L'atelier sur le paludisme en 2007 a porté sur la mesure de la parasitémie et de la charge parasitaire totale pour le diagnostic et le pronostic du paludisme. Il a mis en lumière l'importance de la charge parasitaire dans l'évaluation de la gravité de l'accès palustre et les techniques de mesure utilisées, notamment le frottis mince et la goutte épaisse. Des méthodes de dosage de l'histidine-rich protein 2 (hrp2) dans le plasma ont également été évoquées pour estimer la charge parasitaire totale.

1. ATELIER PALUDISME 2007
Parasitémie et charge parasitaire
totale
KOITA Mohamedou
Laboratoire de Parasitologie et Mycologie médicale
Institut National de Recherches en santé Publique
EVALUATION
par les FACILITATEURS

2. ATELIER PALUDISME 2007
Plan
Définition
Intérêt de la charge parasitaire
Mesure de la Parasitémie
Charge parasitaire totale
Charge parasitaire et accès palustre

3. ATELIER PALUDISME 2007
Définition de la charge parasitaire
Le nombre total de Plasmodies parasitant
l'organisme:
-Parasites présents dans la circulation sanguine(
Parasitémie)
-Parasites séquestrés dans les organes profonds
La charge parasitaire séquestrée peut varier

4. ATELIER PALUDISME 2007
Intérêt de la charge parasitaire
Diagnostic et pronostic de la gravite de l’accès
palustre(parasitémie supérieure à 5% chez un
sujet non immun)
Évaluation de l’efficacité des traitements
En zone d’endémie une goutte épaisse positive
ne suffit pas pour attribuer les manifestations
cliniques au paludisme (seuil de pyrogenie)

5. ATELIER PALUDISME 2007
Mesure de la Parasitémie(1)
Les techniques employées:
Le frottis mince
La goutte épaisse

6. ATELIER PALUDISME 2007
Le frottis mince
Prélèvement du sang au bout du doigt ou sur
anticoagulant
Fixation avec du méthanol
Coloration et Lecture (objectif à immersion)

7. ATELIER PALUDISME 2007
La Goutte épaisse
Les étapes
Défibrination
Hémolyse
Séchage
Coloration

8. ATELIER PALUDISME 2007
Mesure de la Parasitémie (2)
Lecture de la lame et observation au microscope
- Sur le frottis et Goutte épaisse
Goutte épaisse Frottis mince

9. ATELIER PALUDISME 2007
Mesure de la Parasitémie(3)
La numération des plasmodies sur GE par rapport aux
leucocytes,leucocytemie moyenne:8000 leu/ l

10. ATELIER PALUDISME 2007
Charge parasitaire totale(1)
Estimation de la charge parasitaire totale à partir du
dosage de l’Histidine- rich protein 2 (HRP2) plasmatique:
-L’HRP2 produite spécifiquement par P.falciparum ,elle est
présente dans le vacuole et le cytoplasme du parasite.
-Passe dans le cytoplasme de l’hématie et est libérée dans le
plasma par rupture de la schizonte
-Utilisée pour des tests de détection rapide(parasight)

11. ATELIER PALUDISME 2007
Charge parasitaire totale(2)
Dosage de l’HRP2
A partir de l’ELISA sandwich
Limite inférieure de détection est de 1.5 ng/ml
Estimation de la charge parasitaire totale:
-Médiane de production par parasite au cours du cycle
érythrocytaire (5.2 fg),dont 89% au cours de la
rupture du schizonte et 11% lors de la deuxième
partie du cycle érythrocytaire.

12. ATELIER PALUDISME 2007
Charge parasitaire totale(3)
Dosage de l’HRP2 et Calcul de la charge
parasitaire totale
Ptot=12Cobs(1-Hct) x poids
corporel x 1013
Ptot=charge parasitaire totale
Cobs=concentration en HRP2

13. ATELIER PALUDISME 2007
Calcul de la charge de parasites
séquestrés
Ptot = Pseq + Pcirc
Pseq=charge de parasites séquestrés
Pcirc=charge de parasites circulants

14. ATELIER PALUDISME 2007
Charge parasitaire et accès
palustre(1)
Dans les zones endémiques du fait du portage
asymptomatique du Plasmodium l’association fièvre et
charge parasitaire n’est pas un critère suffisant du
paludisme.
La charge parasitaire peut être influencée:
-facteur dû au parasite:inoculum,nombre de piqûres
infectantes,virulence.
-Facteur dû à l’hôte:âge, la grossesse,immunité, le
traitement ou la prophylaxie.

15. ATELIER PALUDISME 2007
Charge parasitaire et accès
palustre(2)
Seuil pyrogénique:
-Défini en zone d’endémie
- Prends en compte
- la saison
Exemple au mali une étude ,enfant de 6 mois à 9 ans,
Saison pluvieuse 33.6% de fièvre dû au paludisme, seuil 3200
parasites/ l
Saison sèche 23.3% de fièvre dû au paludisme, seuil 200parasites/
l

16. ATELIER PALUDISME 2007
- l’âge

17. ATELIER PALUDISME 2007
Charge parasitaire et accès
palustre(3)

18. ATELIER PALUDISME 2007

19. ATELIER PALUDISME 2007
Bibliographie
Paludisme:Critéres de gravité Available from
http://www.astrium.com/html2pdf/generated/article1117.pdf
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P. Boisier,R.jambou,L.Raharimalala,J.Roux.Relationship between
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Delley V & al .What does a single determination of malaria parasite density
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20. ATELIER PALUDISME 2007