence médicale
-Existence de nombreuses méthodes
-Choix sera fonction du contexte socio-économique
-OMS recommande de plus en plus TDR:
coût
disponibilité
progrès restent à faire….
Atelier Paludisme 2006
En attendant…..
La microscopie
demeure la méthode
de référence…
Atelier Paludisme 2006
Merci de votre attention !!!
Atelier Paludisme 2006
1- WHO/CDS/RBM/2000.14.Malaria Diagnosis: New Perspectives.
Report of a Joint WHO/USAID Informal Consultation,1999 [cited
06 mars 2006].Available from
http://www.who.int/malaria/cmc_upload/0/000/011/403/malaria_diag
nosis.pdf
2- National Center for Infectious Diseases, Division of Parasitic
Diseases. Diagnostic Findings Malaria. 2004 [cited 07 mars
2006].Available from
http://www.dpd.cdc.gov/dpdx/HTML/Malaria.asp?body=Frames/M-
R/Malaria/body_Malariadiagfind2.htm
3- WHO/CDS/RBM/2004.L’utilisation des tests diagnostiques rapides
du paludisme.2004 [cited 07 mars 2006].Available from
http://www.wpro.who.int/NR/rdonlyres/97B82B45-B3A4-451B-9D22-
55EAFD335369/0/RDTFrenchDRU.pdf
Références bibliographiques
Atelier Paludisme 2006
4- Anon.OptiMAL-IT Individual Rapid Malaria Test. [cited 07 mars
2006].Available from
http://www.diamed.com/product_detail.aspx?id=805&navvis&bhcp=1
5- Martet G et Peyron F.Diagnostic du paludisme.2000,[cited 05 mars
2006].Available from
http://asmt.louis.free.fr/diagnostic.html#outils
6- http://www.impact-
malaria.com/FR/EPS/Formations_et_cours_internationaux/Formation_
de_la_Liverpool_School_LSTMH/cours_liverpool/malaria_template_fr/
Section_4/4f_3
7- Snounou G, Viriyakosol S, Zhu XP, et al. High sensitivity detection of
human malaria parasites by the use of nested polymerase chain
reaction. Mol Biochem Parasitol 1993;61:315-320.
8- Thierry Fandeur. Pourquoi un diagnostic du paludisme? Atelier
paludisme 2003.
Atelier Paludisme 2006
DIAGNOSTIC BIOLOGIQUE
DU PALUDISME
Elisabeth BEUGRE
Institut Pasteur de Côte d’Ivoire
Atelier Paludisme 2006

Le diagnostic biologique du paludisme

  • 1.
    DIAGNOSTIC BIOLOGIQUE DU PALUDISME ElisabethBEUGRE Institut Pasteur de Côte d’Ivoire Atelier Paludisme 2006 EVALUATION par les FACILITATEURS
  • 2.
    Pourquoi un diagnosticbiologique? • Clinique non spécifique • Meilleure prise en charge / utilisation plus rationnelle des antipaludiques • Frein à l’extension des résistances • Bénéfices pour le malade et la communauté Atelier Paludisme 2006
  • 3.
    MOYENS • Microscopie • Testsde diagnostic rapide (TDR) • Biologie moléculaire • Sérologie Atelier Paludisme 2006
  • 4.
    1-MICROSCOPIE Goutte épaisse etfrottis sanguin -Méthode de référence + -GE: sensibilité (20 p/µl) -FS:spécificité -Quantitatif -Lecture rétrospective -Faible coût -Matériels -Personnel qualifié -Durée Atelier Paludisme 2006
  • 5.
    2-Tests de diagnosticrapide Détection d’Ag parasitaire (HRP-2 et pLDH) -Rapidité -Réalisation facile -Adapté au terrain -Absence d’équipement spécifique - Bonne sensibilité (> 90%) -Diagnostic rétrospectif (HRP-2+++) -Coût (0.5 - 2 USD) -Pas quantitatif -Viabilité des parasites? -Identification d’espèces? -Stades parasitaires? -Faux positifs (HRP-2 +++) -Stabilité des réactifs? Atelier Paludisme 2006
  • 6.
    Principe du test AtelierPaludisme 2006 HRP-2: -P.falciparum+++ -antigénémie >1sem -seuil sensibilité:10 HPM pLDH: -4 espèces -moins de faux positifs -moins sensible (100-200p/µl)
  • 7.
    positif négatif pLDH (plasmodium Lactate Deshydrogenase) HRP-2 (Histidin Rich Protein -2) Atelier Paludisme 2006
  • 8.
    3-Biologie moléculaire -Outil derecherche (détection de mutations) -Petit prélèvement (blood spot) -Bonne sensibilité (1-3 p/µl) -Etudes rétrospectives -Bonne spécificité (fiable) -Coût +++ -Appareillage -Bonne technicité (contamination) -Durée de réalisation V M F O Atelier Paludisme 2006 Agarose gel (2%) analysis of a PCR diagnostic test for species-specific detection of Plasmodium DNA. Snounou et al,1993.
  • 9.
    Comparaison des méthodes ! " #$ % & ' () **(' ++, + (- -'+, %*- ! .!.%+/ . '!(! +%!+( '!(! +% Points forts Points faibles Atelier Paludisme 2006Source: Thierry Fandeur (Atelier paludisme 2003)
  • 10.
    Quelle méthode choisir? Fonction du contexte: Afrique, Asie et Amérique du sud En zone rurale: TDR +++ (personnel, équipement….) En zone urbaine: Si structure hospitalière (ex:CHU): -Microscopie+++ et/ou -TDR ++ Si institut de recherche (ex:IPM,IPCI…): - Microscopie -TDR -PCR Europe, Amérique du nord Microscopie,TDR,PCR+++ Atelier Paludisme 2006
  • 11.
    CONCLUSION -Erreur diagnostique morbiditéet mortalité diagnostic biologique du paludisme =urgence médicale -Existence de nombreuses méthodes -Choix sera fonction du contexte socio-économique -OMS recommande de plus en plus TDR: coût disponibilité progrès restent à faire…. Atelier Paludisme 2006 En attendant…..
  • 12.
    La microscopie demeure laméthode de référence… Atelier Paludisme 2006
  • 13.
    Merci de votreattention !!! Atelier Paludisme 2006
  • 14.
    1- WHO/CDS/RBM/2000.14.Malaria Diagnosis:New Perspectives. Report of a Joint WHO/USAID Informal Consultation,1999 [cited 06 mars 2006].Available from http://www.who.int/malaria/cmc_upload/0/000/011/403/malaria_diag nosis.pdf 2- National Center for Infectious Diseases, Division of Parasitic Diseases. Diagnostic Findings Malaria. 2004 [cited 07 mars 2006].Available from http://www.dpd.cdc.gov/dpdx/HTML/Malaria.asp?body=Frames/M- R/Malaria/body_Malariadiagfind2.htm 3- WHO/CDS/RBM/2004.L’utilisation des tests diagnostiques rapides du paludisme.2004 [cited 07 mars 2006].Available from http://www.wpro.who.int/NR/rdonlyres/97B82B45-B3A4-451B-9D22- 55EAFD335369/0/RDTFrenchDRU.pdf Références bibliographiques Atelier Paludisme 2006
  • 15.
    4- Anon.OptiMAL-IT IndividualRapid Malaria Test. [cited 07 mars 2006].Available from http://www.diamed.com/product_detail.aspx?id=805&navvis&bhcp=1 5- Martet G et Peyron F.Diagnostic du paludisme.2000,[cited 05 mars 2006].Available from http://asmt.louis.free.fr/diagnostic.html#outils 6- http://www.impact- malaria.com/FR/EPS/Formations_et_cours_internationaux/Formation_ de_la_Liverpool_School_LSTMH/cours_liverpool/malaria_template_fr/ Section_4/4f_3 7- Snounou G, Viriyakosol S, Zhu XP, et al. High sensitivity detection of human malaria parasites by the use of nested polymerase chain reaction. Mol Biochem Parasitol 1993;61:315-320. 8- Thierry Fandeur. Pourquoi un diagnostic du paludisme? Atelier paludisme 2003. Atelier Paludisme 2006
  • 16.
    DIAGNOSTIC BIOLOGIQUE DU PALUDISME ElisabethBEUGRE Institut Pasteur de Côte d’Ivoire Atelier Paludisme 2006